1、生物选修三总结
一、技术种类
1.DNA重组技术（基因工程）；
2.PCR技术：扩增目的基因，分子克隆；
3.（1）农杆菌转化法；
（2）基因枪法；
（3）花粉管通道法；
4.显微注射技术：用到胚胎移植技术；
5.分子杂交技术；
6.蛋白质工程；
7.（1）植物组培技术；
（2）动物细胞培养技术；
8.（1）植物体细胞杂交技术；
（2）动物细胞融合技术；
9.单克隆抗体技术；
10.（1）试管动物技术：良性动物快速繁殖；
（2）植物微型繁殖：快速繁殖，保持亲本优良性状；
11.（1）动物体细胞核移植技术：克隆技术，用到胚胎移植技术；
（2）胚胎分割技术；
2、12.体外受精技术；
13.胚胎移植技术；
14.胚胎干细胞移植技术：全能干细胞；
15.胚胎早期培养技术；
16.性别选择技术。
二、培养环境
1.植物组织培养：完全培养条件，固态培养基；
2.动物细胞合成：合成培养基+血清；
3.体外受精：获能液+肝素/Ca2+载体A23187溶液；
4.早期胚胎培养技术：发育培养液，两盐、两酸、两素、血清；
5.胚胎移植：-196ﾷC液氮，胚胎保存；
6.胚胎分割：操作液；
7.胚胎干细胞：滋养层细胞，抑制因子的培养液，抑制分化；
8.单克隆抗体：选择性培养基。
三、条件
1.运载体条件：
（1）能在宿主细胞中稳定
3、保存复制；
（2）必须有一个或多个限制酶切位点，每种酶切位点最好只有一个；
（3）必须有标记基因；
（4）对受体细胞无害；
2.PCR扩增技术条件：已知核苷酸序列，作为模板DNA合成引物；
3.植物细胞组织培养条件：
（1）严格的无菌条件；
（2）激素诱导分化：细胞分裂素，生长素；
（3）完全营养条件：无机营养，蔗糖，激素，琼脂；
（4）脱分化无光条件，再分化需光；
4.动物细胞培养条件：
（1）无菌、无毒；
（2）充足营养；
（3）合适的温度与pH;
（4）气体环境：5%CO2,95%O2；
5.动物体细胞核移植技术细胞选择：
（1）供体细胞：传代培养10代以
4、内；
（2）受体细胞：减二中期卵母细胞；
6.体外受精卵子采集：注注射促性腺激素，进行超排卵处理，从输卵管冲取卵子；
7.胚胎移植供受体选择：
（1）供体具有优良遗传性状；
（2）受体有正常孕育、繁殖后代的能力；
（3）雌性供体与受体同期发情处理；
8.胚胎移植、分割，胚胎选择，胚胎干细胞采集：选用早期胚胎：桑葚胚、囊胚；
9.胚胎干细胞来源：早期胚胎，原始性腺。
四、意义、优点
1.植物体细胞杂交，动物细胞融合：克服远缘杂交不亲和性；
2.微型繁殖：保持亲本优良性状，实现快速繁殖；
3.人工种子：周期短，保持亲本优良性状，不受自然条件限制，不占用大量土地；
4.
5、单倍体育种：明显缩短育种年限；
5.单克隆抗体：特异性强，灵敏度高，可大量制备，化学性质单一；
6.透明带反应，卵黄膜封闭作用：防止多精入卵；
7.试管动物技术：良种动物快速繁殖；
8.胚胎移植：充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力；
9.同期发情处理：胚胎进入受体提供相同的生理环境；
10.胚胎分割：提高家畜胚胎利用率；
11.内细胞团均等分割。
五、原因
1.表达载体和标记基因：鉴别受体细胞是否含目的基因，将含目的基因细胞筛选出来；
2.工程菌培养，基因工程药物：增殖快，代谢强；
3.植物组织培养的无菌条件：
（1）杂菌生长消耗营养物质；
（2）杂菌产生不利于培养物
6、生长的物质；
4.作物脱毒选择分生区附近组织：没有或少有病毒；
5.动物细胞培养选择10代以内细胞：遗传物质未发生改变；
6.核移植受体细胞选择卵母细胞：
（1）含激发细胞全能性物质；
（2）体积大，易操作；
（3）富含营养物质。
六：酶，激素，细胞产物
1.限制性核酸内切酶：
（1）原核生物防御机制；
（2）识别双链DNA特定核苷酸序列，使每条链特定部位磷酸二酯键断开；
（3）黏性末端/平末端；
2.DNA连接酶
（1）Ecoli DNA连接酶：大肠杆菌，
T4 DNA连接酶：T4噬菌体；
（2）连接双链DNA片段；
3.载体：
（1）环状，双链DNA；
7、2）存在于细菌、酵母菌等中；
（3）有标记基因；
4.DNA聚合酶：
（1）PCR技术；
（2）耐高温；
5.青霉素：
（1）青霉菌释放的激素；
（2）抑制负反馈调节，大量生产；
（3）非基因工程；
6.农杆菌：能在自然条件下感染双子叶植物与裸子植物；
7.干扰素：
（1）效应T细胞生产；
（2）类活性蛋白质，主要为糖蛋白；
（3）抗病毒，癌症治疗；
（4）大肠杆菌生产：无糖蛋白质，
酵母菌生产：糖蛋白；
（5）抑制分裂期间DNA复制；
8.细胞分裂素/生长素
（1）生长素含量较高：诱导脱分化，促进根原基形成；
（2）细胞分裂素含量较高：诱导再分化，促进芽原基形成；
9.聚乙二醇：诱导细胞膜融合；
10.胰蛋白酶，胶原蛋白酶：是动物组织块分散为单个细胞；
11.灭活病毒：
（1）诱导动物细胞融合；
（2）利用病毒的抗原特性；
（3）作为运载体；
12.抗生素：
（1）杀死细菌；
（2）抑制肽聚糖合成；
13.顶体酶:精子穿越放射冠和透明带；
14.促性腺激素：超数排卵处理；
15.孕激素、前列腺素：同期发情处理。
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