利用果蝇检测河流污水对生物生长繁殖的影响.doc

利用果蝇检测河流污水对生物生长繁殖的影响

实验目的
学习果蝇实验检测生活中污水河道池塘有害化学物质的检测
熟悉无菌操作技术，果蝇的生长繁殖周期
实验原理
果蝇属多细胞生物，具有生存期短，繁殖量大，饲养简便，反反应灵敏等优点。利用河流污水中过量的有害物质对果蝇的生长的影响，通过对果蝇的突变率，畸形率，及个体大小等统计，对河流污染状况初步的定量探究性实验。
实验材料
1. 材料：黑腹果蝇
2. 用具：双筒解剖镜，显微镜，小镊子，麻醉瓶，毛笔，棉塞，恒温培养箱，小滴瓶，载片，盖片，吸水纸，纱布等
3. 药品：琼脂，，蔗糖，乙醇，乙醚，丙酸，玉米粉，酵母粉
4. 特殊药品：污水河道中的水
实验步骤
果蝇的培养
A.培养基和培养瓶

1. 果蝇饲料的配制
果蝇是以酵母菌作为主要食料的，因此实验室内凡能发酵基质，都可用作果蝇饲料。

常用的饲料有玉米饲料、米粉饲料、香蕉饲料等。配方如下表：

玉米饲料
米粉饲料
香蕉饲料
水（毫升）
琼脂（克）
蔗糖（克）
香蕉浆（克）
玉米粉（克）
米粉（克）
麸皮（克）
酵母粉（克）
丙酸（毫升）
200
1.5
13
—
17
—
—
1.4
1
100
2
10
—
—
8
8
1.4
1
50
1.6
—
50
—
—
—
1.4
0.5—1
1）玉米饲料：
i)取应加水量的一半，加入琼脂，煮沸，使充分溶解，加糖，煮沸溶解。
ii)取另一半水混和玉米粉，加热，调成糊状。
iii)将上述两者混和，煮沸。以上操作都要搅拌，以免沉积物烧焦。
iv）待稍冷后加入酵母粉及丙酸，充分调匀，分装。按附表用量配制，可得饲料200毫升左右。
2）米粉饲料：方法与玉米饲料相同，用米粉代替玉米粉。
3）香蕉饲料：
i)将熟透的香蕉捣碎，制成香蕉浆。
ii)将琼脂加到水中煮沸，使充分溶解。
iii)将琼脂溶液加入香蕉浆，煮沸。
iv）待稍冷后加入酵母粉及丙酸，充分调匀，分装。
丙酸的作用是抑制霉菌污染，用量参照附表，每200毫升饲料约加1毫升左右。如无酵母粉，也可用酵母液代替，但用法不同。若用酵母菌液则在饲料分装到培养瓶中以后再加入，每瓶加数滴。
2.培养瓶
培养果蝇用的培养瓶可用牛奶瓶，或大、中型指管，用海棉或纱布包的棉花球作瓶塞。实验室中保存原种以及杂交实验以中指管为宜。培养瓶用前要消毒，而后再装饲料（每瓶2厘米厚即可），待饲料冷却后，用酒精棉花擦瓶的内壁，然后插入消毒过的吸水纸，作幼虫化蛹时的干燥场所。
B.果蝇的繁殖
1.取若干对健全健康的雌雄黑腹果蝇转移到配好培养基中自由交配，待雌蝇产下虫卵后，将亲本移除并标注日期，让虫卵在恒温25度的恒温培养箱中自然孵化。
2．等待一周左右，幼虫就可以孵化成蛹，在过一周，蛹羽化成成虫。刚羽化的成虫还不能进行交配，此时将雄蝇和雌蝇分开培养，筛选出处女蝇。
C.实验操作
预备配制a,b两组果蝇，a组作为实验组，b组作为空白对照组，每组配制10皿培养基
1、 在a组中用从环境获取的污染水配制培养基来培育果蝇。
2、 每皿中放置一对果蝇，每对果蝇的大小，健康状况，发育程度等都保持一致
3、 将培养的果蝇放在恒温培养箱中培养一代
4、 对培养发育完全的果蝇进行观察统计，记录变异个体数，个体大小，健康状况。
5、 整理实验数据，书写实验报告
6、 为确保实验数据客观可靠，将上述实验步骤从复操作三次，对三次实验结果进行统计分析
D，实验心得:完成实验后回顾整个实验流程谈谈个人经验心得。

成员：姚维炳 张珍瑞 叶虎 蒋晨超 尤伟名 郑杰 顾寒冰 许乾坤