1、探究实验设计之测定空气中氧气的含量(全面版)资料 探究实验设计之测定空气中氧气的含量 1.化学反应原理 如图5-1所示,利用磷燃烧消耗空气中的氧气,从而使容器内形成负压,打开止水夹后,水进入容器内。进入容器中的水的体积,可粗略地认为是空气中所含氧气的体积。 图5-1 2.实验仪器:集气瓶、燃烧匙、烧杯、玻璃管、乳胶管、止水夹。 实验药品:红磷、水。 3.探究方案: ⑴ 在集气瓶中放入少是水(用于溶解生成的五氧化二磷,同时可吸收燃烧产生的热,有利于瓶内降温),做上记号,并将瓶内剩余体积均分为五等分。 ⑶ 用止水夹夹紧乳胶管,点燃燃烧匙内的红磷后,立即伸入集气瓶中并把
2、塞子塞紧。观察到红磷燃烧,产生浓厚的白烟。 ⑶红磷熄灭后,冷却至室温,打开止不夹,观察到水进入集气瓶内,最终水面在五分之一记号处。 4.探究评价: 该探究实验在反应原理上就存在错误。我们都知道,反应物浓度越小,反应的速率越慢。当燃烧持续进行时,氧气的浓度越来越小,氧化的速率也越来越小。一旦燃烧放出的热量不足以维持可燃物在着火点以上温度时,燃烧便停止了。这也是有些物质不能在空气中燃烧,但能在氧气中燃烧的原因。因此,从这个意义上说,利用燃烧试图除尽空气中的氧气,是很难达到目的的。维持红磷燃烧需要的氧气浓度相对较高,因此就更无法除尽氧气了。很多教师在做该实验时,都发现,最终水面停在十分之一处,
3、而不是五分之一处,原因就在于此。 该实验装置可能发生气体泄漏的地方太多,加之燃烧的红磷伸入集气瓶中加热了内部的空气,使之外逸,都会导致实验的误差。 要做好该实验,关键要注意以下几点: ⑴ 用更易燃烧的可燃物代替红磷(如白磷); ⑶ 装置的气密性要好; ⑶ 燃烧匙伸入集气瓶中的速度要快,并塞紧塞子。 5. 资源开发: 通过刚才的分析,我们知道,在做好本探究实验除用白磷代替红磷外,就是尽可能防止或减少气体泄漏的可能。我们可以利用以下装置来进行探究: ⑴ 用凸透镜将太阳光聚焦到白磷,使白磷燃烧。此法可以防止燃烧匙伸入集气瓶时气体的散逸。如图5-2。 ⑵ 用水浴加热的办法使白磷燃烧,
4、也可以防止燃烧匙伸入集气瓶内气体的散逸。白磷的着火点仅40℃,水温稍高,足以使白磷着火燃烧。如图5-3。做此实验时,盛白磷的广口瓶不能直接放入沸水中,也以免广口瓶因骤热而爆裂。可先用温水淋浴后,再将热水注入外面的大烧杯中。 ⑶用钟罩代替集气瓶进行实验,如图5-4所示。钟罩下方敞口,气体受热膨胀时,可将水压出一部分从产生减压作用。用此法既减少了气体泄漏的可能,准确性比原实验方案高。 ⑷ 在一端封闭的粗玻璃管内放一颗白磷,用胶塞塞住,并使从推入到玻璃管中部,记下位置。用酒精灯微微加热白磷,使之燃烧,同样可观察到白磷燃烧,有大量白烟生成,胶塞被推向外侧(右侧)。待装置冷却,胶塞逐渐向内侧(左
5、侧)移动,根据胶塞停止时的位置,确定空气中氧气的体积。如图5-5。 这种方法在不透气的情况下进行,几乎可以完全防止漏气。但要注意的是,胶塞在干燥条件下很难塞入玻璃管内,可蘸少量水后向管内推入;推入时,还须在胶塞上插一根注射器针头,以便排出气体,待胶塞推到合适位置时,拔出针头即可。 做该实验时,玻璃管不宜太短,太短,加热时胶塞会被推出管外。 6.创新思维: ⑴ 利用缓慢氧气测定氧气的体积分数 如图5-6所示,取长10cm,宽1.5cm的铝箔,用细线系好。在其表面涂一层硝酸汞的药液,立即用滤纸将铝箔擦干,迅速放入粗玻璃管中,悬于玻璃管上部,立即插入盛水的小烧杯中,塞上塞子,静置观察。
6、① 铝跟空气中的氧气反应放出的热,使玻璃管壁变得温热; ② 玻璃管内水位慢慢上升,10min左右,水位上升停止。进入的水的体积约为玻璃管未浸入水中部分容积的1/5。 进行该实验时,应当注意: 硝酸汞溶液的浓度要大。铝箔表面涂硝酸汞溶液后要立即用滤纸擦干后再放入试管中,否则,铝跟硝酸汞反应置换出来的汞,在形成铝汞齐的条件下,铝会跟水反应产生氢气,使测定出的氧气体积分数偏低。 ⑶ 利用蜡烛燃烧测定氧气的体积分数 蜡烛燃烧产生二氧化碳气体,常温下二氧化碳仅微溶于水,且溶解速度比较慢,因此一般不用蜡烛燃烧测定氧气的体积分数。但若能吸收二氧化碳,此法也不失为一种简便的方法。而且蜡烛易燃烧,取材
7、方便,可鼓励学生在家自己动手实验。 如图5-7所示,在水槽中盛适量的稀氢氧化钠溶液,并滴入2~3滴酚酞试液,在小木片上固定一只短蜡烛(普通蜡烛1cm,生日蜡烛2~3cm),用火柴点燃蜡烛。 把集气瓶倒扣在小木块上方,并将瓶口水封。几秒钟后,蜡烛火焰熄灭,水位上升。且进入瓶中的液体变红色。 在水下用玻片盖上集气瓶,取出,量得集气瓶中水的体积,约为集气瓶容积的1/5。 若学生在家做此实验,可用茶杯代替集气瓶,用石灰水代替稀氢氧化钠溶液(若无石灰水,用清水效果也很好)。 该实验简便、粗略,可多次重复,容易被学生接受。缺点是,在盖上集气瓶开始时,由于气体膨胀,有气泡从瓶口冒出,导致实验测得的
8、值偏大。 ⑶用加热氧化法测空气成分 把长约2cm的一束细铜丝装进一根长约5~6cm的普通玻璃管中部,两端用两节橡皮管分别跟两只注射器(其中一只注射器留出50mL空气,另一只注射器不留空气)连接起来,使之成为一个密闭系统(如图5-8)。推动注射器活塞,空气可以通过装铜丝的玻璃管在两只注射器间来回传送,不会泄漏。 给装有细铜丝的玻璃管加热,待铜丝的温度升高以后,缓缓地交替推动两只注射器的活塞,使空气在铜丝上来回流动。经过5~6次以后,空气里的氧气可以全部与铜结合。 停止加热,冷至室温,读出残留的注射器里气体的体积数。减少的体积即为50mL空气中所含氧气的体积。由此可以推算出空气中氧气的
9、体积分数。 做该实验时,要注意注射器不宜太小,太小体积变化不大,现象不明显。 工作简报 流动注射 分光光度法测定食盐中碘含量 黄 进1,张新申2*,肖 凯2,魏 良2 (1.成都大学城乡建设学院,成都610106; 2.四川大学轻纺与食品学院,成都610065 摘 要:基于在酸性介质中,碘酸根与对苯二胺发生显色反应,提出了流动注射 分光光度法测定碘酸盐态碘含量的方法。对流动注射体系中盐酸溶液的浓度及二苯胺溶液浓度等反应条件进行了试验及优化。在室温下,当盐酸浓度为0.5mo l L-1、对苯二胺浓度为10g L-1时,该方法的线性范围为0.05~10.0mg L-1
10、检出限(3S/N为0.0063m g L-1,用于2种食盐中碘含量的测定,回收率在99.8%~101.6%之间,相对标准偏差(n=11为1.07%(1.0mg L-1碘酸根。 关键词:流动注射 光度法;碘;对苯二胺;碘酸盐 中图分类号:O657.3 文献标志码:A 文章编号:1001 4020(202107 0836 02 FI Photometric Determination of Iodate in Table Salt HUANG Jin1,2,ZHANG Xin shen1*,XIAO Kai1,WEI Liang1 (1.College of Rur al and Ur
11、 ban Cons tr uction,Chengdu Univ er sity,Chengd u610106,China; 2.College of L ight I ndus try and T ex tile and Food Engineer ing,Sichuan Univer sity,Cheng du610065,China Abstract:Based on t he co lo r r eaction of iodate w ith p phenylenediamine in dil.H Cl medium,a FI photo metric method fo r de
12、ter minatio n of iodate in table salt was pr oposed.Conditio ns of colo r reactio n in the FI sy stem,i.e.,the concent ratio ns of HCl solut ion and the p phenylene diamine solution,wer e studied and o ptimized. Linear ity range o f the metho d was found to be0.05-10.0mg L-1,at r oom temperature,w
13、hen the concent ratio n of H Cl solution and the p pheny lene diam ine solutio n w er e0.5mo l L-1and10g L-1,r espectiv ely.Detectio n limit(3S/Nfound w as0.0063mg L-1.P recisio n of the method w as tested at IO-3co ncentration of1.0mg L-1for11determinat ions,giving v alue of RSD of1.07%.Based on2sa
14、mples o f table salt wit h know n content s o f iodate,r eco ver y w as tested by standard addit ion method,values o f recover y fo und w ere r ang ed fr om99.8%to 101.6%. Keywords:F lo w inject ion pho tometr y;Iodate;p Pheny lenediam ine;T able salt 微量元素碘的缺乏及其引起的碘缺乏病是一个涉及各国、影响全人类健康的全球公共健康卫生问题。我国
15、是人群缺碘严重的 之一,食用富含碘食品及碘盐能有效地对人体补充碘。人体碘摄入的缺乏或过高都会引起多种疾病,对环境、食品中碘的分析方法的研究一直是人们十分关注的问题。食盐加碘有加碘酸钾和碘化钾两种形式,由于碘酸钾比较稳定,在加工、贮存和使用过程中不易丢失,所以 收稿日期:2021 04 12 项目: 863资助项目(NO:2006AA09Z173 作者简介:黄进(1970-,女,四川宜宾人,博士研究生,副教 授,主要从事环境治理和环境监测方向的研究。 * 我国采用碘酸钾加碘。目前,碘的测定方法有萃取比色法[1]、滴定法[2]、催化光度法[3]、紫外光度法[4]、示波伏安
16、法[5]、高效液相色谱法[6]、气相色谱法[7]等,上述方法有的为手工操作不适合大批量样品的测定,有的需要较贵重的仪器设备且对操作人员有较高要求。本研究是基于碘酸根与对苯二胺发生显色反应,提出流动注射 分光光度法测定食盐中的碘含量。本方法准确度和精密度良好、操作简单、分析速度快,适于大批量样品的测定。 1 试验部分 1.1 仪器与试剂 S54紫外 可见分光光度计,722S型分光光度 836 黄进等:流动注射 分光光度法测定食盐中碘含量 计,ZJ 1a 自动分析仪,N 2000双通道色谱工作站信号处理及计算机系统。 碘酸根标准储备溶液:称取碘酸钾0.1223g 于小烧杯中,溶解后转
17、入100mL 容量瓶中,用去离子水稀释,摇匀,质量浓度为1.0000g L -1。 对苯二胺溶液:称取对苯二胺1.0g 于小烧杯中,加入约5mL 无水乙醇溶解,转入50mL 容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,质量浓度为20g L -1。避光保存,临用时现配。 所用试剂均为分析纯,试验用水为去离子水。1.2 试验方法 按图1所示连接试验流路。将管路入口端分别置于相应的试剂瓶中,依次开启分光光度计、蠕动泵、六通进样阀及记录仪电源。用蠕动泵P 1将标准溶液或试样注入进样环中,转动六通进样阀,载流(去离子水经过进样环将试样带入流路。同时蠕动泵P 2将0.5m ol L -1盐酸与10g L -1对
18、苯二胺混合溶液吸入流路。反应液经过反应圈充分反应显色后流入流通池进行比色,在400nm 波长处测定试样吸光度, 以相对峰高进行碘酸根的定量。 S 待测样品 C 推动液 R 反应剂(盐酸+对苯二胺 P 1、P 2 蠕动泵 V 进样阀 L 反应圈 D 检测器 W 废液 图1 流动注射光度法检测碘酸根的流程示意图Fig.1 Schematic diag ram of the FIA system for photometric determin ation of iodate 采样时间和分析时间均为2min,反应圈长度为3.0m (内径0.5m m,进样环体积为600 L 。控制
19、盐酸和对苯二胺混合液的流量为0.2m L min -1,试样和载流流量为0.5mL m in -1。 2 结果与讨论 2.1 检测波长的选择 移取10.0m g L -1碘酸根标准溶液10.0mL 于25mL 具塞比色管中,加入20g L -1 对苯二胺 溶液1.5mL,加入2.0m ol L -1 盐酸溶液2.0mL, 摇匀后放置10min,同时制备试剂空白。在S 54紫外可见分光光度仪上,于350~760nm 波长范围内进行扫描,确定反应产物的最大吸收波长400nm 为体系的检测波长。 试验结果表明:碘酸根与对苯二胺的显色反应需在酸性介质中进行,当显色液中盐酸浓度低于
20、0.3m ol L -1时体系峰高迅速减小,盐酸浓度在0.3~0.5mo l L -1时体系峰高逐步升高,当盐酸浓度高于0.5mo l L -1 时体系峰高又逐步降低。试验选择0.5mol L -1盐酸溶液作为体系最佳的反应液酸度。 试验考察了显色液中对苯二胺质量浓度在1~14g L -1范围内对体系峰高的影响。结果表明:随着对苯二胺质量浓度的增大,体系峰高也增大;当对苯二胺质量浓度超过10g L -1 时,体系峰高随对苯二胺浓度的增加变化不大,但基线噪声增加。试验选择对苯二胺溶液的质量浓度为10g L -1。2.3 最佳流路条件的选择 选择不同的进样体积300,500,6
21、00,700,900 L 进行试验,试验结果表明:进样体积为 600 L 时,体系峰高达到最大值。试验选择进样体积为600 L 。 按试验方法对载气流量、试样流量、显色液流量进行了试验。试验结果表明:当载气流量、试样流量均为0.5mL min -1时,盐酸和对苯二胺混合显色液流量为0.2mL m in -1 时,体系峰高达到最大值。试验选择载气流量、试样流量和显色液流量分别为0.5,0.5,0.2m L min -1。 2.4 干扰试验 按试验方法对质量浓度为1.0m g L -1碘酸根标准溶液进行了测定,当相对误差不大于 5%,下列共存离子不干扰测定:24000倍的Na +,3
22、7000 (下转第841页 837 赵吉寿等:近红外光谱法测定烤烟中氯量续表2 序号标准值 w/% 预测值 w/% 相对误差 /% 序号 标准值 w/% 预测值 w/% 相对误差 /% 满足烤烟样品中氯的分析要求。 参考文献: [1] 张槐苓,葛翠英,穆怀静,等.烟草分析与检验[M].郑 州:河南科学技术出版社,1994:221 224. [2] 乐俊明,陈鹰,丁映.近红外光谱分析法测定烟草化学 成分[J].贵州农业科学,2005,33(3:62 63. [3] 王家俊,罗丽萍,李辉,等.F T N IR光谱法同时测定烟 草根、茎、叶中的氮、
23、磷、氯和钾[J].烟草科技,2004, 12:24 27. [4] 张建平,谢雯燕,束茹欣,等.烟草化学成分的近红外快 速定量分析研究[J].烟草科技,1999,3:37 38. [5] 李艳坤,邵学广,蔡文生.基于多模型共识的偏最小二 乘法用于近红外光谱定量分析[J].高等学校化学学报,2007,28(2:246 249. [6] 陆婉珍,袁洪福,徐广通,等.现代近红外光谱分析技术 [M].北京:中国石化出版社,2000:146 148. (上接第837页 倍的Cl-,4000倍的SO2-4,1000倍的Mg2+、Ca2+,80倍的I-。 2.5 标准曲线、检出限和相对标
24、准偏差 按试验方法对碘酸根系列标准溶液进行测定,碘酸根的质量浓度在0.05~10.0m g L-1范围内与体系峰高呈线性关系,线性回归方程为:y= 55.14 -0.9936,相关系数为0.9998。方法的检出限(3S/N为0.0063m g L-1。对质量浓度为1.0mg L-1碘酸根标准溶液连续测定11次,相对标准偏差为1.07%。 2.6 样品分析 称取食用加碘盐样品3.0000g,溶解、过滤、分别定容至100mL。按试验方法对食盐样品中碘酸根进行了测定,同时进行了加标回收试验,结果见表1。 表1 食盐中碘酸根的测定结果(n=5 Tab.1 Determination of i
25、odate in table salt 样号 IO-3测定值 /(mg L-1 标准加入量 /(m g L-1 测得总量 /(mg L-1 回收率 /% 将测定结果换算成食盐中碘的含量,平均值为20.51mg kg-1。 参考文献: [1] 杜建中,李倩,罗牡燕,等.高聚物萃取光度法测定海带 中碘含量的研究[J].食品科学,2007,28(2:281 283. [2] 范金山.测定碘酸钾盐中碘的滴定方法比较[J].中国 卫生检验杂志,1997,7(3:180 181. [3] 李素梅,刘列钧,李秀维,等.碱灰化砷铈催化分光光度 法测定食品中碘含量[J].中
26、国地方病防治杂志, 2005,20(5:266 268. [4] 黄俊盛,任乃林,张若茹.紫外分光光度法测定碘酸钾 盐中碘的方法研究[J].广州食品工业科技,2004,20 (3:125 126. [5] 倪宏刚,郑建斌.示波伏安法测定碘酸钾碘盐中碘[J]. 理化检验 化学分册,2006,42(7:569 571. [6] 任凯,刘剑平,左社清,等.高效液相色谱法测定食盐中 碘含量[J].白求恩医科大学学报,2001,27(2:151 152. [7] 黄会秋.气相色谱法测定加碘食盐中碘[J].食品科学, 2002,23(1:122 123. 841 第24卷 第
27、1期 2021年3月 西 南 科 技 大 学 学 报 Journal of South west University of Science and Technol ogy Vol .24No .1 M ar .2021 收稿日期:2021-11-17 项目: “十一五”科技支撑计划重大专项课题(NO.2007BAD89B15。 作者简介:侯大斌(1965-,男,博士,教授,主要从事植物分子生物学及药用植物学研究。E -mail:dbhou@126 。 附子不同组织中生物碱含量的测定 侯大斌 赵祥升 王 惠 许 源
28、 (西南科技大学生命科学与工程学院 四川绵阳 621010 关键词:附子 新乌头碱 次乌头碱 乌头碱 高效液相色谱法 中图分类号:R282;S567 文献标识码:A 文章编号:1671-8755(202101-0098-04 D eterm i n a ti on of A lka lo i ds i n D i fferen t T issue of A con itum ca rm ichaeli HOU Da 2bin,ZHAO Xiang 2sheng,WANG Hui,XU Yuan (School of L ife Science and Eng ineeri
29、ng,Sou thw est U niversity of Science and Technology, M ianyang 621010,S ichuan,China Abstract:T o deter m ine the t otal alkal oids and three kinds of diester diter penoid alkal oids in different tis 2sue of A conitum car m ichaeli and its na mely mesaconitine,aconitine and hypaconitine,acid dye
30、 col ori m e 2try and RP 2HP LC was used .The compounds was analyzed on Zorbax extend 2C 18colu mn (150mm ×4.6mm ,5.0μm and by gradient eluti on p r ogra m perf or med with acet onitrile and 0.1%ethylenedia m ine as a mobile phase .The fl ow rate was 1.0m l/m in .The detecti on was done at 240nm and
31、 colu mn te mperature was 30℃.The alkal oids contents of monkshood 2tubers,ste m ,leaves,fibr ous tubers and mother tubers were 5.53,3.81,14.77,8.87and 4.58mg /g res pectively .The contents of three kinds of diester diter pe 2noid alkal oids in different tissue of A conitum car m ichaeli were in the
32、 sequence of:fibr ous tubers >monkshood 2tubers >mother tubers >leaves >ste m.A ll tissues of A conitum ca r m ichaeli contained alka 2l oids .This study can p r ovide a scientific basis f or the res ources utilizati on of A conitum ca r m ichaeli . Key words:Hypaconitine ;A conitum car m ichaeli ;
33、M esaconitine ;HP LC 附子是我国常用的中药和四川道地药材,其性大热,味辛、甘,有毒,入心、脾、肾,通行十二经,具有回阳 救逆、温里助阳、祛寒止痛的功效[1],近年来现代药理学研究证明,附子提取液还具有抗癌、抗衰老和增强免 疫机能等作用[2]。根据人们对附子中次生代谢产物研究表明其主要有附子脂酸、附子磷脂酸钙、 β-谷甾醇、脂肪酸酯、生物碱等成分,主要活性成分为生物碱,其中大多是二萜型生物碱,包括C 18,C 19和C 20三大类。其中C 19类型属去甲基二萜生物碱,大部分含有1~2个酯化的醇羟基,酯基多由醋酸、苯甲酸及其衍生 物或黎芦酸等构成,双酯型生物碱毒性很大
34、为附子中主要的毒性和活性成分[3-5]。附子中双酯型生物碱最 具代表性的为:乌头碱(aconitine 、新乌头碱(mesaconitine 与次乌头碱(hypaconitine [6]等。附子在我国 主要产地为四川江油和陕西汉中,其中四川江油为附子的道地产地[7]。根据人们长期的用药习惯,子根和 母根是药材的主要收获组织,而茎秆、叶片和须根通常都被遗弃。本文主要研究附子不同组织中乌头类总生物碱与新乌头碱、乌头碱、次乌头碱3种双酯型生物碱的含量,为附子栽培和资源综合利用提供科学依据。1 材料、方法与设备 1.1 材料 试验材料购于江油附子G AP 基地收获的新鲜附子全植株。附子各
35、组织用纯水清洗2次,装入牛皮纸袋放入烘箱,在105℃下烘30m in,再在60℃~70℃下烘干至恒重,粉碎过60目筛,4℃冰箱保存,备用。 1.2 仪器与设备 Varian 1200LC /MS 液相色谱—质谱联用仪(带紫外检测器,美国Varian 公司;旋转蒸发仪(Buchi 公司;电子分析天平(Sart orius 公司;优普超纯水制造系统(上海优普实业;超声波清洗器(昆山市超声仪器;T 6普析通用新世纪紫外分光光度计(北京普析;中草药粉碎机(天津泰斯特仪器;电热恒温鼓风干燥箱(上海福玛实验设备。 1.3 试剂 乙腈,乙二胺为色谱纯,水为超纯水,其余试剂均为分析纯;乌头碱(NO.1
36、10797-200404, 新乌头碱(NO.110799-200404,次乌头碱(NO.110798-200404对照品购于中国药品生物制品检定所。2 方法 2.1 乌头类总生物碱含量测定 3.0±0.1的HAC -Na AC 缓冲液20mL ,浸泡过夜,用干燥滤纸滤过,用HAC -Na AC 缓冲液定容到20mL,为供试溶液。 标,以吸光度X 为横坐标,绘制标准曲线。 2.2 新乌头碱、乌头碱、次乌头碱含量测定 定容到10mL 的容量瓶,取适量用0.45μm 微孔滤膜滤过,作为供试品溶液 美国Z orbax extend -C 18(150mm ×4.6mm
37、 ,5.0μm 色谱柱;流动相为乙腈—0.1%乙二胺;梯度洗脱,时间程序为0→15→30→35→60m in,乙腈体积分数相应为35%→50%→75%→35%→35%;流速为1mL /m in;柱温为30℃;检测波长240nm 。 3 结果与分析 3.1 乌头类总生物碱的测定 99 第1期 侯大斌,等:附子不同组织中生物碱含量的测定 的线性关系。 4.77mg/g;茎秆中含量最低为:3.81mg/g;子根和母根中乌头类总生物碱含量处于中等水平,含量分别为: 5.53mg/g,4.58mg/g;叶片中乌头类总生物碱显著高于其他组织,含量是子根和母
38、根的近三倍,比须根的含量高出6 6.5%。各组织中乌头类总生物碱含量顺序为:叶片>须根>子根>母根>茎秆。 3.2 新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的含量 表1 附子不同组织中乌头类总生物碱的含量(n =5 Table 1The con ten t of tot a l a lka lo i ds i n d i fferen t tissue of A con itum ca r m ichaeli (n =5项目平均含量/mg ・g -1 差异显著性5%1%叶片 14.77A A 须根8.87B B 子根5.53C C 母根4.58D D 见图1。表明新乌头碱、乌头碱、次乌
39、头碱能达到基线分离,3种生物碱的分离效果较好 醇稀释到刻度,配成不同浓度的溶液,振荡均匀,作为 对照品稀释液。在同一色谱条件下分别加入对照品稀释液20.0μL,确定标准物质的保留时间。然后各取一定体积储备液配成不同浓度的混合标准溶液,分别平行测定3次(均进样20.0μL ,以平均峰面积Y 为纵坐标,质量浓度X (μg/mL 为横坐标进行线性回归,各物质的回归方程、相关系数及线性范围见表2。表2 3种生物碱的回归方程、相关系数和线性范围 Table 2Regressi on equa ti on s,correl a ti on coeff i c i en ts and li
40、 n ear ranges of three k i n ds of a lka lo i ds 化合物回归方程相关系数线性范围 (n =5分别为:99.1%,99.4%,99.2%;RS D 分别为:1.64%,1.97%,1.75%。 001 西 南 科 技 大 学 学 报 第24卷 生物碱含量(2441.89μg/g 显著偏高,比子根和母根高3倍左右;须根中乌头碱和次乌头碱含量比其它组织显著高,而其新乌头碱含量与子根和母根相当;茎杆双酯型生物碱含量明显低于其它组织。叶片中新乌头碱 母根的含量相当,但次乌头碱含量比子根和母
41、根 的含量高约100 μg,但低于须根的含量。4 讨论 附子中3种双酯型生物碱含量的测定目前常 用的方法是高效液相测定法,在试验中我们比较 了3种生物碱样品制备中的提取方法:药典法、乙 醚超声法、乙醇加热回流法等(另文发表发现,乙醚超声提取法具有步骤较少、简单、条件容易控制、提取率高等优点,该制备方法适合用于此类生物碱高效液相的定量分析。 附子不同组织中的生物碱呈现了明显的差异性,叶片中的乌头类总生物碱含量最高,茎秆的含量最低,两组织在利用上应区别对待;母根和子根含量低于须根,处于中等水平。从新乌头碱,乌头碱,次乌头碱的含量来看,除须根外的组织中,新乌头碱是主要成分,这与陈嬿[1
42、1]研究的新乌头碱是附子生物碱中的主要成分相同。茎秆中3种生物碱含量均低于其它组织,可能茎秆中纤维组织含量比其它组织的纤维含量高,双酯型生物碱含量明显低于其它组织。叶片中的3种生物碱含量只有348.67μg/g,低于子根、母根和须根的含量,但是它的总生物碱的含量最高,说明其非双酯型生物碱的含量特别高,叶片中非双酯型生物碱含量和种类需要进一步实验的证实和研究。须根中次乌头碱含量显著高于子根,可能的原因是须根的木质部、韧皮部和周皮等组织所占比例较大,而子根因富含淀粉、糖类等物质而导致木质部、韧皮部和周皮等组织所占比例较小。这可从前人研究其他药用植物发现次生代谢产物主要分布在木质部、韧皮部和周皮等组
43、织[12-13]得到一定支持。但由于附子的组织化学、次生代谢产物的具体的合成途径还不清楚,因此生物碱在不同组织中的差异性还有待进一步研究,该结果也为附子组织化学的研究提供了基础。 附子收获的主要组织是子根和母根,但是茎叶和须根占生物量约44%左右,须根中3种生物碱和乌头类总生物碱的含量都比较高;叶片中3种双酯型生物碱的含量很低,但是总碱的含量很高,也有较高的研究价值和利用价值,应该是以后附子研究的对象。该研究为附子各组织的收获提供了科学依据,也为附子资源的充分利用奠定了基础。 参考文献 [1] 药典委员会.中华人民共和国药典(一部[M ].北京:化学工业出版社,2005.132~1
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