课时跟踪检测(二)--微生物的基本培养技术.doc

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课时跟踪检测（二） 微生物的基本培养技术
一、选择题
1．下列有关培养基的叙述，正确的是(　　)
A．培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质
B．培养基都只含有水、碳源、氮源和无机盐
C．固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基
D．微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌
解析：选A　培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质；培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，除此之外，可能还含有生长因子、缓冲剂等；固体培养基中加入少量水不能制成液体培养基；肉眼看不到单个细菌，在固体培养基上可形成肉眼可见的单个菌落。
2．培养基、培养皿、接种针、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是(　　)
①化学消毒　②灼烧灭菌　③干热灭菌　④紫外线消毒
⑤高压蒸汽灭菌　⑥巴氏消毒法
A．⑤③②①④⑥　　　　 B．①②③④⑤⑥
C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤
解析：选A　培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌；培养皿能耐高温且需要保持干燥，可用干热灭菌法；接种针可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药剂(如酒精)进行消毒；空气可用紫外线消毒；为不破坏牛奶的营养成分，可采用巴氏消毒法。
3．(2020·遂宁期末)关于微生物的实验室培养，下列叙述错误的是(　　)
A．为避免污染，实验操作应在酒精灯火焰上进行
B．琼脂常在配制培养基中用作凝固剂
C．接种环、接种针、试管口等常使用灼烧灭菌法
D．试管、烧杯、培养基等可以用高压蒸汽灭菌法灭菌
解析：选A　为避免杂菌污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行，而不是在酒精灯火焰上，A错误；琼脂是从红藻中提取的多糖，在配制培养基中用作凝固剂，B正确；接种环、接种针、试管口等常使用灼烧灭菌法，C正确；试管、烧杯、培养基等可以用高压蒸汽灭菌法灭菌，D正确。
4．(2020·徐州期末)下列关于高压蒸汽灭菌法的说法，错误的是(　　)
A．灭菌锅内要加入适量的蒸馏水，且物品的摆放不能过挤
B．接通电源加热后，先打开排气阀，以排尽灭菌锅内的冷空气
C．关闭电源后，打开排气阀，待压力表指针降为0后，打开灭菌锅盖
D．待灭菌锅内的温度降至60 ℃以下后，方可取出锅内物品
解析：选C　高压蒸汽灭菌锅中加入的是蒸馏水，需要灭菌的物品摆放不能过挤，以免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果，A正确；接通电源加热后，先打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气，B正确；达到灭菌所需的时间后，切断电源或关闭煤气，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品，C错误；灭菌锅内的温度降至60 ℃以下后，方可取出锅内物品，D正确。
5．(2020·滨州期末)下列关于无菌技术的叙述，错误的是(　　)
A．无菌技术是保证获得纯净培养物的关键
B．要对培养基、接种工具等进行灭菌处理
C．已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触
D．倒平板操作应在酒精灯火焰附近进行
解析：选C　无菌技术是获得纯净培养物的关键，A正确；接种用的培养基、器皿和接种工具都需要灭菌处理，B正确；为防止杂菌污染，实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触，C错误；倒平板属于无菌操作，需要在酒精灯火焰附近进行，D正确。
6．下列有关倒平板操作的叙述，错误的是(　　)
A．将灭过菌的培养皿放在酒精灯火焰旁的桌面上
B．打开的锥形瓶瓶口应迅速通过火焰
C．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上
D．待平板冷却凝固后需要倒过来放置
解析：选C　整个倒平板过程要防止外来杂菌的入侵，因此，灭过菌的培养皿应放在酒精灯火焰旁的桌面上；打开的锥形瓶瓶口应迅速通过火焰；将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，不能将培养皿盖完全打开；待平板冷却凝固后需要倒过来放置。
7．幽门螺杆菌(含有脲酶)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如图所示，图中X表示(　　)
―→―→―→―→
A．调节pH　　　　　　　 B．接种
C．加入酚红指示剂 D．将培养基倒置
解析：选B　培养基配制好后，经过高压蒸汽灭菌，然后在无菌条件下进行接种，再进行培养、观察，故X是接种。
8．(2020·无锡期末)下列关于实验室常用的消毒和灭菌方法的叙述，错误的是(　　)
A．接种箱使用前可以用紫外线照射进行消毒
B．培养基分装到培养皿后进行高压蒸汽灭菌
C．培养皿放入干热灭菌箱采用干热灭菌法灭菌
D．接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧灭菌
解析：选B　接种箱使用前可以用紫外线照射进行消毒，A正确；培养基在分装到培养皿前进行高压蒸汽灭菌，B错误；培养皿放入干热灭菌箱采用干热灭菌法灭菌，C正确；接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧灭菌，D正确。
9．下列有关平板划线操作的叙述，正确的是(　　)
A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌
B．打开含菌种的试管后需要将试管口通过火焰，蘸取菌种后需要马上塞上棉塞
C．培养皿盖打开后将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可
D．待接种环冷却后再伸入菌液中蘸取一环菌液
解析：选D　使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中还需灭菌，因为接种环会沾有细菌，A错误；打开含菌种的试管后需通过火焰灭菌，取出菌种后还需通过火焰灭菌，再塞上棉塞，B错误；将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，还需盖上培养皿盖，防止空气中的杂菌混入，C错误；待接种环冷却后再伸入菌液中蘸取一环菌液，避免高温杀死菌种，D正确。
10.如图是在实验室中培养某种微生物的结果，相关说法错误的是(　　)

A．该实验所采用的接种方法为平板划线法
B．每次接种前都要将接种环进行灼烧灭菌
C．该接种方法常用于微生物的分离纯化
D．只有最后的划线区域才能得到单菌落
解析：选D　由图可知，该实验所采用的接种方法为平板划线法，A正确；每次接种前都要将接种环进行灼烧灭菌，B正确；该接种方法常用于微生物的分离纯化，C正确；不一定在最后的划线区域才能得到单菌落，在之前的划线区域也可能会得到单菌落，D错误。
11．下表是对四种生物能源、碳源、氮源、代谢类型的描述，其中正确的是(　　)
选项
A
B
C
D
生物类型
硝化细菌
乳酸菌
根瘤菌
衣藻
能源
利用化学能
分解乳酸

固定N2
利用光能
碳源
CO2
糖类
糖类
CO2
氮源
NH3
N2
N2
NO
代谢类型
异养需氧型
异养厌氧型
异养需氧型
自养需氧型

解析：选D　硝化细菌能利用氮源，且能利用氧化NH3释放的化学能进行化能合成作用合成有机物，属于自养需氧型生物，A错误；乳酸菌是异养厌氧型生物，不能直接利用氮气，且能量来源为糖类，B错误；根瘤菌进行生命活动所需要的能量来自糖类等有机物的氧化分解，C错误；衣藻是低等植物，能利用光能进行光合作用制造有机物，属于自养需氧型生物，D正确。
二、非选择题
12．(2020·天津和平区期末)下表为一种营养液的配方，试根据表中的内容回答下列问题：
成分
Ca(NO3)2
KH2PO4
KCl
MgSO4
Fe(NO3)2
Mo
蒸馏水
含量
1 g
0.25 g
0.12 g
0.30 g
0.30 g
极少
1 000 mL

(1)若用于植物培养，在培养的初期，植物出现萎蔫现象，最可能的原因是________________________________________________________________________。
可采用的最简单的有效措施是_______________________________________________。
(2)培养一段时间后，检测到培养液中留存的NO较少而Ca2＋等离子较多，这一现象与细胞膜的____________有关。
(3)此培养液若用于培养微生物，则可以培养的微生物代谢类型是________。培养液中含有的营养物质有________ 类，分别是________________。如果不慎将过量的NaCl加入培养基中，如不想浪费此培养基，可加入____________，用以培养_________________________。
若用于菌种的鉴定，应该增加的成分是____________。若除去Ca(NO3)2、Fe(NO3)2，该培养基则可用于培养____________。
解析：(1)植物萎蔫是由于细胞大量失水，最可能的原因是培养液浓度过高，导致植物不能从培养液中吸水，甚至失水。可采用的最简单的有效措施是加水稀释培养液。(2)一段时间后，检测到培养液中留存的Ca2＋较多，而NO较少，说明该植物吸收Ca2＋较少，而吸收NO较多，这一现象与细胞膜的选择透过性功能有关。(3)此培养液中无有机物，所以只能培养自养型微生物。此培养液能提供水、无机盐、氮源3类营养物质。不慎将过量NaCl加入培养基中，若不想浪费此培养基，可再加入含碳有机物，用于培养金黄色葡萄球菌。鉴定微生物菌种用的是固体培养基，所以还应该加入琼脂。除去Ca(NO3)2、Fe(NO3)2，则该培养基中没有了氮源，所以该培养基可用于培养固氮微生物。
答案：(1)培养液浓度过高　加水稀释　(2)选择透过性
(3)自养型　3　无机盐、水、氮源　含碳有机物　金黄色葡萄球菌　琼脂　固氮微生物
13．回答与微生物实验室培养有关的问题：
(1)在制备固体培养基时需加入凝固剂，常用的是________。
(2)为防止外来杂菌入侵，对____________________等可采用干热灭菌法进行灭菌。

(3)如图为平板划线法接种后的示意图。在划线接种的整个操作过程中，对接种环至少需进行________次灼烧灭菌。经数次划线后培养，可以分离得到__________。
(4)接种后盖上皿盖，将平板________放入恒温箱中培养，这样放置的目的是________________________________________________________________________。
还需将一个未接种平板共同放入恒温箱中培养，其目的是________________________________________________________________________。
解析：(1)制备固体培养基最常用的凝固剂是琼脂。(2)为防止外来杂菌入侵，需要进行消毒灭菌，对耐高温且需要保持干燥的物品如玻璃器皿和金属用具等，可采用干热灭菌法进行灭菌。(3)平板划线法接种过程中需在接种前、每次划线后对接种环进行灼烧灭菌，图中所示培养基共接种5个区域，故接种环至少需要进行6次灼烧灭菌处理。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。(4)微生物培养过程中，易产生冷凝水，为防止水珠滴在培养基表面造成污染和避免水分过快挥发，培养时需将平板倒置。将未接种的平板共同放入恒温箱中培养，其目的是检测培养基灭菌是否合格。
答案：(1)琼脂　(2)玻璃器皿和金属用具　(3)6　单菌落　(4)倒置　避免培养基被污染和防止培养基水分过快挥发　判断培养基是否被杂菌污染(或培养基灭菌是否合格)
14．牛奶是微生物生长的良好培养基。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒，以杀死有害微生物。为检测自制酸奶是否被杂菌污染，可先将酸奶进行一定程度的稀释，请回答下列问题：
(1)牛奶用巴氏消毒的好处是_______________________________________________。
(2)取最终的牛奶稀释液在培养基上划线，应选择的工具是下图中的________(填选项)。

(3)理想情况下，培养一段时间后可在培养基表面形成菌落，如果培养基上出现________________________的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染。
(4)已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌，纯化乳酸菌时划线操作正确的是________(填选项)。

解析：(1)巴氏消毒的方法是指62～65 ℃消毒30 min或80～90 ℃处理30 s～1 min，使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是牛奶的营养成分不被破坏。(2)划线时所用的接种工具是接种环，即图中的A。(3)如果培养基上出现(形状、大小、颜色、光泽度)不同的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染。(4)A图很难得到由单个菌株增殖而来的菌落；B图划线从上次划线末端开始，容易得到由单个菌株增殖而来的菌落；C图划线没有从上次划线的末端开始，接种环上没有菌种，不能得到由单个菌株增殖而来的菌落；D图划线不是从上次划线末端开始，不容易得到由单个菌株增殖而来的菌落。
答案：(1)尽量不破坏牛奶的营养成分 (或营养成分几乎没有损失)　(2)A　(3)(形状、大小、颜色、光泽度)不同　(4)B