2024年植物组织培养期末题库.doc

一、填空题（每空0.5分，共10分）
1.    植物组织培养按培养基的物理状态分为固体培养和液体培养。
2.    在组织培养中，IAA等植物激素必须用过滤法灭菌，而接种室空间可采取紫外线法灭菌或熏蒸法灭菌。
3.    植物的胚胎培养，包括胚培养、胚珠培养、胚乳培养以及试管受精等四个内容。
4.    1960年，英国学者Cocking用真菌纤维素酶分离原生质体成功，从而开创原生质体培养技术。
5.    对植物材料进行表面灭菌时，常采取的灭菌药剂为75%酒精、次氯酸钠、升汞。
6.    器官培养时，其营养器官的培养有离体根的培养、离体茎的培养、离体叶的培养三种方式。
7.    大多数植物组织培养的适宜温度范围是20~30℃，培养基的pH值范围是5.6~5.8。
8.    用烘箱迅速干燥洗净后的玻璃器皿时温度能够设在80℃的温度范围内，而若用它高温干燥灭菌则需在150℃的温度下1~3小时。
二、单项选择题（每题2分，共10分）
1. 下列不属于生长素类的植物激素是A。
A 6-BA；B IAA；C NAA；D IBA
2. 在原生质体的培养中，渗透稳定剂的作用是A。
A 稳定原生质体的形态而不使其被破坏；B 支持作用；C 提供营养；D 调整PH值
3. MS培养基中，下列不属于大量元素的盐是C。
A NH4NO3；B KNO3；C ZnSO4.7H2O；D MgSO4.7H2O
4. 下列试验中也许取得单倍体植株的是D。
A 小麦的茎尖培养；B番茄花柱培养；C玉米胚乳培养；D玉米花粉培养
5. 同一植株下列B部位病毒的含量最低。
A 叶片细胞；B 茎尖生长点细胞；C 茎节细胞；D 根尖生长点细胞
三、判断题（对画√，错画×。每题2分，共10分）
1.    幼嫩的组织比成熟的老组织脱分化难。（× ）
2.    对于含有琼脂糖的培养基而言，在pH值高于6.5时，培养基不能很好地凝固；低于5.0时，培养基会变硬。（× ）
3.    常用的生长素作用的强弱次序为：2,4-D>NAA > IAA>IBA。（× ）
4.    由性细胞发育而成的胚叫做胚状体，而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚。（× ）
5.    通过花药培养所取得的植株一定都是单倍体。（× ）
四、名词解释（每题3分，共15分）
1. 培养基母液: 在配制培养基时，预先配制好不一样组分的浓溶液，分别是使用浓度的10倍或100倍，甚至1000倍。这些母液包括无机盐、维生素以及在水溶液中稳定的生长调整物质。
2. 植物细胞全能性：植物细胞具备该植物体所有遗传的也许性，在一定条件下犹如受精卵同样，具备发育成完整植物体的潜在能力
3. 植物生长调整物质：指能影响植物的细胞分化、分裂及发育，和影响植物的形态建成、开花、坚固、成熟、萌发等生理生化过程，对外植体愈伤组织的诱导和器官分化起着重要和明显的调整作用，其中以生长素类和细胞分裂素类最为常用。
4. 细胞脱分化：使以分化的细胞失去已分化细胞的经典特性，或消除了细胞分工，使之回复到分生组织状态或胚性细胞状态，从而恢复细胞分化的能力。
5. 无菌操作：在无菌的空间环境下，对植物材料进行组织培养操作
五、简答题（每题5分，共25分）
1. 培养基的重要成份及作用?
无论液体培养还是固体培养，大多数植物组织培养中所用的培养基都是由水、无机营养物（无机盐）、碳源、维生素、生长调整物质、琼脂和有机附加物等几大类物质组成。培养基中的水是植物细胞各种生理、生化反应的介质，起着维持细胞一定渗透压与膨压的作用，并为植物机体提供氢、氧元素；无机盐包括大量元素和微量元素，重要提供无机营养物质；碳源是培养基中作为植物材料生长发育的能源；维生素类与植物体内各种酶的形成有关；生长调整物质是培养基中不可缺乏的核心物质，对外植体愈伤组织的诱导和器官分化起着重要和明显的调整作用；琼脂的重要作用是使培养基在常温下凝固，但不参加代谢；有机附加物包括各种氨基酸，是培养基中重要的有机氮源。
2. 什么是广义的和狭义的植物组织培养?
广义的植物组织培养泛指将植物体的各种结组成份，如植物细胞、植物原生质体、植物组织以及植物器官甚至幼小植株放在离体的、无菌的人工环境中让其生长发育的措施。也叫离体培养或试管培养。包括植株的培养、植物胚胎培养、植物器官培养、植物组织培养、植物细胞培养、植物原生质体培养。狭义的植物组织培养是指对植物小块组织的培养。
3. 简述脱除植物病毒的措施。
脱除植物病毒的措施有四种：1.茎尖培养脱毒法；2.热处理脱毒法；3.微体嫁接离体培养脱毒法；4.珠心组织脱毒法。茎尖培养脱除病毒的依据：病毒在植物体内分布是不均一的，越接近生长点病毒浓度越稀，因此可采取小的茎尖离体培养而脱除植物病毒。热处理脱毒法的原理：热处理法并不杀死病毒，只能钝化病毒的活性，使病毒在植物体内增殖减缓或增殖停止，而失去侵染的能力；同时能够加速植物细胞的分裂，使植物细胞在与病毒繁殖的竞争中取胜。微体嫁接离体培养脱毒法原理：把极小的茎尖作为接穗嫁接到种子实生苗砧木上，然后连同砧木一起在培养基上培养。珠心组织脱毒法的原理：病毒是通过维管组织传输的，而珠心组织与维管组织没有直接联系，故能够通过珠心组织培养取得无病毒植株。
4. 植物组织培养中，培养基的pH值起什么作用?假如pH值过高或过低会有什么后果?
植物组织培养中，一般调整培养基的pH值至一适宜的范围，其作用是：首先提供大多数植物材料要求的弱酸性环境，以便能进行正常的生理生化活动，其次是影响固体培养基的凝固程度。一般调整培养基的pH值至5.0-6.0的范围，pH值过高或过低都会导致植物材料不能正常生长发育，并且pH值过高会导致固体培养基的过硬，不利于营养成份的吸取，pH值过低则导致固体培养基不能正常凝固。
5. 单倍体育种的技术流程。
选择亲本→有性杂交→F1产生的花粉离体培养取得单倍体植株→诱导染色体加倍取得可育纯合子→选择所需要的类型。
6. 人工种子的制作措施。
1. 选用适宜的植物材料，切取植物组织
2. 脱分化培育愈伤组织
3. 将培养液制作成为人工胚乳，
4. 将愈伤组织以及人工肝胚乳放入具备一定透气透水性的人工种皮中。
六、论述题（每题10分，共30分）
1.    请你设计一个组培试验室，都需要哪些仪器设备，阐明你设计组培试验室的各分室及其所需仪器设备的作用。
1. 一个标准的组织培养试验室应当具备进行下列工作所必需的设施与仪器：1）玻璃器皿、塑料器皿和其他试验器皿的清洗和贮存；2）培养基的制备、灭菌和贮存；3）植物材料的无菌操作；4）将培养物保持在温度、光照、也许时尚有湿度可控的条件下；5）培养物的观测。
植物组织培养的试验室，一般包括通用试验室、无菌操作室（接种室）、恒温培养室、检查培养情况并做统计的细胞学试验室。通用试验室重要用于植物组织培养所需器具的洗涤、干燥和保存，培养基的配制、分装和灭菌，化学试剂的存储及配制，重蒸馏水的生产，待培养植物材料的预处理及培养物的常规生理生化分析等操作。为了配制各种培养基，室内必须有一个较大的平面工作台及供放置各种培养器具的橱柜。室内重要应有灭菌设备、称量设备、pH值测定设备、蒸馏水器、烘箱、冰箱、药物柜、搅拌器、无菌操作室重要用于植物材料的消毒和接种，培养物的继代转移等等。它应是无尘、无对流空气的非常洁净的试验室。室内重要应有超净工作台和通风换气设备。恒温培养室是培养试管苗的场所，要满足外植体生长所需的温度、光照、湿度和气体等条件。室内重要应有培养架和控制温度和光照的设备，以及摇床、小型的光照培养箱。细胞学试验室重要用于随时观测和统计培养物的细胞学和形态解剖学的变化，可进行显微观测、显微摄影和一般摄影、组织切片、细胞染色等工作。室内重要应有双筒实体显微镜、一般或超薄切片机、磨刀机、染色缸、烘片器以及摄影冲洗设备。

2.    请论述植物原生质体的培养措施、操作流程、以及在体细胞杂交中的应用。
植物组织培养的三大难题及处理措施。

3.原生质培养流程包括：
1）原生质体分离、2）原生质体纯化、3）原生质体培养、4）原生质体胞壁再生、5）细胞团形成和器官发生。
原生质体分离措施：1）机械分离法 先将细胞放在高渗糖溶液中预处理，待细胞发生轻微质壁分离，原生质体收缩成球形后，再用机械法磨碎组织，从伤口处可释放出完整的原生质体。2）酶解分离法 用细胞壁降解酶脱除植物细胞壁取得原生质体的措施。
原生质体纯化措施：沉降法（离心）、漂浮法（比重大的高渗溶液）、界面法（两种比重不一样的溶液）。
原生质体的培养技术：1) 固体培养法、2) 浅层液体培养法、3) 双层培养法。
体细胞杂交：两种异源(种、属间)原生质体，在诱导剂诱发下相互接触，从而发生膜融合，胞质融合和核融合并形成杂种细胞，深入发育成杂种植物体，称为细胞杂交，或细胞融合，如取材为体细胞则称体细胞杂交