新精选HIV抗体筛查试验室内质控品制备和日常检测典型案例分析.pptx

室内质控品抗体检测的统计学室内质量控制非试剂盒组份的外部质控品，是为了监控检测的重复性而设置的，包括强阳性、弱阳性和阴性质控血清；只设置一个弱阳性质控，以该试剂盒临界值（Cut-off）的23倍为宜。外部质控品的作用是，判断该批临床样品检测的有效性，因此，每次实验必须包含室内质控品，其结果无效，必须重新试验。室内质控品可以是商品或实验室自行制备。室内质控品的使用和质量要求每一次实验必须使用室内质控品，以便监控实验的重复性。同时可以了解各批试剂盒的批间或孔间差异。室内质控品的管间或瓶间变异必须小于监测系统预期的变异（cv20%）；并且质控品应稳定、无菌，且不含有影响试剂反应的防腐剂。北京大学人民医院肝病研究所承担HIV抗体检测任务：首选试剂：生物梅里埃（3代）；备用试剂：万泰3代；2011年检测样本量：筛查阳性样本数26例（0.3）；其中，确证试验阳性样本13例，不确定4例，阴性9例；2012年1-4月，筛查阳性15（1 ），阳性9例。2012年，检验科开始用雅培化学发光进行初筛，初筛阳性送肝病研究所进行复检。调制针对生物梅里埃（3代）_1材料抗-HIV阳性灭活血清（可用梅里埃试剂盒中的阳性对照替代）；抗-HIV阴性的血清（可用梅里埃试剂盒中的阴性对照）或20%小牛血清；2 mL冻存管；生物安全柜；酶免仪、微量进样器、15-50 mL离心管；调制针对生物梅里埃（3代）_2基本操作流程先将抗-HIV阳性灭活血清混合进行常规检测，读取OD值。将抗-HIV阳性灭活血清用抗-HIV阴性的血清、或20%小牛血清稀释至所需浓度（4-6倍），一般为阴性对照OD值的3-4倍。将配置好的质控血清分装到2 mL冻存管中，1 mL/管，置-20冰箱保存。按照室内质控要求计算出此批次质控血清的SD值、CV值，并绘出质控图，标明批号备用。2012年2月质控图2011-2质控考评质控图ELISA检测HIV抗体室内质控血清的制备目的实验室自制外部质控血清，绘制质控图，满足全国艾滋病检测技术规范要求和考评要求。方法利用试剂盒内的阳性对照血清，用健康人的血清按一定量混合稀释成弱阳性，筛选出合适混合比例，分装冷冻保存使用。结果试剂盒内的阳性对照血清与健康人的血清1：10左右混合比例比较适合。结论自制质控血清性能稳定，经济、方便，便于推广使用。韦雪芳（广西壮族自治区横县疾病预防控制中心HIV初筛实验室530300）；检验医学与临床，2011；8:2527-2528.HIV抗体阳性血清梯度稀释系列用于实验室质控和试剂评价探讨（1）方法 用阴性血清梯度稀释HIV抗体确认阳性血清，用第三代ELISA检测试剂进行检测，寻找稀释度与OD 值间的关系，然后应用于实验室质控和试剂评价。HIV 抗体阳性混合血清：WB确证阳性样本：WB全条带（gp160、gp120、p66、p55/p51、gp41、p31、p24p17）；HIV 抗体阴性混合血清：筛查试验阴性；用阴性血清稀释阳性混合血清，筛查试验确定最高稀释度稀释倍数：103-105；-20保存；李红星（商丘市卫生防疫站）；河南预防医学杂志，2005；16:133-135.HIV抗体阳性血清梯度稀释系列用于实验室质控和试剂评价探讨（2）结果 在一定稀释度范围内-log稀释度与OD 值呈线性关系。实验系列用于质控，各实验室均正确报出样品的阴阳性结果，但灵敏度（回归曲线斜率/残差标准差）不同，依此对实验室进行排序。结论 HIV 抗体阳性血清梯度稀释系列可用于实验室质控和试剂评价。但灵敏度的合适范围还需继续探讨。李红星（商丘市卫生防疫站）；河南预防医学杂志，2005；16:133-135.北京大学人民医院肝病研究所联系电话：88325729化学发光试剂应用案例1韩，山东青岛人,19岁，MSM2012年3月初，到北京大学人民医院呼吸科，以发烧、腹泻住院治疗；检验科雅培化学发光：S/CO值29；送肝病研究所复核阴性（梅里埃、万泰，三代）；主治医生比较负责任，采血继续送检，梅里埃（1.9）、万泰（0.3），均阳性；CD4细胞计数和CD4/CD8比值偏低；地坛医院皮肤科就诊，送检确证。化学发光试剂应用案例1（续）批号批号样本样本IDID检测日期检测日期初筛初筛复检复检1 1WBWB带型带型北京大学北京大学人民医院人民医院3 3月月6 6日日雅培发光：雅培发光：2525梅里埃、梅里埃、万泰万泰3 3代：代：0.10.1未送检未送检人民医院人民医院121176121176 3 3月月1313日日梅里埃梅里埃3 3代代:1.61.6万泰万泰3 3代代:0.320.32p17 gp120 gp160p17 gp120 gp160地坛医院地坛医院121631121631 4 4月月1010日日梅里埃梅里埃4 4代代:2.92.9万泰万泰4 4代代:0.660.66p24 gp41 gp120 p24 gp41 gp120 gp160gp160北京大学人民医院&地坛医院韩，山东青岛人,19岁，MSM化学发光试剂应用案例2单位单位样本样本IDID 检测日期检测日期初筛初筛复检复检1 1WBWB带型带型东直门医东直门医院院120740120740 2 2月月2121日日雅培发光：雅培发光：2.52.5万泰万泰4 4代：代：0.070.07p24p24性艾所性艾所VCTVCT121214121214 3 3月月2020日日万泰万泰4 4代代:1.491.49梅里埃梅里埃4 4代：代：1.811.81p24 p31 gp160p24 p31 gp160性艾所性艾所VCTVCT121518121518 4 4月月1010日日万泰万泰4 4代代:1.891.89梅里埃梅里埃4 4代：代：2.052.05p17 p24 p31 gp41 p17 p24 p31 gp41 p51 p55 p66 gp120 p51 p55 p66 gp120 gp160gp160东直门医院&性艾所贾，33岁，MSM雅培：2.51万泰4：0.013一个月后，梅里埃4：1.81万泰4：1.49部分单位送检样本确证结果分析初筛试剂筛查阳性确证阳性确证阴性确证阴性（%）确证可疑（疑似感染）备注华信罗氏化发701041（58)19（3）阴性，Max:21；可疑,Max:7.8；阳性,Min:171望京梅里埃4代36523（63)8（3）中日金豪583014（24)14（5）北医三院罗氏化发711231（43)28（4）梅里埃4代551022（40)23（4）雅培化发22地坛医院 梅里埃4代26522013(6)32（16）皮肤科，新发病例多2012年北医三院罗氏化发55542(76)8（1）阴性，Max:31.35；可疑Max:13.4雅培化发6312协和雅培化发4831413（7）阳性Min：6.61；阴性Max：3.652012年罗氏和雅培化学发光确证结果的比较根据病例属性情况，选择适宜的筛查试剂；没有最好的试剂，要选择最适合的试剂。初筛试剂筛查阳性确证阳性确证阴确证阴性（性（%）确证可疑（疑似感染）备注罗氏化发1112363（56）25（4）阴性，Max:31.35；可疑,Max:76.4；阳性,Min:49.2雅培化发147109 12（8）26（9）阴性，Max:143.25和52.8（同仁医院）；可疑,Max:139（p24）和36.42（p66）；阳性,Min:6.6和10.21统计数据截止到2012-4-10HIV抗体不确定病例排查HIV抗体不确定病例(特殊病例)的排查，可以通过核酸检测予以辅助诊断，尤其是手术病例；可联系协和医院、地坛医院、佑安医院送检，约1300元/例；协和医院：韩扬，65295048地坛医院：宋淑静，84322434佑安医院：魏飞力，83997354302医院：王海滨，66933129-6245谢谢！以下为附加内容不需要的朋友下载后可以编辑删除，谢谢以下为附加内容让更多的农民成为新型职业农民中央农业广播电视学校中央农业广播电视学校 刘天金刘天金20130507 陕西 农业部部长韩长赋：这是一项基础性工程、创新性工作，要大抓特抓、坚持不懈。让更多的农民成为新型职业农民（目标）生产更多更好更安全的农产品供给社会（方向）一、为什么要大力培育新型职业农民二、什么是新型职业农民三、如何加快培育新型职业农民一、为什么要大力培育新型职业农民（一）深刻背景农村劳动力持续转移农村劳动力持续转移,“,“人走村空人走村空”问题愈演愈问题愈演愈烈烈 2012年我国农民工数量达到2.62.6亿亿，每年新增900-1000900-1000万万。四川抽样调查：26%26%举家外出农户20%20%留守农户转移比例平均60%60高的70-80%70-80%一、为什么要大力培育新型职业农民（一）深刻背景农农村村青青壮壮年年劳劳动动力力大大量量外外出出，“老老人人农农业业”“”“妇女农业妇女农业”“”“小学农业小学农业”问题日益凸显问题日益凸显陕西抽样调查：72%72%“80后”“90后”青壮年劳动力（农民工）5555岁岁 务农农民平均年龄63%63%妇女83%83%初中及以下文化程度 四川抽样调查：务农农民50岁以上54%，60岁以上30%，70岁以上13%；妇女60%；初中及以下90%。一、为什么要大力培育新型职业农民（一）深刻背景农村新生劳动力离农意愿强烈，农业后农村新生劳动力离农意愿强烈，农业后继乏人问题步步紧逼继乏人问题步步紧逼新生代农民工76%76%不愿再回乡务农85%85%从未种过地（国家统计局2010年10省调查：90%的新生代农民工没有从事过一天的农业生产活动）一、为什么要大力培育新型职业农民（二）紧迫课题“谁来种地谁来种地”“”“地如何种地如何种”？党党的的十十八八大大：坚持和完善农村基本经营制度，构建集约化、专业化、组织化、社会化相结合的新型农业经营体系。国国务务院院常常务务会会议议：要采取有效措施，使一部分年轻人愿意在农村留下来搞农业，培养和稳定现代农业生产队伍。中中央央经经济济工工作作会会议议、中中央央农农村村工工作作会会议议：要稳定完善强农惠农富农政策，充分保护和调动农民生产经营积极性，使务农种粮有效益、不吃亏、得实惠。20132013年年中中央央一一号号文文件件：农村劳动力大量流动，农户兼业化、村庄空心化、人口老龄化趋势明显，农民利益诉求多元，加强和创新农村社会管理势在必行。十十二二届届全全国国人人大大一一次次会会议议（政政府府工工作作报报告告）：要采取有效措施，稳定农业生产经营队伍，积极培育新型农民。聚焦聚焦“谁来种地谁来种地”“”“地如何种地如何种”一、为什么要大力培育新型职业农民（二）紧迫课题“谁来种地”“地如何种”是一个问题的两个方面 农村劳动力结构性不足：“不是不是没人种地，而是这地由什么人来种没人种地，而是这地由什么人来种”创新农业生产经营方式：“不是不是种不过来，而是怎么种得更好种不过来，而是怎么种得更好”一、为什么要大力培育新型职业农民（三）历史使命回回答答好好“谁谁来来种种地地”“”“地地如如何何种种”的的问问题题，历历史史性性地地落落在在了了培培育育新新型型职职业业农农民民上。上。2012年中央一号文件聚焦农业科技，着力解决农业生产力发展问题，明确提出大力培育新型职业农民；2013年中央一号文件突出农业经营体制机制创新，着力完善与现代农业发展相适应的农业生产关系，进一步强调加强农业职业教育和职业培训。创新农业生产经营方式创新农业生产经营方式（现代）家庭经营+合作组织+社会化服务 =新型农业经营体系新型职业农民 新型生产经营主体 新型农业经营体系 现代农业 新型职业农民新型职业农民是伴随农村生产力发展和生产关系完善产生的新型生产经营主体，是构建新型农业经营体系的基本细胞基本细胞，是发展现代农业的基本支基本支撑撑，是推动城乡发展一体化的基本力量基本力量。一、为什么要大力培育新型职业农民（四）重大意义不失时机地大力培育新型职业农民：一一是是有有利利于于促促进进农农民民从从身身份份向向职职业业的的转转变变，在推动城乡发展一体化中加快剥离“农民”的身份属性，使培育起来的新型职业农民逐步走上具有相应社会保障和社会地位的职业化路子，解决有人愿意在农村留下来搞农业的问题；一、为什么要大力培育新型职业农民（四）重大意义不失时机地大力培育新型职业农民：二二是是有有利利于于促促进进农农民民从从传传统统农农业业生生产产向向现现代代农农业业生生产产经经营营的的转转变变，在加大强农惠农富农政策力度中加快发展现代农业，使培育起来的新型职业农民逐步走上专业化、规模化、集约化、标准化生产经营的现代化路子，解决务农种粮有效益、不吃亏、得实惠的问题；一、为什么要大力培育新型职业农民（四）重大意义不失时机地大力培育新型职业农民：三三是是有有利利于于促促进进农农民民从从传传统统小小农农生生产产向向社社会会化化大大生生产产的的转转变变，在坚持和完善农村基本经营制度中加快培育新型生产经营主体，使培育起来的新型职业农民逐步走上“家庭经营+合作组织+社会化服务”新型农业经营体系的组织化路子，解决保供增收长效机制的问题。培育新型职业农民的过程，就是激活农民自身活力和增强农业农村发展活力的过程，就是培养高素质现代农业和新农村建设者的过程，就是培育“三农”事业发展未来的过程。农业部部长韩长赋农业部部长韩长赋 应对农业后继乏人问题的挑战，必须在稳定提高农业比较效益的基础上，大力培育种养大户、家庭农场、专业合作社等各类新型农业经营主体，让更多的农民成为新型职业农民。世界性课题世界性课题比如在英国，农场主平均年龄达到59岁。欧盟一直关注农民老龄化和培养青年农民问题，在CAP新一轮改革议案中提出，将2%的直接支付专门用于支持40岁以下的青年农民从事农业。世界性课题世界性课题法国经验 统筹农村劳动力转留 加强农业后继者培养 重视农业劳动力教育培训 切实把培育新型职业农民放在三农工作突出位置予以推动落实。农村劳动力向城镇和二三产业转移，是伴随现代化进程的必然趋势。目前我国农业劳动力供求结构已进入总量过剩与结构性、区域性短缺并存新阶段，关键农时缺人手、现代农业缺人才、新农村建设缺人力问题日显普遍，“谁来种地”“地如何种”事关13亿人的饭碗。各级农业部门要把培育新型职业农民作为一项重要职责和基本任务，积极争取当地政府和有关部门的重视支持，将其放在三农工作的突出位置，坚持“政府主导、农民主体、需求导向、综合配套”的原则，采取更加有力的措施加以推动落实，培养和稳定现代农业生产经营者队伍，壮大新型生产经营主体。二、什么是新型职业农民（一）基本表述 传统农业向现代农业转型，必然要求传统农民向新型职业农民转变。从我国农村基本经营制度和农业生产经营现状及发展趋势看，新型职业农民是指以农业为职业、具有新型职业农民是指以农业为职业、具有一定的专业技能、收入主要来自农业的一定的专业技能、收入主要来自农业的现代农业从业者。现代农业从业者。二、什么是新型职业农民（二）主要类型生产经营型：生产经营型：专业大户、家庭农场主专业技能型：专业技能型：农业工人、农业雇员等社社会会服服务务型型：农村信息员、农产品经纪人、跨区作业农机手、统防统治植保员、村级动物防疫员等农业社会化服务人员