1、
实验六、维生素C的测定——2，6一二氯靛酚滴定法
（1）原理
还原型抗坏血酸可以还原染料2，6一二氯靛酚。该染料在酸性溶液中是粉红色（在中性或碱性溶液中呈蓝色），被还原后颜色消失；还原型抗坏血酸还原染料后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准染料液的量，与样品中抗坏血酸含量成正比。
（2）试剂
①1%草酸溶液（m/V）
②2%草酸溶液（m/V）
③抗坏血酸标准溶液 准确称取20mg抗坏血酸，溶于1%草酸溶液，并稀释至100ml，置冰箱中保存。用时取出5ml，置于50ml容量瓶中，用1%草酸溶液定容，配成0.02mg／ml的标准使用液。
标
2、定 吸取标准使用液 5ml于三角瓶中，加入6%碘化钾溶液 0.5ml、1%淀粉溶液 3滴，以 0.001mol/L碘酸钾标准溶液滴定，终点为淡蓝色。
计算 c＝
式中 c——抗坏血酸标准溶液的浓度，mg/ml；
V1—一滴定时消耗0.001mol/L碘酸钾标准溶液的体积，ml；
V2—一滴定时所取抗坏血酸的体积，ml；
0.088—一1ml 0.001mol/L碘酸钾标准溶液相当于抗坏血酸的量，mg/ml
④2，6-二氯靛酚溶液 称取 2，6-二氯靛酚50mg，溶于200ml含有 52mg碳酸氢钠的
热水中，待冷，置于冰箱中过夜。次日过滤于
3、250ml棕色容量瓶中，定容，在冰箱中保存。
每星期标定一次。
标定 取 5ml已知浓度的抗坏血酸标准溶液，加入1%草酸溶液 5rnl，摇匀，用 2，6-二氯靛酚溶液滴定至溶液呈粉红色，在15s不褪色为终点。
计算：T＝
式中 T—一每毫升染料溶液相当于抗坏血酸的毫克数， mg/ml；
c—一抗坏血酸的浓度，mg/ml；
V1－一抗坏血酸标准溶液的体积，ml；
V2——消耗2，6-二氯靛酚的体积，ml。
⑤ 0.000167mol／L碘酸钾标准溶液 精确称取干燥的碘酸钾0.3567g，用水稀释至100ml，取出 lml，用水稀
4、释至100ml，此溶液 lml相当于抗坏血酸 0.088mg。
⑥ 1%淀粉溶液（m/V）。
⑦6%碘化钾溶液（m/V）。
（3）测定步骤
①样品的制备
鲜样的制备 称 100g鲜样加等量1%草酸溶液，倒入捣碎机中打成匀浆，取10~40g匀浆（含l～2mg抗坏血酸）倒入1000ml容量瓶中。用1%草酸溶液稀释至刻度，混匀。
干样的制备 称1～4g干样（含l~2mg抗坏血酸）放入研钵内，加入1%草酸溶液磨成匀浆，倒入100ml容量瓶内，用1%草酸溶液稀释至刻度，混匀。
将上述样液过滤，滤液备用。不易过滤的样品可用离心机沉淀后，倾出上清液，过滤，备用。
②滴定 吸取 5～10
5、ml滤液，置于 50ml三角瓶中，快速加入2，6-二氯靛酚溶液滴
定，直到红色不能立即消失，而后再尽快地一滴一滴地加入（样品中可能存在其他还原性杂质，但一般杂质还原染料的速度均比抗坏血酸慢），以呈现的粉红色在15s内不消失为终点。同时做空白。
（4）实验记录
2,6-二氯靛酚的标定
Vc标液的浓度c
Vc标液的体积V1
2,6-二氯靛酚的体积V2
20mg/L
25ml
o.35ml
样品测定：
样品
样品体积V
2,6-二氯靛酚标液体积V3
饮料酸柠檬
25ml
0.34ml
（5）结果计算
T＝
式中 χ—一样品中抗坏血酸含量，mg/L；
T——lml染料溶液相当于抗坏血酸标准溶液的量， mg/ml；
V3—一滴定样品溶液时消耗染料的体积， ml；
V0——滴定空白时消耗染料的体积，ml；
V—一滴定时所取样品体积，ml。
（6）结论
经测定样品饮料酸柠檬中维生素C含量为19mg/L。
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