1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,指导老师：,课题负责人：,组员：,1,紫花鄂北贝母试管快繁技术的研究,2,目录,2,研究背景,研究现状,目的及意义,技术路线,研究内容,预期成果,研究进度,实验经费,3,采挖不合理，资源严重匮乏,野生贝母多 生长于高海拔地区，生 长周期长,人工种植难度大，繁殖系数低，生产时间长,其他原因,药用价值高,供不应求,供不应求,供不应求,供不应求,研究背景,4,紫花鄂,北贝母,抗肿瘤细胞,活性,舒张离体气,管平滑肌,研究背景,鳞片多数,、,繁殖系数大,味极苦，生物碱含量高,达,0.55%,4,镇咳平喘,减慢心率,降
2、血压,抑菌,祛痰,未形成商品，是新药用,种源,特点,药理研究,贝母组织培养已相继在基因型（种源），外植体，基本培养基，植物生长调节物质，碳源，培养条件，小鳞茎再生，生物碱积累，多倍体诱导等方面做了相关报道，并取得的显著成效。,紫花鄂北贝母组织培养,尚未见报道。,研究现状,5,贝母组培技术难关,初代培养污染率高,玻璃化苗和畸形苗,试管苗驯化条件和管理操作,严格,移栽成活率低,研究现状,6,研究内容,1,、诱导愈伤组织,最佳激素组合及外植体部位的研究,（以污染率为指标）,以,NAA,，,6-BA,，外植体部位为因素，设置三因素三,水平的,正交试验,（详见表,1,）。,表,1,不同因素水平表,mg/
3、L,水平,因素,A,（,6-BA,）,B(NAA),外植体部位,1 1.0 0.1,上,2 2.0 0.5,中,3 3.0 1.0,下,9,10,研究内容,1.1,外植体的消毒,贝母鳞瓣洗去泥土,中性洗涤剂,清洗蒸馏水清洗滤纸吸干,75%,酒精消毒,30s,滤纸吸干,0.1%,的升汞消毒,15min,无菌水清洗,45,次滤纸吸干,准备接种。,1.2,接种,将,鳞瓣,切成约,0.3cm,长的切段,接种在附加不同激素组合的,MS,培养基上培养。每处理接种,10,瓶，共,90,瓶；每瓶接种外植体,3,4,块。培养基中加蔗糖,3%,琼脂,0.75%,PH 5.8,6.0,培养室温度,25,士,2,，光
4、照,14h/d,光照强度,1500,2000 Lux,。,15,30d,后观察统计。,2,、诱导生芽（以芽高度、增殖倍数为指标）,以,6-BA,、,NAA,、,IBA,为筛选条件作三因素、五水平的,正交实验,，确定,最佳培养条件（详见表,2,）。,将得到的愈伤组织块切成,1,2cm,的小块转,接入,不同,分化培养基,（,25,个激素组合）,，,15,30,天后统计芽的分化情况。,研究内容,11,表,2,不同因素水平表,mg/L,水平,因素,A,（,6-BA,）,B(NAA)C,（,IBA,）,1 0.5 0.1 0.1,2 1.0 0.5 0.5,3 2.0 1.0 1.0,4 2.5 2.0
5、 2.0,5 3.0 4.0 4.0,3,、诱导生根（以生根长度、生根率为指标）,以,NAA,、,IBA,为筛选条件，设定五个梯度，确定最佳培养条件,待丛生芽长到,2,3cm,时，切取粗壮芽条连带其下部愈伤组织，转接到生根培养基,，共,10,个组合,。,15,30,天后统计生根情况,。,研究内容,12,表,3,不同因素水平表,mg/L,水平,因素,A,（,IBA,）,B(NAA),1 0.5 0.5,2 1.0 1.0,3 2.0 2.0,4 3.0 3.0,5 5.0 5.0,研究内容,4,、炼苗移栽（以成活率为指标,）,13,试管苗生根，从人工气候箱移到普通室内，,1,2,天后打开瓶盖炼苗
6、炼苗,3,5,天后，用毛刷轻轻刷去根部培养基，植于盛有蛭石、草木灰等的营养钵中，小苗生长稳定后，移栽至土壤中。,1.,建立贝母的无菌培养体系,2.,培育出小批量健壮试管苗,3.,提交一篇论文,预期成果,14,2012.09,至,2012.11,初代培养，增殖培养。,2012.11,至,2013.10,生根培养，炼苗与移栽，,并撰写论文。,研究进度,15,实验经费,16,项目,费用,备注,化学试剂、激素等费用,800,元,用于培养基的配制,消毒药品,150,元,用于消毒,培养皿、培养瓶,400,元,用于组织培养,买药材费用,400,元,采购新鲜贝母,耗材费用,350,元,脱脂棉、手术刀、牛皮纸、镊子、炮弹管、枪头等,炼苗费用,300,元,蛭石、草木灰等,其他费用,100,元,打印资料,谢谢,17,
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