体外消化透析法测定朱砂中汞生物可接受率的实验条件确定.doc

体外消化透析法测定朱砂中汞生物可接受率
的实验条件确定

作者：庞京团 胡广林 韩彬 齐江宁 李平

【摘要】目的确定体外消化透析法测定朱砂中汞的生物可接受率

的实验条件，建立实验流程，并测定朱砂中汞的生物可接受率。方法

模拟胃肠消化环境，研究 pH、接触时间等因素对朱砂中汞的溶出率及

透析时间等对朱砂中汞的生物可接受率的影响规律，确定合适模拟条

件。结果确定的实验流程模拟条件为： /固比 100，
液 人工胃液 pH=1.5，

加入 0.16%胃蛋白酶 1 ml，接触时间 100 min，透析时间 100 min，加

入胰液胆盐混合物量为 5 ml。在确定的实验条件下，CV-AFS 测得水飞

朱砂中汞的溶出率为 2.5×10-6（n=6，RSD＝4.1％） ，生物可接受率

为 4.8×10-7 (n=6，RSD＝3.5％)。结论体外消化透析法可用于测定

朱砂中汞的生物可接受率，可为测定含朱砂中成药中汞的生物可接受

率提供方法学上的参考。

【关键词】 体外消化透析法； 朱砂； 生物可接受率； 汞

Abstract ： ObjectiveTo determine the simulated

conditions for estimating the bioaccessibility of mercury from

cinnabar by means of an in vitro digestion and

dialysis.MethodsIn order to determine the appropriate simulated

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conditions, we simulated gastrointestinal digestion

environment, and studied the effects of contact time,the pH of

artificial gastric juice, addition of pepsin, dialysis time,

addition of pancreatin bile salt mixture.ResultsThe simulated

conditions were determined as follows: liquid/solid of 100, the

pH value of 1.5 in artificial gastric juice, 1 ml pepsin which

contained 0.16 g pepsin per ml, contact time of 100 min, 5 ml

pancreatin bile salt mixture which contained 0.004 g pancreatin

and 0.025 bile salt per ml,dialysis time of 100 min. We estimated

the bioaccessibility of mercury from cinnabar by CV-AFS, and the

mercury dissolution rate and bioaccessibility from cinnabar

showed high repeatability, dissolution rate was about 2.5×

10-6(n=6,RSD＝4.1％), and the bioaccessibility was about 4.8

×10-7(n=6,RSD＝3.5％).ConclusionThe in vitro digestion and

dialysis are suitable for estimating the bioaccessibility of

mercury from Chinese traditional patent medicine which contains

cinnabar.

Key words：In vitro digestion and dialysis； Cinnabar；

Bioaccessibility； Mercury

朱砂又名丹砂、辰砂等，始载于《神农本草经》 列为上品药， ，

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主含硫化汞(HgS)；其性微寒，有毒，归心经，有镇心安神、清热解毒

之功，主治心神不宁、心悸消渴等病症［1］ 。近年来关于朱砂及含

朱砂中成药对肾脏、中枢神经系统及生殖系统的毒性屡见报道［2］ 。

目前，国际上对中药中重金属的毒副作用已相当重视，FDA 和 WHO 均

制定了类似食品、蔬菜以及茶叶等产品的重金属允许摄入量。美国、

欧盟、日本等国家及我国传统中药出口的东南亚地区都制定了严格的

重金属限量标准。但是，包括我国在内，所有针对汞制定的限量标准

都只考虑了汞总量，这显然不能说明问题。对于以 HgS 为主要成分的

矿物药朱砂，以汞总含量对其评价显然是片面的，因而如何合理评价

朱砂及含朱砂中成药中汞的安全性已经成为一个亟待解决的问题，对

朱砂中汞进行安全性评价就具有了重要的现实意义。

体外消化透析法(in vitro Digestion and Dialysis)是通过

模拟人体内消化环境，对营养物质被人体吸收利用部分进行评估的方

法。此实验法有很多的优点，它较之动物实验更有说服力，和人体实

验相比耗费小，简便易操作。近年来，科研人员在评价元素生物可接

受率方面做了大量工作，体外消化透析法已经被广泛应用于测定食品

中 Fe，Ca，Zn［3，4］ 等营养元素和环境中 Pb、Cd［4，5］ 等重金

属元素的生物可接受率，并证实体外消化透析法测得的生物可接受率

与人体吸收利用有较好的相关性。关于生物可接受率影响因素的报道

很多，M. Waisberg［6］ 等报道了 pH 值和接触时间等对 Cd 元素生物

利用性有显著影响。本实验研究了朱砂中汞溶出率和透析率的主要影

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