微生物细胞数计数.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,微生物细胞数计数,微生物细胞数计数,第1页,使用血球计数板计数单细胞微生物数量。,一、试验目标,微生物细胞数计数,第2页,血球计数板是一块比普通载玻片厚特制玻片制,成。玻片中央刻有四条槽，中央两条槽之间平面比其它平面略低，中央有一小槽，槽两边平面上各刻有,9,个大方格。中间一个大方格为计数室，它长、宽各为,1mm,，深度为,0.1mm,容积为,0.1mm,3,。计数室有两种规格，一个是把大方格分成,16,个中格，每一中格分成,25,小格，共计,400,小格；另一个规格是把大方格分成,25,中格，每一中格分成16,小格，总共也是,400,小格。,二、试验原理,微生物细胞数计数,第3页,血细胞计数板正面、侧面与正面方格放大示意图,微生物细胞数计数,第4页,所以，在计算上可按以下两种公式进行：,1.1625,计数板计算：,细胞数,/mL=,（,100,小格内细胞数,/100,）,400 10000,稀释倍数,2.25X16,计数板计算：,细胞数,/mL=,（,80,小格内细胞数,/80,）,400 10000,稀释倍数,式中，,400,为计数板小格总数；,10000,为由计数室,0.1mm,3,换算成,lmL,体积系数,二、试验原理,微生物细胞数计数,第5页,1.,材料,酵母菌悬液,2.,用具,显微镜、血球计数板,三、试验材料和用具,微生物细胞数计数,第6页,四、试验方法,1.,取清洁干燥血球计数板，在计数室上面加盖玻片。在显微镜下找到计数室。,2.,取酵母菌液，摇匀，用滴管由盖玻片边缘滴一小滴,(,不宜过多,),。菌液可自行渗透计数室。计数室不得有气泡，然后置高倍镜下计数。,微生物细胞数计数,第7页,3.,样品浓度要求每小格内有,5,10,个菌体为宜。,4.,计数时，用,1625,计数板要按对角线方位，取左上、左下、右上，右下四个中方格,(,即,100,小格,),计数酵母菌液，用,2516,计数板，除计数上述对角线四个方格外，还需数中央一个方格酵母菌数,(,即,80,小格,),。,四、试验方法,微生物细胞数计数,第8页,5.,每个样品重复计数,2,3,次，取其平均值，按上述公式计算每毫升菌液所含酵母细胞数。,6.,计数完成，将计数板在水龙头上冲洗，切勿用硬物洗刷，自行晾干或吹风机吹干，或用擦镜头纸轻轻擦拭。,四、试验方法,微生物细胞数计数,第9页,使用血球计数板对样品酵母菌液进行计数，并计算菌液浓度。,五、试验内容,微生物细胞数计数,第10页,将微生物计数结果填入以下空白,1.,第一次计数酵母细胞数目 个。,2.,第二次计数酵母细胞数目 个。,3.,从两次计数结果中求出酵母细胞平均数目,4.,稀释倍数 倍。,5.,求出每毫升酵母菌液中细胞数 个。,六、试验汇报,微生物细胞数计数,第11页,七、思索题,1.,为何两种不一样规格血球计数板测定同一样品时，其结果是一样？,2.,使用细胞计数板应注意什么问题,?,微生物细胞数计数,第12页,