大便常规和隐血试验标准操作规程.doc

大便常规和隐血试验标准操作规程
一、 目
用于规范大便常规和隐血试验操作。
二、 适用范围
适适用于大便常规和隐血试验检测。
三、 支持性文件
《临床检验操作规程》(第三版)、 《临床检验基础》（第三版）、 《隐血试验操作说明书》
四、 大便标本采集
1、 采集粪便标本方法因检验目不一样而有差异, 如通常检验留取新鲜指头大小(约5g)即可, 放入干燥、 清洁、 无吸水性有盖容器内送检, 标本容器最好用内层涂腊硬纸盒, 便于检验后焚毁。血吸虫毛蝴孵化则留全量新鲜便(不少于30g)。细菌检验粪便标本应搜集于灭菌封口容器内, 勿混入消毒剂及其它化学药品。
2、 检验蛲虫卵需要用软玻璃纸拭子, 在清晨排便前由肛门四面拭取标本, 也可用棉拭子拭取, 但均须立刻镜检。
3、 检验阿米巴滋养体, 应于排便后立刻检验。冬季需采取保温方法, 快速送检。
4、 不应该采取尿壶或便盆中粪便标本。若标本中混入尿液, 可使柔弱原虫致死。用白明胶膜法检验粪便中胰蛋白酶活性时, 可因尿液中存在溶解白明胶物质而造成其检验结果错误增高。粪便标本中也不可混入植物、 泥土、 污水等, 因腐生性原虫、 真菌抱子、 植物种子、 花粉易混淆试验结果。
5、 盛粪便标本容器必需有盖, 有显著标识。粪便标本应选择其中脓血粘液等病理成份, 若无病理成份, 可多部位取材。采取标本后, 应在一小时内完成检验, 不然可因9H及消化酶等影响, 而使粪便中细胞成份破坏分解。6、 检验胆石、 胰石、 寄生虫体及虫卵计数, 应搜集24h粪便送验。
7、 隐血试验, 应嘱患者搜集标本前3日禁食动物性食物。连续检验3天, 并选择外表及内层粪便。搜集标本后须快速进行检验, 以免因长时间放置使隐血反应敏感度降低。
8、 细菌检验用标本应全部用无菌操作搜集。
五、 常规检验
1、 颜 色
可依据观察所见汇报, 如黄色、 褐色、 土灰色、 绿色、 红色、 柏油样等。
正常粪便因粪胆素而呈棕黄色, 但可因饮食、 药品或病理原因影响而改变粪便颜色。灰白色见于钡餐后、 服硅酸铝、 阻塞性黄疽、 胆汁降低或缺乏。绿色见于食用含叶绿素蔬菜后及含胆绿素时。红色见于下消化道出血、 食用西红柿、 西瓜等。柏油样便见于上消化道出血等。酱色常见于阿米巴痢疾、 食用大量咖啡、 巧克力等。米泔水样见于霍乱。
2、 性 状
可汇报为软、 硬、 糊状、 泡沫样、 稀汁样、 血水样、 血样、 粘液血样、 粘液脓样、 有不消化食物等。正常时为有形软便。
[1] 球形硬便: 便秘时可见。
[2] 粘液稀便: 见于肠壁受刺激或发炎时, 如肠炎、 痢疾和急性血吸虫病等。
[3] 粘液脓性血便: 多见于细菌痢疾。
[4] 酱色粘液(可带脓)便: 多见于阿米巴痢疾。
[5] 稀汁样便:可见于急性肠胃炎,大量时见于伪膜性肠炎及隐孢子虫感染。
[6] 米泔样便并有大量肠粘膜脱落, 见于霍乱、 副霍乱等。
[7] 扁平带状便: 可能因直肠或肛门狭窄所致。
3、 寄生虫虫体
蛔虫、 蛲虫、 绦虫节片等较大虫体, 肉眼即可分辨。钩虫虫体常需将粪便冲洗过筛后方可看到。服驱虫剂后排便时应检验有没有虫体。驱绦虫后应仔细寻求有没有虫头。
4、 直接涂片镜检
[1] 洁净玻片上加等渗盐水1—2滴, 选择粪便不正常部分, 或挑取不一样部位粪便做直接涂片检验。
[2] 最好取大玻片, 制成涂片后, 应覆以盖片。涂片厚度以能透过印刷物字迹为准。
[3] 在涂片中如发觉疑似包囊, 则在该涂片上加1滴碘液, 在高倍下仔细判别, 如仍不能决定时, 可取全量粪便浓缩法检验。
[4] 虫卵汇报方法: 未找到者注明“未找到虫卵”, 找到一个汇报一个, 找到多个汇报多个, 并在该虫卵后面注明数量若干, 以低倍视野计算。
[5] 应注意将植物纤维及其细胞与寄生虫、 人体细胞相判别, 并应注意有没有肌纤维、 结缔组织、 弹力纤维、 淀粉颗粒、 脂肪小滴球等。若大量出现, 则提醒消化不良或胰腺外分泌功效不全。
[6] 细胞中应该注意红细胞、 白细胞、 嗜酸性粒细胞(直接涂片干后用瑞氏染色)、 上皮细胞、 巨噬细胞等。
[7] 夏科—雷登(Charcot—Leyden)结晶: 为无色或浅黄色两端尖而透明含有折光性菱形结晶, 大小不一。常见于肠道溃疡, 尤以阿米巴感染粪便中最易检出。过敏性腹泻及钩虫病患者粪便亦常可见到。
[8] 细菌: 占粪便净重l／3(4000亿／g干粪), 正常菌群关键是大肠杆菌和肠球菌, 占80％; 而过路菌(产气杆菌、 变形杆菌、 绿脓杆菌等)不超出10％; 芽胞茵(如梭状菌)和酵母菌为常住菌, 但总量不超出10％。正常菌群消失或百分比失调可因大量应用抗生素所致, 除涂片染色找细菌外, 应采取不一样培养基培养判定。
六、 隐血试验
上消化道有少许出血时, 红细胞被消化而分解破坏, 因为显微镜下不能发觉, 故称为隐血。
1、 原理（匹拉米洞半定量检验法）
隐血试验是利用匹拉米洞半看成呈色指示剂, 在酸及H2O2作用下, 与血红蛋白反应, 产生紫蓝→紫红颜色, 据此来进行判读及阳性结果半定量。
2、 【储存条件及使用期】
储存条件: 本试剂盒应避光贮存在相对湿度小于80%, 无腐蚀性气体和通风良好5℃~30℃室内。
使用期: 原包装未开封试剂使用期为24个月, 在使用期内德已开封试剂应在开封后3个月内使用完, 每次使用后应立刻拧紧瓶盖, 以免挥发或变质。
3、 【样本要求】
粪便检体搜集后应立刻进行检测, 以免因检体长时间放置造成隐血反应敏感性降低。
4、 【检体搜集与准备】
从采集盒 （瓶）中取样或将测试卡及取样木棒交给病人自行取样, 取样时直接打开测试卡正面盖子, 并利用取样木棒挖取不一样部位粪便检体 10-50mg（相当于火柴头大小）涂抹在测试卡A窗或B窗方格内(切勿超出方格之外) , 然后合上盖子。若是病人自行取样应立刻将测试卡交回医检师处或检验室, 以进行常规试验。（注: 病人绝对不能自行打开测试卡后面印有“Development Window”封盖)
5、 【检验方法】
1）、 将测试卡后面朝上, 并打开印有“Development Window ”封盖。
2 ）、 在方格内左右两侧各滴一滴显色剂A , 待试剂完全渗透以后, 再各滴一滴显示剂B。
3 ）、 当加入显色剂B 后, 于2min 内判读完成。
6 【检验结果解释】
1）、 当加入显色剂B 后, 立刻产生紫蓝色, 汇报为 （4 + ）。
2）、 当加入显色剂B 后, 10s 内产生紫蓝色, 汇报为 （3+ ）。
3）、 当加入显色剂B 后, 1min 内产生紫红色, 汇报为 （2 + ）。
4）、 当加入显色剂B 后, 1~2min 内才逐步产生紫红色, 汇报为 （1 + ）。
5）、 当加入显色剂B 后, 于判读时间内无任何紫蓝或紫红颜色反应, 汇报为阴性 （－）。
※ 敏感性: 大于50g(Hb)/g(stool)
7、 【检验方法不足】
本试剂盒仅作为对粪便隐血检测初检及筛查试剂使用, 不能替换胃镜、 直肠镜、 内窥镜和X 线检验。
8、 【产品性能指标】
1)、 批内差: 检验程度中阳性测试结果批内差应小于3 张。
2）、 批间差: 检验程度中阳性测试结果批间差应小于3 张。
9、 【注意事项】
1）、 本试剂盒仅用于体外诊疗, 不作其她临床用途。
2）、 在粪便标本采集、 运输过程中和使用试剂进行检测时, 操作人员应注意做好个人防护, 避免人体接触, 以预防可能产生污染和本身感染。
3）、 对无任何显著症状但却怀疑可能有少许出血病人, 提议应连续取3 天粪便标本, 天天从标本不一样部位取材做两次试验, 3 天之内, 共做6 次隐血检验。
4）、 检验前2 天内提议应禁食动物血、 脏器及含叶绿素类食物; 铁剂、 中药、 维生素C 等药品, 以尽可能避免出现假阳性结果。
5）、 本试剂盒不能与氧化剂共同存放, 应避免阳光直射及高、 低温和潮湿贮存环境。
6）、 冬天室温过低时反应可能较迟缓, 应合适延长观察时间。
7）、 本试剂应由专业人员使用, 每次使用后请拧紧试剂瓶盖, 以免挥发。
8）、 使用前应具体阅读使用说明书, 在使用期内使用。
9）、 用后应按医院或环境保护部门要求处理废弃物。
10）、 生产批号、 使用期见外包装。
10、 【参考文件】
便隐血（OB）试剂(匹拉米洞半定量检验法)使用说明书。