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氟伐他汀对大鼠气道平滑肌增生的影响

作者：李毅，戚好文，刘颖格，陈秉耀

【关键词】 氟伐他汀

【Abstract】AIM： To study the effects of fluvastatin,

a new synthetic inhibitor of 3-hydrox-3-methylglutaryl coenzyme

A (HMG-CoA) reductase, on the proliferation of airway smooth

muscle cell (ASMC) from rats. METHODS： MTT and cell growth

counts were used to analyze the effects of fluvastatin on the

proliferation of ASMC. RESULTS ： Fluvastatin inhibited the

proliferation of ASMC stimulated by fetal calf serum or

histamine. The inhibitory rate of the proliferation of ASMC was

above 20% or 100% when the concentrations of fluvastatin were

10-5 mol・ L-1 or 10-4 mol・L-1 and there was a

concentration-dependent decrease in the proliferation of rat

ASMC. CONCLUSION： Fluvastatin can inhibit ASMC proliferation

either stimulated by fetal calf serum or histamine.

【 Keywords 】 fluvastatin; airway;muscle ， smooth;

hyperplasia; asthma

【摘要】 目的: 观察氟伐他汀（Fluvastatin）对离体培养

的大鼠气道平滑肌（Airway Smooth Muscle Cell, ASMC）增生的影响.

方法: MTT 法及细胞计数检测体外培养的 ASMC 的增生.结果: 氟伐他

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汀 对 于 由 血 清 和 组 织 胺 刺 激 引 起 的 ASMC 增 生 均 具 有 抑 制 作 用

(P<0.01)，1×105 mol・L-1 浓度的氟伐他汀对 ASMC 的增

生的抑制率达 20%以上，而 1×10-4 mol・L-1 浓度的氟伐他汀

则可完全抑制 ASMC 的增生.结论: 氟伐他汀可抑制 ASMC 的增生， 且这

种作用与其浓度呈一定相关性.

【关键词】 氟伐他汀;气道；肌，平滑; 增生；哮喘

0 引言

哮喘是一种慢性气道反应性炎症，其主要临床特征为气道高

反应性和可逆性的气道阻塞.大量尸体解剖资料显示， 哮喘患者气道内

不仅有炎症存在，还有气道平滑肌细胞（Airway Smooth Muscle Cell,

ASMC ） 的 显 著 增 生 ［ 1 - 4］ .ASMC 增 生 是 产 生 气 道 重 建 （ Airway

remodeling）的重要原因，并与气道高反应性的发生密切相关，气道

重建已成为哮喘发病机制中具有特殊意义的因素，如何抑制哮喘患者

气道重建是国内外医学界所广泛关注的课题［３，４］.国内外学者已

采用多种方法对气道重建的发生机制及如何防治进行了广泛研究，并

取得初步进展.近年来有研究发现氟伐他汀（Fluvastatin）不但有降

低人体内胆固醇的作用，还发现它对多种细胞的增生具有抑制作用.

本研究观察氟伐他汀对离体培养的大鼠 ASMC 增殖的影响， 为氟伐他汀

用于防治哮喘患者气道重建提供实验依据.

1 材料和方法

11 材料Ⅳ型胶原酶、 兔抗鼠bactin mAb、 组织胺、 ： MTT Sigma

公司；DMEM：Gibco 公司；胎牛血清（FCS） ：杭州四季青生物制品工

2

程公司；氟伐他汀：瑞士诺华制药有限公司.

12 方法

1.2.1 大鼠 ASMC 分离与培养健康、雄性 SD 大鼠（第四军医

大学实验动物中心提供）1 只，体质量 260 g，脊椎脱臼法处死，无菌

剥离气管，细心剥离气管内、外膜，剪碎剩余组织块，约 1 mm×1 mm

×1 mm 大小，2 g・L-1Ⅳ型胶原酶 37℃消化 2 次，每次 30 min，

中间吹打组织块 1 次， 用含 100 mL・L-1 胎牛血清的 DMEM 冲洗，

100 目不锈钢网过滤，离心后制成细胞悬液，接种于培养瓶内.

1.2.2 大鼠 ASMC 纯化经原代培养后，细胞呈多克隆生长，选

择细胞形态呈梭形的克隆在倒置显微镜下机械分离.分离所得细胞继

续培养一代，2.5 g・L-1 胰酶短暂消化，13 传代，静置细胞

30 min，去除未贴壁细胞，利用平滑肌细胞容易贴壁的特性进一步纯

化所得细胞.

1.2.3 大鼠 ASMC 鉴定 ASMC 离体培养时呈梭形，有较长的突

起，细胞核位于细胞中央，排列成旋涡状、放射状或栅栏状是其生长

特点.培养细胞经 SABC 免疫组织化学鉴定， 细胞bactin 阳性.4~12 98%

代于对数生长期的细胞用于实验.

1.2.4 对 ASMC 生长的影响 以 2×104 个/孔将细胞接种于 96

孔培养板内，37℃下孵育 36 h 使细胞贴壁，弃上清液，无血清 DMEM

清洗 2 遍，进行以下试验 ① 血清培养试验 : 每孔先加入 100

mL・L-1FCS 约 200 mL，再加入氟伐他汀使其终浓度分别为 1

×10-5mol・L-1，1×10-4 mol・L-1；② 组织胺培养试

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