卵巢肿瘤中增殖细胞核抗原及表皮生长因子受体的表达.doc

卵巢肿瘤中增殖细胞核抗原及表皮生长因子受体的表达（全面版）资料
卵巢肿瘤中增殖细胞核抗原及表皮生长因子受体的表达
王 　 岩 1, 高一群 1, 刘慧雯 2, 刘东华 2, 单智炎 2
(1. 齐齐哈尔铁路中心医院 , 黑龙江 齐齐哈尔 161000; 2. 哈尔滨医科大学组织胚胎学教研室 , 黑龙江 哈尔滨 150086
摘要 :目的 　 探讨增殖细胞核抗原 (PC NA 及表皮生长因子受体 (EG FR 与卵巢上皮性肿瘤发生发展的 关系 。 方法 　 应用 PC NA 的单克隆抗体和 EG FR 的单克隆抗体 , 以 S ABC 免疫组织化学方法 , 观察在 35例卵 巢上皮癌 、 18例卵巢上皮瘤 、 15例卵巢组织中的表达情况 。结果 　① 从正常卵巢到卵巢瘤及卵巢癌 PC NA 及 EG FR 的表达从阴性到阳性 , 且呈增高趋势 ; 正常卵巢与卵巢肿瘤 PC NA 及 EG FR 的表达有显著性差异 (P <0. 05 , 正常卵巢与卵巢癌之间有极显著性差异 (P <0. 01 ; ②Ⅱ 、 Ⅲ 、 Ⅳ 期组 PC NA 及 EG FR 的阳性表达 (15/21、 18/27 明显高于 Ⅰ 期组 (1/8、 2/8 具有显著性差异 (P <0. 05 ; 高分化组 PC NA 及 EG FR 的阳性表 达 (11/25、 14/25 均低于中 、 低分化组 (5/10、 7/10 , 但差异无统计学意义 (P >0. 05 ;PC NA 及 EG FR 在卵巢 浆液性囊腺瘤及非浆液性囊腺瘤中的表达无显著差异 ; ③ PC NA 及 EG FR 阳性表达的 3年生存率 (7/16、 5/20 与阴性表达具有显著性差异 。 结论 　 PC NA 及 EG FR 在正常卵巢组织呈阴性表达 , 在卵巢上皮瘤中可有表 达 , 在卵巢癌中明显表达 。 2者的阳性表达与临床分期有关 , 晚期有转移者明显增高 , 与组织分化程度及病 理类型无关 , 可以估计卵巢癌患者的预后 , 并辅助指导临床化疗 。
关键词 :基础医学 ; 卵巢肿瘤 ; 增殖细胞核抗原 ; 表皮生长因子受体 ; 免疫组织化学 学科分类代码 :310117　　　　 中图分类号 :R329128　　　　 文献标识码 :A 文章编号 :1004-5775(2004 08-0592-03
作者简介 :王岩 (1967- , 女 , 汉族 , 副主任医师 , 硕
士研究生 。
Expression of PCNA and EGFR on Ovary Epithelium Tumor
W ANG Y an , G AO Y i -qun , LI U Hui -wen , et al .
(Department of obstetrics &gynecology , The Railway Central Hospital of Qiqihar , Qiqihar 161000, China Abstract :Objective 　 T o discuss the relation between the expression of PC NA and EG FR in development of ovary epithe 2
lium tum or. Methods 　 The m ono -clone antibody of PC NA and EG FR were detected in expression with S ABC method in 35cases ovary epithelium carcinoma , 18cases ovary epithelium tum or and 15cases ovary epithelium tissue. Results 　 The tendency of negative to positive expression of PC NA and EG FR were increased from normal tissue to malignant tum or. The expression of PC NA and EG FR in normal ovary and tum or had significant differences in (P <0. 05and P <0. 01in malignant tum or . The expression of PC NA and EG FR in stage Ⅱ , Ⅲ and Ⅳ was higher than that of stage Ⅰ with significant difference , but not in high and low differential groups. Als o did in serous cystoma and non -serous cystoma. There was significant difference in 3years survival rate with different positive expression. C onclusion 　 The expression of PC NA and EG FR in normal tissue was negative. There was expression in ovary tum or and positive expression in malignant tum or of ovary. It might relate with clinical stage and metastasis but not with tissue differentiation and pathology. This data might assess the prognosis and indicate the clinical chem otherapy. K ey w ords :Ovary tum or ; PC NA and EG FR ; Immunohistochemistry
　　 来源上皮组织的肿瘤是人类最常见的肿瘤 。 卵 巢上皮性用肿瘤主要由浆液性肿瘤 、 黏液性肿瘤 、 子 宫内膜样癌等组成 。 PC NA (增殖细胞核抗原 是一 种非蛋白性核蛋白 , 与细胞增殖和 DNA 合成有关 ,
可反映细胞增殖程度和所处周期 〔 1,2〕
,EG FR (表皮生 长因子受体 与许多肿瘤的发生发展密切相关 , 肿瘤
细胞表面左右 EG FR 高表达 〔 3〕
。 PC NA 及 EG FR 与 卵巢肿瘤的发生发展都有密切关系 。 1　 资料与方法 111　 一般资料
选自齐齐哈尔铁路中心医院 1998~2004-03妇科手术切除标本 , 及临床病理资料完整的病例共 35例 , 均为上皮性卵巢癌病例 。患病年龄 38~70岁 , 平均年龄为 54. 28岁 。 其中 , 浆液性乳头状囊腺 癌 27例 , 黏液性腺癌 2例 , 宫内膜样腺癌 5例 , 混合 性腺癌 1例 。根据 1985年 FIG 0分期 :Ⅰ 期 8例 , Ⅱ 期 7例 , Ⅲ 期 18例 , Ⅳ 期 2例 。根据 WH O 分级 :高 分化 25例 , 中分化 2例 , 低分化 8例 。另取卵巢上 皮瘤 18例 , 正常卵巢组织 15例 。 经 10%甲醛固定 , 常规石蜡包埋 。 112　 试剂
采用美国 SIG M A 公司生产的鼠抗人 PC NA 单克 隆抗体 PC 10; 生物素化山羊抗小鼠 IgG 和链霉素亲 合素 -生物素 -过氧化物酶复合物 (S ABC ; 试剂盒 购自武汉博士德生物工程 ; EG FR 单克隆 抗体由北京中山生物技术提供 。 113　 方法
石腊切片常规脱腊至水 , 浸泡于 10mm ol/L 柠 檬酸溶液中 , 放于微波炉中加热 2次 , 每次 5min , 取 出后冷却至室温 ,P BS 缓冲液冲洗 。以下步骤分别 按 S ABC 方法进行 。 114　 结果判定
PC NA 表达 :经免疫组化染色 , 细胞核内出现深 棕色颗粒的细胞为阳性 ; EG FR 表达 :经免疫组化染
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色的切片中细胞膜与胞浆中出现棕黄色为阳性 。 2　 结果
211　 正常卵巢 、 卵巢上皮瘤及卵巢上皮癌中 PC NA 及 EG FR 的表达
15例正常卵巢组织中 PC NA 及 EG FR 均为阴性 表达 ,18例卵巢上皮瘤中有 6例 PC NA 及 EG FR 同 时阳性表达 。 35例卵巢上皮癌中有 16例 PC NA 阳 性表达 , 主要在细胞核内出现深棕色染色 ; 有 20例 EG FR 的阳性表达 , 主要在细胞膜及细胞浆中可见 棕黄色染色 。 其中 ,2者有 13例同时阳性表达 。从 正常卵巢到卵巢瘤及卵巢癌 PC NA 及 EG FR 的表达 从阴性到阳性 , 且呈增高趋势 。正常卵巢与卵巢肿 瘤 PC NA 及 EG FR 的表达有显著性的差异 (P <0. 05 , 正常卵巢与卵巢癌之间有极显著性的差异 (P <0. 01 , 卵巢上皮癌的 PC NA 及 EG FR 表达均高于 卵巢瘤 , 但无显著性差异 (P >0. 05 见表 1。
表 1　 PC NA 及 EG FR 在正常卵巢 、 卵巢瘤 、 卵巢癌中
例数 151835
PC NA 阳性表达 (% 0/15(0 6/18(6 33316/35(16 33 ( ( 333　　 3P <0. 05　 33P <0. 01　 333P >0. 05
212　 PC NA 及 EG FR 阳性表达与卵巢上皮癌病理资 料的关系
21211　 临床分期的比较 :根据肿瘤是否有其他部位 的转移 , 我们将 Ⅰ 期与 Ⅱ 、 Ⅲ 、 Ⅳ 期合并比较 。 Ⅱ 、 Ⅲ 、 Ⅳ 期组 PC NA 及 EG FR 的阳性表达 (15/27,18/ 27 明显高于 Ⅰ 期组 (1/8, 2/8 , 具有显著性差异 (P <0. 05 。
21212　 组织学分级的比较 :本组收集的病例 , 中分 化组只有 2例 , 故将中分化组与低分化组合并与高 分化组比较 。 高分化组 PC NA 及 EG FR 的阳性表达 (11/25,14/25 均低于中 、 低分化组 (5/10,7/10 , 但 差异无统计学意义 (P >0. 05 。
21213　 不同病理类型的比较 :本组资料中浆液性囊 腺癌 27例 , 黏液性腺癌 2例 , 宫内膜样腺癌 5例 , 混 合性腺癌 1例 , 因后几种类型样本数较少 , 故将其合 并与浆液性囊腺癌相比 , 经统计学处理 PC NA 及 EG FR 在卵巢浆液性囊腺癌及非浆液性囊腺癌中的 表达无显著差异 (P >0. 05 。
213　 PC NA 及 EG FR 的阳性表达与卵巢上皮癌生存 率的关系
PC NA 及 EG FR 阳性表达的 3年生存率 (7/16, 5/20 与阴性表达 3年生存率 (15/19,9/15 相比 , 阴 性组明显高于阳性组 ,2者之间具有显著性差异 (P <0. 05 。 见表 2。
表 2　 PC NA 及 EG FR 阳性表达与卵巢上皮癌 3年生 存率的关系
(
PC NA +167(7/16
-1915(15/19 3
EG FR +205(5/20 33
　　 3t =2. 1806, P <0. 05; 33t =2. 1217, P <0. 05 214　 PC NA 与 EG FR 在上皮性卵巢癌中表达的关系 本组 35例上皮性卵巢癌中 , PC NA 与 EG FR 呈 一致性表达共 25例 (25/35 , 其中同时阳性表达 13例 , 同时阴性表达 12例 ,2者的表达呈现出一致的 相关性 。 其余 10例呈非一致性表达 。经统计学处 理 。 PC NA 与 EG FR 的表达无显著性差异 (χ2=0. 9, P >0. 05 。 2者之间具有联系 , 具有相关性 (P =0. 015 见表 3。
表 3　 PC NA 及 EG FR 在上皮性卵巢癌中表达关系 EG FR
PC NA
合计
+13(a 7(b 20
-3(c 12(d 15
　　 P <0. 05
3　 讨论
研究中观察到 15例正常卵巢组织 PC NA 染色 呈阴性 ,18例卵巢上皮瘤中有 6例为阳性表达 , 说 明良性卵巢瘤中也可有 PC NA 的表达 。 卵巢上皮癌 中均有不同程度的表达 , 表明在癌瘤发生过程中 DNA 合成紊乱 , 表现为非同步的异常增殖 。本研究 发现 , 随着临床期别的增高 ,PC NA 的阳性表达呈增 高趋势 。 Ⅰ 期组与 Ⅱ 期以上组相比具有显著性差 异 , 表明 PC NA 的表达与临床分期有关 。这与国内 学者报道一致 〔 4,5〕 。 本研究显示 , 高分化组 PC NA 的 阳性表达低于中低分化组 , 但差异无统计学意义 。 PC NA 的阳性表达在浆液性卵巢上皮癌与非浆液性 卵巢上皮癌之间无显著性差异 , 说明 PC NA 的表达 与癌组织的分化及病理类型无关 。 PC NA 表达与卵 巢上皮癌患者预后有关 。 PC NA 在恶性组织肿瘤中 的表达高低不一 , 阳性表达 3年生存率 (7/16 明显 低于阴性 (15/19 ,2者之间具有显著性差异 。结合 本文研究 , PC NA 表达与卵巢上皮癌组织学分级高 度相关 , 癌分化越低 , PC NA 阳性表达增高 , 则患者 预后较差 。
在本文研究中 , EG FR 在正常卵巢中为阴性表 达 , 在卵巢上皮瘤中可有表达 , 在卵巢上皮癌中表达 率增高 , 正常卵巢与卵巢肿瘤之间 EG FR 的阳性表 达有极显著性差异 。 在本研究中随着卵巢癌的发展 转移的出现 , 即临床期别的增加 , EG FR 的阳性表达 明显增加 , Ⅰ 期 (无转移 与 Ⅱ 期以上 (有转移 组之 间具有显著性差异 。本研究显示 :高分化组 EG FR 的阳性表达低于中 、 低分化组 , 但无统计学意义 。 EG FR 的表达在浆液性卵巢上皮癌与非浆液性卵巢 上皮癌之间无显著性差异 , 说明 EG FR 的表达与病 理类型无关 。 EG FR 高表达肿瘤患者预后较差 , 易 发生转移 , 复发时间短 , 复发率高 , 存活期短 。本文 结果支持上述观点 , EG FR 阳性表达的 3年生存率 (5/20 明显低于阴性组 (9/15 ,2者之间具有显著性 差异 。
PC NA 与 EG FR 阳性表达具有一致的相关性 。 在 35例中 , 有 25例呈一致性表达 , 经统计学证实 PC NA 与 EG FR 在卵巢上皮癌中的表达无显著性差 异 ,2者具有联系 , P <0. 05, 呈一致性表现 , 具有相 关性 。因 PC NA 与 EG FR 表达阳性的患者预后差 , 根据其检测结果可判断卵巢癌患者的预后 , 并指导 临床化疗期限的选择 , 以增强治疗效果 。 因 PC NA 395
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经岩乙状窦前入路中岩骨磨除的显微解剖研究
王 　 越 1, 李俊石 2, 刘晓谦 2
(1. 中国人民解放军第 208医院神经外科 , 吉林 长春 130062; 2. 哈尔滨医科大学第一临床医学院神经外科 , 黑龙江 哈尔滨 150001
摘要 :目的 　 经岩乙状窦前入路中 , 行岩骨磨除及术野显露方法的研究 。方法 　 成人头颈标本 10具 。 显微镜下模拟经岩乙状窦前入路 , 研究岩骨磨除安全范围及术野可暴露范围 。结果 　① 弓气房位于前半规 管外侧 , 外半规管上方 , 存在率 100%⑨ 其内壁可见上半规管切迹 ; 迷路下气房体积大 , 前方为颈静脉球部 , 上壁可见后半规管切迹 ⑧ 与岩上窦 -乙状窦交汇点 (PS 点 距离为 23. 59mm ±3. 72mm ; ② 岩骨嵴阻挡显露 幕下窝的视野 , 磨除至内听道上结节后可完全暴露中上斜坡 。 结论 　 经岩乙状窦前入路术野显露优劣与前 后半规管轮廓化及岩骨嵴磨除程度密切相关 ; 弓气房及鼓室可作为轮廓化前半规管的定位标志 ; 迷路下气 房 , 前庭水管可作为轮廓化后半规管的定位标记 , 充分显露中上斜坡颅底组织结构需磨除岩骨嵴至外耳道上 结节中点 。
关键词 :解剖学 ; 经岩乙状窦前入路 ; 半规管 ; 轮廓化 学科分类代码 :31011420　　　　 中图分类号 :R322　　　　 文献标识码 :A 文章编号 :1004-5775(2004 08-0594-02
Microsurgical anatomy of the petrous bones within Presigmoid Approach
W ANG Y ue , LI Jun -shi , LI U X iao -qian
(Department of Neurosurgery , the First Teaching Hospital of Harbin Medical University , Harbin 150001, China Abstract :Objective 　 T o provide anatomic basis for clinical application to grind petrous bones with presigm oid approach for . Neurosurgery. Method 　 A microanatomy study of petrous bone within Presigm oid Approach on ten cadaveric adult head specimens. Results 　① Air cell of superior semicircular canal is located at the superior to the lateral semicircular canal ,the presence is 100%,and the in fralabyrintheine air cell is retral to the buld of jugular vein. The distance between the in fralabyrintheine air cell and the point of sigm oid sinus and superior petrosal sinus (PS is 23. 59±3. 72mm . ② The crest of the petrous bones (CP B is the main baffle to un fold the space bellow the tentorium cerebelli. T o drill the CP B behind the superior thyroid tubercle of internal auditory artery can un fold the operative field of the upslope and middles 2lope. C onclusion 　 The effect to un fold the field of operation within the presigm oid approach is correlative with the stan 2dard exposure of bony semicircular canal and the drilling extent of the CP B. The air cells of superior semicircular canal and the middle ear can be the landmark to expose superior semicircular canal as well as the in fralabyrintheine air cell to the posterior semicircular canal. T o drill the CP B su fficiently is the key to un fold the field of upslope and middleslope well.
K ey w ords :Presigm oid Approach ; Semicircular canal ; Standard exposure
　　 经岩乙状窦前入路与传统岩斜区手术入路相比 具有手术距离短 , 可多角度广泛显露术野等优点 , 尤 其是对中上斜坡伴跨幕上下肿瘤的 Ⅰ 期手术治疗具 有明显的优势 , 已在国内较广泛的开展 。在手术过 程中 , 保留耳蜗及听神经功能的同时对岩锥的充分 磨除是手术显露的关键 。 而半规管的显露识别与保 护也成为岩骨磨除中的重点对和难点 。 我们在对标 本的模拟手术中 , 通过对半规管周围各解剖标识的 确认及 PS 点与它们之间距离的测量 , 为从后磨除岩 锥提供新的方法及相关数据参考 。 1　 材料与方法
取福尔马林固定头颅标本 10具 , 乳胶灌注动静 脉血管 ,May field 头架固定 , 颞部平行于地面 。皮肤 切口始于外耳道前颧弓水平 , 沿颞浅动静脉的上支 作者简介 :王越 (1976- , 男 , 汉族 , 主治医师 , 硕士
研究生 。
与 EG FR 表达阳性的患者预后差 , 根据其检测结果 可判断卵巢癌患者的预后 , 并指导临床化疗期限的 选择 , 对化疗的个体化提供了理论依据 , 对 PC NA 及 EG FR 阳性的患者 , 应增加化疗疗程及提高化疗力 度 , 以增强治疗效果 。 参考文献 :
〔 1〕 Britow R E ,M ontz F J ,Lagasee L D , et al . Suriral im pact of surgical cytoreduction in stage Ⅳ epithe 2lial orarian cancer 〔 J 〕 . G ynecol Oncol 1999, 72:278~287.
〔 2〕 Curtin J P ,Malik R ,Venkaramen E S , et al . Stage Ⅳ ovarian cancer :impact of surgical debulking 〔 J 〕 . G ynecol Oncol ,1997,64:9~12.
〔 3〕 Friedlander M L. Prognostic factors in ovarian cancer 〔 J 〕 . Semin Oncol ,1998,25:305~315.
〔 4〕 刘德顺 , 彭芝兰 1DNA 含量定量分析在肿瘤 病理学研究中的应用 〔 J 〕 1现代妇产科进展 ,1997,6:119~1221
〔 5〕 臧荣余 1晚期上皮性卵巢癌治疗的临床和 实验研究 〔 J 〕 1上海医科大学学报 ,1999,1~191
(编辑 :金 　 阳
(收稿日期 :2004-06-25
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慢性排斥反应移植体动脉硬化与增殖细胞核抗原表达

    【摘要】目的　探讨慢性排斥反应移植动脉硬化与增殖细胞核抗原(PCNA)表达的关系。方法　采用免疫组化SP法研究61只大鼠的移植动脉，10例慢性排斥反应移植肾动脉组织中的PCNA表达。结果　实验组：在大鼠移植动脉中层PCNA术后7天达最高峰，内膜层术后20天达最高峰，且细胞数明显增多，两者呈正相关。临床组：移植肾动脉PCNA表达主要集中在内膜，其次为中层，外膜极少。结论　移植动脉硬化过程中细胞增殖与PCNA表达关系密切。慢性排斥的移植肾动脉PCNA呈高表达。且与术后早期急性排斥反应的发生频率及程度密切相关。
　　【关键词】移植物排斥　动脉硬化　动物，实验
Expression of PCNA in the transplant arteriosclerosis of chronic rejection
LI Qiansheng,QIAO Zhuoyi,FANG Yuhuan,et al.
(Renal Transplantation Center,Daping Hospital,the Third Military Medical University,Chongqing 400042,China)
　　【Abstract】Objective　To investigated the relationship between the expression of PCNA and transplant arteriosclerosis of chronic rejection.Methods　The expression of PCNA in the allograft arteriosclerosis of 61 rats and the transplant renal artery in 10 patients of chronic rejection were studied with immunohistochemistry SP method.Results　In the experiment group,the expression of PCNA in the media of transplant aorta showed a peak at 7 days postoperative,the intimal PCNA showed a peak at 20 days and the cell numbers increased.The expression of PCNA and the cell numbers showed a positive correlation.In the clinical group,the expression of PCNA was mainly found in the intimal membrane of transplant renal artery,the next was in the media,where as the exomembrane showed a few.Conclusions　There was a close relationship between the increase of expression of PCNA and the cell proliferation.The expression of PCNA in the transplant artery of chronic rejection increased.It had significant relationship with the frequency or the degree of acute rejection.
　　【Key words】Graft rejection　Arteriosclerosis　Animals,laboratery
　　移植体动脉硬化是慢性排斥反应的主要病理学特征之一。目前，在移植动脉硬化过程中细胞增殖进程与原癌基因的表达尚缺乏了解。为明确血管细胞增殖DNA复制与增殖细胞核抗原(PCNA)表达的相互关系，我们在建立标准慢性排斥反应动物模型基础上，对移植体动脉硬化与PCNA表达作了实验与临床观察。
动物实验

时相点(术后，天)
内膜
中层
　3
0
51±15
　7
0
63±46
14
25±　9
27±22
20
73±24
12±10
30
36±21
　7±　5
60
　9±　7
0

　　与同组前一时相点比较，差别有显著性意义，P＜0.05
临床研究
　　一、研究对象
　　收集10例同种肾移植术后1～9年移植肾失功病理诊断为慢性排斥反应并行肾切除的移植肾标本。男8例，女2例。年龄23～55岁。肾移植术后3个月内发生急性排斥反应1次3例，2次4例，3次1例，不详2例。5例正常肾组织为对照组。
　　二、材料与方法
　　与实验组相同，即取移植肾动脉1～2级分支，采用SP法行PCNA免疫组化检测。
　　三、结果
　　1.PCNA表达形式：在光镜下显示移植肾动脉硬化血管中PCNA阳性细胞染色呈棕黄色颗粒，呈弥散状或混合状分布，不规律地表达于胞浆、胞核及胞膜，胞浆内以混合型多见，核内分布以弥散状颗粒为主。血管壁各层均可见大量炎性细胞，其中以内膜占相当大的比例，包括单核、巨噬细胞及T细胞。对照组未见PCNA阳性细胞。
　　2.PCNA表达部位及其阳性率：血管壁内膜、中层及外膜PCNA阳性表达率分别为90%、50%及10%。表明排斥反应时血管PCNA表达主要集中在内膜，其次为中层，外膜极少，差别有显著性意义，P＜0.05。
　　3.PCNA表达强度与急性排斥发生频率关系：肾移植术后发生急性排斥1次3例，血管内皮细胞PCNA阳性表达率为31%，2次4例，阳性细胞表达率63%，3次1例，阳性细胞表达率80%。即急性排斥发生频率越高，PCNA阳性细胞表达率越明显，P＜0.05。
讨　　论
　　一、PCNA来源、表达形式及部位
　　PCNA作为评价细胞增殖状态的一个重要指标，近年来已广泛开展。本实验在异系移植动脉硬化研究中发现，PCNA在血管的内、中、外层均有不同程度的表达，且主要集中在内膜及中层，染色呈棕黄色颗粒，弥散状或混合状分布，不规律地表达于胞浆、胞核及胞膜。胞浆内以混合型颗粒为主，核内以弥散状颗粒为主。外膜有大量炎性细胞浸润，PCNA有不均匀少量的表达。因外膜中不存在平滑肌细胞增生，故推测PCNA来源于内皮细胞、单核及巨噬细胞［1］。
　　二、PCNA表达与动脉硬化的关系
　　本实验发现移植后14天，内膜出现增生层，内膜细胞PCNA阳性表达率为25%±9%，术后20天达最高峰为73%±24%，且伴随平滑肌细胞由中层向内膜迁移以及迁移后细胞增生。此后PCNA表达阳性率逐渐下降。而在血管中层术后7天PCNA阳性率达最高峰63%±24%。以后逐渐下降，反映出术后2周出现的“中层坏死”现象。由此推测，中层PCNA阳性表达多为平滑肌细胞。有人认为，移植动脉中层坏死与内膜增生其主要因素与中层平滑肌细胞向内膜迁移有关［2］。某些细胞因子如IGF-1，PDGF及TGF-b，或白介素及炎症脂质介质等可促进平滑肌细胞的迁移［3］。
　　本组10例移植肾慢性排斥的动脉硬化标本中可见血管各层均有炎性细胞浸润。如单核、巨噬细胞及T细胞，尤以内膜更为显著。PCNA表达也主要集中在内膜，其次为中层。虽然由于人类肾移植术后免疫抑制剂的应用，中层坏死炎性细胞浸润程度、PCNA表达程度均较动物实验低，但炎性细胞的浸润与内膜PCNA表达及细胞增生导致动脉硬化的关系密切。
　　三、PCNA高表达与急性排斥之间的关系
　　肾移植术后急性排斥发生频率及强度是导致慢性排斥的主要危险因素［4］。在移植动脉硬化的过程中，当给予免疫抑制剂抑制急性排斥的发生，内膜增生可明显受到抑制。Almond等［5］报告术后早期使用MMF，内膜增生较对照组低76.3%。本组急性排斥8例移植肾动脉标本中发现，急性排斥发生的频率越高，内膜增生越显著。增生形式有半月状或同心圆状，严重者管腔完全闭塞。因此，我们认为，肾移植术后急性排斥是导致移植肾动脉硬化的重要因素。一旦发生，其改变不可逆转。
　　四、PCNA表达的启动因素与增生的关系
　　1.炎性细胞的浸润：炎性细胞通过不相容MHC抗原识别，释放淋巴因子(IL-1等)，通过其免疫介导，使其产生PCGF，TGF-β等生长因子，PCNA表达增强，DNA大量复制合成，出现细胞增生［6］。
　　2.缺血与再灌注损伤：一般认为，在冷缺血时间较短的情况下，缺血/再灌注损伤对移植动脉硬化影响不大。相反，供体长时间缺血，或再灌注性损伤，均可导致氧自由基的活化降低。脂蛋白氧化［7］，刺激细胞及生长因子，促使内膜增生及动脉硬化。
　　3.感染：术后早期感染，血管外膜炎性细胞浸润，可使内膜增生程度加倍。而术后晚期的CMV感染可通过增强PDGF-BB及TGF-β mRNA的表达，导致内膜增生［8］。
　　我们认为，移植体动脉硬化过程中细胞增殖是多因素作用的结果，而PCNA的表达乃是细胞增殖的主要分子病理学基础。因肾移植术后使用免疫抑制剂，使PCNA的表达强度较实验动物弱。
作者单位：李黔生(第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科洗肾移植中心　重庆，400042)
乔着意(第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科洗肾移植中心　重庆，400042)
方玉华(第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科洗肾移植中心　重庆，400042)
徐序广(第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科洗肾移植中心　重庆，400042)
靳风烁(第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科洗肾移植中心　重庆，400042)
朱方强(第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科洗肾移植中心　重庆，400042)
万江华(第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科洗肾移植中心　重庆，400042)
姜庆(第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科洗肾移植中心　重庆，400042)
吴刚(第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科洗肾移植中心　重庆，400042)
靳文生(第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科洗肾移植中心　重庆，400042)
参考文献
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