结核病实验室诊断现状.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,结核病实验室诊断现状,主要内容,一、患者发现,二、结核病控制对实验室的要求,三、结核病实验室诊断现状,四、结核病实验室存在的问题,五、结核实验室诊断的主要难题,六、十二五结核病实验室建设,结核病难上加难！,筛查,/,诊断,/,确诊难,PPD,医学检验,X,线,临床症状,传染,/,传播性强,呼吸道,飞沫传播,1,人,-10-15,人,并发症,/,合并症,糖尿病,艾滋病,发现难,症状隐匿,/,多样,早期症状轻微,-,易漏诊,咳嗽、咳痰、低热,起病缓慢,-,病程长,全程难,治疗难,耐多药肺结核,结核病流调,-疫情显示,结核病,疫情特征,人群筛查,缺少可靠的实验室筛查技术,菌阴占多数,菌阴肺结核患者多,临床诊断,临床诊断难度加大,无症状,无症状患者比例,明显增加,结核病难上加难！,一、患者发现,2012,年全国结防机构登记活动性肺结核患者,894199,例，登记率,66.37/10,万，涂阳患者,358149,例（占,40.05%,，登记率为,26.58/10,万），,涂阴患者,508620,例,（占,56.88%,）未查痰,2073,例（占,0.23%,），结核性胸膜炎,25357,例（占,2.84%,），,与,2011,年相比涂阳减少,65681,例，,涂阴增加,53960,例,2012,年登记的耐多药肺结核患者共,2731,例,患者发现,2012,年全省结防机构登记活动性肺结核患者,47334,例，登记率,82.70/10,万，涂阳患者,21339,例（占,45.08%,，登记率为,37.28/10,万），,涂阴患者,25731,例,（占,54.36%,），未查痰,12,例（占,0.03%,），结核性胸膜炎,252,例（占,0.53%,），与,2011,年相比,涂阳减少,4812,例，涂阴增加,5427,例,2012,年湖北省登记耐多药肺结核患者,210,例,患者发现,据,WHO,估算，每年新发,MDR-TB,患者,50,万，,XDR-TB 5,万，目前检测到的耐多药结核病病例仅占全球负担的,5%,，广泛耐药结核病（,XDR-TB,）则更低,依据我国第,5,次结核病流行病学调查结果。我国结核病患者中,涂阳患者占,14,4,(118,1310),，,菌阳,(,涂阳或培阳,),患者占,26,5,(347,1310),，菌阴患者占,73,5,(963,1310),根据,07-08,耐药监测结果估算，我国每年新发,MDR-TB,患者,12.1,万，,XDR-TB 1,万,提示虽然实验室发现了大量患者，但诊断技术与能力仍然缺乏,二、结核病控制对实验室的要求,结核病正确诊断是发现、治疗和管理结核病患者的基础。实验室诊断起着重要的作用，特别是细菌学诊断,WHO1995,年把,DOTS,策略作为全球结核病控制策略，肺结核症状可疑者使用痰涂片检查发现传染性患者是,DOTS,策略,5,要素之一,2005,年提出的遏制结核病策略，仍然将采用细菌学方法发现患者作为要素之一，并提出协作研发新型诊断技术,对实验室的要求,当前，抗酸菌涂片镜检、结核分枝杆菌分离培养和药物敏感性试验等常规方法仍然是发达国家和发展中国家细菌学诊断的主要方法，它不仅是发现传染源的最主要手段，也是确诊结核病、选择治疗方案、考核疗效以及评价防治效果的可靠指标,对实验室的要求,目前的常规实验室方法虽各有长短，但总体上仍不能满足结核病诊断的要求。快速、准确、简便和低廉的实验室诊断技术一直是人们不知疲倦追求的目标。特别是，近年来人们将控制潜伏性感染或是临床前期感染作为控制结核病的早期策略之一，这些对实验室工作提出了较高的要求,对实验室的要求,在发达国家，由于结核病疫情低，具有特征性的持续咳嗽、发热等症状已经不再是疑似结核病的可疑症状，在这些国家需要：,能够在高危险人群中确定潜伏性感染的方法,能够替代,x,线光片和痰涂片来发现移民和其他高感染风险人群中活动性结核病的措施,能够替代传统培养方法的早期诊断手段,能够快速便捷的区别医源性感染和社区获得性感染的指纹分析手段,能代替生化方法来进行菌种鉴定的新技术。,对实验室的要求,在发展中国家，尤其是结核病高负担国家，结核病暴露史已经很难进行确定和评估，一些免疫学方法也在实验室诊断中起着一定的作用，如血清学方法，但是，广泛的卡介苗,(BcG),接种和,HIV,感染影响了一些血清学方法的特异性。对于寻找快速、可信、简便的方法来替代现行的涂片显微镜检查的需求不很迫切，这些国家的需要倾向于：,较传统培养方法更敏感、快速、简便的手段来诊断涂阴肺结核和无症状的结核病患者,在耐药结核病高流行国家需要快速、可靠、廉价的方法来发现耐药结核病患者,在,HIV,感染者中简便的筛查结核病患者的方法,三、结核病实验室诊断现状,1,、发达国家的结核病实验室诊断现状,涂片常规镜检、分离培养和药物敏感性试验仍然是大多数发达国家临床实验室诊断技术的主流,与此同时一些快速诊断技术如基于液体培养的方法、核酸杂交、,16s,核糖体基因的测序、应用,HPLc,对细胞壁脂质,(,分枝菌酸,),的分析、核酸扩增检测（,NAAT),，以及荧光原位杂交和噬菌体生物扩增技术等方法也成为他们的常规方法,免疫学检测方法也取得不错的结果，特别是,干扰素释放试验在发达国家得到了较广泛的应用,测序技术在药敏检测中得到应用,1,、发达国家的结核病实验室诊断现状,基因分型技术在发达国家被广泛使用，主要方法有：限制性酶切片段长度多态性,(IS6110,一,RFLP),、数目可变的串联重复序列,(VNTR),、分枝杆菌散在重复单位分型,(MIRU),、间隔区寡核苷酸分型,(Spoligotyping),，单核苷酸多态性分析,(SNPS),、长片段多态性,(LSP),以及缺失图谱等方法,在一定条件下可以追溯和确定传染源，鉴别未知传播，发现和鉴别培养的假阳性,2,、发展中国家结核病实验室诊断现状,从全球来看，结核病的高负担国家主要集中在发展中国家，由于经济发展程度所限，已经被使用了百余年的痰涂片显微镜检查技术和分离培养技术仍然是发展中国家结核病实验室诊断体系中所采用的主要方法,尽管痰涂片显微镜检查在,HIV,高流行地区其灵敏度不是很高，但是其简便、价廉并能够检测出传播意义更为重要的排菌患者,wHO,在发展中国家仍然推荐使用涂片镜检作为结核病控制规划中患者发现的基本手段，在这些国家，只是在少数地区的实验室能开展分离培养和药物敏感性试验等,3,、我国结核病实验室诊断现状,我国结核病实验室诊断体系已经建立多年，总体上由三部分组成,第一，国家、省、地市和县级结核病控制体系中的实验室，对结核病控制工作做出了重要贡献，在体系中地市、县结核病实验室（包括近两年出现的定点医院实验室）当前以涂片镜检为主要技术手段，部分县市开展了培养，部分地市开展了药敏和分子生物学快速诊断技术,我国结核病实验室诊断现状,第二，结核病专科医院的临床细菌学实验室，开展涂片镜检、分离培养和药物敏感性试验等较为全面的细菌学方法，也能采用快速培养、分子生物学技术及免疫学检测技术对于一些特殊病例进行鉴别诊断,第三，综合医院中的结核病实验室（很少有），很少开展或不常开展细菌学检查，多采用一些可靠性不高的免疫学检测进行实验室诊断,设备名称,全球基金项目,中盖结核病项目一期,中盖结核病项目二期,我省情况,LED,30,个省,89,个地市,908,个县区,1027,台,3,个省,4,个地市,6,个县区,14,台,4,个省,4,个地市,25,个县区,46,台,全覆盖,Hain,30,个省,89,个地市,125,台（,NTRL1,台）,4,个省,4,个地市,4,台,2,个省,2,个地市,5,台（,NTRL1,台）,省本级及,4,地市共,5,台,Genechip,无,4,个省,4,个地市,4,台,1,个省,1,个地市,3,台,省本级及,4,地市共,6,台,GeneXpert,30,个省,89,个地市,865,个县区,934,台,2,个省,3,个地市,4,个县区,尚未采购,省级及全球基金项目县共,39,台,新型检测技术应用情况,-1,设备配备情况,设备配备情况,其他,达米恩项目：为贵州贵阳、青海西宁地市级及所辖县区配备,LED,荧光显微镜,梅里埃项目：为广西柳州、新疆喀什地市级及所辖县区配备,LED,荧光显微镜,省级经费：,液体培养自动化检测系统：北京、上海、河南、浙江等,LED,荧光显微镜：湖北、山东、浙江等,基因芯片：湖北,新型检测技术应用情况,-2,中盖项目试点地区,新诊断技术组合模式,镇江市,Hain,组合方案：,县级采用,LED+,胸片,+,临床检查的方案进行诊断，并对涂阴患者做培养；地市级对涂阳的痰标本或涂阴培阳的菌株开展,Hain,耐药快速检测；经耐药快速检测诊断为利福平耐药的患者进一步开展二线抗结核药物传统药敏试验，检测其广泛耐药性。,宜昌市,Genechip,组合方案：,县级采用,LED+,胸片,+,临床检查的方案进行诊断，并对涂阴患者做培养；地市级对涂阳的痰标本或涂阴培阳的菌株开展,Genechip,耐药快速检测；经耐药快速检测诊断为利福平耐药的患者进一步开展二线抗结核药物传统药敏试验，检测其广泛耐药性。,汉中市,Hain,组合方案：,县级采用,LED+,胸片,+,临床检查的方案进行诊断；地市级对涂阳的痰标本开展,Hain,耐药快速检测；经耐药快速检测诊断为利福平耐药的患者进一步开展二线抗结核药物传统药敏试验，检测其广泛耐药性。,新型检测技术应用情况,-3,关于,Hain,和基因芯片的建议,适用于地区及以上级实验室,仅适用于涂阳标本和结核分枝杆菌阳性培养物的检测,操作需要至少有,3,个独立的实验室以避免交叉污染,仅能检测,MDR,，,XDR,的检测仍需要依靠传统药敏试验,可以独立作为,MDR,的诊断工具,对于,MDR,病人，仍需要传统的培养（固体或液体培养）检测治疗效果（培养阴转）,临床报告必须取得省级临床检验中心颁发的,临床基因扩增实验室,许可证,建议的覆盖面,:,每,50,100,万人口至少需要,1,个,LPA,实验室或基因芯片实验室，就我国目前实际情况,100,万人口地市的级建立一个相应实验室是可行的,Xpert MTB/RIF,检测结核分枝杆菌,检测利福平耐药,直接标本检测,100,分钟可获得结果,WHO,关于,Xpert MTB/RIF,的,建议,Xpert MTB/RIF,应该用于怀疑,MDR-TB,的病人、以及,HIV,合并结核的病人的最初诊断（强烈推荐）,Xpert MTB/RIF,在,MDR,或,HIV,问题不十分严重的地区，可以考虑作为显微镜检查基础之上的后续检测，特别是用于涂阴,标本,的进一步检测（根据具体情况推荐，需考虑当地的资源）,说 明,WHO,在“201 1,年全球结核病控制报告”中对该试剂的评估结论为：单次,XpertMTB,RIF,检测可检出,99,的涂片阳性,(,简称涂阳,),和,80,的涂片阴性,(,简称涂阴,),肺结核病患者。但有文献报道，单次,XpertMTB,RIF,检测,涂阴培阳,样本的检出率分别为,72,5,和,76,9,。由于涂阴患者包括涂阴培阳、涂阴和培养阴性,(,简称培阴,),两种类型，而涂阴培阴患者的检出率必然低于涂阴培阳患者，因此，该报告中,XpeftMTB,RIF,的,MTB,涂片阴性患者阳性检出率较实际值偏高,说 明,涂阴特别是涂阴培阴患者的诊断有进一步探讨的必要，根据该检测试剂公开发表的数据，该试剂的敏感度研究均以培养或涂片阳性作为判断标准。涂阳培阳样本检出率为,99,8,，培阳样本的检出率也高达,90,，具有高敏感度。根据我国第,5,次结核病流行病学调查结果，以我国痰菌阳性,(,简称菌阳,),患者占患者总数,26,4,进行推算，该试剂的理论检出率仅为,23,7,；我国结核病涂阴培阴患者占患者总数的,73,6,说 明,Xpert MTB/RIF,适用于痰标本（包括去污染后的痰标本），肺外标本应用,Xpert MTB/RIF,的研究十分有限。,增加检测次数可能会增加,Xpert MTB/RIF,的敏感性，但是需要考虑资源情况,上述建议也适用于儿童,不能取代传统的涂片检查、培养和药敏试验（治疗监测、流行病学调查、其他一线药物以及二线药物的药敏试验）,在,MDR,低风险组（如新病人）,Xpert MTB/RIF,检测结果为利福平耐药者，建议用传统药敏试验或,LPA,进行确认,新检测技术验证评估与应用,完成评估,国产环介导核酸等温扩增试剂盒,新型检测检术应用情况,-4,其他正在开发或评估的新技术,方法,商品,检测目的,流体芯片法,MDR-TB,检测,荧光定量,PCR,溶解曲线法,检测,MDR-TB/XDR-TB,MODS,（显微镜观察药敏实验）,无商品化试剂盒,检测分枝杆菌的药物敏感性,噬菌体生物扩增法,诊断结核感染及药物敏感性,新的固体药敏方法,硝酸盐还原试验（无商品化试剂盒）,诊断菌株对异烟肼和利福平的敏感性,薄层琼脂培养法（无商品化试剂盒）,诊断结核感染以及对异烟肼和利福平的敏感性,颜色指示方法,刃天青法（无商品化试剂盒）,检测菌株对利福平和异烟肼的敏感性,分子水平,线性探针杂交（,LiPA,）,基因芯片法（,Genechip,）,多重连接再扩增（,MLPA,）,变性高效液相色谱（,DHPLC,）,质谱（,MALDI-TOF MS,）,焦磷酸测序（,Pyrosequencing,）,实时,PCR,（,Real-time PCR,）,线性探针（,V2),多色巢式荧光定量,(GenXpert),分子诊断技术,免疫学诊断,结核菌素试验：,用于流调、卡介苗接种、筛查、临床诊断与鉴别诊断，但,PPD,有多种分枝杆菌的蛋白成分，因而特异性差，且结果观察不便,结核抗体测定,：,结核抗原测定,：,能早期检测，技术简便快捷，但难以获得高特异性的抗体，目前尚缺乏结核抗原检测试剂,细胞因子检测,：,免疫学诊断,结核抗体测定,:,结核分枝杆菌感染机体，患者或有特异性,IgG,、,IgM,、,IgA,形成，联合检测可提高灵敏性,优点：,简便快速，有一定的敏感性和特异性，对结核病的诊断与鉴别诊断有参考价值,缺点：,假阳性较高，没有单一抗原被所有患者识别,总的来说，结核病患者的抗体反应是不完全相同的，,要求设计一个由多种抗原组成的鸡尾酒式的结核病血清学诊断试验。,具有灵敏度高和特异性强的结核病血清学诊断试剂要求由多种抗原的混合体构成,因此以后的研究方向是筛选各种特异性强、灵敏度高的抗原组成混合抗原，研制结核病血清学诊断试剂。有很多研究者已经进行或正在进行这方面的研究，相信在不久的将来这种研究成果可以应用于临床，服务于结核患者,免疫学诊断,1,个决定性因素,-,抗原,特异性,/,灵敏度,潜伏,/,感染初期,活动性肺结核,脂阿拉伯甘露聚糖（,LAM,）抗原,敏感性,63%,；特异性,92.4%,作为属特异性抗原的脂阿拉伯甘露聚糖,是分枝杆菌细胞壁的重要组成，拥有较,强免疫原性与免疫调价的功能，能刺激,机体促进相应抗体产生，故可作为为结,核病血清学诊断抗原，应用较广泛。,对,活动性肺结核患者的检测敏感性为,63.0%,特异性达,92.4%,，提示,LAM,抗体检测不失,为一项结核病辅助诊断的有效方法,U1,蛋白,-,早期,/,特异性,U1,蛋白（,Urine Protein 1),为,Mukherjee,等收,集结核分枝杆菌,H37Rv,株静脉感染,C57BL/6,小鼠,早期（,10-14,天）尿液中分离得到的结核抗原，,经氨基酸测序鉴定后，克隆表达获得可溶性重,组蛋白，分子量约为,16.8KDa,。以,ELISA,法检测,肺结核患者血清中,U1,抗体，显示其敏感性为,60%,对合并,HIV,感染的结核病患者进行检测的敏感性,为,87%,，正常人血清则不与,U1,蛋白产生反应。,38KDa,与,16KDa,敏感性提高,11.1%,联合检测可提高,11.1%,的敏感性。,结核分枝杆菌抗原多而复杂，在宿主体内表达的数量、种类或时机可能随病人的个体免疫背景和病程而异，表现出不同的抗原抗体谱。检测时有的抗原不表达，未检测出相应的抗体；有的抗体含量高，有的则低。,产品核心优势,关于,4,种抗原的学术研究进展,是,a-,晶状小分子热休克蛋白家族的成员。该蛋白携带有结核 杆菌特异性的,B,细胞表位，用单克隆抗体检测发现其至少存在四种不同的抗原 决定簇，能诱导特异的体液免疫应答。,14KDa,蛋白在感染初期就具有明显的免疫原性,14KDa,蛋白,-,感染初期,免疫学诊断,细胞因子检测,细胞因子,:,是由细胞分泌，影响细胞生物学行为、调节免疫功能和对炎症反应的一类物质，被广泛研究的有,TNF-,（,肿瘤坏死因子,-,）、,白细胞介素和干扰素等,肿瘤坏死因子,-,参与了结核病的发病过程，与结核病产生的炎症反应程度有关，为重要的前炎症因子和免疫调节因子。国内研究表明，结核病活动期患者血清,TNF-,水平较健康对照组明显升高,免疫学诊断,-,干扰素释放试验：目前研究认为,：,一、特异性高，不受卡介苗和非结核分枝杆菌的干扰，同时也不受能导致类结核症状的其他病原的影响,二、敏感性好，特别是对菌阴肺结核和肺外结核有,90%,以上的检出率,三、非人体试验，不随访，结果判断客观四、检测到,-,干扰素浓度的高低认为与体内感染结核杆菌的载量多少相关,五、无法区分是否活动性结核，在高流行地区，检测阴性结果排除结核的意义更大,六、价格高，广泛应用有一定的难度,四实验室存在的问题,1,、结核病防治体系的变革，为结核病实验室网络建设提出了新课题,疾控中心结核病实验室能力 出现弱化现象：职能定位不清，责、权、利不明，人员减少，设施、设备缺乏，无日常工作，熟练度不能保证，新技术推广无经费及基础,定点医疗机构结核病实验室工作处于初始阶段，医院对实验室定位不清，资质不完备，实验条件不够，人员不够、能力欠缺，相关检测项目收费局限，开展检测项目意愿不高，质量意识薄弱,存在的问题,2,、实验室生物安全问题：根据我国,病原微生物实验室生物安全管理条例,和,实验室生物安全通用要求,的规定，卫生部印发的,人间传染的病原微生物名录,的要求，对于结核分枝杆菌大量活菌操作须在符合生物安全三级,(BsL_3),的环境中进行，而对于样本检测：包括样本的病原菌分离纯化、药物敏感性试验、生化鉴定、免疫学实验、,PcR,核酸提取、涂片、显微观察等初步检测活动，可以在符合生物安全二级,(BsL_2),的环境中进行，许多实验室不能达到生物安全的要求,存在的问题,3,、合格实验标本的采集,4,、实验室人员结构和能力建设,5,、适应现在需要的结核病实验室检验规程、规范的编印出版及推广应用不够，造成实验结果的可靠性和互认程度不高,6,、新技术的评估、选择和应用,新技术评估，对照标准选择的科学性存在偏差,新技术应用存在某些限制因素,硬件设施的要求、资质的要求、人员能力,费用较高,与传统技术相结合,7,、整体应急能力较弱,缺乏快速、准确的储备技术,存在的问题,8,、质量保证体系的建立和完善,传统方法质量保证体系还有待进一步完善和在疾控及医疗系统的推广及应用的,分子生物学等新技术、新方法的质量保证体系尚待建立,新技术设备,/,试剂，评估，推广应用后迫切需要有效的质量保证体系,9,、整体科研能力有待于提升,基础性研究 实施性研究,存在的问题,五结核实验室诊断的主要难题,1,涂阴肺结核实验室诊断、,潜伏感染L,atent TB infection，LTBI),的,诊断,、没有简便、准确、可靠、单一的方法,2,、结核合并,HIV,感染患者诊断困难，结核病是,患者最常见的感染性疾病，也是,最常见的死亡原因。,可促使结核病发病，,感染后易迅速发展，播散，死亡率极高，同时由于患者免疫功能缺陷，实验室诊断效率较低,3,、,MDRTB,和,XDRTB,的产生与流行，凸显出对结核病进行快速、有效诊断和治疗的重要性,主要难题,4,、小儿结核与老年结核病诊断困难小儿结核的一个最大特点是带菌量少，细菌学检测方法不易检出，的小儿结核患者细菌学检查呈阴性，若合并感染,，则诊断更难；老年结核诊断难的主要原因是临床表现不典型，常合并其他严重疾病而掩盖了结核病情，同时免疫功能低下也使实验室诊断方法（如,）应用于老年结核诊断时，检测灵敏度一般都较低,主要难题,5,肺外结核诊断困难肺外结核病发生在肺部以外各部位，如不及时诊断治疗会造成脏器功能受损，甚至危及生命。其诊断困难的原因有：患者的病情往往被其他病症所掩盖，就诊时极易误诊，如脑结核易误诊为脑膜炎等；病灶取材不方便，难以获得细菌学证据；相当大一部分肺外结核患者免疫功能低下或缺陷，很多实验室诊断方法使用时灵敏度较低,6,突破性的结核病实验室诊断新技术,六、十二五结核病实验室建设与发展规划,目的,建立健全全国结核病实验室网络服务体系，提高各级结核病实验室服务质量和水平,提高结核病的早期、快速诊断能力,十二五结核病实验室总体目标,1,、,100%,的省级参比实验室具备分子生物学诊断和快速菌种鉴定能力,2,、,100,的地（市）级实验室具备药物敏感性试验能力,3,、,80,的区（县）级实验室具备分枝杆菌培养能力,4,、县级以上医疗机构的结核病实验室纳入网络服务体系，建立全国结核病实验室网络信息服务平台,结核病实验室主要工作指标,1,结核病实验室生物安全二级（,BLS,2,）达标率,:2011,年，,100%,的省级结核病实验室达到,BLS,2,，地（市）级和（区）县级从,2011,年开始，每年递增,20,，至,2015,年达到,100%,2,省级结核病实验室计量认证达标率,:2011,年达到,10,，逐年递增,20,，,2015,年达到,90,3,省级结核病实验室,ISO 15189,或,ISO 17025,认证达标率,:2011,年达到,10%,逐年递增,10,，,2015,年达到,50,4,实验室质量保证：至,2015,年，省级实验室和地（市）级实验室的抗结核药物敏感性试验室间质量评估覆盖率均达到,90%,；至,2015,年，,100,县级以上医疗机构结核病实验室检测纳入国家结核病实验室质量保证体系,各级实验室的职能及要求,县区级结核病实验室职能及要求,地市级结核病实验室职能及要求,省级结核病实验室职能及要求,县区级结核病实验室职能及要求,职能 涂片、培养、督导,方法 涂片、培养的标准化操作流程,房屋 最少两间,设备、设施,生物安全柜、显微镜、恒温培养箱、冰箱、高压灭菌器等；,人力资源,2-3,人,地市级结核病实验室职能及要求,职能：涂片、培养、药敏试验、菌种鉴定、督导、培训、质控，有条件的地市开设快速诊断方法；,房间：至少,3,间，如开展快速检测方法还应有适宜的、按照功能分区的基因扩增实验室；,设备、设施：生物安全二级、三级实验室，有开展传统检测方法的必须设备，开展快速检测的，应有基因扩增和相应的检测设备；,人力资源：至少,5,人,省级结核病实验室职能及要求,职能：规划省级实验室工作，制定省级网络建设和发展计划。开展传统和快速检测方法并进行相应的督导、质控和技术指导工作，接受国家级及跨国参比室的各项质控。,房间：至少,5,间，面积不少于,150,平方米。,设备、设施：生物安全二级、三级实验室，有开展传统检测方法的必须设备，开展快速检测的，应有基因扩增必需的区域和相应的设备；,人力资源：至少,10,人,全国结核病实验室网络,国家结核病参比室,卫生部临检中心,省家结核病参比室,省级临检中心,地市实验室,县市实验室,县市医疗机构结核病实验室,省级医疗机构结核病实验室,地市医疗机构结核病实验室,谢谢,