神经细胞黏附分子在胶质细胞系源性神经营养因子保护多巴胺能神经元中的作用.doc

神经细胞黏附分子在胶质细胞系源性神经营
养因子保护多巴胺能神经元中的作用

作者：王红军，刘红梅，王炎强，曹俊平，高殿帅

【关键词】 神经细胞

摘要 :目的 研究神经细胞黏附分子（neural cell adhesion

molecule ，NCAM ）在胶质细胞系源性神经营养因子（ glial cell

line-derived neurotrophic factor，GDNF）保护 1-甲基-4-苯基-1，

2，， 四氢吡啶 1-methyl-4-phenyl-1，，，
3 6- （ 2 3 6-tetrahydropyridine，

MPTP）损伤的多巴胺（dopamine，DA）能神经元中的作用。 方法 以

原代培养的小鼠腹侧中脑神经细胞作为观察对象， 实验分 4 组:空白对

照组、MPTP 组（在无血清培养基内加入 10mmol.L MPTP） GDNF+MPTP 、

组（在无血清培养基内加入 GDNF 保护的基础上，再加入 MPTP） 、抗

-NCAM+GDNF+MPTP 组 （在无血清培养基内加入 NCAM 封闭抗体阻断 GDNF

保护作用的基础上，再加入 MPTP） 。采用免疫细胞化学染色技术，观

察各组酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase，TH） 钙结合蛋白 D28K 、

（calbindin D28K，CB）表达的变化。 结果 MPTP 组 TH 阳性神经元

胞体明显小于空白对照组;CB 阳性神经元数目减少，有统计学意义。

GDNF+MPTP 组 TH 阳性神经元胞体与 MPTP 组有明显差别;CB 阳性神经元

数目与 MPTP 组有显著性差异。 -NCAM+GDNF+MPTP 组上述指标与 MPTP 抗

组无显著性差异。 结论 NCAM 参与了 GDNF 保护 DA 能神经元的作用，

该保护作用可能是通过增加 CB 的表达而完成的。

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关键词 :多巴胺能神经元;胶质细胞系源性神经营养因子;1-

甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶;钙结合蛋白 D28K;神经细胞黏附

分子

Abstract:Objective To explore the possible role of

neural cell adhesion molecule（NCAM）in mediating the protective

effect of glial cell line-derived neurotrophic actor（GDNF）

on dopaminergic（DA）neurons in the mesencephlic cell culture

in-jured by1-methyl-4-phenyl-1 ， 2 ， 3 ， 6-tetrahydropyridine

（ MPTP ） .Methods Primary culture of ventral mesencephalic

neurons was established.The neurons were studied in four

groups:normal control group，MPTP control group，MPTP plus GD-NF

test group，and anti-NCAM plus MPTP and GDNF test group.On the8th

day ， TH and CB immunohistochemistry was per-formed.The

morphologic indexes were measured and statistic

analysed.Results The long diameter of TH positive neurons in the

MPTP control group was significantly shorter than that in the

normal control group.The density of CB positive neurons was

al-so decreased in the MPTP injury control group.GDNF could

protect the DA neurons against the injury of MPTP.However，the

protective effect of GDNF on DA neurons was canceled，when the

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NCAM pathway was blocked by adding anti-NCAM in the fourth group

of the present experiment.Conclusion NCAM can mediate the

protective effect of GDNF on DA neurons，and this role may be

related to the increase of CB expression.

Key words:dopaminergic neurons;glidal cell

line-derived neurotrophic factor;1-methyl-4-phenyl-1，2，3，

6-tet-rahydropyridine;calbindin;neural cell adhesion molecule

中脑黑质多巴胺（dopamine，DA）能神经元参与控制自主运

动，它们的变性坏死是帕金森病（Parkin-son disease，PD）的主要

病理特征［1］ 。如何保护这些容易受到损伤而变性死亡的 DA 能神经

元成为 PD 治疗研究的热点之一。

胶质细胞系源性神经营养因子（glial cell line-derived

neurotrophic factor，GDNF）于 1993 年由 Lin 等人首次分离纯化胶

质细胞系，其对多巴胺能神经元的保护作用已为众多学者所证实［2～

4］ ，但其保护作用机制如何，目前尚不明确。

介导 GDNF 信号转导的通路有 Ret 依赖性和 Ret 非依赖性两大

类［5］ ，最新研究表明在 Ret 非依赖性信号通路中，神经细胞黏附

分子（neural cell adhe-sion molecule，NCAM）可能发挥了重要作

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