钙的测定方法.doc

附　录　A
（规范性附录）
饲料中钙的测定方法
GB/T　6436－2002
代替 GB/T　6436－1992
A.1　 范围
本标准规定了用高锰酸钾法和乙二胺四乙酸二钠络合物滴定测定饲料中钙含量的方法。
本标准适用于饲料原料和饲料产品。本方法钙的最低检测限为150mg/kg（取试样1g时）。
A.2　 引用标准
下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。
GB/T 6682－1992　分析实验室用水规格和实验方法（neq ISO 36961987）
GB/T 601－1988　　化学试剂　滴定分析（容量分析）用标准溶液的制备
第一篇　　高锰酸钾法（仲裁法）
A.3　 原理
将试样中有机物破坏，钙变成溶于水的离子，用草酸铵定量沉淀，用高锰酸钾法间接测定钙含量。
A.4　 试剂
实验用水应符合GB/T 6682中三级用水规格，使用试剂除特殊规定外均为分析纯。
A.4.1　 硝酸。
A.4.2　 高氯酸：70%～72%。
A.4.3　 盐酸溶液：1＋3。
A.4.4　 硫酸溶液：1＋3。
A.4.5　 氨水溶液：1＋1。
A.4.6　 草酸铵水溶液（42g/L）：称取4.2g草酸铵溶于100mL水中。
A4.7　 高锰酸钾标准溶液［c(1/5KMnO4)＝0.05mol/L］的配制按GB/T 60规定。
A.4.8　 甲基红指示剂（1g/L）：称取0.01g甲基红溶于100mL95%乙醇中。
A.5　 仪器和设备
A.5.1　 实验室用样品粉碎机或研钵。
A.5.2　 分样筛：孔径0.42mm(40目)。
A.5.3　 分析天平：感量0.0001g。
A.5.4　 高温炉：电加热，可控温度在（550±20）℃。
A.5.5　 坩埚：瓷质。
A.5.6　 容量瓶：100mL。
A.5.7　 滴定管：酸式，25mL或50mL。
A.5.8　 玻璃漏斗：直径6cm。
A.5.9　 定量滤纸：中速，7cm～9cm。
A.5.10　 移液管：10、20mL。
A.5.11　 烧杯：200mL。
A.5.12　 凯氏烧瓶：250 mL或500mL。
A.6　 试样制备
取具有代表性试样至少2kg，用四分法缩分至250g，粉碎过0.42mm孔筛，混匀，装入样品瓶中，密闭，保存备用。
A.7　 测定步骤
A.7.1　 试样的分解
A.7.1.1　 干法
称取试样2g～5g于坩埚中，精确至0.0002g，在电炉上小心炭化，再放入高温炉于550℃下灼烧3h（或测定粗灰分后连续进行），在盛灰坩埚中加入盐酸溶液10mL和浓硝酸数滴，小心煮沸，将此溶液转入100 mL容量瓶中，冷却至室温，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。
A.7.1.2　 湿法
称取试样2g～5g于250mL凯氏烧瓶中，精确至0.0002g，加入浓硝酸10mL，加热煮沸，至二氧化氮黄烟逸尽，冷却后加入高氯酸10mL，小心煮沸至溶液无色，不得蒸干（危险），冷却后加蒸馏水50mL，且煮沸驱逐二氧化氮，冷却后转入100 mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。
A.7.2　 测定
准确移取试样分解液10mL～20mL（含钙量20mg左右）于200mL烧杯中，加蒸馏水100mL，甲基红指示剂2滴，滴加氨水溶液至溶液呈橙色，若滴加过量，可加盐酸溶液调至橙色，再多加2滴使其呈粉红色（pH为2.5～3.0），小心煮沸，慢慢滴加热草酸铵溶液10mL，且不断搅拌，如溶液变橙色，则应补加盐酸溶液使其呈红色，煮沸数分钟，放置过夜使沉淀陈化（或在水浴上加热2h）。
用定量滤纸过滤，用1＋50的氨水溶液洗沉淀6～8次，至无草酸根离子（接滤液数毫升加硫酸溶液数滴，加热至80℃，再加高锰酸钾溶液（4.7）1滴，呈微红色，且半分钟不褪色）。
将沉淀和滤纸转入原烧杯中，加硫酸溶液10mL、蒸馏水50mL，加热至75℃～80℃，用高锰酸钾标准溶液（4.7）滴定，溶液呈粉红色且半分钟不褪色为终点。
同时进行空白溶液的测定。
A.8　 测定结果的计算与表述
A.8.1　 结果计算
测定结果按式（1）计算：
(V－V0) ×C×200
　 m×V ¹
(V－V0) ×C×0.02
V ¹ V ¹
100

m ×
X（%）= 　 ×100 = 　　 × 100 ……………（1）

式中：X——以质量分数表示的钙含量，% 。
V——试样消耗高锰酸钾标准溶液的体积，mL；
V0——空白消耗高锰酸钾标准溶液的体积，mL；
　　C——高锰酸钾标准溶液的浓度，mol/L；
V ¹——滴定时移取试样分解液体积，mL；
m——试样的质量，g。
0.02——与1.00 mL高锰酸钾标准溶液［c(1/5KMnO4)＝1.00mol/L］相当的以克表示的钙的质量。
A.8.2　 结果表示
每个试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果，所得结果应表示至小数点后两位。

第二篇　　乙二胺四乙酸二钠络合滴定法
A.9　 原理
将试样中有机物破坏，钙变成溶于水的离子，用三乙醇胺、乙二胺、盐酸羟胺和淀粉溶液消除干扰离子的影响，在碱性溶液中以钙黄绿素为指示剂，用EDTA标准溶液络合滴定钙，可快速测定钙的含量。
A.10　 试剂和溶液
实验用水应符合GB/T6682中三级用水规格，使用试剂除特殊要求外均为分析纯。
A.10.1　 盐酸羟胺。
A.10.2　 三乙醇胺。盐酸。
A.10.3　 乙二胺。
A.10.4　 盐酸水溶液：1＋3。
A.10.5　 氢氧化钾溶液 200g/L：称取20g氢氧化钾溶于100mL水中。
A.10.6　 淀粉溶液(10g/L)： 称取1g可溶性淀粉入200mL烧杯中，加5mL水润湿。加95mL沸水搅拌，煮沸，冷却备用（现配现用）。
A.10.7　 孔雀石绿水溶液 （1g/L）。
A.10.8　 钙黄绿素一甲基百里香酚蓝指示剂 0.1g钙黄绿素与0.10g甲基麝香草酚蓝与0.03g百里香酚酞、5g氯化钾研细混匀，贮存于磨口瓶中备用。
A.10.9　 钙标准溶液 0.0010g/mL：称取2.497g于105～110℃干燥3h的基准碳酸钙，溶于40mL盐酸（11.4）中，加热赶除二氧化碳，冷却，用水转移至1000mL容量瓶中，稀释至刻度。
A.10.10　 乙二胺四乙酸二钠（EDTA）标准滴定溶液 ： 称取3.8gEDTA入200mL烧杯中，加200mL水，加热溶解冷却后转至1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度。
A.10.10.1　 EDTA标准滴定溶液的标定：准确吸取钙标准溶液（11.9）10.0mL按试样测定法进行滴定。
A.10.10.2　 EDTA滴定溶液对钙的滴定度按式计算：
ρ×V
V0

T= ……………………………………………………（2）

式中：T——EDTA标准滴定溶液对钙的滴定度，g/mL；
ρ——钙标准溶液的浓度，g/mL；
V——所取钙标准溶液的体积，mL；
V0——EDTA标准滴定溶液的消耗体积，mL。
A.11　 仪器和设备
仪器和设备同第五章。
A.12　 测定步骤
A.12.1　 试样分解
试样分解同7.1。
A.12.2　 测定
准确移取试样分解液5 mL～25mL（含钙量2 mg～25mg）。加水50mL，加淀粉溶液（11.6）10mL、三乙醇胺（11.2）2mL、乙二胺（11.3）1mL、1滴孔雀石绿（11.7），滴加氢氧化钾溶液（11.5）至无色，再过量10mL，加0.1g盐酸羟胺（11.1）(每加一种试剂都须摇匀)，加钙黄绿素（11.8）少许，在黑色背景下立即用EDTA标准滴定溶液（11.10）滴定至绿色荧光消失呈现紫红色为滴定终点。同时做空白实验。
A.13　 滴定结果的表示与计算
A.13.1　 测定结果按式（3）计算：
T×V2×V0
m×V1
T×V2
V1
V0

m ×
X（%）= ×100 = × 100 …………………（3）

式中：X――以质量分数表示的钙含量，%；
T——EDTA标准滴定溶液对钙的滴定度，g/mL；
V0——试样分解液的总体积，mL；
V1——分取试样分解液的体积，mL；
V2——试样实际消耗EDTA标准滴定溶液的体积，mL；
m——试样的质量，g。
A.13.2　 结果表示同8.2。