血涂片的制作及免疫细胞的形态观察.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,血涂片的制作及免疫细胞的形态观察,血涂片的制作及免疫细胞的形态观察,第1页,一、试验目标,学习掌握血涂片制备和染色方法,;,比较观察各种免疫细胞形态。,血涂片的制作及免疫细胞的形态观察,第2页,二、试验原理,血涂片是血液学研究中最基础技术。将血液样品制成单层细胞涂片标本。为观察细胞内部结构，识别各种细胞，血涂片必须进行染色。血涂片各种染色方法大多是罗氏,（,Wright,）,染色法衍变来。当前常见瑞特氏染色法。,血涂片的制作及免疫细胞的形态观察,第3页,瑞氏染料是由,酸性染料伊红,和,碱性染料亚甲蓝,组成有复合染料。细胞染色现有,物理吸附,作用，又有,化学亲和作用,，各种细胞成份化学性质不一样，,对,各种染料亲和力也不一样。,所以，经瑞氏染液染色后，不一样免疫细胞中颗粒能够展现不一样颜色。依据细胞中颗粒,颜色,、,大小及多少,，再结合细胞大小及细胞核形态，就能够将免疫细胞进行分类计数。,血涂片的制作及免疫细胞的形态观察,第4页,三、试验用具,试验材料：,酒精棉球、载玻片、眼科镊、眼科剪等。,试剂：,瑞氏（,Wright,）染液。,血涂片的制作及免疫细胞的形态观察,第5页,四、试验步骤,.,准备洁净玻片两张，一张用于推片，另一张用于固定标本。,.,剪断小鼠尾巴取血或小鼠眼球取血，快速在玻片上涂血膜制备血涂片，自然干燥。,血涂片的制作及免疫细胞的形态观察,第6页,涂片,将一滴血置于载玻片一端，再取另一张边缘光滑载玻片，斜置于血涂片前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状，两玻片角度以,30-40,度为宜（角度过大血膜较厚，角度小则血膜薄），轻轻将载玻片向前推进，即涂成血液薄膜（如图），推进时速度要一致，不然血膜成波浪形，厚薄不匀。,血涂片的制作及免疫细胞的形态观察,第7页,血涂片的制作及免疫细胞的形态观察,第8页,3,瑞氏,染色,待涂片在空气中完全干燥后，滴加数滴瑞氏染液盖满血膜为止，染色,1min,。,染,1,分钟后，再加等量缓冲液或蒸馏水于染色液上，吹匀,浸染约,8-10,分钟。,用蒸馏水快速冲洗。待自然干燥后或用吸水纸吸干,即可置血涂片于显微镜下进行镜检,脱色：用,20%,盐酸甲醇脱色，肉眼观察玻片呈粉红色为宜，显微镜下观察结果。（省略）,血涂片的制作及免疫细胞的形态观察,第9页,4,观察,分别用低倍、高倍镜观察血涂片，分辨不一样血细胞类型。,淋巴细胞,颗粒细胞（嗜酸性、嗜碱性、嗜中性）,单核细胞,红细胞与血小板,血涂片的制作及免疫细胞的形态观察,第10页,五、试验结果,绘图并比较几个免疫细胞形态特征。,血涂片的制作及免疫细胞的形态观察,第11页,红细胞,血小板,未成熟中性粒细胞,大淋巴细胞,成熟中性粒细胞,嗜酸性粒细胞,嗜碱性粒细胞,单核细胞,血涂片,血红蛋白、嗜酸性颗粒,为碱性蛋白质与酸性染料伊红结合染,粉红色,称为,酸性,物质；,细胞核蛋白和淋巴细胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染,蓝色,或紫色称为,嗜碱,性物质；,中性颗粒成等电状态与伊红和,美蓝,均可结合,染,紫红色,称中性物质,血涂片的制作及免疫细胞的形态观察,第12页,neutrophils,lymphocytes,monocytes,Basophils,eosinophil,血涂片的制作及免疫细胞的形态观察,第13页,