食品安全亚硝酸盐和硝酸盐的测定.pptx

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,食品中亚硝酸盐与硝酸盐,测定,第1页,一、方法适用范围及原理,亚硝酸盐采取盐酸萘乙二胺分光光度法测定，方法检出限为,1mg/kg,定量限为,3mg/kg,。,硝酸盐采取镉柱还原法测定，方法检出限为,10mg/kg,，定量限为,30mg/kg,。,第2页,方法原理,试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸性条件下,，,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，与标准,系列,比较定量。,采取镉柱将硝酸盐还原成亚硝酸盐，测得亚硝酸盐总量，由此总量减去亚硝酸盐含量，即得试样中硝酸盐含量。,第3页,二、试验准备,（一）试剂配制,（二）标准溶液配制,（三）主要仪器,（四）镉柱,第4页,（一）试剂配制,试验用水应为蒸馏水、纯净水或去离子水，不能用自来水。,购置试剂时要注意试剂名称和分子式是否与标准方法一致。比如：,亚铁氰化钾,K,4,Fe(CN),6,.3H,2,O,、,乙酸锌,Zn(CH,3,COO),2,.2H,2,O,、,硼酸钠,Na,2,B,4,O,7,.10H,2,O,、,对氨基苯磺酸,C,6,H,7,NO,3,S,、,盐酸萘乙二胺,C,12,H,14,N,2,.2HCL,第5页,氨缓冲溶液：量取,30mL,盐酸，加,100mL,水，混匀后加,65mL,氨水，再加水稀释至,1000mL,，混匀。,调整,pH,至,9.6,9.7,（用,PH,计）。,氨缓冲液稀释液：量取,50mL,氨缓冲溶液，加水稀释至,500mL,，混匀。,第6页,（二）标准溶液配制,购置固体标准，应注意亚硝酸钠（NaNO2）、硝酸钠（NaNO3）均应为优级纯（GR），称量前，必须在硅胶干燥器中干燥二十四小时以上。,购置液体标准溶液，应注意其标示浓度是以N计、以NO2-计、以NO3-计，最终结果均应换算成 以NaNO2计。,第7页,亚硝酸钠、硝酸钠标准贮备溶液（,200g/mL,，以,NaNO,2,计）应置棕色瓶中,5,以下,冷藏保留，使用期,6,个月。,亚硝酸钠、硝酸钠标准使用液（,5.0g/mL,、以,NaNO,2,计）、必须临用前现配。,第8页,（三）主要仪器,小型绞肉机、粉碎机、匀浆机天平：感量为,0.1mg,和,1mg,。,分光光度计：,2cm,比色皿。,镉柱,第9页,（四）镉柱制备,投入足够锌皮或锌棒于,500mL,硫酸镉溶液,(200g/L),中，放置,3h,4h,。,当镉全部被锌置换后，用玻璃棒轻轻刮下，取出残余锌棒，使镉沉底，倾去上层清液，,以水用倾泻法屡次洗涤（,10,次以上）,。,移入组织捣碎机中，加,500mL,水，捣碎约,2s,，用水将金属细粒洗至标准筛上，取,20,目,40,目之间部分（颗粒大小约同食用盐）。,第10页,第11页,（四）镉柱装填,先用水装满镉柱玻璃管，然后装入,2cm,高玻璃棉做垫，将玻璃棉压向柱底时，,应将其中所包含空气全部排出。,在轻轻敲击下加入海绵状镉至,8cm,10cm,高，上面再用,1cm,高玻璃棉覆盖，上置一贮液漏斗。,第12页,当镉柱填装好后，先用,25mL,盐酸,(0.1mol/L),洗涤，再以水洗两次，每次,25mL,。,镉柱不用时，必须用水封盖，随时都要保持水平面在镉层之上，不得使镉层夹有气泡。,如无上述镉柱玻璃管时，能够,25mL,酸式滴定管代替。,第13页,三、,样品接收,收样人应认真检验样品包装和状态，若发觉异常，应与送样人达成处理决定。,送样量不能少于要求数量，最少不能少于测试用量三倍。,样品应编号登记，加施唯一性标识，确保不一样检测状态和传递过程中样品不被混同。,第14页,四、样品制备和保留,一）样品制备,（二）样品保留,第15页,（一）样品制备,已粉碎样品（盐菜末等），应,使用圆锥四分法（堆成圆锥体,压成扁平圆形,划两条交叉直线分成四等份,取对角部分）进行缩分。,未粉碎样品（腌咸菜、腌萝卜条等），,应间隔一定距离取多份小块四分法进行缩分。,已切成片或块禽肉类样品（排骨、鸡爪等），先室温解冻，四分法缩分。,整块,禽肉类样品（腊肉、烤鸭等）在不一样部位切取小片或截取小段四分法缩分。,第16页,（一）样品制备,将缩分后样品四分法分成二份，一份作留样备用（,100g,），另一份切细后用捣碎机捣碎混匀供分析,(50g),。,当送样量不能满足留样要求时，全部粉碎混匀，在确保分析样用量后，全部用作留样。,第17页,样品应冷藏储运，在送达试验室后要尽快测定。,蔬菜类样品应用食品塑料袋装好，在,5,以下冰箱冷藏保留,。,禽肉类样品应用食品塑料袋装好，在,-18,以下冰柜或冰箱冷冻保留。,（二）样品保留,第18页,五、试验步骤,（一）试样前处理。,（二）试剂空白制备。,（三）标准曲线制备。,（四）测定。,第19页,（一）试样前处理,硼砂饱和液作用：,硼砂溶入水中，即被水解为等量硼酸与硼酸二氢钠，起缓冲溶液作用。溶液,pH,约为,9.18,，即碱性。在碱性下处理样品有几方面作用：,（,1,）是锌盐沉淀蛋白质时，要求在碱性。,（,2,）是碱性下处理肉制品，脂肪被皂化，降低样品被脂肪包裹，使亚硝基根更易提取到水溶液中。,（,3,）是溶液在碱性下亚硝基根以离子存在，易溶且稳定，如溶液偏酸性，则形成亚硝酸，在加热下轻易挥发，也易分解，造成损失。,第20页,（二）试剂空白制备,于,50mL,烧杯中，加,12.5mL,硼砂饱和液，,以,70,左右水约,300mL,将试样洗入,500mL,容量瓶中，于沸水浴中加热,15min,，取出后冷却至室温。然后一面转动，一面加入,5mL,亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入,5mL,乙酸锌溶液。加水至刻度，摇匀，放置,0.5h,，清液用滤纸过滤，弃去初滤液,30mL,，滤液备用。,第21页,（三）标准曲线制备,（,1,）曲线最少作,5,个点（不包含空白）。,2,）线性范围内相关系数应大于,0.9990,。,（,3,）测试溶液中被测组分浓度必须在校准曲线线性范围内。,第22页,（四）测定,亚硝酸盐测定,（,1,）,盐酸萘乙二胺溶液易变质，最好临用时新配。,（,2,）用,2cm,比色杯，以零管调整零点，于波长,538nm,处测吸光度。,第23页,（四）测定,硝酸盐测定,（,1,）镉柱还原效率测定,（,2,）样品滤液经镉柱还原,（,3,）,亚硝酸钠总量测定,第24页,（,1,）,镉柱还原效率测定,先用,25mL,盐酸,(0.1mol/L),洗涤，,再以水洗,2,次，每次,25mL,流速控制在,3mL/min,5mL/min(1-2,滴,/,秒,),吸收,20mL,硝酸钠标准使用液，加入,5mL,氨缓冲液稀释液,，混匀后注入贮液漏斗，使流经镉柱还原，以原烧杯搜集流出液。,当贮液漏斗中样液流完后，再加,5mL,水置换柱内留存样液。,第25页,（,1,）,镉柱还原效率测定,将全部搜集液如前,再经镉柱还原,一次，第二次流出液搜集于,100 mL,容量瓶中，,继以水流经镉柱洗涤三次，每次,20 mL,，,洗液一并搜集于同一容量瓶中，加水至刻度，混匀。,得到还原后溶液为,100mL,。,第26页,（,1,）,镉柱还原效率测定,取,10.0mL,还原后溶液,（相当,10g,亚硝酸钠）于,50mL,比色管中，加入,2mL,对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置,3min,5min,后各加入,1mL,盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置,15min,，用,2cm,比色杯，以空白管调整零点，于波长,538nm,处测吸光度，代入标准曲线计算含量。,第27页,（,1,）,镉柱还原效率测定,还原效率计算：,X=A100/10,X,还原效率，,%,A,由标准曲线计算测得亚硝酸钠含量，单位为微克（,g,）,10,测定用溶液中亚硝酸钠含量，单位为微克（,g,）,第28页,（,1,）,镉柱还原效率测定,还原效率大于,98%,为符合要求。,若不符合要求，则继续用,25mL,盐酸,(0.1mol/L),洗涤，再以水洗两次，每次,25mL,。,试验过程中，随时保持镉柱在水平面以下，加液时沿贮液漏斗管壁匀速加入，防止镉柱内产生气泡。,屡次洗涤后，还原效率还不符合要求，应该重新制备装填镉柱。,第29页,（,2,）样品滤液经镉柱还原,先以,25mL,氨缓冲液稀释液,冲洗镉柱，流速控制在,3mL/min,5mL/min,（约,1-2,滴,/,秒）。,吸收,20mL,滤液于,50mL,烧杯中，,加,5mL,氨缓冲溶液,，混合后注入贮液漏斗，使流经镉柱还原，以原烧杯搜集流出液。,当贮液漏斗中样液流完后，再加,5mL,水置换柱内留存样液。,随时都要保持水平面在镉层之上，不得使镉层夹有气泡。,将全部搜集液如前再经镉柱还原一次，第二次流出液搜集于,100mL,容量瓶中，继以水流经镉柱洗涤,三次,，每次,20mL,，洗液一并搜集于同一容量瓶中，加水至刻度，混匀。,第30页,（,3,）,亚硝酸钠总量测定,吸收,20mL,还原后样液于,50mL,比色管中，分别加入,2mL,对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置,3min,5min,后各加入,1mL,盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置,15min,，用,2cm,比色杯，以空白管调整零点，于波长,538nm,处测吸光度。代入标准曲线计算。,第31页,六、结果计算,试剂空白不为零时应扣除。,样品溶液有颜色时，应先不加显色剂测定吸光度，再从加显色剂后测得吸光度中扣除。,亚硝酸盐含量结果应换算成以,NaNO,2,计，并保留两位有效数字。,在重复性条件下取得两次独立测定结果绝对差值不得超出算术平均值,10%,。,第32页,六、结果计算,硝酸盐含量计算（以,NaNO,3,计,）,X,2,=(X-X,1,)1.232,X,2,试样中硝酸钠含量，毫克每千克（,mg/kg,）；,X,经镉柱还原后测得总亚硝酸钠含量，毫克每千克,（,mg/kg,）。,X,1,计算出试样中亚硝酸钠含量，毫克每千克,（,mg/kg,）。,1.232,亚硝酸钠换算成硝酸钠系数；,第33页,七、,玻璃量器洗涤和干燥,先用机械方法除去量器上污染物，如用毛刷刷，或用水摇动,(,必要时可加入滤纸碎片,),。油或油类物质可选取适当溶剂去除，然后注入低泡沫洗涤液并用力摇摆（必要时能够超声）。,若内壁仍不够清洁，可用下述洗液洗涤：,（,1,）重铬酸钾,-,浓硫酸混合液（,100g/L,）。,（,2,）等量,30g/L,高锰酸钾溶液和,1mol/L,氢氧化钠混合溶液。,然后用自来水冲洗，直至洗涤液全部冲净，再用纯水洗三次。,普通洗净后玻璃量器应自然风干。若急用，提议玻璃量器烘干温度不得超出,150,。,第34页,Thank you!,.03.24,第35页,