药物分析方法学验证中各项指标的深度剖析.ppt

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,2021/10/10,*,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,药物分析方法学验证中各项指标的深度剖析,2021/10/10,1,一、线性试验,主成分含量测定 以测定浓度为,100%,，,50%120%,之间选取,5,个点即可。溶出（释放）度测定 以释放量的,10%,120%,间选取,5,个点即可。杂质含量用杂质对照品准确测定 以杂质限度为,100%,，,50%120%,之间选取,5,个点即可。,2021/10/10,2,测定结果：,1,）阐述如何看待截距和斜率、如何应用。,2,）误差在哪里，应用时的注意事项。,3,）为什么没有不成线性的？通常,C,、,H,、,O,、,N,结构，紫外监测器决定。个别化学键所致。梯度洗脱时，有时会出现不成线性。,4,）都成线性、为何还要做？最小二乘法的原理知晓。,2021/10/10,3,唑 来 磷 酸 结 构 式,2021/10/10,4,引申使用：,1,）有关物质测定 归一化法和自身对照法的相互妙用。,2,）缓释制剂溶出度测定，对照品浓度设定为中间浓度。举例说明。,3,）回收率试验为何做,80%120%,即可？亦及样品浓度与对照品浓度接近到何等程度的理解。,4,）国内只注重相关系数，不注重截距。,2021/10/10,5,二、精密度试验,重复性试验：连续进样,6,次。中间精密度试验和重现性试验通过“耐用性试验中的溶液稳定性试验”来体现。浓度极低时才会不理想，加大进样量。色谱峰形极为重要，对称性、柱效等参数。加大柱温、增加流动相中有机相比例，使被测物质峰尽快出峰。,2021/10/10,6,三、准确度试验 用回收率来衡量,作法：在,80%120%,间选择,3,点或,5,点，原因是由外标一点法决定的。已知杂质、且有杂质对照品的，可采用加入法，即加样回收率来评价。一般情况下，只要空白辅料无干扰，回收率均是良好的！,2021/10/10,7,四、专属性,有关物质为主，其他检测项目（含量）基本上均参照有关物质。有关物质的验证，采用中间体和降解产物（确认结构后人工合成）来验证与主成分的分离。,2021/10/10,8,系统适用性试验的配制方法：在,100,浓度的主成分溶液中加入,1%,浓度的杂质对照品，以模拟样品中有可能存在的状态。介绍配制方法,先配制杂质贮备液，再用供试品溶液（或浓的对照品溶液）来稀释，简便、易行！2021/10/10,9,专属性试验验证图谱,2021/10/10,10,存在问题,配制相同浓度，测定样品时，主成分峰骤然加大，将杂质峰覆盖。强破坏试验的目的：验证药品在遭遇了极端的气候环境条件下产生的杂质，在所建立的色谱条件下是否能够分离、测定。,2021/10/10,11,检测波长的确定,涉及到各被检测物质在该波长下的响应因子是否相同，即所谓重量校正因子的问题。（,f=A,杂质,/A,被测成分）选取主成分与各杂质具有相同紫外吸收的波长（,f=1.0,）。选取各杂质紫外吸收大于主成分紫外吸收的波长（,f1.0,），这样可更加严格控制杂质的限度。如选取各杂质紫外吸收小于主成分紫外吸收的波长，应必须加入重量校正因子（,f99.5%,）考察方法精密度，平行试验,5,个样本的,RSD0.2%,；准确度：以测定原料精制品的回收率计算，应在,99.7%,100.3%,之间（,n,5,RSD0.1%,）；滴定终点确定的依据：包括滴定曲线的绘制，如用指示剂法确定终点，应用电位法校准终点颜色，提供指示剂颜色与电位变化情况的对比结果；,2021/10/10,29,耐用性：考察测定条件（供试液稳定性、样品提取次数、时间等）有微小变动时，测定结果不受影响的承受程度，如测试条件要求苛刻时则应在方法中注明。,HPLC,法的验证：精密度：,RSD2%,（,n,5,）；准确度：用于制剂时，要考察辅料的影响，将一定量药物加到按处方比例配制的辅料中（为标示量的,80%,120%,）制成高、中、低三个剂量，混合均匀后，每个剂量取三份样品，按拟定方法测定回收率，应在,98%,102%,之间（,n,9,RSD2%,）。,2021/10/10,30,线性范围：用已知含量的精制品配制一系列浓度的溶液（,n,5,7,），用浓度,C,对峰面积,A,或峰高,h,或被测物的响应值之比进行回归处理，线性方程的相关系数,r0.9990,，截距越小越好，并提供线性关系图；,专属性：辅料、有关物质或降解产物峰对主药峰应无干扰；,耐用性：考察测定条件（供试液稳定性、流动相组成和,pH,值、不同品牌或批号的同类色谱柱、柱温、流速、样品提取次数、时间等）有微小变动时，测定结果不受影响的承受程度，如测试条件要求苛刻时则应在方法中注明；,灵敏度：作为常量分析法，此项可不作主要要求。,2021/10/10,31,UV,法的验证：精密度：,RSD1%,（,n,5,）；准确度：方法同,HPLC,法，回收率应在,98%,102%,之间（,n,9,RSD2%,），同时要求辅料、有关物质或降解产物在测定波长处无吸收。,线性范围：用已知含量的精制品配制一系列浓度的溶液（,n,5,7,，吸收度,A,在,0.3,0.7,间），用浓度,C,对,A,进行回归处理，线性方程的相关系数,r,应,0.9990,，截距应趋于零，并提供线性关系图；,耐用性：考察测定条件（供试液稳定性、样品提取次数、时间、比色法中显色剂用量、反应温度、时间、,pH,值等）有微小变动时，测定结果不受影响的承受程度，如测试条件要求苛刻时则应在方法中注明。,2021/10/10,32,