实验室规则及常识.doc

第四部分 附 录

一、实验室规则及常识

1．每个同学都应遵守学习纪律，维护实验室秩序，保持室内安静，不大声说笑或喧哗。
2．实验前应认真作好预习，明确目的和要求，了解本次实验内容的基本原理和操作步骤。
3．在实验过程中要听从教师的指导，严肃认真的按操作规程进行实验，并简要、准确地将实验结果及原始数据记录在专用的实验记录本上，养成良好的实事求是的科学作风。课后及时总结复习，根据原始记录进行整理，并写出实验报告，按时送交任课教师评阅。
4保持实验室环境和仪器的整洁是做好实验的重要条件及关键。必须维持实验桌面及试剂药品架上的清洁整齐，不要乱放和乱扔，仪器和试剂药品放置要井然有序公用试剂药品用毕后立即盖好放回原处，要特别注意保持药品及试剂的纯净，严禁混杂。
5．使用仪器、药品、试剂和各种器材都必须注意爱护及节约，不得浪费。洗涤和使用玻璃仪器时，应谨慎仔细，防止损坏，在使用贵重精密仪器时，应严格遵守操作规程，发现故障立即报告教师，不要擅自动手拆散和检修。
6．废弃溶液可倒入水槽内，但强酸、强碱溶液必须先用水稀释后，再放水冲走。强腐蚀性废弃试剂药品、废纸及其他固体废物或带有渣滓沉淀的废液均应倒入废品缸内，不能倒入水槽内。
7．实验室内一切物品，未经本室教师许可，严禁携出室外，借物时必须办理登记手续。仪器损坏时，应随即向教师报告，如实说明情况并认真登记后方可补领。

8．必须遵守和熟悉实验室安全规章及防护知识，不得违反和破坏。禁止在实验室内吸烟。使用电炉应有人在旁，不可擅自离开不管，用毕后切记断电。
9．每次实验结束后，应各自立即将仪器洗净倒置放好，并整理好实验桌面上的物品。值日生要负责当日实验室的卫生和安全检查，做好全部清理工作，离开实验室前应关上水、电、煤气、门窗等，严防不安全隐患事故的发生。
10．对实验内容和安排不合理之处可提出改进意见，做到教学相长。对实验中出现的一切反常现象可开展分析和讨论。
11．洗净的仪器要放在架上或干净的纱布上晾干，不能用抹布擦试，更不能用抹布擦试仪器内壁。
12．挪动干净玻璃仪器时，勿使手指接触仪器内部。
13．取出的试剂和标准溶液，如未用尽，切勿倒回原试剂瓶内，以免掺混。
14．凡是发生烟雾、有毒气体及有臭味气体的实验，必须在通风橱内进行。
15．用实验动物进行实验时，不许戏弄动物。进行杀死或解剖等操作，应按规定方法进行，绝对不能用动物、手术器械或药物开玩笑。
16．一般容量仪器的容积都是在20℃下校准的。使用时如温差在5℃以内，容积改变不大，可以勿略不计。

二、实验室安全及防护知识

1．实验室安全知识
在生物化学实验室中，经常与毒性很强、有腐蚀性、易燃烧和具有爆炸性的化学药品直接接触，常常使用易碎的玻璃和瓷质的器皿，以及在水、电、煤气等高温电热设备的环境下进行着紧张而细致的工作。因此，必须十分重视安全工作和具备一定的防护知识。
（1）使用电器设备（如烘箱、恒温水浴、离心机、电炉等）时，严防触电，绝不可用湿手或在眼睛旁视时开关电闸和电器开关。凡是未装地线或漏电的仪器，一律不能使用。
（2）使用煤气灯或酒精喷灯时，应做到火着人在，人走火灭。
（3）使用浓酸、浓碱，必须极为小心地操作，防止溅失。用移液管吸量这些试剂时，必须使用橡皮球或洗耳球，绝对不能用口直接吸取。如果不慎溅洒在实验桌面或地面上，必须及时用湿抹布或拖布擦洗干净。
（4）使用易燃物（如乙醚、乙醇、丙酮、笨等）时，应特别小心。不要大量放在桌上，更不应在靠近火源处放置。只有在远离火源时，或将火焰熄灭后才可大量倾倒这类试剂。低沸点的有机溶剂不准在火焰上直接加热，仅限在水浴上利用回流冷凝装置进行加热或蒸馏。如果不慎倾出了相当量的易燃液体。应立即关闭室内所有的火源和电加热器，并打开窗门及通风设备迅速用抹布或毛布擦拭撒出的液体，转入适当的容器中后再作妥善处理。
（5）用油浴操作时，应小心加热，随时用温度计观测，绝对不能使温度超过油的燃烧温度。
（6）易燃和易爆物质的残渣（如金属钠、白磷、火柴头等）不得倒入水槽或废物缸中，应倾入或收集在指定的容器内。
（7）毒物应按实验室规定及办理审批手续后领取，使用时严格操作，用后妥善处理。
2．实验室灭火方法
实验中一旦发生了火灾切不可惊慌失措，应保持镇静。首先立即切断室内一切火源和电源。然后根据具体情况积极正确地进行抢救和灭火。常用的方法有：
（1）在可燃液体燃着时，应立即拿开着火区域内的一切可燃物质，关闭通风器，防止扩大燃烧。若着火面积较小，可用石棉布、湿布或沙土覆盖，隔绝空气使之熄灭。但覆盖时要轻，避免碰坏或打翻盛有易燃溶剂的玻璃器皿，导致更多的溶剂流出而再着火。
（2）酒精及其它可溶于水的液体着火时，可用水灭火。
（3）汽油、乙醚、甲苯等有机溶剂着水时，应用石棉布或砂土扑灭。绝对不能用水，否则反而会扩大燃烧面积。
（4）金属钠着火时，可把砂子倒在它的上面。
（5）导线着火时不能用水及二氧化碳灭火器，应切断电源或用四氯化碳灭火器。
（6）衣服被烧着时切忌奔走，可用衣服、大衣等包裹身体或躺在地上滚动藉以灭火。
（7）发生火灾时应注意保护现场。较大的着火事故应立即报警。
3．实验室急救措施
在实验过程中不慎发生受伤事故，应立即采取适当的急救措施：
（1）受玻璃割伤及其它机械损伤：首先必须检查伤口内有无玻璃或金属等物碎片。然后用硼酸水洗净，再涂以碘酒或红汞水，必要时可用护创膏或纱布包扎。若伤口较大或过深而大量出血，应迅速在伤口上部和下部扎紧血管止血，立即到医院诊治。
（2）烫伤一般用浓的（90%—95%）酒精消毒后，涂上苦味酸软膏。如果伤处红痛或红肿（一级灼伤），可涂医用橄榄油或用棉花沾酒精敷盖伤处；若皮肤起泡（二级灼伤），不要弄破水泡，防止感染；若伤处皮肤呈棕色或黑色（三级灼伤），应用干燥而无菌的消毒纱布轻轻包扎好，急送医院治疗。
（3）强碱（如氢氧化钠，氢氧化钾等），钠、钾等触及皮肤而引起灼伤时，要先用大量自来水冲洗，再用5%硼酸溶液或2%乙酸溶液涂洗。
（4）强酸、溴等触及皮肤而致灼伤时，应立即用大量自来水冲洗，再以5%碳酸氢钠溶液或5%氢氧化铵溶液洗涤。
（5）如酚触及皮肤引起鸭伤，可用酒精洗涤。
（6）若煤气中毒时，应到室外呼吸新鲜空气。如严重时应立即到医院诊治。
（7）水银容易由呼吸道进入人体，也可以经皮肤直接吸收而引起积累性中毒。严重中毒的征象是口中有金属味，呼出气体也有气味；流唾液，牙床及嘴唇上有硫化汞的黑色，淋巴腺及唾液腺肿大。若不慎中毒时，应送医院急救。急性中毒时，通常用碳粉或呕吐剂彻底洗胃，或者食入蛋白（如1升牛奶加三个鸡蛋清）或蓖麻油解毒并使之呕吐。
（8）触电：触电时可按下列方法之一切断电路。
①关闭电源；②用干木棍使导线与被害者分开；③使被害者和土地分离。急救时急救者必须做好防止触电的安全措施，手或脚必须绝缘。

三、实验用器皿的清洗及洗涤液的配制

实验中所使用的玻璃仪器及塑料器皿清洁与否，直接影响实验结果，往往由于器皿的不清洁或被污染而导致较大的实验误差，甚至会出现相反的实验结果。因此，实验用器皿洗涤清洁工作是十分重要的基本操作是做好实验的前提及实验成败的关键之一。
1．洗涤液的种类及配制
（1）0.5%去垢剂溶液（常用洗涤液）。
（2）铬酸洗液[又称重铬酸钾（或钠）——浓硫酸洗涤液，简称洗液]广泛用于玻璃仪器的洗涤。其配制方法如下：
①称取5g重铬酸钾(或钠)粉末放入250ml烧杯中，加5ml水，尽量使其溶解。然后边搅拌，边缓缓注入浓H2SO4l00ml，待洗液温度冷却至40℃以下，将其转移到具玻塞的细颈干燥的试剂瓶内贮存备用。
②称取10g重铬酸钾粉末置于500ml烧杯中，加水20ml，尽量使其溶解。然后慢慢注入浓H2SO4180ml，随加随搅拌。冷却后贮于具玻塞的细颈试剂瓶中备用。
③量取100ml工业硫酸置于250ml烧杯中，小心加热，慢慢加5g重铬酸钾粉末，边加边搅拌，待全部溶解后，冷却并贮于具玻塞的试剂瓶中备用。
（3）浓HCl（工业用）常用于洗去水垢或某些无机盐沉淀。
（4）浓HNO3（常用于洗涤除去金属离子）。
（5）1mol·L-1KOH溶液。
（6）8mol·L-1尿素洗涤液（PH1.0）适用于洗涤盛蛋白质溶液及血样的器皿。
（7）10-3mol·L-1EDTA溶液用于除去塑料容器内壁污染的金属离子。
（8）5%—10%磷酸三钠（Na3PO4·12H2O）溶液（用于洗涤油污物）。
（9）氢氧化钾（KOH）的乙醇溶液和含有高锰酸钾的氢氧化钠（NaOH）溶液，适用于清除容器内壁污垢，但这两种强碱性洗涤液对玻璃仪器的侵蚀性很强，故洗涤时间不宜过长，使用时应小心慎重。
（10）有机溶剂：丙酮、乙醇、乙醚等可用于洗脱油脂、脂溶性染料等污痕。二甲苯可洗脱油漆类污垢。
2．玻璃仪器的清洗
（1）初用玻璃仪器的洗涤
新购置的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性物质，可先用去垢剂（0.5%水溶液）或肥皂水洗刷，再用自来水洗净。然后浸泡1%—2%HCl溶液中过液，次日取出用自来水充分冲洗，最后再用蒸馏水漂洗数次，置烘箱内烘干或倒置晾干备用。
（2）使用过的玻璃仪器的洗涤
①一般玻璃仪器洗涤
许多污染物（包括有机物及金属离子等）易粘附于玻璃容器的内壁上，故每次使用均须及时清洗。通常情况下先用自来水冲洗 至无污物，再用去垢剂洗涤或浸泡于0.5%去垢剂水溶液中，将器皿内外（特别是内壁）仔细刷洗后，用自来水充分洗净，最后用蒸馏水漂洗数次，置烘箱（或微波炉）烘干或倒置在清洁处晾干备用。凡洗净的玻璃器皿，其壁上不沾有水珠，否则表示尚未洗净，应按上述方法重新洗涤。量具玻璃仪器不能烘烤，只能晾干或风干。
对于进行高灵敏度的分析及检测实验所用的器皿，除用上述方法清洗外，还需采用其他特殊洗涤方法彻底清除污染物，使器皿洗得十分洁净是非常必要的。一般是把玻璃器皿浸泡于铬酸洗液中4—6h或过夜，再分别用自来水充分冲洗和蒸馏水漂洗，烘干或晾干备用。通过洗液处理的玻璃器皿，在其器壁上的有机污物会被完全清除。如有必要还可用浓HNO3洗涤及处理玻璃器皿，最后用双蒸馏水充分漂洗，这样将使器壁上污染的金属离子得以清除。
具有传染性样品的容器，如病毒、传染病患者的血清等沾污的容器，应先进行消毒处理后再进行清洗。盛过毒物的容器，特别是剧毒药品和放射性同位素物质的容器，必须经过专门处理，确知没有残余毒物或放射性存在方可进行清洗。
②移液管（吸量管）的洗涤
移液管每次使用后须及时用流水冲洗或浸泡于冷水中，特别是吸取粘滞性较大的液体（全血、血浆、血清等）后应立即用流水充分冲洗，以免物质干涸和堵塞移液管。通常使用过的移液管经自来水冲洗后，可浸泡于0.5%去垢剂溶液中或铬酸洗液中过夜（不少于4h），然后分别用自来水充分冲洗和蒸馏水漂洗，晾干备用。
③玻璃比色皿和石英比色皿的清洗
比色皿使用后应立即用蒸馏水充分冲洗，倒置在清洁处晾干备用。所有比色皿均可用0.5%去垢剂溶液洗涤，必须用脱脂棉小心地清洗，然后用大量蒸馏水充分漂洗干净，倒置晾干。但不能用氢氧化钾的乙醇溶液及其他强碱洗涤液清洗比色皿，因这样导致比色皿的严重腐蚀。
3．塑料器皿的洗涤
聚乙烯塑料制品容器在生物化学实验室中的应用与日俱增，因此塑料器皿的清洗也是非常重要的。新购买的塑料器皿一般先用自来水清洗后，应以8mol·L-1尿素溶液（PH1.0）洗涤，再用蒸馏水漂洗。随后用1mol·L-1KOH溶液洗涤，再用蒸馏水漂洗。然后用10-3mol·L-1EDTA溶液洗涤，以除去污染的金属离子，最后用双蒸馏水充分漂洗，倒置晾干备用。经过上述洗涤步骤处的器皿，每次使用后可以0.5%去垢剂溶液洗涤，再分别用自来水充分冲洗和蒸馏水漂洗，晾干后即可使用。如果必要也可按碱→尿素→EDTA洗涤顺序处理，以除去器皿上的污染物。
多数塑料器皿可在烘箱中干燥，但温度不宜过高，硝酸纤维制品离心管不能置烘箱中干燥，因硝酸纤维是一种易爆物。

四、实验室常用仪器的使用

（一）容量玻璃仪器的使用方法
容量仪器有装量和卸量两种。量瓶和单刻度管为装量仪器。滴定管、一般吸管和量筒等均为卸量仪器。近年来，自动取样器已广泛应用于生物化学教学和科学研究中，是一种取液量连续可调的精密仪器，使用极为方便。
1．吸管 吸管是生物化学实验中最常用的卸量容器。移取溶液时，如吸管不干燥，应预先用所吸取的溶液将吸管冲洗2~3次，以确保所吸取的操作溶液浓度不变。吸取溶液时，一般用右手的大拇指和中指拿住管颈刻度线上方，把管尖插入溶液中。左手拿吸耳球，先把球内空气压出，然后把吸耳球的尖端接在吸管口，慢慢松开左手指，使溶液吸入管内。当液面升高至刻度线上方，再使吸管离开液面，此时管的末端仍靠在盛溶液器皿的内壁上。略为放松食指，使液面平稳下降，直到溶液的弯月面与刻度标线相切时，立即用食指压紧管口，取出吸管，插入接受器中，管尖仍靠在接受器内壁，此时吸管应垂直，并与接受器约呈15°夹角。松开食指让管内溶液自然地沿器壁流下。遗留在吸管尖端的溶液及停留的时间要根据吸管的种类进行不同处理。
（1）无分度吸管（单刻度吸管，移液管） 下图1 使用普通无分度吸管卸量时，管尖所遗留的少量溶液不要吹出，停留等待3秒钟，同时转动吸管。
（2）分度吸管（多刻度吸管、直管吸管） 分度吸管有完全流出式、吹出式和不完全流出式等多种型式。
①完全流出式（下图中2和3） 上有零刻度，下无总量刻度的，或上有总量刻度，下无零刻度的为完全流出式。这种吸管又分为慢流速、快流速两种。按其容量和精密度不同，慢流速吸管又分为A级与B级，快流速吸管只有B级。使用时A级最后停留15秒，B级停留3秒，同时转动吸管，尖端遗留液体不要吹出。
②吹出式 标有“吹”字的为吹出式，使用时最后应吹出管尖内遗留的液体。

③不完全流出式（上图中4） 有零刻度也有总量刻度的为不完全流出式。使用时全速流出至相应的容量标刻线处。
为便于准确快速地选取所需的吸管，国际标准化组织统一规定：在分度吸管的上方印上各种彩色环，其容积标志如下表：

标称容量（ml）
0．1
0．2
0．25
0．5
1
2
5
10
25
50
色标
红
黑
白
红
黄
黑
红
桔红
白
黑
标注方式
单
单
双
双
单
单
单
单
单
单

不完全流出式在单环或双环上方再加印一条宽1~1.5mm的同颜色彩环以与完全流出式分度吸管相区别。
使用注意事项：
（1）应根据不同的需要选用大小合适的吸管，如欲量取1.5ml的溶液，显然选用2ml吸管要比选用1ml或5ml吸管误差小。
（2）吸取溶液时要把吸管插入溶液深处，避免吸入空气而将溶液从上端溢出。
（3）吸管从液体中移出后必须用滤纸将管的外壁擦干，再行放液。
2．滴定管 可以准确量取不固定量的溶液或用于容量分析。常用的常量滴定管有25ml及50ml两种，其最小刻度单位是0.1ml，滴定后读数时可以估计到小数点后2位数字。在生物化学工作中常使用2及5ml半微量滴定管。这种滴定管内径狭窄，尖端流出的液滴也小，最小刻度单位是0.01ml~0.02ml，读数可到小数点的后第3位数字。在读数以前要多等候一段时间，以便让溶液缓慢流下。
3．量筒 量筒不是吸管或滴定管的代用品。在准确度要求不高的情况下，用来量取相对大量的液体。不需加热促进溶解的定性试剂可直接在具有玻璃塞的量筒中配制。
4．容量瓶 容量瓶具有狭窄的颈部和环形的刻度。是在一定温度下（通常为20℃）检定的，含有准确体积的容器。使用前应检查容量瓶的瓶塞是否漏水，合格的瓶塞应系在瓶颈上，不得任意更换。容量瓶刻度以上的内壁挂有水珠会影响准确度，所以应该洗得很干净。所秤量的任何固体物质必须先在小烧杯中溶解或加热溶解，冷却至室温后才能转移到容量瓶中。容量瓶绝不应加热或烘干。
（二）称量仪器的使用方法
生物化学实验中常用的称量仪器有台秤和光学天平。目前，不同型号的电子天平应用也很普通。它具有实用、快速和称量范围大的特点。
台秤
台秤又称药物天平是用于粗略称量的仪器。常用的100g（感量0.1g）、200g（感量0.2g）、500g（感量0.5g）和1 000g（感量1g）4种。其使用方法如下：
（1）根据所称物品的重量选择合适的台秤。
（2）将游码移至标尺“0”处，调节横梁上的螺丝使指针停止在刻度中央或使其左右摆动的格数相等。
（3）将称量用纸或玻璃器皿（易吸潮的药品称重时应放在带盖的器皿中）放在左盘上，砝码放在右盘上。使指针重新平衡摆动，则右盘上的砝码总量（包括游码代表的重量）即代表左盘上称量用纸（或器皿）的重量，记录此重量。
（4）向纸或器皿中加入称重的物品再向左盘上加砝码使重新达到平衡，将所得砝码总重减去纸或容器的重量即得所称物品的重量。
（5）必须用镊子夹取砝码，加砝码的顺序是从大到小。
（6）称量完毕，将游码重新移至“0”处，清洁称重盘，放回砝码。
光学天平
1．光学天平的使用方法
（1）被称物要称准到1mg时才准使用分析天平。被称物重量不得超过天平最大载荷。若被称物较重，应先在粗天平上试称。
（2）在同一次实验中应使用同一台天平和同一盒砝码。不同砝码盒内之砝码不能随意调换。
（3）每次称量前检查天平位置是否水平，零点偏差多少。零点偏差超过1mg时，需调整后再用。
（4）天平机构有任何损坏或不正常情况时，在未消除故障以前应停止应用。
（5）使用过程中要特别注意保护玛瑙刀口，起落升降横梁时应缓慢，不得使天平剧烈振动。
（6）取放被称物或加减砝码都必须把天平横梁托起（关闭天平）以免损坏刀口。
（7）被称物的温度必须和天平室的室温一致。
（8）被称物须盛在干净的容器中称量。具有腐蚀性的蒸气或吸湿性的物质必须放在密闭的容器内称量。
（9）被称物和砝码要放在天平盘的中央。
（10）天平的前门不得随意打开。称量过程中只能打开左右两个边门。取放物品或加减砝码时开关门要轻而慢。称量时天平的各玻璃门要紧闭。
（11）必须用镊子夹取砝码，严禁用手拿取。按从大到小顺序缓慢增加砝码。加环码果要注意避免环码跳落或变位以致影响称量数据。
（12）使用完毕后必须将天平横梁托住（将开关手柄关闭，最好取下），然后将砝码放回原位（包括盒砝码和环砝码）。清洁天平，断开电源，再用罩把天平罩好。必须登记使用情况后方可离开天平室。
2．天平的调整 较大的调整应由保管天平的专人或教师进行。
（1）调水平 用天平前位两个底脚螺丝调正水准器。气泡在水准器正中央即为水平。
（2）调零点 即使微量标尺上的0点与游标（光屏）刻线完全重合。
①较大的零点调整 可移动横梁上左右平衡螺丝的位置。
②较小的零点调整 即微量标尺“0”点与游标（光屏）刻线相距3格以内，可转动底板下面的拨杆。
（3）调光学系统
①射影颜色 若灯光射影显示骚扰的颜色，明暗不一，可转动和移动聚光镜的位置。
②射影不正 如光学投影上的刻度偏上或偏下，可移动一次反射镜的角度来调整。
③射影明晰性 如光学投影上的射影不清晰或重线，可调放大镜的距离。
（4）调感量 用重心螺丝调感量。重心螺丝向上移动时感量增大。重心螺丝向下移动时感量减小。没有一定经验的人，不要随意自行调整感量。
5）调秤盘磨擦的适度 当天平停止使用时，秤盘应正好与下面的托盘轻微接触，如托盘太高或太低，可将托盘拨下，调整托盘螺丝的长短使其摩擦适度。
（6）当天平开动后，光学投影在停止前应左右摆动自如。如摆动突然停止，则指针、阻尼器等发生磨擦，应仔细检查各部分安装是否正确然后纠正其不正确处，让天平自由地摆动。
3．读数方法

4．注意事项 天平应固定专人管理，定期复检、调整及维护。
（1）天平室要保持高度清洁，清扫天平室时，只能用带潮气的布擦拭，决不能用湿透的拖把拖地。潮湿物品切勿带入室内，以免增加湿度。
（2）应随时清洁天平外部，至少一周清洁一次。一般可用软毛刷，绒布或麂皮拂去天平上的灰尘，清洁时注意不得用手直接接触天平零件，以免水分遗留在零件上引起金属氧化和量变。因此应戴细纱手套或极薄的胶皮手套，并顺其金属光面条纹进行，以免零件光洁度受损。为避免有害物质的存留，在每次称量完毕后，应立即清洁底坐。横梁上之玛瑙刀口的工作棱边应保持高度清洁，常使用麂皮顺其棱边前后滑动，用慢速清洁，中刀承和边刀垫之玛瑙平面及各部之玛瑙轴承也用麂皮清洁。阻尼器的壁上可用软毛刷和鹿皮清洁后，再用20~30倍放大镜观察是否仍有细小物质的存在。
（3）天平玻璃框内需放防潮剂，最好用变色硅胶，并注意更换。
（4）在天平和砝码附近应放有该天平和砝码实差的检定合格证书，以便衡量时获得准确的必要数据。
（5）搬动天平时一定要卸下横梁、吊耳和秤盘。远距离搬动还要包装好。箱外应标志方向和易损符号，并注有精密仪器切勿倒置等字样。
（三）干燥箱和恒温箱
干燥箱用于物品的干燥和干热灭菌，恒温箱用于微生物和生物材料的培养。这两种仪器的结构和使用方法相似，干燥箱的使用温度范围为50~250℃，常用鼓风式电热以加速升温。恒温箱的最高工作温度为60℃。
1．使用方法
（1）将温度计插入座内（在箱顶放气调节器中部）。
（2）把电源插头插入电源插座。
（3）将电热丝分组开头转到1或2位置上（视所需温度而定），此时可开启鼓风机促使热空气对流。电热丝分组开头开启后，红色指示灯亮。
（4）注意观察温度计。当温度计温度将要达到需要温度时，调节自动控温旋钮，使绿色指示灯正好发亮，十分钟后再观察温度计和指示灯，如果温度计上所指温度超过需要，而红色指示灯仍亮，则将自动控温旋钮略向反时针方向旋转，直调到温度恒定在要求的温度上，指示灯轮番显示红色和绿色为止。自动恒温器旋钮在箱体正面左上方。它的刻度板不能做为温度标准指示，只能做为调节用的标记。
（5）在恒温过程中，如不需要三组电热丝同时发热时，可仅开启一组电热丝。开启组数越多，温度上升越快。
（6）工作一定时间后，可开启顶部中央的放气调节器将潮气排出，也可以开启鼓风机。
（7）使用完毕后将电热丝分组开关全部关闭，并将自动恒温器的旋钮沿反时针方向旋至零位。
（8）将电源插头拔下。
2．注意事项
（1）使用前检查电源，要有良好地线。
（2）干燥箱无防爆设备，切勿将易燃物品及挥发性物品放箱内加热。箱体附近不可放置易燃物品。
（3）箱内应保持清洁，放物网不得有锈，否则影响玻璃器皿洁度。
（4）使用时应定时监看，以免温度升降影响使用效果或发生事故。
（5）鼓风机的电动机轴承应每半年加油一次。
（6）切勿拧动箱内感温器，放物品时也要避免碰撞感温器，否则温度不稳定。
（7）检修时应切断电源。
（四）电热恒温水浴
电热恒温水浴用于恒温加热和蒸发，最高工作温度为100℃，此仪器利用控温器控制温度，所以工作原理和使用方法与干燥箱相似。但应注意使用前在水浴槽内加足量的水以避免电热管烧坏。如较长时间不使用，必须放尽水槽内的全部水。
（五）酸度计
酸度计是测量pH值的精密仪器，也可用来测量电动势。
1．使用方法
（1）安装
①电源的电压与频率必须符合仪器铭牌上所指明的数据，同时必须接地良好，否则在测量时可能指针不稳。
②仪器配有玻璃电极和甘汞电极。将玻璃电极的胶木帽夹在电极夹的小夹子上。将甘汞电极的金属帽夹在电极夹的大夹子上。可利用电极夹上的支头螺丝调节两个电极的高度。
③玻璃电极在初次使用前，必须在蒸馏水中浸泡24小时以上。平常不用时也应浸泡在蒸馏水中。
④甘汞电极在初次使用前，应浸泡在饱和氯化钾溶液内，不要与玻璃电极同泡在蒸馏水中。不使用时也浸泡在饱和氯化钾溶液中或用橡胶帽套住甘汞电极的下端毛细孔。
（2）校整
①将“pH—mv”开关拨到pH位置。
②打开电源开头指示灯亮，预热30分钟。
③取下放蒸馏水的小烧杯，并用滤纸轻轻吸去玻璃电极上的多余水珠。在小烧杯内入选择好的，已知pH的标准缓冲溶液。将电极浸入。注意使玻璃电极端部小球和甘汞电极的毛细孔浸在溶液中。轻轻摇动小烧杯使电极所接触的溶液均匀。
④根据标准缓冲液的pH，将量程开关拧到0~7或7~14处。
⑤调节控温钮，使旋钮指示的温度与室温同。
⑥调节零点，使指针指在pH7处。
⑦轻轻按下或稍许转动读数开关使开关卡住。调节定位旋钮，使指针恰好指在标准缓冲液的pH数值处。放开读数开关，重复操作，直至数值稳定为止。
⑧校整后，切勿再旋动定位旋钮，否则需重新校整。取下标准液小烧杯，用蒸馏水冲洗电极。
（3）测量
①将电极上多余的水珠吸干或用被测溶液冲洗二次，然后将电极浸入被测溶液中，并轻轻转动或摇动小烧杯，使溶液均匀接触电极。
②被测溶液的温度应与标准缓冲溶液的温度相同。
③校整零位，按下读数开关，指针所指的数值即是待测液的pH。若在量程pH0~7范围内测量时指针读数超过刻度，则应将量程开关置于pH7~14处再测量。
④测量完毕，放开读数开关后，指针必须指在pH7处否则重新调整。
⑤关闭电源，冲洗电极，并按照前述方法浸泡。
2．注意事项
（1）防止仪器与潮湿气体接触。潮气的浸入会降低仪器的绝缘性，使其灵敏度、精确度、稳定性都降低。
（2）玻璃电极小球的玻璃膜极薄，容易破损。切忌与硬物接触。
（3）玻璃电极的玻璃膜不要沾上油污，如不慎沾有油污可先用四氯化碳或乙醚冲洗，再用酒精冲洗，最后用蒸馏水洗净。
（4）甘汞电极的氯化钾溶液中不允许有气泡存在，其中有极少结晶，以保持饱和状态。如结晶过多，毛细孔堵塞，最好从新灌入新的饱和氯化钾溶液。
（5）如酸度计指针抖动严重，应更换玻璃电极。
3．标准缓冲液的配制
酸度计所用的标准缓冲液的试剂容易提纯也比较稳定。常用的配制方法如下：
（1）pH=4.00的标准缓冲液 称取在105℃干燥1小时的邻苯二甲酸氢钾5.07g，加重蒸馏水溶解，并定容至500ml。
（2）pH=6.88的标准缓冲液 称取在130℃干燥2小时的磷酸二氢钾（KH2PO4）3.401g，磷酸氢二钠（Na2HPO·12H2O）8.95g或无水磷酸氢二钠（Na2HPO4）3.549g，加重蒸馏水溶解并定容至500ml。
（3）pH=9.18的标准缓冲液 称取硼酸钠（Na2B4O7·10H2O）3.8144g或无水硼酸钠（Na2B4O7）2.02加重蒸馏水溶解并定容至100ml。
（六）离心机
离心机是利用离心力对混合液（含有固形物）进行分离和沉淀的一种专用仪器。实验室常用电动离心机有低速、高速离心机和低速、高速冷冻离心机，以及超速分析、制备两用冷冻离心机等多种型号。其中以低速（包括大容量）离心机和高速冷冻离心机应用最为广泛，是生化实验室用来分离制备生物大分子必不可少的重要工具。在实验过程中，欲使沉淀与母液分开，常使用过滤和离心两种方法。但在下述情况下，使用离心方法效果较好。
①沉淀有粘性或母液粘稠。②沉淀颗粒小，容易透过滤纸。③沉淀量过多而疏松。④沉淀量很少，需要定量测定。或母液量很少，分离时应减少损失。⑤沉淀和母液必须迅速分开。⑥一般胶体溶液。
1．电动离心机的基本结构和性能
①普通（非冷冻离心机
这类离心机结构较简单，可分小型台式和落地式两类，配有驱动电机、调速器、定时器等装置，操作方便。低速离心机其转速一般不超过4000rpm，台式高速离心机最大转速可达18000rpm。
②低速冷冻离心机
转速一般不超过4000rpm，最大容量为2—4L，是实验室最常用于大量初级分离提取生物大分子、沉淀物等。其转头多用铝合金制的甩平式和角式两种，离心管有硬质玻璃、聚乙烯硬塑料和不锈钢管多种型号。离心机装配有驱动电机、定时器、调整器（速度指示）和制冷系统（温度可调范围为-20—+40℃），可根据离心物质所需，更换不同容量和不同型号转速的转头。
③高速冷冻离心机
转速可达20000rpm以上，除具有低速冷冻离心机的性能和结构外，高速离心机所用角式转头均用钛合金和铝合金制成。离心管为具盖聚乙烯硬塑料制品。这类离心机多用于收集微生物、细胞碎片、细胞、大的细胞器、硫酸沉淀物以及免疫沉淀物等。
④超速离心机
转速可达50000rpm以上，能使亚细胞器分级分离，并用于蛋白质、核酸分子量的测定等。其转头为高强度钛合金制成，可根据需要更换不同容量和不同型号的转速转头。超速离心机驱动电机有两种，一种为调频电机直接升速，另一种为通过变速齿轮箱升速。为了防止驱动电机在高速运转中产热，装有冷却驱动电机系统（风冷、水冷），限速器、记时器、转速记录器等。此外，超速离心机还装配有抽真空系统。
2．低速离心机的一般使用规程
（1）使用方法
①检查离心机调速旋钮是否处在零位，外套管是否完整无损和垫有橡皮垫。
②离心前，先将离心的物质转移入合适的离心管中，其量以距离心管口1~2cm为宜，以免在离心时甩出。将离心管放入外套管中，在外套管与离心管间注入缓冲水，使离心管不易破损。
③取一对外套管（内已有离心管）放在台秤上平衡。如不平衡，可调整缓冲用水或离心物质的量。将平衡好的套管放在离心机十字转头的对称位置上。把不用的套管取出，并盖好离心机盖。
④接通电源，开启开关。
⑤平稳、缓慢地转动调速手柄（约需1~2分钟）至所需转速，待转速稳定后再开始计时。
⑥离心完毕，将手柄慢慢地调回零位。关闭开关。切断电源。
⑦待离心机自行停止转动手，才可打开机盖，取出离心样品。
⑧将外套管、橡胶垫冲洗干净，倒置干燥备用。
（2）注意事项
①离心机要放在平坦和结实的地面或实验台上，不允许倾斜。
②离心机应接地线，以确保安全。
③离心机启动后，如有不正常的噪音及振动时，可能离心管破碎或相对位置上的两管重量不平衡，应立即关机处理。
④须平稳、缓慢增减转速。关闭电源后，要等候离心机自动停止。不允许用手或其他物件迫使离心机停转。
⑤一年检查一次电动机的电刷及轴承磨损情况，必要时更换电刷或轴承。注意电刷型号必须相同。更换时要清洗刷盒及整流子表面污物。新电刷要自由落入刷盒内。要求电刷与整流子外圆吻合。轴承缺油或有污物时，应清洗加油，轴承采用二硫化钼锂基脂润滑。加量一般为轴承空隙的。
（七）分光光度计
1．分光光度计的基本部件
分光光度计根据使用的波长范围不同可分为紫外光区、可见光区和红外光区分光光度计。无论哪一类分光光度计都包括5个基本部件：光源、单色器、吸收池、检测器和测量仪表。分光光度计各部件的次序如图所示：

（1）光源
分光光度计上常用的光源有两种：钨丝灯或氢灯。
在可见光区、近紫外光区和近红外光区常用钨丝灯作为光源,其工作温度约为2870°K.。钨丝灯的灯丝为紧密螺旋形，若将灯丝对准仪器光学装置的轴线时，能在出光狭缝的平面上投射光亮均匀的直线影像。钨丝灯的缺点是在短波长（＜350nm）处辐射强度小，而且必须小心地控制流到灯上的电流才能维护恒定的强度。
在紫外光区多使用氢弧灯。氢灯内充有低压氢气，在两极间施以一定电压来激发氢分子可发出紫外光。因玻璃吸收紫外线（光学玻璃的透射范围为340~1000 nm），所以氢灯的泡壳用石英制成（石英的透射范围为185~3500 nm ），或在灯泡的发光处开一石英窗。
若用氘灯代替氢灯，虽发射的波长范围相同，但在紫外光区的发射强度可增加3倍之多。因氘灯价格昂贵，一般很少使用。
（2）单色器
单色器是把混合光波分解为单一波长光的装置。在分光光度计中多用棱镜或光栅作为色散元件
①棱镜 光波通过棱镜时，不同波长的光折射率不同。波长愈短，传播速度愈慢，折射率也愈大；反之，波长愈长，传播速度愈快，折射率则愈小。因而能将不同波长的光分开。因为玻璃对紫外线的吸收力强，故玻璃棱镜多用于可见光分光光度计。石英和熔凝石英（fused silica）棱镜可在整个紫外光区传播光，故在紫外光分光光度计中广为应用。熔凝石英虽比石英在短波长方面更易传播光，但因价格昂贵，仅在需要高强度辐射时才被使用。
②衍射光栅 在石英或玻璃的表面上刻划许多平行线（每英寸约刻15 000~30 000条）。由于刻线处不透光，通过光的干涉和衍射使较长的光波偏折角度大，较短的光波偏折角度小，因而形成光谱。
在光源照到棱镜（或光栅）以前，一般先要经过一个入射狭缝，再通过平行光镜使成为平等光束投到棱镜上。透过棱镜的光再经另一聚光镜，在此聚光镜的焦面内可得一清楚的光谱图。如在焦线处放一出射狭缝，转动棱镜使光谱移动，就可以从出射狭缝射出所需要的单色光。整个装置称为“单色器”（见下图）。

（3）吸收池（比色杯、比色皿、比色池）
一般由玻璃、石英或熔凝石英制成，用来盛被测的溶液。在低于350nm的紫外光区工作时，必须采用石英池或熔凝石英池。
当光透过吸收池时，有一部分光因空气和玻璃接触面的反射而损失，其数值为4%。为了减少这种反射损失，吸收池必须与光束方向垂直。此外，在制造吸收池时，也应尽可能使每套池子完全相同（如玻璃的质料、厚度等）以免产生误差。
吸收池上的指纹、油污或壁上的沉积物都会显著地影响其透光性，因此在使用前务必彻底清洗。
（4）检测器
常用的检测器有3种：光电池、光电管和光电倍增管。
①光电池 光电池是由3层物质组成的圆形或长方形薄片，装在一个特制的匣子里面。第一层是一种导电性良好的金属（如银），这是光电池的负极。中间极薄的一层是半导体硒，第3层是铁，这是光电池的正极。当光电池受光照射以后，半导体硒的表面逸出电子，这些电子只向负极方向移动，而向正极移动，因此在上下两金属片间产生一个电位差，线路连通时即产生电流（见图）。

②光电管 光电管是由封装在真空透明封套里的一个半圆柱型阴极和一个丝阳极组成。阴极的凹面上有一层光电发射材料，此种物质经光照射可发射电子。当在两极间加有电位时，发射出来的电子就流向丝阳极而产生光电流。对于相同的辐射强度，它所产生的电流约为光电池所产生的电流的1/4。由于光电管具有很高的电阻，所以产生的电流容易放大。（见图）
③光电培增管 光电倍增管远比光电管优越，它可将第一次发射出的电子数目放大到数百万倍。下图为光电管倍增管的示意图。

和光电管相似，光电培增管的阴极表面在光的照射下可发射电子。电子被带有正电的兼性阳极（dynode）吸引，并向着它加速运动。当电子打在兼性阳极上时，能引起更多的电子从表面射出。这些射出的电子又被第二个兼性阳极所吸引，同样再产生更多的电子。这样的过程重复9次后，每个光子可形成106~107个电子。这些电子最后被收集在阳极上。所得到的倍增电流可进一步加以放大和测量。
（5）测量装置
一般常用的紫外光和可见光分光光度计有3种测量装置，即电流表、记录器和数字示值读数单元。现代的仪器常附有自动记录器，可自动描出吸收曲线。
2．722型光栅分光光度计使用
（1）仪器外型及各部分功能

仪器外形、面板及主要操作旋钮及按键如图所示。说明如下：
①测量方式（Range）选择
仪器有以下三种方式可供选择，按下相应键后即完成该选择：
a．T：在此方式时，仪器作透射比测试。
b．Ab：仪器工作于吸光度测试方式，测试范围0—1.999Ab。
c．Conc：工作于浓度测定方式。仪器用某一已知浓度的标准样品作校定。
②CONC：在仪器工作于浓度测量方式时，调节本旋钮，可以使表头显示的读数与标准溶液的读数一致。以后在测试待测样品时，则可直接读出测得的浓度数值。
③ABS O（FINE）：消光值细调旋钮。在T=100.0%时将A细调零。
④0%T ADJ（透射比T调零）：打开样品室盖，光电管暗盒光门自动关闭。光电管处于无辐照状态。调节此旋钮，可以补偿暗