丰月季的组培快繁技术.doc

丰花月季的组培快繁技术
　　摘要: 试验结果表明: 适宜丰花月季离体侧芽分花的培养基为M S+ 6-BA 2.00 mg/L + NAA 0.10～0.05mg/L , 生根培养基为1/2 M S+ NAA 0.30～ 0.50 mg/L , 其生根率在95% 以上; 在蛭石与营养土的双层基质中,生根试管苗的移栽成活率达90%。
　　关　键　词: 丰花月季; 离体侧芽; 组培快繁; 移栽
　　丰花月季具有花色多、花期长、枝叶繁茂、抗寒、抗旱、适应性强、好管理等特点, 是切花和装饰街道花坛的极好材料, 目前市场上需求量大, 但用常规方法繁殖系数低、速度慢。为此, 我们进行了丰花月季的组培快繁试验, 以期快速生产出大量苗木满足市场需求。
1　材料与方法
1.1　外植体的建立
供试材料为丰花月季的著名老品种红帽子。取其嫩枝用清水冲洗干净, 剪成长0.5～ 1.0 cm 的茎段, 先在70%的酒精中浸30 s, 再在0.1%的升汞液中浸5～10 m in, 将消毒茎段用无菌水冲洗6次后接种于诱导分化培养基上。
1.2　诱导分花
培养基以MS为基本培养基, 附加不同浓度的6-BA、NAA , 共设8 个处理(表1) , 每处理接种5 瓶,每瓶接4个茎段, 20d 后调查侧芽分化情况。当分化芽长至具有5～7 片叶时, 将其切成带1～ 2 个叶片的茎段, 转入分化培养基中进行继代增值。
1.3　分化苗的诱导生根
将继代增殖的无根试管苗剪成1～2 cm 左右的茎段, 接种在1/2MS 附加不同浓度NAA的生根培养基(表2) 上诱导生根, 30 d 后调查生根率。以上所有MS 培养中蔗糖浓度均为30 g/L , 1/2MS培养基中蔗糖浓度均为20 g/L , pH 5.8; 在温度25 (±3) ℃, 每天光照10～12 h、光照强度1500～2000 L x 的条件下培养。
1.4　生根苗驯化移栽
先将生根试管苗打开瓶塞炼苗3～5d, 然后取出试管苗(洗净根部培养基) 栽植于上层蛭石、下层疏松营养土的分层基质中(厚度各占1/2 ) , 用水浇透后搭小拱棚保湿, 并定期喷雾, 使棚内相对湿度保持在85%以上, 7d后逐渐通风, 直至最后去除小拱棚。
2　结果与分析
2.1　侧芽诱导分化结果
将丰花月季的茎段接种在8种不同的培养基上, 7 d 后侧芽开始膨大, 10d 左右分化芽逐渐形成幼苗。从侧芽分化结果(表1) 可以看出, 丰花月季茎段在所用的8 种培养上均能分化出侧芽, 分化率为5.0%～ 95.0% , 其中以M S + 6-BA 2.00 mg/L +NAA 0.50 mg/L 培养基上的分化率较高, 说明6-BA浓度较高时易诱导侧芽分化。同时看出, 增加适量NAA 有利于离体侧芽分化, 但当浓度达到1.00mg/L时则仅诱导产生大量愈伤组织, 不利于侧芽的直接分化和生长。因此, 适宜丰花月季茎段侧芽分化的培养基为MS + 6-BA 2.00 mg/L + NAA 0.10～0.50 mg/L 。
2.2　试管苗生根培养结果
当分化芽转接在分化培养基上继代培养时, 虽然部化丛生芽可以生根, 但生根率低, 且不定根往往发生在愈伤组织上,不利于驯化移栽。将继代增殖的无根试管苗转入1/2 M S 附加不同浓度NAA 的生根培养基上培养的结果(表1) 表明, 1/2M S 附加NAA 0～ 1.00 mg/L 均可诱导产生不定根, 生根率在70.0%～ 97.5% , 且以附加NAA 浓度为0.30mg/L 和0.50 mg/L 的生根效果最佳, 根系生长良好, 其生根率分别为95.0% 和97.5% , 平均根数为4.0 条和4.3 条, 最大根长6.2 cm 和5.1 cm。
表1　不同培养基诱导分化结果
培养基 接种茎 诱导分 诱导率(% ) 分化芽 分化率(% )苗 质 段数(个) 化数(个) 数(个) 量
M S+ 6-BA 1.00+ NAA 0.01　 20 3 15.0 3 15.0 细弱
M S+ 6-BA 1.00+ NAA 0.10　 20 6 30.0 9 45.0 健壮
M S+ 6-BA 1.00+ NAA 0.50　 20 2 10.0 4 20.0 健壮
M S+ 6-BA 1.00+ NAA 1.00　 20 1 5.0 1 5.0 细弱
M S+ 6-BA 2.00+ NAA 0.01　 20 7 35.0 13 65.0 健壮
M S+ 6-BA 2.00+ NAA 0.10　 20 9 45.0 15 75.0 健壮
M S+ 6-BA 2.00+ NAA 0.50　 20 10 50.0 19 95.0 健壮
M S+ 6-BA 2.00+ NAA 1.00　 20 6 30.0 7 35.0 健壮
　　 生长调节剂浓度以mg/L 计
表2　试管苗在不同培养基上的生根培养结果
培养基 接种数(个) 生根数(个) 生根率(%) 平均根数(条) 最大根长(cm)
1/2MS 40 28 70.0 2.0 2.8
1/2MS+NAA0.1 40 35 87.5 3.3 4.6
1/2MS+NAA0.3 40 38 95.0 4.0 6.2
1/2MS+NAA0.5 40 39 97.5 4.3 5.1
1/2MS+NAA1.0 40 29 72.5 1.5 4.8
　　 激素浓度以mg/L 计。

2.3　生根苗驯化移栽结果
选择具有2～5 条根、根长在1cm 以上、生长健壮的试管苗进行炼苗移栽, 移栽于1/2 蛭石、营养土双层基质上, 移栽后要适当保湿, 并逐渐增强光照,中午避免阳光直射, 适时防治病虫害, 其移栽成活率可达90%。
3　小结与讨论
3.1　适合丰花月季离体诱导分化的培养基为MS+6-BA 2.00 mg/L + NAA 0.10～ 0.50 mg/L , 生根培养基为1/2M S+ NAA 0.30～ 0.50mg/L 。
3.2　适宜的移栽基质为上层是蛭石、下层是疏松营养土的双层基质, 这种基质疏松通气、保水性好, 试管苗先栽入上层蛭石中, 成活后根系伸入营养土中吸收养分, 利于试管苗的成活及生长。
3.3　本试验仅以丰花月季为试材, 但不同品种间可能会略有差异, 在生产中应根据品特性适当调整激素浓度, 以获得最佳培养效果。