基因检测技术临床应用价值和策略.ppt

基因检测技术的临床应用价值和策略基因检测技术的临床应用价值和策略2021/3/29 星期一1内容提要内容提要n药物基因组学发展历程药物基因组学发展历程n临床基因检测的关注点临床基因检测的关注点n基因检测的临床应用价值基因检测的临床应用价值n我们开展的一些工作我们开展的一些工作2021/3/29 星期一2内容提要内容提要n药物基因组学发展历程药物基因组学发展历程 n临床基因检测的关注点临床基因检测的关注点n基因检测的临床应用价值基因检测的临床应用价值n我们开展的一些工作我们开展的一些工作2021/3/29 星期一3药物基因组学的发展历程药物基因组学的发展历程 1918 Marshall报道人类对外源性化学品的反应具有多样性报道人类对外源性化学品的反应具有多样性 1932 Snyder发现化学品反应的多样性与民族或种族之间存在有相关性发现化学品反应的多样性与民族或种族之间存在有相关性1956 Carson报道了葡萄糖报道了葡萄糖6磷酸脱氢酶缺陷症磷酸脱氢酶缺陷症1957 Kalow and Genest报道了血浆胆碱酯酶缺陷症报道了血浆胆碱酯酶缺陷症1959 Vogel F提出了遗传药理学的概念：提出了遗传药理学的概念：基因在药物效应中的作用基因在药物效应中的作用1960 Evans发现异烟肼的乙酰化具有多样性发现异烟肼的乙酰化具有多样性1988 Gonzalez FJ报道了细胞色数氧化酶报道了细胞色数氧化酶P450 2D6基因的多态性基因的多态性1997 1997 药物基因组学概念的形成药物基因组学概念的形成 2001 Wilson建立了评估遗传结构差异与药物反应相互关系的工作平台建立了评估遗传结构差异与药物反应相互关系的工作平台2021/3/29 星期一4n n药药药药物物物物基基基基因因因因组组组组学学学学是是是是研研研研究究究究基基基基因因因因序序序序列列列列多多多多态态态态性性性性与与与与药药药药物物物物效效效效应应应应多多多多样样样样性性性性之之之之间间间间的的的的关关关关系系系系，即即即即研研研研究究究究基基基基因因因因本本本本身身身身及及及及其其其其突突突突变变变变体体体体与药物效应相互关系的一门科学与药物效应相互关系的一门科学与药物效应相互关系的一门科学与药物效应相互关系的一门科学n n目目目目标标标标：提提提提高高高高药药药药物物物物疗疗疗疗效效效效及及及及安安安安全全全全性性性性，研研研研究究究究影影影影响响响响药药药药物物物物吸吸吸吸收收收收、转转转转运运运运、代代代代谢谢谢谢、消消消消除除除除等等等等个个个个体体体体差差差差异异异异的的的的基基基基因因因因特特特特性性性性，以以以以及及及及基基基基因因因因变变变变异异异异所所所所致致致致的的的的不不不不同同同同患患患患者者者者对对对对药药药药物物物物的的的的不不不不同同同同反反反反应应应应，并由此开发新的药物和用药方法并由此开发新的药物和用药方法并由此开发新的药物和用药方法并由此开发新的药物和用药方法n n宗宗宗宗旨旨旨旨：实实实实现现现现个个个个体体体体化化化化用用用用药药药药,以以以以获获获获得得得得最最最最佳佳佳佳疗疗疗疗效效效效和和和和最最最最少少少少不不不不良反应良反应良反应良反应n药物基因组学研究药物基因组学研究 2021/3/29 星期一5n n基因组学技术的作用基因组学技术的作用基因组学技术的作用基因组学技术的作用 n n在新药研发中的作用在新药研发中的作用在新药研发中的作用在新药研发中的作用n n寻找新靶点，提高药物安全性寻找新靶点，提高药物安全性寻找新靶点，提高药物安全性寻找新靶点，提高药物安全性n n指导指导指导指导I I期临床研究，缩短药物上市所需时间，保证有效性和安期临床研究，缩短药物上市所需时间，保证有效性和安期临床研究，缩短药物上市所需时间，保证有效性和安期临床研究，缩短药物上市所需时间，保证有效性和安全性全性全性全性n n老药的重新评价老药的重新评价老药的重新评价老药的重新评价n n应用范围：药物临床前研究及各期临床试验研究应用范围：药物临床前研究及各期临床试验研究应用范围：药物临床前研究及各期临床试验研究应用范围：药物临床前研究及各期临床试验研究2021/3/29 星期一6疗效好疗效好疗效不好或无疗效疗效不好或无疗效毒副反应毒副反应药物反应的个体差异药物反应的个体差异相同药物治疗的一组人群相同药物治疗的一组人群药物不良反应药物不良反应开展药物基因组学研究的价值 2021/3/29 星期一7基因检测基因检测患患者者药药物物选对药，选对人，用对量选对药，选对人，用对量FDA,Clinical Pharmacogenomics:Premarketing Evaluation in Early Phase Clinical Studies (2011.2)2021/3/29 星期一8治疗药物监测发展趋势治疗药物监测发展趋势治疗药物监测发展趋势治疗药物监测发展趋势 HPLC-MS、红外光谱质谱、毛细管电泳 体内药物代谢产物分离分析 20世纪 50-60年代 20世纪 70-80年代 20世纪 90年代 21世纪 薄层分析、气相色谱（GC）临床毒物分析、体液分析 HPLC、GC-MS及免疫学测定如放射免疫等分析 血药浓度的监测广泛应用于临床，TDM深入发展 药物基因组学、代谢组学 多学科联合的基因分析 2021/3/29 星期一9 服务 项目 2009年 2010年 2011年 增 长 率服务人次百分率 服务人次百分率服务人次百分率基因检测14670.1115660.1140400.25175.39175.39外源性检测16570.0918810.144650.23169.46内源性检测8960.026220.0111690.0330.47 上海市公立医院基因检测平均服务人次（上海市公立医院基因检测平均服务人次（2009-2011年）年）范祝萍，白洁，周萍等范祝萍，白洁，周萍等.上海市医疗机构基因临床研究与应用现状分析上海市医疗机构基因临床研究与应用现状分析.中国医院管理中国医院管理，2013,33（1）：）：23-252021/3/29 星期一10内容提要内容提要n药物基因组学发展历程药物基因组学发展历程n临床基因检测的关注点临床基因检测的关注点n基因检测的临床应用价值基因检测的临床应用价值n我们开展的一些工作我们开展的一些工作2021/3/29 星期一11美国美国FDA确认的与相关基因有关需进行确认的与相关基因有关需进行TDM的药物分类的药物分类 2021/3/29 星期一12FDAFDAFDAFDA近几年批准的基因检测数量近几年批准的基因检测数量近几年批准的基因检测数量近几年批准的基因检测数量 FDAFDAFDAFDA面向制药企业发布两个文件（面向制药企业发布两个文件（面向制药企业发布两个文件（面向制药企业发布两个文件（2012 2012 2012 2012年初年初年初年初）药物基因组学数据提交指南（药物基因组学数据提交指南（PDSPDS）临床药物基因组学：早期临床研究的上市前评价草案临床药物基因组学：早期临床研究的上市前评价草案2021/3/29 星期一13 酶 药 物 CYP1A9 氟西汀氟西汀,酰胺咪嗪酰胺咪嗪,地尔硫卓地尔硫卓,异烟肼异烟肼,丙咪嗪丙咪嗪,异烟肼异烟肼,萘普生萘普生,去甲替林去甲替林,苯妥英苯妥英,利福平利福平,茶碱茶碱,异搏定异搏定,红霉素红霉素 CYP2C9 氟西汀氟西汀,布洛芬布洛芬,丙咪嗪丙咪嗪,异烟肼异烟肼,萘普生萘普生,苯妥英苯妥英,吡罗昔康吡罗昔康,利福平利福平,异搏定异搏定,华法林华法林 CYP2C18 氟西汀氟西汀,丙咪嗪丙咪嗪,吡罗昔康吡罗昔康,利福平利福平 CYP2C19 氟西汀氟西汀,丙咪嗪丙咪嗪,异烟肼异烟肼,去甲替林去甲替林,苯妥英苯妥英,利福平利福平,华法林华法林 CYP2D6 氟西汀氟西汀,地尔硫卓地尔硫卓,丙咪嗪丙咪嗪,美托洛尔美托洛尔,去甲替林去甲替林,茶碱茶碱 CYP2E1 氟西汀氟西汀,异烟肼异烟肼,茶碱茶碱,异搏定异搏定 CYP450酶系酶系2021/3/29 星期一14 器官 载体 肠道 MDR1*,BCRP*,MRP*,OCT2#肝 MDR1*,BCRP*,MRP2*,BSEP*,LST#,OCT#肾 MDR1*,BRCP*,MRP*,OCT#脑 MDR1*,BCRP*,OCT2#,OCT3#,OATP-A#*Mediates efflux from cell.#Mediates uptake into cell.相关转运体相关转运体 2021/3/29 星期一15n n硫嘌呤甲基转移酶（硫嘌呤甲基转移酶（硫嘌呤甲基转移酶（硫嘌呤甲基转移酶（TMPTTMPT）：巯嘌呤类药物）：巯嘌呤类药物）：巯嘌呤类药物）：巯嘌呤类药物n n葡萄糖醛酸转移酶葡萄糖醛酸转移酶葡萄糖醛酸转移酶葡萄糖醛酸转移酶1A11A1：伊立替康：伊立替康：伊立替康：伊立替康n nHER2/NEUHER2/NEU：曲多单抗：曲多单抗：曲多单抗：曲多单抗n n表皮生长因子（表皮生长因子（表皮生长因子（表皮生长因子（EGFREGFR）：吉非替尼）：吉非替尼）：吉非替尼）：吉非替尼n乙醛脱氢酶（乙醛脱氢酶（ALDH2）：硝酸甘油等）：硝酸甘油等 其他基因其他基因/蛋白类型蛋白类型 2021/3/29 星期一16n n小分子生物标志物小分子生物标志物小分子生物标志物小分子生物标志物 n n生生生生物物物物标标标标志志志志物物物物一一一一般般般般是是是是指指指指可可可可供供供供客客客客观观观观测测测测定定定定和和和和评评评评价价价价的的的的、生生生生理理理理病病病病理理理理或或或或治治治治疗疗疗疗过过过过程程程程中中中中的的的的某某某某些些些些特特特特征征征征性性性性的的的的生生生生化化化化指指指指标标标标，通通通通过过过过对对对对它它它它的的的的测测测测定定定定就就就就可可可可获获获获悉悉悉悉机机机机体在某个时间或某种特殊影响下的生理病理状态体在某个时间或某种特殊影响下的生理病理状态体在某个时间或某种特殊影响下的生理病理状态体在某个时间或某种特殊影响下的生理病理状态n nFDAFDA在在在在“药药药药物物物物基基基基因因因因组组组组学学学学数数数数据据据据呈呈呈呈报报报报指指指指南南南南”草草草草案案案案中中中中推推推推出出出出了了了了生生生生物物物物标标标标志志志志物物物物的的的的分分分分类类类类方方方方法法法法。草草草草案案案案指指指指出出出出“有有有有效效效效的的的的生生生生物物物物标标标标志志志志物物物物”是是是是一一一一种种种种得得得得到到到到人人人人们们们们广广广广泛泛泛泛认认认认可可可可的的的的、具具具具有有有有生生生生理理理理学学学学、毒毒毒毒理理理理学学学学、药药药药理理理理学学学学或或或或者者者者临临临临床床床床意意意意义义义义的的的的指标指标指标指标n n临床用药和诊断提供参考依据的小分子标志物临床用药和诊断提供参考依据的小分子标志物临床用药和诊断提供参考依据的小分子标志物临床用药和诊断提供参考依据的小分子标志物n n卡尼汀卡尼汀卡尼汀卡尼汀判断左卡尼汀是否用药的依据判断左卡尼汀是否用药的依据判断左卡尼汀是否用药的依据判断左卡尼汀是否用药的依据n n褪黑素褪黑素褪黑素褪黑素睡眠障碍药物治疗的参考睡眠障碍药物治疗的参考睡眠障碍药物治疗的参考睡眠障碍药物治疗的参考n n异前列腺素异前列腺素异前列腺素异前列腺素氧化应激药物治疗预后指标氧化应激药物治疗预后指标氧化应激药物治疗预后指标氧化应激药物治疗预后指标n n大麻素大麻素大麻素大麻素神经细胞调节因子应用监测指标神经细胞调节因子应用监测指标神经细胞调节因子应用监测指标神经细胞调节因子应用监测指标n n过敏原（过敏原（过敏原（过敏原（PRFPRF）判断药物过敏的细胞因子之一判断药物过敏的细胞因子之一判断药物过敏的细胞因子之一判断药物过敏的细胞因子之一2021/3/29 星期一17nTDM领域中的相关基因产品领域中的相关基因产品n nCYP2C19CYP2C19CYP2C19CYP2C19基因检测与波立维合理用药基因检测与波立维合理用药基因检测与波立维合理用药基因检测与波立维合理用药n n波立维主要代谢酶为波立维主要代谢酶为波立维主要代谢酶为波立维主要代谢酶为CYP2C19CYP2C19，形成活性代谢物发挥作用。，形成活性代谢物发挥作用。，形成活性代谢物发挥作用。，形成活性代谢物发挥作用。n nCYP2C19CYP2C19弱代谢弱代谢弱代谢弱代谢患者使用常规剂量波立维，抑制血小板功能患者使用常规剂量波立维，抑制血小板功能患者使用常规剂量波立维，抑制血小板功能患者使用常规剂量波立维，抑制血小板功能弱弱弱弱，接受接受接受接受PCIPCI手术时，手术时，手术时，手术时，心血管事件发生率较高心血管事件发生率较高心血管事件发生率较高心血管事件发生率较高。n nCYP2C19CYP2C19基因可检测基因可检测基因可检测基因可检测 国食药械（准）国食药械（准）国食药械（准）国食药械（准）2009 2009第号第号第号第号，检测结果作为医生，检测结果作为医生，检测结果作为医生，检测结果作为医生 调整用药策略的依据。调整用药策略的依据。调整用药策略的依据。调整用药策略的依据。2021/3/29 星期一18n n通过通过通过通过CYP2C19CYP2C19基因代谢的药物基因代谢的药物基因代谢的药物基因代谢的药物 质子泵抑制剂抗抑郁药 抗癫痫类其他奥美拉唑氟西汀丙咪嗪 安定环磷酰胺兰索拉唑西酞普兰吗氯贝胺 苯妥英黄体酮泮托拉唑S西酞普兰 阿米替林曲米帕明 依替唑仑苯巴比妥 丙戊酸利福平氯吡格雷氯米帕明氯巴占那非那韦氯胍伏立康唑2021/3/29 星期一19n nCYP2C19CYP2C19基因检测结果分析基因检测结果分析基因检测结果分析基因检测结果分析 n氯吡格雷氯吡格雷 慢代谢疗效差 剂量增加/更换其他药n丙戊酸丙戊酸 慢代谢者适用 较小-正常n奥美拉唑奥美拉唑 快代谢疗效差 剂量增加/更换其他药n伏立康唑伏立康唑 快代谢疗效差 剂量增加/更换其他药n乙醛脱氢酶（乙醛脱氢酶（ALDH2）基因试剂盒（）基因试剂盒（2010年年6月获月获SFDA批文）批文）n硝酸甘油 突变型不适用 更换其他药n饮饮 酒酒 突变型伤害大 限制饮酒n高血压个体化用药基因试剂盒高血压个体化用药基因试剂盒2021/3/29 星期一20内容提要内容提要n药物基因组学发展历程药物基因组学发展历程n临床基因检测的关注点临床基因检测的关注点n基因检测的临床应用价值基因检测的临床应用价值n我们开展的一些工作我们开展的一些工作2021/3/29 星期一21n n肿瘤化疗实施中的困惑肿瘤化疗实施中的困惑肿瘤化疗实施中的困惑肿瘤化疗实施中的困惑 n n同一癌症，同一分期，同一病理类型，使用相同的化同一癌症，同一分期，同一病理类型，使用相同的化同一癌症，同一分期，同一病理类型，使用相同的化同一癌症，同一分期，同一病理类型，使用相同的化疗方案，疗效与生存期可能截然不同；疗方案，疗效与生存期可能截然不同；疗方案，疗效与生存期可能截然不同；疗方案，疗效与生存期可能截然不同；n n不同类型癌症患者，相同的化疗方案，疗效与生存期不同类型癌症患者，相同的化疗方案，疗效与生存期不同类型癌症患者，相同的化疗方案，疗效与生存期不同类型癌症患者，相同的化疗方案，疗效与生存期相似；相似；相似；相似；n n化疗耐受与化疗耐药现象；化疗耐受与化疗耐药现象；化疗耐受与化疗耐药现象；化疗耐受与化疗耐药现象；n n原因？原因？原因？原因？基因检测技术的临床应用价值基因检测技术的临床应用价值 2021/3/29 星期一22n n影响消化道肿瘤患者化疗疗效、预后及毒性反应相关蛋白、影响消化道肿瘤患者化疗疗效、预后及毒性反应相关蛋白、影响消化道肿瘤患者化疗疗效、预后及毒性反应相关蛋白、影响消化道肿瘤患者化疗疗效、预后及毒性反应相关蛋白、基因基因基因基因 n n胸苷酸合成酶；胸苷酸合成酶；胸苷酸合成酶；胸苷酸合成酶；n n二氢嘧啶脱氢酶；二氢嘧啶脱氢酶；二氢嘧啶脱氢酶；二氢嘧啶脱氢酶；n n切除修复交叉互补基因；切除修复交叉互补基因；切除修复交叉互补基因；切除修复交叉互补基因；n n多药耐药相关蛋白多药耐药相关蛋白多药耐药相关蛋白多药耐药相关蛋白-1-1；n n葡萄糖醛酸转移酶；葡萄糖醛酸转移酶；葡萄糖醛酸转移酶；葡萄糖醛酸转移酶；n n着色性干皮病复合物着色性干皮病复合物着色性干皮病复合物着色性干皮病复合物DD；n nX X线交叉互补基因线交叉互补基因线交叉互补基因线交叉互补基因1 1n n2021/3/29 星期一23n n胸苷酸合成酶（胸苷酸合成酶（胸苷酸合成酶（胸苷酸合成酶（thymidylate synthase TSthymidylate synthase TS）n n生物学性质及功能生物学性质及功能生物学性质及功能生物学性质及功能n nTSTS基因位于基因位于基因位于基因位于1818号染色体号染色体号染色体号染色体p11.32p11.32，含，含，含，含7 7个外显子，个外显子，个外显子，个外显子，6 6个内含子，长度为个内含子，长度为个内含子，长度为个内含子，长度为16kb16kb，在，在，在，在5 5非翻译区的增强子区域内含有单一重复的非翻译区的增强子区域内含有单一重复的非翻译区的增强子区域内含有单一重复的非翻译区的增强子区域内含有单一重复的28bp28bp序列。序列。序列。序列。n n编码的编码的编码的编码的TSTS是是是是DNADNA合成途径中的一种限速酶合成途径中的一种限速酶合成途径中的一种限速酶合成途径中的一种限速酶n n5-FU5-FU作用机制及肿瘤耐药作用机制及肿瘤耐药作用机制及肿瘤耐药作用机制及肿瘤耐药n n机制机制机制机制n n3R3R等位基因可以导致肿瘤组织等位基因可以导致肿瘤组织等位基因可以导致肿瘤组织等位基因可以导致肿瘤组织TSTS表达增加（原因在于增加了表达增加（原因在于增加了表达增加（原因在于增加了表达增加（原因在于增加了mRNAmRNA的翻译效的翻译效的翻译效的翻译效率和率和率和率和TS mRNATS mRNA水平），水平），水平），水平），TSTSTSTS的高表达需要足够多的的高表达需要足够多的的高表达需要足够多的的高表达需要足够多的5-FU5-FU5-FU5-FU来抑制来抑制来抑制来抑制TSTSTSTS的活性，从而的活性，从而的活性，从而的活性，从而产生耐药产生耐药产生耐药产生耐药，同时，同时，同时，同时，3R-3R-等位基因对等位基因对等位基因对等位基因对5-FU5-FU不敏感，反而增加不敏感，反而增加不敏感，反而增加不敏感，反而增加3-43-4级的毒性和腹泻的级的毒性和腹泻的级的毒性和腹泻的级的毒性和腹泻的副作用，副作用，副作用，副作用，5-FU尿苷激酶FdUMPDNA(-)TS2021/3/29 星期一24n n临床应用临床应用临床应用临床应用n n6565例胃癌患者，化疗方案：顺铂例胃癌患者，化疗方案：顺铂例胃癌患者，化疗方案：顺铂例胃癌患者，化疗方案：顺铂+甲酰四氢叶酸甲酰四氢叶酸甲酰四氢叶酸甲酰四氢叶酸+5-FU+5-FU 启示启示nTS蛋白和基因的表达水平与蛋白和基因的表达水平与5-FU为基础的胃癌患者化疗疗效呈现负为基础的胃癌患者化疗疗效呈现负相关相关n对胃癌患者开展对胃癌患者开展TS检测可以提高患者的疗效检测可以提高患者的疗效 2021/3/29 星期一25n n二氢嘧啶脱氢酶（二氢嘧啶脱氢酶（二氢嘧啶脱氢酶（二氢嘧啶脱氢酶（dihydropyrimidine dehydrogenase dihydropyrimidine dehydrogenase DPDDPD）n n生物学性质及功能生物学性质及功能生物学性质及功能生物学性质及功能 n n由相同亚单位构成的二聚体，每亚单位分子质量为由相同亚单位构成的二聚体，每亚单位分子质量为由相同亚单位构成的二聚体，每亚单位分子质量为由相同亚单位构成的二聚体，每亚单位分子质量为11110111103 3，含有，含有，含有，含有FMNFMN，FADFAD，-NH-NH2 2，-COO(4Fe24S)2-COO(4Fe24S)2n n双氢嘧啶脱氢酶（双氢嘧啶脱氢酶（双氢嘧啶脱氢酶（双氢嘧啶脱氢酶（DPDDPD）是嘧啶类药物如）是嘧啶类药物如）是嘧啶类药物如）是嘧啶类药物如5-FU5-FU分解代谢的起始酶和分解代谢的起始酶和分解代谢的起始酶和分解代谢的起始酶和限速酶限速酶限速酶限速酶n n5-FU5-FU5-FU5-FU分解代谢及肿瘤耐药分解代谢及肿瘤耐药分解代谢及肿瘤耐药分解代谢及肿瘤耐药 n n机制机制机制机制5-FU5-FUH2NADPH5-FUPA5-FBAL-丙氨酸合成酶丙氨酸合成酶体体外外DPD2021/3/29 星期一26n n耐药机制耐药机制耐药机制耐药机制 药代动力学研究表明，药代动力学研究表明，药代动力学研究表明，药代动力学研究表明，DPDDPD活性的高低与肿瘤耐药有明显的关系活性的高低与肿瘤耐药有明显的关系活性的高低与肿瘤耐药有明显的关系活性的高低与肿瘤耐药有明显的关系n nDPDDPD低活性：低活性：低活性：低活性：5-FU5-FU体内清除下降，体内清除下降，体内清除下降，体内清除下降，T1/2T1/2显著延长，合成增加，毒性加显著延长，合成增加，毒性加显著延长，合成增加，毒性加显著延长，合成增加，毒性加强；强；强；强；n nDPDDPD高活性：高活性：高活性：高活性：5-FU5-FU分解增加，合成减少，耐药分解增加，合成减少，耐药分解增加，合成减少，耐药分解增加，合成减少，耐药n n临床应用特点临床应用特点临床应用特点临床应用特点 n nDPDDPD活性与患者人种、性别、年龄、肿瘤部位、分期、分化、病理类活性与患者人种、性别、年龄、肿瘤部位、分期、分化、病理类活性与患者人种、性别、年龄、肿瘤部位、分期、分化、病理类活性与患者人种、性别、年龄、肿瘤部位、分期、分化、病理类型无关型无关型无关型无关n n研究表明，临床监测研究表明，临床监测研究表明，临床监测研究表明，临床监测5-FUH5-FUH2 2浓度为浓度为浓度为浓度为1.14-37.881.14-37.88mol/Lmol/L时，时，时，时，5-FU5-FU临床疗临床疗临床疗临床疗效最佳；效最佳；效最佳；效最佳；n n胃癌组织中胃癌组织中胃癌组织中胃癌组织中DPDDPD活性可以预测肿瘤组织对活性可以预测肿瘤组织对活性可以预测肿瘤组织对活性可以预测肿瘤组织对5-FU5-FU的敏感性，的敏感性，的敏感性，的敏感性，DPDDPD越低越低越低越低对对对对5-FU5-FU越敏感越敏感越敏感越敏感 n n外周血单核细胞外周血单核细胞外周血单核细胞外周血单核细胞DPDDPD活性具有时间节律性，活性具有时间节律性，活性具有时间节律性，活性具有时间节律性，1 1点活性最高，点活性最高，点活性最高，点活性最高，1313点活性点活性点活性点活性最低，临床上可以根据这一规律来调整用药。最低，临床上可以根据这一规律来调整用药。最低，临床上可以根据这一规律来调整用药。最低，临床上可以根据这一规律来调整用药。2021/3/29 星期一27n n切除修复交叉互补基因（切除修复交叉互补基因（切除修复交叉互补基因（切除修复交叉互补基因（excision repair cross-excision repair cross-complementing-1 ERCC1complementing-1 ERCC1）n n生物学性质及功能：生物学性质及功能：生物学性质及功能：生物学性质及功能：n nERCC1ERCC1位于位于位于位于19q13.3-q13.219q13.3-q13.2，基因长度约为，基因长度约为，基因长度约为，基因长度约为14kb14kb，包括，包括，包括，包括1010个外显子。个外显子。个外显子。个外显子。n nH-RasH-Ras基因所引起的基因所引起的基因所引起的基因所引起的Ap1Ap1主导的主导的主导的主导的c-Junc-Jun和和和和c-Fosc-Fos强大的相互作用对强大的相互作用对强大的相互作用对强大的相互作用对ERCC1ERCC1反应很重要，在以反应很重要，在以反应很重要，在以反应很重要，在以H-RasH-Ras介导的细胞对铂类药物耐药具有重要意义；介导的细胞对铂类药物耐药具有重要意义；介导的细胞对铂类药物耐药具有重要意义；介导的细胞对铂类药物耐药具有重要意义；n n减少减少减少减少ERCC1ERCC1的表达可以增加肿瘤细胞对铂类化疗药物的敏感性。的表达可以增加肿瘤细胞对铂类化疗药物的敏感性。的表达可以增加肿瘤细胞对铂类化疗药物的敏感性。的表达可以增加肿瘤细胞对铂类化疗药物的敏感性。2021/3/29 星期一28n n临床应用临床应用临床应用临床应用 n n用顺铂为基础的胃癌患者进行辅助化疗，结果如下用顺铂为基础的胃癌患者进行辅助化疗，结果如下用顺铂为基础的胃癌患者进行辅助化疗，结果如下用顺铂为基础的胃癌患者进行辅助化疗，结果如下 n n启示启示启示启示 n n在化疗方案中，合用在化疗方案中，合用在化疗方案中，合用在化疗方案中，合用ERCC1ERCC1合成抑制剂可以大大提高以铂类为基础的化合成抑制剂可以大大提高以铂类为基础的化合成抑制剂可以大大提高以铂类为基础的化合成抑制剂可以大大提高以铂类为基础的化疗药物在消化道肿瘤化疗中的疗效。疗药物在消化道肿瘤化疗中的疗效。疗药物在消化道肿瘤化疗中的疗效。疗药物在消化道肿瘤化疗中的疗效。Metzgle R,Leichman CG,Danenberg,et al,.J Clin Oncol,1998,16(1)309-317 2021/3/29 星期一29n n多药耐药相关蛋白多药耐药相关蛋白多药耐药相关蛋白多药耐药相关蛋白-1-1（multidrug resistance-assiciated multidrug resistance-assiciated proteins-1 MRP-1proteins-1 MRP-1）n n生物学性质及功能生物学性质及功能生物学性质及功能生物学性质及功能 n n属于属于属于属于ABCABC转运蛋白超家族，定位于转运蛋白超家族，定位于转运蛋白超家族，定位于转运蛋白超家族，定位于1616号染色体号染色体号染色体号染色体p13.1p13.1带上，带上，带上，带上，6500bp6500bp组成，组成，组成，组成，编码编码编码编码15311531个氨基酸的跨膜糖蛋白，分子质量为个氨基酸的跨膜糖蛋白，分子质量为个氨基酸的跨膜糖蛋白，分子质量为个氨基酸的跨膜糖蛋白，分子质量为190000190000，主要包括，主要包括，主要包括，主要包括MRP-MRP-1 1、MRP-2MRP-2和和和和MRP-3 MRP-3 n n主要功能为主要功能为主要功能为主要功能为肿瘤组织对抗肿瘤药物耐药肿瘤组织对抗肿瘤药物耐药肿瘤组织对抗肿瘤药物耐药肿瘤组织对抗肿瘤药物耐药，是判断恶性肿瘤敏感性的极，是判断恶性肿瘤敏感性的极，是判断恶性肿瘤敏感性的极，是判断恶性肿瘤敏感性的极其重要的指标，与恶性肿瘤化疗生物学行为及预后密切相关。其重要的指标，与恶性肿瘤化疗生物学行为及预后密切相关。其重要的指标，与恶性肿瘤化疗生物学行为及预后密切相关。其重要的指标，与恶性肿瘤化疗生物学行为及预后密切相关。2021/3/29 星期一30n n耐药机制耐药机制耐药机制耐药机制 n n与谷胱甘肽与谷胱甘肽与谷胱甘肽与谷胱甘肽S S结合载体（结合载体（结合载体（结合载体（GS-XGS-X泵）活性提高有关泵）活性提高有关泵）活性提高有关泵）活性提高有关 n nMRPMRP转运的步骤转运的步骤转运的步骤转运的步骤 n n谷胱甘肽（谷胱甘肽（谷胱甘肽（谷胱甘肽（GSHGSH）的合成）的合成）的合成）的合成 n nGSHGSH与药物偶联与药物偶联与药物偶联与药物偶联 n nMRPMRP将药物泵出细胞外将药物泵出细胞外将药物泵出细胞外将药物泵出细胞外 n nMRPMRP可以介导可以介导可以介导可以介导 n n药物中的谷胱甘肽共轭物药物中的谷胱甘肽共轭物药物中的谷胱甘肽共轭物药物中的谷胱甘肽共轭物 n n葡萄糖醛酸甙共轭物葡萄糖醛酸甙共轭物葡萄糖醛酸甙共轭物葡萄糖醛酸甙共轭物 n n硫酸盐共轭物硫酸盐共轭物硫酸盐共轭物硫酸盐共轭物 n n解决途径解决途径解决途径解决途径 n n7-7-乙基乙基乙基乙基-10-10-羟基喜树碱（羟基喜树碱（羟基喜树碱（羟基喜树碱（SN-38SN-38）等可以逆转）等可以逆转）等可以逆转）等可以逆转MRPMRP介导的多药耐药（介导的多药耐药（介导的多药耐药（介导的多药耐药（MDRMDR）n n反义反义反义反义RNARNA技术，可以大大减少对化疗药的耐药技术，可以大大减少对化疗药的耐药技术，可以大大减少对化疗药的耐药技术，可以大大减少对化疗药的耐药 n n启示启示启示启示 n n在消化道肿瘤化疗前，检测在消化道肿瘤化疗前，检测在消化道肿瘤化疗前，检测在消化道肿瘤化疗前，检测MRPMRP的表达，对于指导临床化疗药选择、评估疗效及的表达，对于指导临床化疗药选择、评估疗效及的表达，对于指导临床化疗药选择、评估疗效及的表达，对于指导临床化疗药选择、评估疗效及预后具有重要的意义。预后具有重要的意义。预后具有重要的意义。预后具有重要的意义。2021/3/29 星期一31n n葡萄糖醛酸转移酶（葡萄糖醛酸转移酶（葡萄糖醛酸转移酶（葡萄糖醛酸转移酶（UDP-glucuronosyltransferase,UGTsUDP-glucuronosyltransferase,UGTs）n n伊立替康体内代谢与转化伊立替康体内代谢与转化伊立替康体内代谢与转化伊立替康体内代谢与转化 2021/3/29 星期一32n nUGT1A1UGT1A1分子生物学特征分子生物学特征分子生物学特征分子生物学特征 n n具有具有具有具有2525种基因多态性，其中种基因多态性，其中种基因多态性，其中种基因多态性，其中2828等位基因启动子区域含等位基因启动子区域含等位基因启动子区域含等位基因启动子区域含6 6个个个个TATA重复区域重复区域重复区域重复区域 （-53(TA)-53(TA)6767，UGT1A1*28UGT1A1*28）最为普通。）最为普通。）最为普通。）最为普通。n nTATA重复区域的高表达与严重的中性粒细胞减少所致发热、腹泻有密切关重复区域的高表达与严重的中性粒细胞减少所致发热、腹泻有密切关重复区域的高表达与严重的中性粒细胞减少所致发热、腹泻有密切关重复区域的高表达与严重的中性粒细胞减少所致发热、腹泻有密切关系（增加系（增加系（增加系（增加7 7倍）倍）倍）倍）n n启示启示启示启示 n n对于消化道肿瘤患者进行对于消化道肿瘤患者进行对于消化道肿瘤患者进行对于消化道肿瘤患者进行UGT1A1*28UGT1A1*28UGT1A1*28UGT1A1*28等位基因等位基因等位基因等位基因的测定，对于选择正确选择的测定，对于选择正确选择的测定，对于选择正确选择的测定，对于选择正确选择药物，减少伊立替康所带来的不良反应具有极其重要的意义。药物，减少伊立替康所带来的不良反应具有极其重要的意义。药物，减少伊立替康所带来的不良反应具有极其重要的意义。药物，减少伊立替康所带来的不良反应具有极其重要的意义。2021/3/29 星期一33n n着色性干皮病复合物着色性干皮病复合物着色性干皮病复合物着色性干皮病复合物DD（Xeroderma pigmentosum Xeroderma pigmentosum complementation group D,XPDcomplementation group D,XPD）n n在基于奥沙利铂治疗的胃癌患者中，同义在基于奥沙利铂治疗的胃癌患者中，同义在基于奥沙利铂治疗的胃癌患者中，同义在基于奥沙利铂治疗的胃癌患者中，同义XPDArg156ArgXPDArg156Arg（CACA）基因多）基因多）基因多）基因多态性与态性与态性与态性与C/AC/A或或或或A/AA/A长时间和高表达密切相关，长时间和高表达密切相关，长时间和高表达密切相关，长时间和高表达密切相关，对于转移性结直肠癌患者，对于转移性结直肠癌患者，对于转移性结直肠癌患者，对于转移性结直肠癌患者，基因高表达可以增加肿瘤组织对药物的敏感性，延长患者的中位生存率基因高表达可以增加肿瘤组织对药物的敏感性，延长患者的中位生存率基因高表达可以增加肿瘤组织对药物的敏感性，延长患者的中位生存率基因高表达可以增加肿瘤组织对药物的敏感性，延长患者的中位生存率。n nXPD Lys751GlnXPD Lys751Gln（ACAC）基因多态性在给予各种铂类制剂化疗的结直肠癌）基因多态性在给予各种铂类制剂化疗的结直肠癌）基因多态性在给予各种铂类制剂化疗的结直肠癌）基因多态性在给予各种铂类制剂化疗的结直肠癌患者中与生存率无显著差异。患者中与生存率无显著差异。患者中与生存率无显著差异。患者中与生存率无显著差异。n n启示：对启示：对启示：对启示：对肠道肿瘤患者进行肠道肿瘤患者进行肠道肿瘤患者进行肠道肿瘤患者进行XPDXPD基因多态性的相关检测，对于选择合适基因多态性的相关检测，对于选择合适基因多态性的相关检测，对于选择合适基因多态性的相关检测，对于选择合适的铂类化疗药，评价疗效，化疗预后均有重要的意义的铂类化疗药，评价疗效，化疗预后均有重要的意义的铂类化疗药，评价疗效，化疗预后均有重要的意义的铂类化疗药，评价疗效，化疗预后均有重要的意义。2021/3/29 星期一34n nX X线交叉互补基因线交叉互补基因线交叉互补基因线交叉互补基因1(X-ray repair cross complementing 1(X-ray repair cross complementing group 1,XRCC1)group 1,XRCC1)n n分子生物学特征及功能分子生物学特征及功能分子生物学特征及功能分子生物学特征及功能 n n位于人位于人位于人位于人1919号染色体长臂区（号染色体长臂区（号染色体长臂区（号染色体长臂区（19q13.219q13.2），编码的蛋白通过与多聚），编码的蛋白通过与多聚），编码的蛋白通过与多聚），编码的蛋白通过与多聚ADPADP核糖聚合酶核糖聚合酶核糖聚合酶核糖聚合酶（PARPPARP）、）、）、）、APE1APE1、多聚核苷酸激酶、多聚核苷酸激酶、多聚核苷酸激酶、多聚核苷酸激酶/磷酸酶、磷酸酶、磷酸酶、磷酸酶、DNADNA连接酶连接酶连接酶连接酶3 3及及及及DNADNA多聚酶多聚酶多聚酶多聚酶 的的的的相互作用参与相互作用参与相互作用参与相互作用参与DNADNA碱基修复及碱基修复及碱基修复及碱基修复及DNADNA单链单链断裂重断裂重断裂重断裂重组组修复，修复，修复，修复，该该基因常基因常基因常基因常见见的的的的单单核苷核苷核苷核苷酸多酸多酸多酸多态态性有性有性有性有3 3种：种：种：种：C26304TC26304T、G27466AG27466A、G28152AG28152A，这这些突些突些突些突变变位点的存在会影响位点的存在会影响位点的存在会影响位点的存在会影响编码编码蛋白的功能活性，使机体蛋白的功能活性，使机体蛋白的功能活性，使机体蛋白的功能活性，使机体对肿对肿瘤的易感性瘤的易感性瘤的易感性瘤的易感性发发生生生生变变化。化。化。化。2021/3/29 星期一35n n基因多基因多基因多基因多态态性与性与性与性与结结直直直直肠肠癌癌癌癌发发病相关性病相关性病相关性病相关性 n n埃及人群：埃及人群：埃及人群：埃及人群：26304T26304T、28152A28152A等位基因等位基因等位基因等位基因编译编译，会增加早，会增加早，会增加早，会增加早发发性性性性结结直直直直肠肠癌的罹患癌的罹患癌的罹患癌的罹患风风险险；n n韩韩国人群：国人群：国人群：国人群：28152A28152A等位基因等位基因等位基