1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,第三节,动物的克隆,1,动物细胞的培养和克隆形成,2,（,1,）离体的动物细胞能否正常的生活、表现出正常的生命活动？,只要条件适合就能表现出正常的生命活动，如细胞的分裂、生长等,（,2,）是不是所有的动物细胞都能在离体的情况下表现出生命活动？,不是，越是幼嫩的细胞越容易培养并表现出正常的生命活动，因此在细胞培养时一般选择幼嫩的细胞,3,（,3,）细胞离体培养时，表现出什么样的生命活动？,生长、分裂（繁殖）至接触抑制,（,4,）离体的动物组织能否像离体的动物细胞一样表现出体外培养的特征？,动物组织在离体的
2、情况下，也能培养并表现出正常的生命活动；但与细胞培养也有不同的地方：在得到离体的组织后，需要机械处理或胰蛋白酶处理得到分散的细胞再进行细胞培养，同时动物组织培养过程中可以伴随组织分化。,4,（,5,）动物组织培养具体是如何实现的？,动物组织培养的发展历史,什么是原代培养？什么是传代培养,动物组织培养时，培养细胞能不能,无限制地存活下去,阅读教材,5,1.,过程：,（一）动物细胞培养,6,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,胰蛋白酶,剪碎,单个细胞,加培养液,制成,细胞悬浮液,细胞系、,细胞株,细胞增殖,去掉组织间蛋白,动物细胞培养不能,最终培养成生物体,原代培养,传代培养,7,如何界定原代培养和传
3、代培养；细胞株和细胞系？,细胞悬浮液,转入特殊培养液中培养,分瓶培养,原代培养,传代培养,细胞系（可传代的细胞）,连续细胞系：,有限细胞系：,二倍体细胞,发生转化的细胞系（遗传物质发生了改变，具不死性）,细胞株：,从原代培养物或细胞系中获得用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群，称细胞株。遗传物质未变,8,大家有疑问的，可以询问和交流,可以互相讨论下，但要小声点,9,（,5,）如何获得纯系的细胞系？,采用细胞克隆,什么是克隆培养法。,细胞克隆的最基本要求是什么？,什么细胞容易进行克隆培养,阅读教材,如何提高细胞克隆形成率？,克隆培养法的主要用途是什么？,10,1.,过程：,
4、诱导方式,物理法：,化学法：,生物法：,灭活仙台病毒,聚乙二醇,电刺激等,（二）动物细胞融合,11,1.,过程：,灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面,细胞膜被病毒颗粒穿通,细胞膜连接,细胞融合，形成杂种细胞,12,主要用于制备,单克隆抗体,获得杂种植株,用途,物理、化学方法,（同左）,灭活的病毒,物理（离心、振荡、电刺激）,化学（聚乙二醇）,诱导方法,使细胞分散后诱,导细胞融合,去除细胞壁后诱,导原生质体融合,细胞融合的方法,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性、,植物细胞全能性,原理,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,植物体细胞杂交、动物细胞融合的比较,13,1.,其由何种细胞产生？,2.,主要分
5、布在哪里？,3.,如何得到抗体？,(,三）单克隆抗体,动物细胞融合的重要应用,14,抗体,1,、抗原 动物体内,刺激,浆细胞,抗原 动物体内,刺激,浆细胞,抗体,抗原不纯,抗体不纯,筛选单一浆细胞,不能增殖，产生大量抗体,2,、特异性差、纯度低；,产量低、反应不够灵敏,15,设计方案：,一个,B,淋巴细胞只分泌一种特异性抗体,小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖,单克隆抗体的优点：化学性质单一,特异性,灵敏度高,杂种细胞,16,2.,制备过程：,（,1,）给小鼠抗原注射的目的是什么？,诱导小鼠体内的特异性免疫应答，分化出浆细胞。,（,2,）两次筛选的目的相同吗？,不同，第一次筛选是为了筛选杂交瘤细胞，第二
6、次筛选是做抗体检验，筛选产生特异性抗体的细胞。,（,3,）最后培养有几种方案？,两种，体内培养和体外培养。,17,18,多莉,克隆猴,四、动物的克隆繁殖,19,1,、动物细胞全能性的表现程度：,全能干细胞 多能干细胞 单能干细胞,2,、动物难以克隆繁殖的根本原因：,细胞分化使得细胞发生了基因的差异性表达，有的基因开放，有的基因关闭。体细胞基因组中的基因活动很不完全，不能像受精卵那样发挥细胞的全能性。,20,卵细胞,母绵羊,母绵羊,乳腺细胞,细胞质,细胞核,早期胚胎,卵裂,C,母绵羊子宫,多莉羊,分娩,妊娠,多莉羊的培育过程,融合后的卵细胞,21,克隆动物的研究意义,1.,用于生物学和医学研究的实验动物,2.,改良动物品种,3.,治疗人类疾病,4.,保护濒危动物,22,6.,世界上第一只克隆绵羊,“,多莉,”,的培育等程序如图所示。请仔细看图后回答问题：,黑面绵羊去,核卵细胞,白面绵羊卵,腺细胞核,重组细胞,早期胚胎,另一头母绵羊子宫,克隆绵羊多莉,a,b,电脉冲处理,妊娠、出生,写出、所指的细胞工程各称：,。,实施细胞工程时，所需的受体细胞大多采用动物卵细胞的原因是,：,。,多莉面部的毛色是,，判断依据：,。,继植物组织培养之后，克隆绵羊培育成功，证明动物细胞也具有,。,请举例说明克隆绵羊培育成功的实际意义,：,。,23,
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