2023年兽医微生物学重要知识点.docx

兽医微生物学重要知识点汇总
绪言
1、微生物学 定义：研究微生物形态、生理、遗传变异、生态分布以及其与人类关系 科学，广义 微生物学还包括免疫学，甚至还包括寄生虫学，尤其是原虫学。
2、微生物特点：①个体微小，需借助显微镜观测，其群体可见。②构造简朴，繁殖快，分布广。③比较面积大（有助于物质互换，代谢繁殖）。④易变异，适应性强。
3、微生物种类：三型八大类三菌四体一病毒）
真菌细胞型：细胞核有核膜、核仁，细胞器完整°Eg:真菌。
原核细胞型：仅有原始核，无核仁、核膜，细胞器很不完善。DNA和RNA同步存在（拟核/核体）Eg：细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体。
非细胞型微生物：最小 一类微生物，无经典细胞构造。只能在活细胞内生长繁殖。核酸类型为DNA或RNA.Eg :病毒。
4、微生物学发展过程
第一阶段一一形态课时期：1683年荷兰吕文虎克初次观测到微生物。1861年巴斯德否认“自然发生说”；证明发酵由微生物引起。
第二阶段一一生理学及免疫学奠基时期：
I巴斯德（微生物学、生理学与免疫学 重要奠基人）历史性奉献：①酒是某种微生物发酵产物②处理了酒 败坏问题③研究炭疽病、人 狂犬病，确定这些疾病由对应 微生物引起、微生物可以至弱作作防止传染病用，并且对至弱 途径做了示范性 试验④发明免疫学 防止接种⑤发明巴氏消毒法
II科赫（建立微生物研究 基本操作技术和对病院细菌 研究，有突出奉献）功绩：①发明培养基并用于纯化微生物②发明染色观测、显微摄影③科赫法则④证明炭疽病原因-炭疽杆菌发现结核病源菌-结核杆菌
【科赫法则：①病原微生物应在同一疾病中查见，但在健康动物体内不存在②该病原菌能被分离培养得纯种③该纯培养物接种至易感动物，能产生同样 疾病④自人工感染 试验动物体内能再次分离培养得到相似 病原】
【免疫措施：注射、服、点眼、滴鼻、气雾】
第三阶段一一近代及现代微生物
理论上获得 成就极其应用价值：①进入真正意义上 基因工程时代②进行化学治疗腰肌和抗生素研究③组织移植、免疫耐受研究，抗原抗体反应在诊断及防治疾病上应用技术上 重大创新及其应用价值①电子显微镜 应用②标识抗原或标识抗体 应用③细胞培养、空斑技术、蛋白质及核酸提纯④核磁共振仪使用⑤分子克隆、PCR （聚合酶链式反应）、DNA测试、基因组学及电子计算机等技术应用
微生物学领域 三大进展：微生物遗传学、免疫学及病毒学
第1篇总论
第一章细菌形态构造
【内容提纲】细菌个体微小，经染色后在光学显微镜下才能观测。最常用 是革兰染色法，可讲细菌分为革兰阴性和革兰阳性两大类。
就某种细菌而言，菌体有一定 大小、形态及排列方式。
细菌 基本构造包括细胞壁、细胞膜、细胞质及拟核等。
革兰阳性菌 细胞壁有较厚 肽聚糖及特有 磷壁酸。
革兰阴性菌有外膜，外膜由外膜蛋白、脂多糖等构成，外膜下有一薄层肽聚糖。
细菌 特殊构造有荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等，各有一定 构造及特殊 生理功能，与细菌致病性及免疫原性有关。
细菌是原核生物界中 一大类单细胞微生物，它们个体微小，形态构造简朴，广义 细菌除一般细菌外，还包括立克次体、衣原体、支原体、螺旋体及放线菌。
复习思索题
1、细菌大小、基本形态
答：
大小：细菌个体微小，需染色后在光学显微镜下才能观测到。细菌大小 度量单位一般是微米。
形态：形态比较简朴，有球状、杆状和螺旋状三种基本形态及某些其他形态。
细菌 繁殖方式都是简朴 裂殖，不一样细菌裂殖后其菌体排列方式不一样。有特性性、
相对稳定 形态和排列方式 细菌有球菌、双球菌、链球菌、葡萄球菌（四联、八叠）、杆
菌、螺形菌合适条件下培养 细菌在对数生长期形态经典。不亮环境或老龄期，会出现与正常形状不一样样个体，称为衰老型或退化型。
但有些细菌虽然在合适 环境中生长，其形状也很不一致，有多形性。
2、菌落概念，菌落实际意义
菌落：某个细菌在合适条件下、在适合生长固体培养基表面或内部，培养后分裂繁殖出巨大 菌体，形成一种肉眼可见、有一定形态 独立群体。【单个细菌及其后裔构成“大家族”】
菌苔：生长 菌落连成一片。【多种“大家族”】
菌落实际意义：菌落肉眼可见，多种细菌菌落在大小、色泽、质地、表面形状、边缘构造等方面均有个各自 特性。观测细菌 菌落特性，可推测该细菌 种类，工作中一般通过固体培养基上分离培养 菌落，进行细菌 分离、纯化、传代、计数和鉴定等。
3、细菌 基本构造和特殊构造（绘制细菌构造模式图）
基本构造：细胞壁、细胞膜、细胞质、拟核等基本构造。
特殊构造：荚膜、S层、鞭毛、菌毛、芽孢等。
4、比较革兰氏阳性和阴性细菌细胞壁 异同

阳性
阴性
厚度
厚 15~80nm
薄 10 15nm
肽聚糖
多 40%~95%
少 10%~20%
脂类
少 1%~4%
多 11%~22%
磷壁酸
5
X
外膜
X
5

脂蛋白
X
"
脂多糖
X
/

5、脂多糖和外膜蛋白 构成及功能

构成
功能
脂多糖（LPS ）
（革兰阴性菌所特有，位于外膜最表面）由类脂A、关键多糖和侧链多糖三部分构成
①可以吸附钙离子、镁离子等阳离子②为噬菌体提供特异吸附受体
外膜蛋白（OMP）
（外膜中向前多种蛋白质
统称，按含量和功能分为重
要次要两类）
重要OMP:微孔蛋白、脂蛋白
微孔蛋白：分子筛作用，与细胞粘附和特定物质摄取有关、受体作用
脂蛋白:使外膜层与肽聚糖牢固连接，可作为噬菌体受体，或参与铁及其他营养物质转运

6、细菌遗传物质
拟核和质粒。
遗传物质DNA无核膜包围，分布于菌体中央形成拟核（核体）。拟核含细菌 遗传基因，其功能是控制细菌遗传和变异。
质粒在拟核DNA之外，游离 小型双股DNA分子，含细菌生命非必须基因，其功能是控制产生菌毛、毒素、耐药性和细菌素等遗传性状。质粒能独立复制传给子代。
7、细菌荚膜概念及重要功能
概念：某些细菌在其生活过程中，在细胞壁外周产生一层包围整个菌体、边界清晰粘液样物质。
重要功能：①抗吞噬②抗有害物质损伤③营养物质 储存场所（重要含多糖类）与废物排出
之地。
8、细菌芽孢特点及意义（某些革兰阳性菌在一定 环境条件下，在菌体内形成一种圆形或卵圆形 休眠体，称为芽孢或内芽孢。未形成芽孢 菌体称为繁殖体或营养体，老龄芽孢将脱离原菌体独立存在，称为游离芽孢）
特点：①对高温、干燥、辐射、化学药物等有强大抵御力。
② 含水量低，壁厚而致密，通透性差不易着色，折光性强。
③ 芽孢内新陈代谢几乎停止，处在休眠状态，但能保持潜在萌发力。
④ 不是繁殖器官，一种芽孢萌发只产生一种营养状态细胞。
意义：①芽孢抵御力强，可在自然界中存在数年，是重要传染源，但芽孢并不直接引起疾病，只有发芽成为繁殖体后，才能迅速大量繁殖而致病。
② 芽孢抵御力强，故应以杀灭芽孢座位可靠 灭菌原则。
③ 可根据其形态位置鉴别细菌
第二章细菌生长繁殖与生态
【内容提纲】
细菌菌体 形成是一种复杂 住，波及物质摄取、生物合成、聚合作用（DNA复制，转录、翻译）及组装四个环节。
菌体以二等分分裂法无性繁殖。
细菌群体 生长繁殖和培养时间呈特定规律，用生长曲线表达，并可分为缓慢期、对数期、稳定期及衰亡期四个阶段。
大多数细菌可在人工培养基上生长。根据细菌对氧气和温度需求差异，可将细菌分为需氧菌、厌氧菌、兼性菌以及嗜温菌、嗜冷菌、嗜热菌等。
生化试验系根据细菌传代特点设计，用于细菌鉴定。
自然界中 细菌多以群落存在，生物被膜是一种重要 体现形式，其抵御力较游离细菌强，其生长受控于密度感应系统。后者通过信号分子作用，在基因水平完毕对细菌群落生长 调控。
微生物种群之间在自然界存在着复杂 互相作用，正常菌群对维护动物健康至关重要。
复习思索题
L形成细菌个休代谢过程有何特点？
① 细菌生长和繁殖速度极快，超过动物细胞10~1倍
② 细菌运用多种化合物作为能源能力远远强于动物细胞
③ 细菌对营养需求比动物细胞更为多种多样，由于他们有多种代谢旁路
④ 细菌可运用超长流水线式生产方式生成大分子物质
⑤ 细菌能生产诸如肽聚糖、脂多糖、磷壁酸等特殊物质
2、物质摄取 方式有哪几种？各有何特点?
单纯扩散
被动扩散，细胞内外物质最简朴一种互换方式。细胞膜两侧 物质靠浓度差（浓度梯度）进行分子扩散，不需要能量。无特异性和选择性，速度较慢，细胞内为溶质浓度一旦到达平衡，扩散便停止。
增进扩散
某些物质与某些位于细胞膜特异性载体蛋白相结合，然后将其转运至细胞内，这一过程具有特异性和选择性，不需要能量。
积极运送
细菌吸取营养物质 一种重要方式，需要特异性载体蛋白，能将特异性溶质逆浓度梯度泵入细胞，因此需要能量。
基因位转
物质在运送 同步受到化学修饰，从而能愠缘不停输入细胞，此种方式在缺氧环境中最常见，其过程波及从可溶物向分子 化学变化，需要特异性载体蛋白参与，需要能量。

3、细菌菌体分裂为何只需较短时间?
细菌以二等分分裂法进行无性繁殖。大多数细菌菌体在合适条件下分裂需要较短时间，是由于在上一轮复制尚未完毕时，下一轮细胞分裂已经启动。此外染色体DNA存在多种复制叉，可使自带 染色体DNA同步开始部分复制。
4、何谓细菌 生长曲线？怎样确定？有何意义？不一样步期有何特点？
细菌生长曲线：将细菌接种在液体培养基并置于合适 温度下，定期取样检查活菌数，可发现其生长过程具有规律性。以时间为横坐标、以活菌数为纵坐标，可得出一条生长曲线。曲线显示了细菌生长繁殖 四个期。
细菌 生长曲线是在体外人工培养条件下观测到，在动物体内因受诸多原因 制约，未必能出现此种经典 曲线，但对细菌生长规律 研究及实践有重要 参照价值。
如下为各个时期及其特点:
缓慢期
细菌来到新环境 一种适应过程。菌体增大，代谢活跃，合成并积累所需酶系统。RNA含量明显增长，但DNA含量无变化。此时细菌数并不增长。
对数期
细菌此时生长迅速，以恒定速度进行分裂繁殖，活菌数以几何级数增长，到达顶峰。生长曲线靠近一条斜直线。该期病原菌致病力最强，其形态、染色特性及生理活性较经典，对抗菌药物作用较为敏感。
稳定期
因营养消耗、代谢产物蓄积等，细菌繁殖速度下降，死亡数逐渐上升，新繁殖活菌数与死亡数大体平衡。该期细菌形态及生理形状常有变化。毒素等代谢产物大多在此时产生。
衰亡期
细菌开始大量死亡，死菌数超过活菌数。细菌菌体变形或自溶，染色不经典，难以进行鉴定。

5、何谓培养基？种类有哪些？
培养基还是人工配制 基质，具有细菌生长繁殖必需 营养物质。培养基制成后，一般都要
进行灭菌处理。
种类：按营养构成，状态，功能差异辨别
基础培养基
含多数细菌生长繁殖所需 基本营养成分，常用新鲜牛肉浸膏，加入适量蛋白胨、NaCl、磷酸盐，调整pH至7.2~7.6即成。
营养培养基
在基础培养基内，添加葡萄糖、血液或血清等，即成营养培养基，最常用是血琼脂平板(在营养琼脂中加入5%新鲜血液配制成)
液体培养基
在液体培养基中加入1%~2% 琼脂，加热融化再冷却凝固。用于细菌分离纯化、菌落观测、生物活性检测等，可制成试管斜面或倾倒平面。

固体培养基
在液体培养基中加入0.5%琼脂。可做穿刺试验，观测细菌 运动力。
半固体培养基

鉴别培养基
针对特定菌种设计，根据其特定产物，在培养基中加入特定作用底物或显色指示剂，凭肉眼识别颜色既能鉴别菌种°Eg三糖铁培养基和麦康凯培养基。
选择培养基
在培养基中加入某些化学物质，对不一样细菌分别产生克制或增进作用，从而可从混杂多种细菌 样本分离出所需细菌°Eg麦康凯培养基、SS培养基、伊红美蓝培养基等。
厌氧培养基
为培养厌氧菌而设计。

6、试述重要 细菌生化反应 原理及用途。P28 P29
多种细菌可以分解运用 营养物质不一样，对相似营养物质 分解产物也不一样，据此可以设计特定 生化反应，作为鉴定细菌只用。细菌 合成代谢产物如毒素、色素等也有一定鉴别意义，但一般不用生化反应检测。
常用 生化反应有氧化酶试验、触酶试验、氧化发酵(O/F)试验、VP试验及甲基红试验等。
可采用微量法和常量法。目前一般多用商品化微量生化试剂检测剂盒。
VP试验
由两学者创立得名。大肠杆菌和产气杆菌均能发酵葡萄糖，产酸，产气，两者不能区别。但产气杆菌能使丙酮酸脱落，生成中性 乙酰甲基甲醇，后者在碱性溶液中被空气中分子样所氧化，生成乙二酰与培养基中含胍基 化合物发生反应，生成红色化合物，是为阳性。大肠杆菌不能生成乙酰甲基甲醇，故为阴性。
甲基红试验
在VP试验中，产气杆菌分解葡萄糖，产生 两分子丙酮酸转变为一分子中性 乙酰甲基甲醇，故最终 酸类较少，培养液pH >5.4。以甲基红(MR)做指示剂是，溶液呈橘黄色，是为阴性。大肠杆菌分解匍萄糖时，丙酮酸不转变为乙酰甲基甲醇，故培养基酸性较强，pH <4.5,甲基红指示剂呈红色，则为阳性。

7、生物被膜有何特点。
生物被膜中 细菌由于被多糖等物质包埋而受到保护，对外环境抵御力及对抗生素抗性均较同种游离 单个菌体强，影响抗生素 疗效和灭菌效果。电镜下可观测到细菌 生物被膜呈连片状 菌体团块。研究表明有 细菌如嗜水气单胞菌，治病菌株可形成生物被膜，而非致病菌不形成。生物被膜形成手细菌密度感应系统调控。
8、何谓密度感应系统调控？举例阐明其应用价值。P30
9、试述益生菌和益生元概念及应用价值。
某些细菌或真菌有助于宿主胃肠道微生物区系 平衡，能克制对宿主有害 微生物 生长，用这些微生物制成 制剂称为益生菌或益生素。饲料或食品中 某些寡糖例假如寡糖(FOS )等成分，不被宿主消化吸取，但等选择性 刺激宿主消化道有益微生物或饲喂 益生菌 生长，对宿主产生有益作用，此类成分叫益生元或益生素元。益生菌及毕生缘亦可联合使用。两者对动物有一定保健作用。
10、何谓菌群失调？保持动物正常菌群有何重要意义？
因患病、外科手术、环境变化和滥用抗菌药物等原因，宿主某个微生物正常菌群中 细菌种类和数量发生变化，对机体导致损失，出现一定病理效应 状态，称为菌群失调。例如长期持续或短期大量服大肠杆菌敏感 抗菌药物，杀死了肠道有益大肠杆菌，致使对抗菌药物不敏感致病性大肠杆菌或其他肠道致病菌借机大量增值，引起肠道疾病。
正常菌群与其宿主之间形成一种共生关系，详细表目前营养免疫和生物拮抗三个方面°P32
11、 试述悉生生物学和悉生动物 概念、试验动物分类(包括定义)以及培育试验动物意义。
悉生动物学：是用无菌动物技术研究微生物与其宿主互相关系 生命科学，它是在科学研究与临床医学中应用悉生动物科学。
悉生动物：一切生命形态都懂得 动物。根据概念可分为五类，其中无特定病原体动物应用正日趋广泛。
无菌动物
不带任何微生物动物，即无外源菌动物。实际上某些内源性病毒或正常病毒很难清除，因此无菌动物实际上是一种相对概念。无菌动物中尚有一种无Y球蛋白动物。
悉生动物
侠义 悉生动物是指无菌动物，广义也指有目 地带有某种或某些已知微生物动物。无菌动物带有或接种了一种微生物动物叫单联悉生动物，带两种微生物者称双联微生物，依次类推，称为三联或多联微生物。
无特定病原体动物
(SPF )
是指不存在某些特定具有病原性或潜在病原性微生物动物。例如为了排除某些细菌如假单胞菌属、变形杆菌属、克雷伯菌属等干扰，可通过无菌动物与这些细菌以外正常菌群相联络培育SPF动物。
清洁动物
是指动物来源于剖腹产，喂养与半屏蔽系统，其体内外不能携带人畜共患病和动物重要传染病病原体。是无菌动物与健康动物纯粹正常微生物群相联络成果。
一般动物
是指在开放条件下喂养，其体内外存在着多种微生物和寄生虫，但不能携带人畜共患病病原微生物动物。

培育试验动物意义：由于无菌动物不受任何微生物刺激和干扰，因此可以用于研究动物体内外微生物区系对机体 影响及微生态学研究，可用来研究免疫、肿瘤、病理及传染病净化等。由于无菌动物 培育和喂养技术很困难，因此一般用悉生动物替代。
第三章消毒、灭菌及兽医微生物试验室生物安全
【内容提纲】
消毒和灭菌是兽医微生物学实践中 最常用 措施。
常用 火焰灭菌法、热空气灭菌法、高压蒸汽灭菌法、巴氏消毒法及煮沸灭菌法各有特点和
实用范围。
可见光中 紫外线和红外线有杀菌作用，光复活作用是一种值得注意 现象。r射线和微波等也常用于灭菌。
滤过除菌应用广泛，制造生物制品等药物车间空气需要滤过并规定到达一定洁净程度。
化学消毒剂 功能易受环境原因 影响，抗生素等用于细菌感染 治疗。细菌素对同种或类似细菌有一定抑杀作用。
根据从事病原微生物危害性差异，兽医微生物试验室一般一般分为生物安全等级1~4级(BSL1~4)4种规格，BSL~4是最高安全级别。我国农业部将动物病原微生物分为一至四类，一类危害性最大。
复习思索题
1、灭菌、消毒、防腐、无菌概念？
答：(1)灭菌：杀灭物体上所有微生物 措施，包括杀灭细菌芽胞霉菌孢子在内 所有病原微生物和非病原微生物。
(2) 消毒：杀灭物体上病原微生物 措施，仅规定到达消除传染性 目，而对非病原微生物及其芽胞、孢子并不严格规定所有杀死。
(3) 防腐：制止或克制物品上微生物生长繁殖 措施，微生物不一定死亡。
(4) 无菌：无菌为不存在活细菌意思。防止或杜绝细菌进入动物、人或其他物品措施称为无菌操作。
2、物理消毒灭菌措施重要有哪些？怎样合理选用?
答：(1)热力灭菌法：高温灭菌法是最古老、作用最大、应用最广、使用最简便以及效果最可靠 灭菌措施。热力使蛋白质中 氢键破坏使之变性或凝固，使双股DNA分开为单股，活化核酸酶使单股DNA断裂。
细菌繁殖体对其最为敏感，另一方面真菌和病毒，细菌芽胞对热有很强抵御力作用。
热力灭菌法分为干热灭菌和湿热灭菌两大类，在同一温度下后者 效力比前者大，这是由于湿热中菌体蛋白较易凝固、湿热穿透力比干热强、蒸汽变为液态时可释放大量潜热迅速提高被灭菌物体温度。
(2) 辐射灭菌法辐射包括电磁波辐射和粒子辐射。辐射除可被某些产色素细菌运用作为能量源外，对多数细菌有损害作用。
(3) 超声波杀菌法
超声波裂解细胞 重要机制：它通过水发生空(腔)化作用，在液体中导致压力变化，应力微弱区形成许多小空腔，逐渐增大，最终崩裂。
有残存，费用颇大，故未应用于消毒灭菌。目前重要用于裂解细胞，提取细胞组分进行研究。
(4) 滤过除菌法
概念：是通过机械、物理阻流作用将液体或空气中细菌等微生物除去措施。
合用条件：一般不能除去病毒、支原体、细菌L型等微生物。糖培养液、多种特殊 培养基、血清、毒素、抗毒素、抗生素、维生素、氨基酸等不能加热灭菌 液体常用滤器过滤除菌。此外，还可以进行病毒 分离。运用空气过滤器可以进行超净工作台、无菌隔离器、无菌操作室、试验动物室以及疫苗、药物、食品等生产厂房 空气滤过除菌。
（5）干燥及低温抑菌法干燥T失水T新陈代谢障碍T菌体蛋白质变性或盐类浓度增高T死亡
运用高浓度 盐溶液或糖溶液保留食品，是由于高浓度 溶液吸取菌体内 水分，导致微生物生理性干燥而到达抑菌目。
类型
概念
措施、灭菌机制
条件
干执
1 小、
灭菌
法
火焰
灭菌
法
以火焰直接灼烧杀
死物品中病原微生物措施
灼烧（直接用火焰灭菌）
合用于耐烧接种针（环）、金属器具、试
管等灭菌
焚烧（直接点燃或者焚烧炉内焚烧）
常用于烧毁 物品，如患病动物尸体、病
畜禽垫料及其他污染废弃物等
热空小、-J—
气灭
菌法
运用干热灭菌器，
以干热空气进行灭
菌措施
在干热状况下，由于热空气穿透力较低，需在160r维持2h才能到达杀死所有微生物及其芽胞、孢子目。
合用于高温下不损坏、不变质、不蒸发物品，如多种玻璃器皿、瓷器、金属器械等
湿热
灭菌
法
煮沸
消毒
法

常压下煮沸10~20min可杀死所有细菌繁殖体，芽胞长需煮沸1~2h才能被杀死。
若在水中加入2 %碳酸钠或2 %~5%石炭酸，可以提高沸点，增强杀菌力
外科手术器械、注射器、针头以及食具等
多用此法消毒
巴氏
消毒
法
以较低温度杀灭液态食品中病原微生物或特定微生物，而又不严重损
① .低温维持巴氏消毒法：在63~65°C维持 30min;
② 高温瞬时巴氏消毒法:在71~72C保持15s;
目前重要应用于葡萄酒、啤酒、果酒、牛乳等食品消毒。
超高温巴氏消毒法鲜乳在常温下保质期可长达六个月。

害其营养成分和风
味消毒措施
③超高温巴氏消毒法：在132P保持1~2s。加热消毒后迅速冷却至10°C如下（冷击法）

流通
蒸汽
消毒
法
是运用一种原则大气压下1P 流通蒸汽进行物品消毒，又称常压蒸汽
消毒法
1°C 蒸汽维持30min足以杀死细菌繁殖体，但细菌芽胞和真菌孢子不能被所有杀灭。该法常用阿诺德流通蒸汽灭菌器或蒸笼。

流通
蒸汽
灭菌
法
运用反复多次流通蒸汽间歇加热以到达杀灭所有微生物措施，又称间歇灭菌法或丁达尔灭菌法
在流通蒸汽灭菌器内进行第一次流通蒸汽灭菌后，将物品移植37C保温箱中保温过夜，待芽胞萌发出芽，次日以同样方式再进行一次灭菌和保温过夜，如此持续3次以上，可到达完全灭菌效果。
此法常用于某些不耐高温培养基，如鸡蛋培养基、血清培养基、糖培养基灭菌。如将物品在70~80C加热1h。持续6次，也可到达灭菌目，且可不破坏血清等物质。根据灭菌对象不一样，温度、加热时间、次数，均可合适增减。
高压
蒸汽
灭菌
法
用高压蒸汽灭菌器
进行灭菌措施。
在103.4kPa蒸汽压下，于121.3C维持15~20min，可杀死包括细菌芽胞在内所有微生物。
是应用最广、最有效灭菌措施。凡耐高温、不怕潮湿物品，如多种培养基、溶液、玻璃器皿、金属器械、敷料、橡皮手套、工作服和试验小动物尸体等均可。

类别
概念
措施、灭菌机制
条件
非 可见
是指红外线和紫外线
可见光具有微弱杀菌作用，若
光感作用对原生动物、细菌、毒素、
电 光
之间肉眼可见光
将某些染料如结晶紫、美蓝、汞
病毒和噬菌体等均有灭火作用。
离
线，波长 4~8nm
溴红、伊红、沙黄等加到培养基
革兰阳性菌对光感作用比阴性敏感，
辐

或涂在外伤表面，能增强可见光
美蓝、汞溴红、伊红仅作用于革兰阳
射

杀菌作用，这一现象称为光感
性菌，而沙黄则作用于革兰阴性菌。

作用。一般在有氧 状况才出现

光感作用。（染料激活氧或染料氧

化起杀菌作用）

日光
直射日光有强烈杀
菌作用
多数微生物在直射日光照射下半小时到数小时即可死亡。芽胞往往须经20h才可死亡。
效果影响原因众多。实际生活中，日光对被污染 土壤、牧场、畜舍、用品等消毒以及江河自净作用均有重要意义
紫外
线
紫外线波长2~3nm部分具有杀菌作用，其中265~266nm杀菌力最强。
紫外线损害DNA 构型，干扰
DNA 复制和转录；使空气中
分子氧变为臭氧，释放出氧化能
力强氧原子。
试验室一般使用紫外线杀菌
灯，杀菌力强而稳定
紫外线 穿透力弱，故只能用于微生物试验室、无菌室、手术室、传染病房、种蛋室等空气消毒，或用于不能用高温或化学药物消毒表面消毒；光复活作用。
红外
线
红外线是波长为0.77~10微米电磁波，尤以1~10微米
热效应最强
运用红外线烤箱灭菌。
无需空气传导，可是照射物体表面迅速升温。
灭菌作用与干热相似，灭菌时间、所需温度亦同于热空气灭菌法。
此法多用于医疗器械灭菌。
微波
微波重要是一种波长
1mm到1m 超高频
电磁波
消毒中常用 微波频率为
915~2450MHz。重要是运用微波
加热作用。
可透过玻璃、塑料薄膜、陶瓷等物质，但不能透过金属表面。目前重要用于食品工业，医药方面用于维生素和中药药丸等灭菌。时间短，加热均匀是其明显特点。
电离辐射
放射性同位素射线（即a射线、0射线、Y射线）和X射线以及高能质子、中子等可将被照射物质原子核周围电子击出，引起电离，故称为电离辐射。
射线使水电离出游离基（强烈
还原剂和氧化剂）直接作用于细菌；射线使酶失活；导致包括DNA在内细胞内物质分解；
在足够计量时，对多种细菌均有致死作用。在实际工作中，其他等缺乏穿透力不实用，重要应用X射线、y射线、0射线。电离辐射多用于大量一次性塑料制品 消毒，亦可用于食品、饲料消毒，且不破坏其营养成分。

3、影响消毒剂作用原因
消毒剂 性质和作用时间：绝大多数消毒剂在高浓度时杀菌作用大，浓度低至一定程度只有抑菌作用。过浓不一定能提高消毒效力。一定浓度下，对细菌作用 时间越长，效果越好。
微生物 种类和数量：同一消毒剂对不一样种类处在不一样事情 微生物效果不一样。微生物数数量越大，所需消毒时间就越长。
温度：一般温度升高可增强杀菌效果。
④ 酸碱度：消毒剂杀菌效果受PH 影响°PH也影响消毒剂电离度，一般未电离因子易通过细胞壁杀菌效果好。
⑤ 有机物：环境中有有机物，尤其是蛋白质能和许多消毒剂结合，严重影响效果。
⑥ 药物 互相拮抗：消毒剂理化性质不一样，两种药物合用时也许产生互相拮抗，使药效减少
影响消毒效果尚有湿度、穿透力、表面张力及拮抗物质等。
4、试述我国《兽药GMP》对兽药生产洁净室（区）空气洁净度 划分。
答：1 级、1 级、10 级、30 级
5. 比较消毒剂、防腐剂，化学治疗剂 杀菌机制。
答：消毒剂和防腐剂之间没有严格界线。消毒剂与化学治疗剂不一样，它在杀灭病原微生物
同步，对动物体 组织细胞也有损害作用，因此只能外用或用于环境 消毒，其中少数不被吸取 化学消毒剂亦可用于消化道 消毒。而化学治疗剂对于宿主和病原微生物 作用品有选择性，她能使微生物受克制或死亡，而对宿主细胞毒副作用甚小。
消毒剂：用来杀灭病原微生物化学药剂。
防腐剂：用于克制微生物生长繁殖 化学药剂。
化学治疗剂：用于消除宿主体内病原微生物或其他寄生虫化学药物称为化学治疗剂。
6、抗生素和细胞素两者作用原理怎样？
(1) 抗生素：某些微生物在代谢中产生 一类能克制或杀死另某些病原微生物 物质。作用原理：①干扰细菌细胞壁合成；②损伤细胞膜而影响其通透性；③影响菌体蛋白质合成；④影响核酸合成；
(2) 细菌素：是某种细菌产生 一种具有杀菌作用 蛋白质。只能作用于与它同种不一样株 细菌以及与它亲缘关系相近 细菌
第四章细菌 感染与致病机理
【内容提纲】
细菌与否有致病性，经典根据是柯赫法则，近年来提出基因水平柯赫法则对此原则做了补充和完善。
就某种病原菌而言，其致病性一般通过测定LD50来定量。
细菌 致病性在很大程度上取决于其毒力因子，包括侵袭力与毒素，以及毒力因子 分泌系统。
侵袭力导致病原菌在机体内定殖、突破机体防御屏障、内化作用、繁殖与扩散。
毒素有外毒素和内毒素之分，外毒素是具有特异性毒性作用 蛋白质，经典构造为A-B亚单位 聚体。内毒素为LPS 类脂A，耐热，具有致热作用等。
有关病毒致病性现代观点不仅要考虑病原菌，还要考虑宿主及两者互相作用，机会致病
菌因此得以重视。
细菌 毒力可用人工 措施增强或减弱，并受到温度、离子浓度等多种环境因子、非编码小
RNA及二元信号转导系统等调整。
复习思索题(1~6重点)
1. 致病性与毒力概念。
(1) 一定种类病原菌在一定条件下，能在宿主体内引起感染能力称为致病性。
(2) 病原菌致病力 强弱程度称为毒力。
2. 经典柯赫法则。
由德国细菌学家罗伯特•柯赫890年提出，是确定某种细菌与否具有致病性 重要根据：
(1) 特殊 病原菌应在同一疾病中查见，在健康者不存在：
(2) 此病原菌能被分离培养而得到纯种；
(3) 此纯培养物接种易感动物，能导致同样病症。
3. LD50 概念。
答：半数致死量(LD50 )是指能使接种 试验动物在感染后一定期限内死亡二分之一所需
微生物量或毒素量。
4. 外毒素与内毒素区别。

概念
特性
构成
化学性质
产生
耐热性
毒性作用
毒性程度
致热性
免疫原性
能否产
生类毒素

外毒素
是某些
蛋白质
由某些
一般不
特异性，
高，往往
对宿主
强，刺激
能，用甲
大多数

病原菌

革兰阳
耐热
为细胞
致死
不致热
机体产
醛处理
外毒素

在生长

性菌或

毒素、肠

生中和

由A、B

繁殖过

阴性菌

毒素或

抗体(抗

两种亚

程中所

分泌

神经毒

毒素)

单位构

产生

素，对特

成。A亚

对宿主

点 细

单位为

细胞有

胞或组

毒素

毒性

织发挥

活性中

可溶性

特点作

心，B亚

蛋白质

用

单位为

结合部

位
内毒素
特指革
脂多糖
由革兰
极为耐
全身性，
弱，很少
常致宿
较弱，免
不能
LPS 由

兰阴性

阴性菌
热小、
致发热、
致死
主发热
疫应答

O特意

菌中

裂解产

腹泻、呕

局限性

多糖侧

脂多糖

生

吐

以中和

链、非特

(LPS )

毒性

异关键

成分，细

多糖和

菌在死

类脂A

亡后破

构成。

裂或用

人工措

施裂解

菌体后

才释放

5. 感染类型。
答：隐形感染和显性感染
6. 细菌毒力减弱措施
答：(1)长时间在体外持续培养传代；
(2) 在高于最适生长温度条件下培养；
(3) 在具有特殊化学物质 培养基中培养;
(4 )通过非易感动物;
（5）通过基因工程措施;
7. 试述致病菌侵入宿主细胞 重要过程。
答：定殖（细菌感染 第一步就是在体内定殖）t干扰或逃避宿主 防御机制（抗吞噬作用、抗体液免疫机制）T内化作用（指某些细菌在粘附在细胞组织后能进入吞噬细胞或非吞噬细胞内部 过程）t在体内增殖（关键问题，增殖速度对致病性极其重要）T在体内扩散
8. 什么样细菌能进行内化作用，意义何在？
答：（1）结合杆菌、李氏杆菌、衣原体等严格 胞内寄生菌及大肠杆菌、沙门菌、耶尔森菌等胞外寄生菌；
（2）意义：细菌通过这种位移作用进入深层组织，或进入血液循环，借以从感染 病发原灶扩散至全身或较远 靶器官。宿主细胞为进入其中 细菌提供了一种增殖 小环境和呵护所，使细菌逃避宿主免疫机制杀灭。
9. 胞外蛋白酶有何致病作用，举例阐明。
细菌分泌 蛋白酶称为胞外蛋白酶。它们具有多种致病作用，例如激活外毒素、灭活细菌中补体等，有 蛋白酶自身就是外毒素。此外，最重要 作用是导致组织基质或细胞膜损伤，增长其通透性，有助于细菌在体内扩散。此毒素常见有：透明质酸酶，分解基地组织，葡萄球菌、链球菌可产生； 胶原酶，分解ECM中 胶原蛋白，见之于梭菌、气单胞菌等；神经氨酸酶，分解细胞膜磷脂，产气荚膜梭菌等可产生。
10. 什么是类毒素，有何用途？答：外毒素在0.4%甲醛溶液作用下，通过一段时间可脱毒，但仍保留原有抗原性，称为
类毒素。注入机体后可刺激机体产生抗毒素，可作为疫苗进行免疫接种。
11. 举例阐明细菌毒力因子重要 分泌系统 重要特点。
答：具有接触介导 特性：以肠致病性大肠杆菌(EPEC )为例，置37 ^ 处在对数生长
期 EPEC与宿主细胞接触后，T3SS大量分泌蛋白质并进入宿主细胞。EPEC4型菌毛
(BFP )对激活此分泌系统起关键作用。T3SS这种接触激活作用可被氯霉素克制。
12. 什么是机会致病菌？为何应予以重视？
是指某些细菌一般不积极入侵宿主，但当宿主免疫屏障被打开或免疫功能异常时，此类细菌就会进入机体血液或组织，导致感染并致病。
细菌致病性与毒力 老式概念 缺陷是仅考虑病原菌自身，即着重研究那些专性致病菌，忽视了宿主原因以及宿主和病原菌 互相作用。
13. 环境因子怎样影响细菌毒力因子调整，举例。
(1) 温度：嗜水汽单胞菌 毒素、菌毛在25。。左右体现量最佳；
(2) 铁：它不仅可以诱导铁载体、铁载体受体及其他铁结合蛋白受体等与铁代谢有关成分体现，并且还对某些细菌毒素有调整作用，如类志贺毒素；
(3) 钙：钙对耶尔森菌Yops 体现有调整作用。Yops是耶尔森菌 一系列外膜蛋白，是重要毒力因子；
(4) 渗透压：渗透压对霍乱弧菌毒力及菌毛体现有调整作用，在宿主组织相近生理范围内体现量最高。
14. 什么是非编码小RNA答：是一大类不编码蛋白质 RNA分子，存在于因此生物体中。sRNA作为一种新调控因子，可与mRNA结合，导致后者降解；或与蛋白质结合，影响蛋白质生物学功能。
15. 什么是二元信号转导系统？其在病原信号传递上有何作用。
答：最简朴 二元信号转导系统（TCSTS）由组氨酸激酶（HK ）和反应调整因子（RR ）构成。感受到外界环境信号后将RR磷酸化，将外界信号传递到胞内。整个双组分信号通路由信号输入，HK自身磷酸化、RR磷酸化及信号输入等环节构成。
TCSTS在病原菌 信号传导中起着极为重要 作用，包括病原菌对宿主 识别和侵袭，对环境代谢性适应。对渗透压变化胜利应答、趋化性等等。
第五章细菌遗传变异
【内容提纲】
细菌遗传变异物质基础组合要是基因组。
质粒作为细菌基因组外自我复制 遗传物质，控制细菌 某些次要形状，如抗性等，并可以转移或丢失。
转位因子包括插入序列、转座子、Mu噬菌体及基因盒-整合子系统，具有可移动性和不稳定性。
毒力岛是具有潜在可移动性毒力基因群。
转化、传导和接合是细菌个体间互换遗传物质天然方，采用原生质体融合等人工措施也可到达相似目。
掌握细菌遗传变异 规律，不仅有助于感染性疾病 诊断和防止，并且可推进微生物学和遗传学发展。
复习思索题
1、何谓细菌遗传和细菌变异？
遗传：亲代细菌和子代细菌 相似性，他使细菌 形状保持相对稳定，是细菌存在 根据。
变异：亲代与子代以及子代细菌之间 不相似性，它使细菌得以演化。
2、简述细菌遗传变异物质基础。
基因组
细菌 基因组位于拟核，是遗传 重要物质基础。拟核 功能与真核细胞染色体 功能相似，因此又称其为染色体。细菌 基因组由两条环状双螺旋DNA长链构成，控制细菌遗传变异。每条DNA单链骨架由磷酸和脱氧核糖构成，支链含四种碱基，即两种嘌吟AG ,两种嘧啶TC。细菌基因组 基因是持续，无内含子。
质粒
环状双螺旋DNA分子，是细菌染色体外 遗传物质。质粒可以自身复制，随宿主菌分裂传到子代细菌，质粒是自行复制单位，有 需与染色体 复制同步，称为严紧型复制。质粒可以在细菌间转移，当质粒从一种细菌转移到另一种细菌时，携带性状也随之转移。质粒转移不仅可以发