肾功能衰竭透析并发淀粉样沉积内存有脂蛋白.doc

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肾功能衰竭透析并发淀粉样沉积内存有脂蛋
白

作者：赵辉，刘金平，郑芳，崔秀凤，孙续国

【摘要】 目的：研究脂蛋白是否与淀粉样沉积共存，探讨脂蛋白

与透析相关淀粉样沉积形成的关系.方法：肾功能衰竭透析淀粉样沉

积症(DRA) 手术患者 15 例，腕关节韧带和椎间盘组织进行刚果红染色

结合偏振光诊断淀粉样沉积；Sudan Black B 染色鉴别是否有脂质存

在；抗人血清b 2 microglobulin
（b 2 MG抗体免疫组织化学染色 ）

鉴别淀粉样沉积相关蛋白类型.结果：DRA 患者椎间盘韧带组织内刚

果红染色以及偏振光阳性.连续组织切片病理形态学发现淀粉样沉积

阳性范围与脂肪染色阳性相同；并且与抗人血清b 2 MG 、抗高 抗体

密度脂蛋白(HDL) 抗体免疫组织化学反应与淀粉样沉积阳性部位范围

重合.结论：DRA b 2 MG
患者 相关淀粉样沉积内存有 HDL.

【关键词】 脂蛋白；淀粉样变；免疫组织化学；b 2 球蛋白

【AbstractTo
】 AIM: examine
the effect
of lipoproteins

on 2 microglobulin
b related amyloidogenesis.

levels2 microglobulin related
of b in dialysisamyloidosis 15

(DRA) patients
were determined red byConge staining and

polarized
light diagnosis. expression
Lipoprotein was examined

by Sudan Black B staining. The anti h

lipoprotein
(HDL) antibody
and anti 2 MGantibody b

immunoreactions
were compared
with red Congepositive reaction

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in amyloid deposed tissue in the DRA

red positive and
reaction HDL anti immnoreaction colocalized

in DRA the patients; red
the Congo positive
result colocalized

with b 2 MG anti immnoreactivation.
anti and HDL CONCLUSION:

The colocalizes
HDL with amyloid in patients
deposits DRA and

maybe it is associated b with 2 microglobulin

amyloidogenesis.

【Keywords 】 lipoprotein; b 2 microglobulin; dialysis

related amyloidosis; immunohistochemi

0引言

b 2 microglobulin(
b 2 MG) 是组织相融抗原四聚体的轻

链， 除成熟的红细胞和胎盘滋养层细胞以外， 其他细胞均含有b 2 MG ，

在免疫识别、免疫调节等方面发挥生物学作用［1-2 肾小球单位损 ］.

害患者血液中b 2 MG 蛋白浓度增加.随着血液透析时间治疗的延

长，发现淀粉样变沉积于椎间盘和关节韧带等组织，通过蛋白类型鉴

定证明淀粉样沉积的蛋白纤维为b 2 MG. 但免疫清除血浆中的b

2 MG 蛋白，未能降低透析相关淀粉样沉积症(dialysis relat

amyloidosis,［3.另外最近研究发现 Apolipoprotein
DRA) 率 ］ 的发生

A1 够形成淀粉样沉积蛋白纤维，Apo基因多态性与脑淀粉样沉积
能 E4

形成密切相关［4 .我们研究 DRA
］ 患者椎间盘韧带和腕关节韧带组织

内淀粉样沉积病理形态学特点以及脂蛋白沉积的特点，探讨脂蛋白在

淀粉样沉积形成关系.

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1对象和方法

1.1 对象

临床症状及病理形态学检查诊断为肾功能衰竭透析 5 以上 a

患者 15 9 （男 ，女 6 ）例，年龄 4568 .所有患者均行血清、尿液 ～岁

检查、肾功能检查，采血液后立即分离血清，分析血清b 2 MG 蛋白

水平.所有 DRA 患者手术标本，均-80 ℃和福尔马林两种方式保存.

1.2 方法

血清稀释后，取稀释液体 100L加入预先包被的测定b m

2 MG 反应板内，室温反应 1 h. 洗涤 3次后，加入 1 500
PBS ∶ 稀释

抗人血清b 2 MG 抗体（Dako, Glostrup, L
）100 Denmark m ，室温

反应 1h ，用酶标记二抗，室温反应 1h ，利用 DAB 显色，计算血清b

2 MG 蛋白的浓度.另标准冰冻切片， 500 甲醇溶液作用 2min
用 mL/L ，

重复 2次. 5 g/L Sudan Black溶液，37条件
（700 mL/L B 甲醇） ℃

下作用 1h. 重蒸馏水洗涤 3次， 色 5min.
核染 标准冰冻切片与 5g/L

过碘酸钠 PBS pH 7.4 8 min
缓冲液反应 ，流水洗涤 5 min. 浆 抗人血

HDL (AssayPro,ＭＯ， USA)条件下反应 1h PBS
抗体 Winfiled, 37 ℃ ，

洗涤 3次. DAB HCl Tris pH 7.6 缓冲液，H2O2 液（Dako, 混合

Glostrup, 作用 3min. 病理切片利用显微影像系统分
Denmark ） 连续

析刚果红染色与脂质染色程度的相关性. 统计学处理： 量资料用 计

x s表示，两组比较用 t检验. ±

2结果

患者（n=15 b 2 MG 3.28 ） mg/L 人
）血清 （ ±0.98 比正常

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