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细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 细胞活性检测试剂
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
AR1156 MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 500次 200.00元
AR1157 中性红细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 500次 200.00元
AR1158 WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 100次 150.00元
AR1159 WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 500次 450.00元
AR1160 Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒) 500次 560.00元

一. MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
AR1156 MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 500次 200.00元

产品简介：
1. MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的实验方法。由于细胞活力与细胞数呈正相关，因此常常用来检测细胞的增殖情况。MTT可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物formazan。在特定溶剂存在的情况下，可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。
2. 本试剂盒采用了独特的Formazan溶解液配方，无需去除原有的培养液，可以直接加入Formazan溶解液溶解formazan。从而避免了由于去除培养液时formazan被部分去除而引起的误差。
3. 本试剂盒背景低，灵敏度高，线性范围宽，使用方便提高了可靠性。
4. 本产品为500 次（5个96孔细胞培养板）操作。

产品内容：
MTT染色液 5ml
Formazan溶解液 55ml
说明书 1份

保存条件：
MTT染色液需-20℃避光保存；Formazan溶解液可以室温保存。

注意事项：
1. 由于使用96孔板进行检测，如果你的细胞要养48 h或更长，建议不要吝啬96-孔板的四周边孔，这32个边孔不能使用，建议加入灭菌PBS以饱和中间64个孔的水分。因为细胞培养过程中，边孔的水分蒸发很快，培养液及里面的药物会出现浓缩现象，细胞的状况就复杂了
2. MTT溶剂在低温情况下会凝固，使用前请室温放置或20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3. MTT一般最好4ºC避光保存两周内有效，保存在-20度长期保存，避免反复冻融，最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解，尤其当MTT变为灰绿色时就绝对不能再用了。
4. Formazan溶解液结冻或产生沉淀时可以37℃水浴孵育以促进溶解，并且必须在全部溶解并混匀后使用。
5. 孵育时，须避光
6. MTT有致癌性，用的时候小心,有条件最好带那种透明的簿膜手套.配成的MTT需要无菌，MTT对菌很敏感。

使用说明：
1. 收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔，（边缘孔用无菌PBS填充）。
2. 5%CO2，37℃孵育，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板，具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。加入浓度梯度的药物，原则上，细胞贴壁后即可加药，或两小时，或半天时间，每孔0-10ul，设3-5个复孔.建议设5个。
3. 5%CO2，37℃孵育16-48小时，倒置显微镜下观察。
4. 每孔加入10微升MTT染色液，继续培养4h。若药物与MTT能够反应，可先离心后弃去培养液，小心用PBS冲2-3遍后，再加入含MTT的培养液。
5. 每孔加入100微升Formanzan溶解液，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪570nm测定吸光度。如无570nm滤光片，可以使用560-600nm的滤光片。
6. 同时设置调零孔（培养基、MTT染色液、Formanzan溶解液），对照孔（细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT染色液、Formanzan溶解液）

二. 中性红细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
AR1157 中性红细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 500次 200.00元

产品简介：
1. 中性红细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(Neutral Red Cell Proliferation and Cytotoxicology Assay Kit)是一种基于细胞对于中性红的摄入能力来检测细胞增殖或细胞毒性的试剂盒。
2. 中性红可以被活细胞所摄入，并在溶酶体中积累。在细胞增殖加快时，细胞数量增多，可以摄入的中性红的量就会增加。在细胞受到损伤时，中性红的摄入能力会下降。这样通过对于中性红摄入量的不同就可以确定细胞的增殖或毒性情况。
3. 中性红同时也是一种pH指示剂，在酸性时呈红色，在pH6.8升至pH8.0时由红色逐渐转变为黄色。细胞核中的核酸呈酸性，因此细胞核会被染成红色。由于溶酶体(lysome)中也是酸性环境，因此溶酶体也可以被中性红染色液染成红色。
4. 中性红的分子式为C15H17IN4，分子量为288.8。
5. 本产品为500 次（5个96孔细胞培养板）操作。

产品内容：
中性红染色液 10ml
中性红检测液 100ml
说明书 1份

保存条件：
-20℃保存，一年有效。中性红染色液需避光保存。

注意事项：
1. 准备一台可以测定A540的酶标仪或微量分光光度计。
2. 初次使用建议先取少量样品做好预实验。
3. 使用时最好带那种透明的簿膜手套。

使用说明：
1. 把细胞培养在96孔培养板内，每孔加入200微升细胞培养液，并给予药物刺激。
2. 至待检测时间点，如果培养液中的药物推测不会对后续检测产生干扰，直接加入20微升中性红染色液；如果培养液中的药物可能会对后续检测产生干扰，先用PBS、DPBS或HBSS等适当溶液洗涤1-2次，随后加入200微升细胞培养液，并加入20微升中性红染色液。
3. 细胞培养箱内孵育2小时。（对于细胞密度非常低，细胞代谢速率非常慢的情况，可以把孵育时间延长到3-4个小时）
4. 去除含有中性红染色液的细胞培养液，用PBS、DPBS或HBSS等适当溶液洗涤1-2次。
5. 加入200微升中性红检测液，室温摇床上裂解10分钟。在摇床上摇动可以促进样品的裂解。
6. 测定样品的A540，可以选择690nm作为参考波长。
7. 同时设置调零孔，对照孔

常见问题：
1. 中性红染色液长期存放会产生沉淀。可以直接吸取染色液的上清液使用，也可以过滤去除沉淀后继续使用，不会影响使用效果。因为染色液中的中性红本来就是过量的。
2. 96孔板在细胞培养过程中会存在蒸发问题。在加入中性红染色液前，如果培养液存在明显的蒸发问题，会影响细胞的生长状态，并严重影响后续的检测结果。

三． WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
AR1158 WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 100次 150.00元
AR1159 WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 500次 450.00元

产品简介：
1. WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(WST-1 Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)是一种广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。
2. WST-1是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。
3. WST-1是MTT的一种升级替代产品，和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。首先，MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解；而WST-1和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。其次，WST-1产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。再次，WST-1比XTT和MTS更加稳定，使实验结果更加稳定。另外，WST-1和MTT、XTT等相比，线性范围更宽，灵敏度更高
4. 本试剂盒可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测，也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测，或一些药物诱导的细胞生长抑制检测等。
5. 本试剂盒检测非常便捷。无须使用同位素，所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞，不必收集细胞，也不必采用额外步骤去溶解formazan。可以用于大批量样品的检测。
6. 酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。
7. WST-1对细胞无明显毒性。加入WST-1显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读板，使检测时间更加灵活，便于找到最佳测定时间。
8. 本试剂盒可以测定100/500个样品。

产品内容：
WST-1 (粉末) 1管
电子耦合试剂 1ml/5ml
说明书 1份

保存条件：
-20℃避光保存，一年有效。WST-1粉末溶解后，4℃避光可以保存一周，-20℃避光可以保存半年(宜适
当分装，尽量避免反复冻融)。

注意事项：
1. 由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发的问题。一方面，由于96孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加PBS，水或培养液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。
2. 使用时最好带那种透明的簿膜手套。

使用说明：
1. WST-1溶液的配制：把1ml/5ml电子耦合试剂加入到WST-1粉末中，完全溶解即成WST-1溶液。WST-1溶液4℃避光可保存一周，而不影响使用效果。短期内不使用的WST-1溶液，分装后可以-20℃避光保存半年(尽量避免反复冻融)。冻存的WST-1溶液溶解后可能会观察到一些沉淀物，这是正常现象，37℃水浴孵育2-10分钟，通常可以完全溶解。
2. 收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100ul，铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔，（边缘孔用无菌PBS填充）。5%CO2，37℃孵育，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板，具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。加入浓度梯度的药物，原则上，细胞贴壁后即可加药，或两小时，或半天时间，每孔0-10ul，设3-5个复孔.建议设5个。
3. 每孔加入10微升WST-1溶液，继续培养4h。若药物与WST-1能够反应，可先离心后弃去培养液，小心用PBS冲2-3遍后，再加入含WST-1的培养液。
4. 在细胞培养箱内继续孵育时间长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定，初次实验时可以在0.5、1、2和4小时后分别用酶标仪检测，然后选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续实验。
5. 把96孔板置于摇床上摇动一分钟，以充分混匀待检测体系。
6. 在450nm测定吸光度。如无450nm滤光片，可以使用420-480nm的滤光片。可以使用大于600nm的波长作为参考波长进行双波长测定

四. Cell Counting Kit-8细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
AR1160 Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒) 500次 560.00元

产品简介：
1. Cell Counting Kit-8简称CCK-8试剂盒，是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。
2. CCK-8试剂中含有WST–8：化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐]，它在电子载体的作用下被细胞线粒体中的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。
3. WST-8是MTT的一种升级替代产品，和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。首先，MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解；而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。其次，WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。再次，WST-8比XTT和MTS更加稳定，使实验结果更加稳定。另外，WST-8和MTT、XTT等相比线性范围更宽，灵敏度更高。
4. WST-8和WST-1相比，检测灵敏度更高，更易溶解，并且更加稳定。
5. 本试剂盒可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测，也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测，或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。
6. 本试剂盒检测非常便捷。试剂盒仅一管已经配制好的含有WST-8的CCK-8溶液，无须再进行任何配制等操作。无须使用同位素，所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞，不必收集细胞，也不必采用额外的步骤去溶解formazan。可以用于大批量样品的检测。
7. 酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。
8. WST-8对细胞无明显毒性。加入WST-8显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读板，使检测时间更加灵活，便于找到最佳测定时间。
9. 关于不同细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒的比较和选择。
10. 本试剂盒可以测定500个样品。

产品内容：
CCK-8溶液 5ml
说明书 1份

保存条件：
4℃避光保存一年有效，-20℃避光保存两年有效。

注意事项：
1. 由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发的问题。一方面，由于96孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加PBS，水或培养液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。
2. 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应，如果待检测体系中存在较多的还原剂，例如一些抗氧化剂会干扰检测，需设法去除。
3. 用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定。
4. 使用时最好带那种透明的簿膜手套。

使用说明：
1. 收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔，（边缘孔用无菌PBS填充）。
2. 5%CO2，37℃孵育，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板，具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。加入浓度梯度的药物，原则上，细胞贴壁后即可加药，或两小时，或半天时间，每孔0-10ul，设3-5个复孔.建议设5个。
3. 每孔加入10微升CCK-8溶液。如果起始的培养体积为200微升，则需加入20微升CCK-8溶液，其它情况以此类推。可以用加了相应量细胞培养液和CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。如果担心所使用的药物会干扰检测，需设置加了相应量细胞培养液、药物和CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。
4. 在细胞培养箱内继续孵育0.5-4小时，对于大多数情况孵育1小时就可以了。时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定，初次实验时可以在0.5、1、2和4小时后分别用酶标仪检测，然后选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续实验。
5. 在450nm测定吸光度。如无450nm滤光片，可以使用420-480nm的滤光片。可以使用大于600nm的波长，例如650nm，作为参考波长进行双波长测定。