单核苷酸多态性微阵列技术联合核型分析在颈项透明层增厚胎儿产前诊断中的应用.pdf

临床检验杂志2 0 2 3年6 月第41卷第6 期D0I:10.13602/ki.jcls.2023.06.05单核苷酸多态性微阵列技术联合核型分析在颈项透明层增厚胎儿产前诊断中的应用Chin J Clin Lab Sci,Jun.2023,Vol.41,No.6423临床实验研究童克婷，王森林，李景然，蔡昭方，颜宇辉，朱健生（1.安徽医科大学妇幼医学中心，安徽省妇幼保健院，a.医学遗传中心,b.妇产科，合肥2 30 0 0 0;2.南方医科大学南方医院肾内科，国家慢性肾病临床医学研究中心，广东省慢性肾病临床医学研究中心,广州510 515)摘要：目的探讨单核苷酸多态性微阵列（SNParray）技术联合核型分析在颈项透明层（NT）增厚胎儿产前诊断中的应用价值。方法收集2 0 2 0 年3月至2 0 2 3年3月在安徽省妇幼保健院因NT增厚而行羊膜穿刺术的胎儿516 例，分别运用核型分析技术和SNParray技术对胎儿羊水细胞进行检测，分析胎儿染色体异常情况；根据NT值分成4组：2.5 2.9mm组18 3例、3.03.9mm组2 6 1例、4.0 4.9mm组46 例和5mm组2 6 例；根据是否合并其他异常指征包括高龄、超声异常、血清学异常和不良妊娠史等，分为合并其他异常指征组156 例和单纯NT增厚组36 0 例。结果在516 例NT增厚胎儿中SNParray技术检出致病性染色体异常7 0 例（13.57%）；核型分析组为10.6 6%（55/516），与SNParray组比较差异无统计学意义(X=2.048,P=0.152)。2.5 2.9m m 组染色体异常7.10%、3.0 3.9mm组13.7 9%、4.0 4.9mm组2 3.91%、5mm组38.46%,各组比较差异有统计学意义(X=24.472,P=0.000）。合并其他异常指征组染色体异常2 5.6 4%，而单纯NT增厚组为8.33%，两组比较差异有统计学意义(X=27.805,P=0.000)。结论当NT厚度增加或合并其他异常指征时，胎儿发生染色体异常的风险增加。采用SNParray技术联合核型分析的检测模式，可以提高异常染色体的检出率。推荐将3.5mm和3.0 mm作为单纯NT增厚和NT增厚合并其他异常指征行侵入性产前诊断的截断值。关键词：单核苷酸多态性微阵列技术；核型分析；颈项透明层增厚；产前诊断中图分类号:R446;R715.5Application of SNP microarray and karyotype analysis in prenatal diagnosis of fetuses with thickened nuchal translucencyTONG Keting,WANG Senlin,LI Jingran,CAI Zhaofang,YAN Yuhui,ZHU Jiansheng(1.a.Department of Medical GeneticsCenter,b.Department of Gynecology and Obstetrics,Maternal and Child Medical Center of Anhui Medical University,Anhui ProvinceMaternity and Child Health Hospital,Hefei 230000,Anhui.2.State Key Laboratory for National Clinical Research Center for KidneyDisease,Guangdong Provincial Clinical Research Center for Chronic Kidney Disease,Nanfang Hospital,Southern Medical University,Guangzhou 510515,Guangdong,China)Abstract:Objective To explore the application of single nucleotide polymorphism(SNP)microarray combined with karyotype analy-sis in the fetus with increased nuchal translucency(NT).Methods A total of 516 fetuses performed amniocentesis due to NT thicken-ing in Anhui Maternal and Child Health Hospital from March 2020 to March 2023 were collected.The fetal amniotic fluid cells were de-tected by karyotype analysis and SNP array,respectively,and the fetal chromosome abnormalities were analyzed.According to thethickness of NT,the fetuses were divided into four groups:2.5 to 2.9 mm group(183 cases),3.0 to 3.9 mm group(261 cases),4.0to 4.9 mm group(46 cases)and 5 mm group(26 cases).Depending on whether other abnormal indications existed,such as ad-vanced age,abnormal ultrasound,abnormal serology and adverse pregnancy history,they were divided into two groups:NT thickeningcombined with other indications group(156 cases),NT thickening alone group(360 cases).Results In the 516 fetuses with NTthickening,70 cases(13.57%)of pathogenic chromosome abnormalities were detected by SNP array,and 55 cases(10.66%)of path-ogenic chromosome abnormalities were detected by karyotype analysis.The difference between two methods was not statistically signifi-cant(x=2.048,P=0.152).The detection rates in 2.5 to 2.9 mm group,3.0 to 3.9 mm group,4.0 to 4.9 mm group and 5 mmgroup were 7.10%,13.79%,23.91%and 38.46%,respectively.The difference among the four groups was statistically significant(X2=24.472,P=0.000).The detection rate was 25.64%in the group with other abnormal indications,and 8.33%in NT thickening a-lone group,the difference between two groups was statistically significant(x?=27.805,P=0.000).Conclusion The risk of fetalchromosomal abnormalities increased when NT thickness increased or other abnormal indications were present.The detection mode of文献标志码：A*基金项目：安徽医科大学青年科学基金（2 0 2 2 xkj114)；安徽省妇幼保健院重点科研项目（zd2021-1-3,zd2022-1-2）。作者简介：童克婷，198 7 年生，女，技师，大学本科，主要从事产前诊断工作。通信作者：朱健生，主任技师，博士,E-mail:。.424SNP array combined with karyotype analysis could improve the detection rate of abnormal chromosomes.3.5 mm and 3.0 mm should berecommended as the cut-off values for NT thickening alone,and NT thickening combined with other abnormal indications may be thecut off value for invasive prenatal diagnosis.Key words:SNP array,karyotype analysis,thickened nuchal translucency,prenatal diagnosis颈项透明层（nuchal translucency，NT）是指妊娠11 13+W时在胎儿的颈后部皮肤下的液体生理性积聚,是孕早期产前超声筛查的重要指标。研究发现,NT增厚与胎儿的结构缺陷、染色体异常和遗传疾病相关,会导致不良妊娠结局的发生2 。染色体核型分析技术是产前诊断中首选的方法，可检出与 NT增厚相关的染色体异常等。然而,很多胎儿的遗传性综合征及结构畸形是由于某些染色体微小的不平衡变异导致的，而传统的染色体核型分析技术无法检出。单核苷酸多态性微阵列技术(single nucleotide polymorphism array,SNP array）是一种高分辨率、高通量的全基因组DNA拷贝数变异检测技术，主要用于检测染色体微缺失和微重复,是产前诊断方法中的一线选择3。本研究对516例NT增厚胎儿的羊水细胞进行分析，旨在运用SNParray技术联合核型分析探讨胎儿NT增厚与染色体异常相关性,以期为产前遗传咨询及胎儿预后评估提供实验依据。1对象和方法1.1研究对象选择2 0 2 0 年3月至2 0 2 3年3月于我院超声科经产前超声检查诊断为胎儿NT增厚的孕妇516 例为研究对象,年龄18 45岁，中位年龄2 9岁。纳入标准：（1）单胎；（2）NT值2.5mm;(3)孕周11 13+6 W；（4)行侵人性产前诊断，包括核型分析和SNParray检测。根据NT值分组为：2.5 2.9mm组18 3例、3.0 3.9mm组2 6 1例、4.04.9mm组46 例和5mm组2 6 例;根据是否合并其他超声异常，分为单纯性NT增厚组36 0 例和合并其他异常指征组156 例。本研究经安徽省妇幼保健院医学伦理委员会批准（批准编号：YYLL2022-zd2022-1-2-FA-01），孕妇或其家属均知情同意。1.2仪器与试剂LOGIQE9彩色多普勒超声诊断仪和配套三维超声容积探头（2 5MHz）购自美国GE公司，原位载玻片培养盒（杭州宝荣公司），羊水培养基（美国Gibco公司）,DNA提取试剂（Q IA a m p D NA Bl o o d M i n i K i t,德国Qiagen公司），全基因组扩增试剂盒、Ilumina InfiniumHD试剂盒临床检验杂志2 0 2 3年6 月第41卷第6 期ChinJClinLab Sci,Jun.2023,Vol.41,No.6（美国Ilumina公司），染色体分散仪（美国Ther-motron公司），GLS-120全自动染色体核型扫描捕获系统（德国Leica公司）,Nanodrop2000分光光度计（美国Nanodrop公司），杂交炉、洗涤工作站和芯片扫描仪均购自美国Affymetrix公司。1.3超声检查由超声医师使用LOGIQE9彩色多普勒超声诊断仪，配套经腹部三维超声容积探头,探头频率设置为2 5MHz,检查孕周为1113+W，严格按照国际妇产科超声协会（Internation-al Society of Ultrasound in Obstetrics and Gynecology,ISUOG)发布的妊娠早期胎儿超声检查指南中的NT值质控标准进行判读，以NT值2.5mm纳入研究。重复测量3次，取其最大值。1.4侵人性产前诊断孕妇于妊娠18 2 6 W时，由具有产前诊断资质的医师在超声引导下行羊膜腔穿刺术,抽取羊水34mL。其中2 4mL羊水经原位培养用于核型分析,10 mL用于SNParray检测。1.5实验室检测1.5.1核型分析用原位培养法对羊水细胞进行培养，收获细胞后，制片染色，通过上机扫描可获得核型信息。用Cytovision核型分析软件计数2 0 个细胞分裂中期染色体核型,并分析5个核型,如有异常核型,增加计数量。核型结果按照国际人类细胞遗传学命名系统（ISCN2020)进行描述。1.5.2SNParray检测按照试剂盒说明书提取全基因组DNA,Nanodrop2000分光光度计检测DNA浓度后，-2 0 保存。采用AffymetrixCytoScan750KArray分析平台对羊水细胞DNA进行检测，用Chromosome Analysis Suite（Ch A S)2.0 分析软件对检测结果进行分析。实验过程按照厂家的标准操作说明进行。所得结果与国际基因组变异数据库(the Database of Genomic Variants,http:/dgv.tcag.ca/)对比剔除常见的多态性拷贝数变异（copynumbervariations,CNVs）,其余 CNVs 通过检索 DE-CIPHER(http:/decipher.sanger.ac.uk/)、ISCA(h t-tp:/dbsearch.clincalgenome.org/search/)、Cl i n G e n(http:/www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/dbvar/clin-gen/)、Cl i n Va r (h t t p:/w w w.n c b i.n l m.n i h.g o v/c l i n-var/）、O M IM（h t t p:/o m i m.o r g/）和 PubMed（h t-临床检验杂志2 0 2 3年6 月第41卷第6 期tp:/pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/）等数据库，综合所得数据库报道信息判读CNVs的临床意义。按照美国医学遗传学与基因组学会指南判读拷贝数变异的临床意义4,将CNVs分为3大类5级：（1)致病性 CNVs（p a t h o g e n i c CNVs，p CNVs）；（2）良性CNVs(benign CNVs);（3)临床意义未明 CNVs(va-riants of unknown significance CNVs,VUS-CNVs);（4）可能致病性 CNVs（l i k e l y p a t h o g e n i c CNVs,lpCNVs);(5)可能良性CNVs(likely benign CNVs)。1.6统计学分析采用SPSS22.0统计软件进行分析。计数资料采用百分数表示，组间比较采用X2检验。采用ROC曲线计算曲线下面积，通过敏感性和特异性得到约登指数，从而确定侵人性检查的最佳截断值。以P0.05为差异有统计学意义。2结果2.1NT增厚胎儿染色体核型分析结果核型分析技术共检出致病性染色体异常55例（表1），包括47 例染色体非整倍体、3例染色体缺失综合征、5例衍生染色体（2 号、5号、9号、10 号和18 号），致病性染色体异常的检出率为10.6 6%（55/516)。表1NT增厚胎儿核型分析致病性结果(n=516)类型核型结果非整倍体异常47,XN,+2147,XN,+1847,XXY47,XXX45,X结构异常46,XN,del(5)(p14)46,XN,del(11)(p12p14)46,XN,del(18)(pl1.2)46,XN,der(2)46,XN,der(5)46,XN,der(9)46,XN,der(10)46,XN,der(18)47例染色体非整倍体中，2 1-三体35例、18-三体6 例和性染色体异常6 例（克氏综合征3例、特纳综合征1例、超雌综合征2 例）；3例染色体缺失综合征为猫叫综合征46,XN,del（5）（p 14）1例、18 p缺失综合征46,XN,del（18）（p 11.2）1例和WAGR综合征46,XN,del(11)（p 12 p 14)1例;5例衍生染色体为46,XN,der(2）1例、46,XN,der(5）月Chin J Clin Lab Sci,Jun.2023,Vol.41,No.6例数上比例（%）356.7861.1630.5820.3910.1910.1910.1910.1910.1910.1910.1910.1910.194251 例、46,XN,der(9）1 例、46,XN,der(10）1 例和46,XN,der（18）1例。核型分析技术还检出7 例臂间倒位和8 例染色体多态性改变。7 例臂间倒位为46,XN,inv(9)（p 12 q 13）6 例、46,XN,inv（18）1例;8 例染色体多态性改变包括46,XN,1qh+2例、46,XN,9qh+2 例、46,XN,13pstk+1 例、46,XN,15pstk+1例、46,XN,15ps+1例和46,XN,16qh+1例。2.2NT增厚胎儿SNP array结果SNP array技术共检出致病性染色体异常7 0 例（表2），包括47 例染色体非整倍体(2 1-三体35例、18-三体6 例和性染色体异常6 例）和2 3例pCNVs，检出率为13.57%（7 0/516）。其中47 例染色体非整倍体和3例染色体缺失综合征的SNParray检出结果与核型分析结果基本一致。核型分析检出的5例衍生染色体(2号、5号、9号、10 号和18 号），经SNParray技术验证,2 号衍生染色体是由于2 q37.3区域断裂缺失后与18 q21.1q23区域重排形成，5号衍生染色体是由于5p15.33p15.31区域断裂缺失后与5p15.31p11区域重排形成,9号衍生染色体是由于9p24.3p23区域断裂缺失后与13q31.1q34区域重排形成，10号衍生染色体是由于10 q26.3区域断裂缺失后与4q32.2q35.2区域重排形成，18 号衍生染色体是由于18 p11.32p11.31区域断裂缺失后与7 q34q36.3区域重排形成。另外，SNParray技术还检出48 例核型正常的CNVs，包括15例pCNVs（2.91%，15/516）、2 例lpCNVs（0.39%，2/516）和31例VUS-CNVs（6.0 1%31/516）。核型分析技术额外检出的7 例臂间倒位和8 例染色体多态性改变，而SNP array未能检出。2.3NT增厚胎儿染色体核型分析与SNParray致病性染色体异常的比较根据不同的检测技术,将516例NT增厚胎儿分成核型分析组和SNParray组。核型分析技术检出致病性染色体异常55例,检出率为10.6 6%（55/516);SNParray技术检出致病性染色体异常7 0 例，检出率为13.57%（7 0/516）。对两组致病性染色体异常的检出率进行统计学分析,差异无统计学意义(X=2.048,P=0.152）,但与核型分析技术相比较,SNP array技术对致病性染色体异常的检出率要额外多出2.91%（15/516）。426135364142 4445 464748495051525354555657585960616263 65666768 702.4不同NT值分组中胎儿致病性染色体异常的比较根据NT值，将516 例胎儿分成4组：2.52.9 mm组、3.0 3.9 mm 组、4.0 4.9 mm组和5mm组。2.5 2.9mm组胎儿18 3例,致病性染色体异常的检出率为7.10%（13/18 3）；3.0 3.9mm组胎儿2 6 1例,致病性染色体异常的检出率为13.79%（36/2 6 1);4.0 4.9 m m 组胎儿46 例,致病性染色体异常的检出率为2 3.91%（11/46）；5mm组胎儿2 6 例，致病性染色体异常的检出率为38.46%（10/2 6）。对4组致病性染色体异常的检出率进行统计学分析，差异有统计学意义（X=24.472,P=0.000），即随着NT厚度增加，胎儿染色体异常的发生率随之增加。2.5NT增厚是否合并其他异常指征分组中胎儿致病性染色体异常的比较根据是否合并其他异常指征（包括高龄、超声异常、血清学异常和不良妊娠史）,将516 例NT增厚胎儿分为单纯NT增厚组和合并其他异常指征组。单纯性NT增厚组胎儿360例，致病性染色体异常的检出率为8.33%临床检验杂志2 0 2 3年6 月第41卷第6 期表2 NT增厚胎儿SNParray致病性结果病例SNParray结果arrGRCh3721q11.2q22.3x3ar GRCh37 18p11.32q23x3arrGRCh37Xp22.33q28x2arr CRCh37Xp22.33q28x3arrGRCh37Xp22.33q28x1arrGRCh375p15.33p14.2x1arrGRCh3711p14.2p12x1arrGRCh3718p11.32p11.21x1arrGRCh372q37.3x1arr GRCh37 18q21.1q23x3arr GRCh375p15.33p15.31x1arrGRCh375p15.31p11x3arrCRCh379p24.3p23x1arr GRCh37 13q31.1q34x3arr GRCh37 4q32.2q35.2x3arr CRCh37 10q26.3x1arrGRCh377q34q36.3x3arrGRCh3718p11.32p11.31x1arrGRCh37 Xp21.1x1arrGRCh376p25.3p25.1x1arrGRCh3711p15.5p15.4x3arrGRCh375q35.2q35.3x1arrGRCh378p23.1x1arrCRCh379q22.32q31.1x1arrGRCh3715q13.2q13.3x3arr GRCh3717p12x1arr GRCh3722q11.21x3arrGRCh372q37.3x1arrGRCh378q22.3q23.1x1arrCRCh37 15q11.2x1Chin J Clin Lab Sci,Jun.2023,Vol.41,No.6大小例数47 Mb3580 Mb647,XN,+18156 Mb347,XXY156 Mb247,XXX156Mb145,X23.98 Mb146,XN,del(5)(p14)14.79 Mb146,XN,del(11)(p12p14)14.96 Mb146,XN,del(18)(pl1.2)3.58 Mb146,XN,der(2)33.66 Mb9.03 Mb37.45 Mb8.87 Mb27.71 Mb27.11 Mb3.5 Mb39.03 Mb3.11 Mb117 Kb5Mb7.44 Mb2.03 Mb3.84 Mb5.37 Mb1.81 Mb1.4 Mb2.49/2.54/2.81 Mb1.29 Mb5.09 Mb312 Kb（30/36 0）;NT 增厚合并其他异常指征胎儿156 例，致病性染色体异常的检出率为2 5.6 4%（40/156）。对两组异常染色体的检出率进行比较，差异有统计学意义(X=27.805,P=0.000），即NT增厚合并其他异常指征时,其染色体异常的发生率增加（表3）。表3NT增厚组是否合并其他异常指征分组中胎儿致病性染色体异常的比较致病性比例类型例数例数(%)X2值P值单纯NT增厚360合并其他异常指征156高龄82超声异常60血清学异常15不良妊娠史192.6不同分组中NT增厚胎儿行侵入性检查的截断值村根据是否合并其他异常指征，将516 例NT增厚胎儿分为单纯NT增厚组和合并其他异常指征组。采用ROC曲线计算曲线下面积,单纯NT增厚组为0.6 49（9 5%置信区间:0.539 0.7 59,P=对应的核型结果47,XN,+21146,XN,der(5)146,XN,der(9)146,XN,der(10)146,XN,der(18)146,XN146,XN146,XN146,XN146,XN146,XN146,XN346,XN146,XN146,XN346,XN30401923.171728.33640.00526.328.3327.80525.640.000临床检验杂志2 0 2 3年6 月第41卷第6 期0.007），敏感性为0.533,特异性为0.7 6 1,约登指数为0.2 9 4,最佳截断值为3.46 mm；合并其他异常指征组为0.6 57（9 5%置信区间：0.56 2 0.7 52,P=0.003），敏感性为0.8 50,特异性为0.38 8,约登指数为0.2 38,最佳截断值为2.95mm。3讨论本研究运用SNParray技术联合核型分析对516例NT增厚胎儿进行检测,结果显示染色体致病性异常7 0 例，发生率约为13.57%，小于杨培峰等5 报道的19.3%，这可能是由于地区、样本量大小或人选标准不同而引起的偏差。同时，在各类型的异常结果中以2 1-三体为最常见，占比6.7 8%，提示NT增厚对2 1-三体具有重要的预测价值，这与以往大多数的研究结果相符6 。黄婷婷等7 研究表明,随着NT增厚,胎儿染色体异常的发生率逐渐增加。本研究以不同NT值分组为2.5 2.9mm组、3.03.9 mm组、4.0 4.9 mm组和5 mm组,胎儿染色体异常的检出率分别为7.10%、13.7 9%、23.91%和38.46%,与上述研究一致。周林等8 研究表明，当NT增厚合并其他异常指征时,胎儿染色体异常的发生率明显高于单纯NT增厚。本研究中两组的染色体异常检出率分别为2 5.6 4%和8.33%，亦与上述研究相符合。本研究中核型分析检出致病性异常55例,其中47 例染色体非整倍体异常和3例染色体缺失综合征的检出情况与SNParray结果一致。核型分析检出5例衍生染色体，但其分辨率较低，无法识别片段的来源。而SNParray技术可以明确衍生染色体重复或缺失片段的临床意义,是由于相应染色体断裂发生结构重排产生的。核型分析还检出7 例染色体臂间倒位与8 例染色体多态性改变，而SNParray技术不能识别染色体平衡性变异（如易位和倒位等），同时由于探针的分布情况，其无法检出染色质区、次缢痕、随体以及随体柄等多态性改变。核型分析可以检出染色体数目和形态异常，但无法发现染色体微缺失和微重复9。SNParray技术在核型正常的病例中检出2.91%的pCNVs、0.39%的lpCNVs和6.0 1%的VUS-CNVs，可以弥补核型分析技术的不足。目前关于NT增厚截断值的研究尚不统一，国内外大多数以3.0 mm或3.5mm为NT增厚的截断值10-11。但又有相关研究报道，NT值在2.5 2.9mm范围时,胎儿染色体异常的风险增加12 。本研月Chin J Clin Lab Sci,Jun.2023,Vol.41,No.6427究以2.5 mm为 NT增厚纳入研究,对不同产前指征的NT增厚胎儿进行ROC曲线分析,单纯NT增厚组和合并其他异常指征组行侵入性产前诊断的最佳截断值分别为3.46 mm和2.9 5mm。故建议单纯NT增厚胎儿行侵人性检查的截断值为3.5mm，而当NT增厚合并其他异常指征时,建议其行侵入性产前诊断的截断值为3.0 mm。由于本研究样本量有限,实验结果可能存在一定的偏倚，今后会进一步收集样本进行研究,以期为NT增厚胎儿的产前遗传咨询及预后评估提供更多的实验依据。4参考文献1胡艳平，袁静，李琴，等.染色体核型分析联合CNV-seq在NT增厚胎儿产前诊断中的应用J.国际生殖健康/计划生育杂志,2 0 2 2,41(5)：36 0-36 4.2孙媛媛，刘灵，职云晓，等.染色体微阵列分析和全外显子组测序技术在颈项透明层增厚胎儿中的应用J.解放军医学杂志，2023,48(3):311-317.3陈佳燕，张剑，蔡美娇，等.单核苷酸多态性微阵列分析技术在孕早期颈项透明层增厚胎儿中的应用J中华医学遗传学杂志，2 0 2 1，38(3)：2 96-2 99.4JKearney HM,Thorland EC,Brown KK,et al.American College ofMedical Genetics standards and guidelines for interpretation and re-porting of postnatal constitutional copy number variants J.GenetMed,2011,13(7):680-685.5杨培峰，单婉婉，张琳琳，等.染色体微阵列检测技术在NT增厚胎儿中的应用J.临床检验杂志，2 0 2 0，38（5）：330-332.【6 刘敏，陈先侠.颈项透明层增厚在产前诊断中的应用J.临床与病理杂志，2 0 2 1，41（8）：18 12-18 19.7黄婷婷，周萍，黎俏，等.颈项透明层增厚在产前诊断中的应用J.实用医学杂志，2 0 2 0，36（15）：2 152-2 156.【8 周林，郭淑新，刘新，等.2 42 例颈项透明层增厚胎儿染色体核型联合CNV-Seq检测结果分析J.中国妇幼保健，2 0 2 3，38(5):904-908.【9 李景然，王朝红，黄道奇，等.染色体微阵列分析联合核型分析在胎儿轻度脑室增宽中的应用J.临床检验杂志，2 0 2 0，38(9):646-648.10Holzer I,Husslein PW,Bettelheim D,et al.Value of increasednuchal translucency in the era of noninvasive prenatal testing withcell-free DNAJ.Int J Gynaecol Obstet,2019,145(3):319-323.11 Wang CH,Tang JX,Tong KT,et al.Chromosomal microarray a-nalysis versus noninvasive prenatal testing in fetuses with increasednuchal translucencyJ.J Hum Genet,2022,67(9):533-539.【12 何凌，卢庆，黄爱萍，等.颈项透明层增厚预测胎儿染色体异常和妊娠结局的应用价值J.中外医疗，2 0 2 1，40（2 5）：18 1-185.（收稿日期:2 0 2 3-0 4-2 5）（本文编辑：王海燕，陆金春）