EBV-DNA载量、TLR7mRNA、ADA及HLA-G对儿童传染性单核细胞增多症的诊断效能分析.pdf

Mod Diagn Treat现代诊断与治疗2023 Jul 34渊14冤EBV-DNA 载量尧TLR7mRNA尧ADA 及 HLA-G对儿童传染性单核细胞增多症的诊断效能分析李芳渊兰州市西固区人民医院袁甘肃 兰州 730060冤摘要院目的探究 EBV-DNA 载量尧TLR7mRNA尧腺苷脱氨酶渊ADA冤及白细胞抗原-G渊HLA-G冤对儿童传染性单核细胞增多症的诊断效能遥 方法选取 2018 年 10 月至 2022 年 10 月我院收治的 100 例传染性单核细胞增多症患儿作为观察组袁其中 EBV-DNA 高载量患儿 53 例袁低载量患儿 47 例遥 另选取同期在医院体检的 120 例健康儿童作为对照组遥所有研究对象均接受 EBV-DNA 载量尧TLR7mRNA尧ADA尧HLA-G 检测遥以临床诊断为金标准院渊1冤出现淋巴结肿大尧发热尧肝脾肿大尧咽峡炎等症状中的 3 项遥渊2冤抗 EBV-CA-IgM 和抗 EBV-CA-IgG 抗体阳性袁且抗 EBV-NA-IgG 阴性曰抗EBV-CA-IgM 阴性袁但抗 EBV-CA-IgG 抗体阳性袁且为低亲合力抗体遥 同时满足以上 2 条即可遥 比较观察组和对照组EBV-DNA 载量尧TLR7mRNA尧ADA尧HLA-G袁高载量组和低载量组 TLR7mRNA尧ADA尧HLA-G 及诊断效能遥 结果观察组 EBV-DNA 载量尧TLR7mRNA尧ADA尧HLA-G 高于对照组袁差异有统计学意义渊P约0.05冤遥 高载量组 TLR7mRNA尧ADA尧HLA-G 高于低载量组袁差异有统计学意义渊P约0.05冤曰EBV-DNA 载量尧TLR7mRNA尧ADA尧HLA-G 联合检测诊断沉默组 LncRNA-MIAT 高于对照组渊P约0.05冤遥这提示了 NEAT 可能对 miR-214-3p 具有一定的靶向抑制作用袁通过过表达 NEAT袁可能对 miR-214-3p 产生抑制作用袁进而在 RA 发生尧发展过程中起着至关重要的作用遥 此外袁MIAT 过表达组 RA-FLS 细胞增殖率尧迁移细胞数尧侵袭细胞数低于 shRNA 沉默组尧对照组袁而 shRNA 沉默组细胞增殖率尧迁移细胞数尧侵袭细胞数高于对照组渊P约0.05冤曰MIAT 过表达组细胞凋亡率高于 shRNA 沉默组尧对照组袁而 shRNA 沉默组细胞凋亡率低于对照组渊P约0.05冤遥 提示了 NEAT异常表达会直接影响 RA-FSL 细胞生物学功能袁即抑制细胞增殖尧迁移以及侵袭袁促进细胞凋亡遥 考虑原因袁NEAT 可通过表观遗传以及转录调控等多个方面对靶基因实施调控袁如核内 NEAT 往往是通过调节信使 RNA 间接控制基因转录袁细胞之内的NEAT 则是通过影响信使 RNA 稳定性或 miRNA 活性调控基因表达遥 有研究表明咱5-7暂袁NEAT 可直接作用于 Bcl-2 以及 P53 等细胞凋亡相关蛋白中袁间接实现对细胞生物学功能产生调节作用袁这为本研究提供了佐证遥 而 miR-214-3p 作为非编码 RNA 家族成员之一袁可能通过调控下游靶基因或蛋白的表达袁或调控 Wnt/catenin 信号通路活性袁从而参与免疫反应过程袁介导组织的损伤遥本文结果还显示了袁MIAT 过表达组 IL-1茁尧IL-6 及 TNF-琢 水平均低于 shRNA沉默组尧对照组袁且 shRNA 沉默组 IL-1茁尧IL-6 及TNF-琢 水平均高于对照组渊P约0.05冤遥 分析原因袁可能是 NEAT 通过负调控 miR-214-3p 的表达袁进而对下游靶基因表达产生影响袁从而影响炎症细胞因子的大量合成尧分泌袁促进疾病的发生尧发展咱8-10暂遥综上所述袁LncRNA-MIAT 可通过靶向结合miR-214-3p袁进而调控 RA-FLS 细胞的增殖尧迁移以及侵袭袁有望成为 RA 诊治的新靶点遥参考文献咱1暂苏文晓,卢珺,甘晓雯,等.基于 LncRNA MIAT/miR-384-5p 研究九龙藤黄酮抑制自噬抗心肌缺氧损伤的作用机制咱J暂.中草药,2022,53(18):5701轧5711.咱2暂付长龙,谢新宇,邱志伟,等.基于 lncRNA NEAT1 与 Nrf2/ARE 通路研究荣筋拈痛方延缓膝骨关节炎软骨退变作用机制咱J暂.康复学报,2022,32(4):332轧337.咱3暂蔡梅芝,卢宝全,吴秀玲,等.长链非编码 RNA 核富集转录本 1 通过靶向微小 RNA-761 对缺氧/复氧大鼠星形胶质细胞损伤的影响咱J暂.解剖学报,2022,53(5):571轧577.咱4暂李险波,张志强,韩小勇,等.LncRNA NEAT1 通过调控 miR-124-3p对食管鳞状细胞癌细胞迁移尧侵袭的影响咱J暂.国际检验医学杂志,2022,43(22):2722轧2727.咱5暂卞龙艳,庄敏,李姝,等.长链非编码 RNA-心肌梗死相关转录本对过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞凋亡和氧化应激的调控作用咱J暂.眼科新进展,2021,41(4):317轧322.咱6暂魏晓颖,王军涛,田景霞,等.微 RNA-214 靶向性别决定区 Y-box 4对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖凋亡的影响咱J暂.中华风湿病学杂志,2021,25(7):455轧460.咱7暂余晓明,袁雪凌,孟昊业,等.骨性关节炎患者膝关节软骨及软骨下骨中 miR-214 的表达咱J暂.解放军医学院学报,2015,36(11):1131轧1133.咱8暂任泰超,肖鹏.微小 RNA-214-3p 介导神经营养酪氨酸激酶受体 2型通路调节血管内皮生长因子旁分泌在骨关节炎发展中的作用咱J暂.中华实验外科杂志,2022,39(1):116轧119.咱9暂李合,黄亮,田由京,等.miR-214-3p 通过靶向 MFN2 诱导胃癌细胞线粒体分裂及凋亡的机制咱J暂.中国老年学杂志,2023,43(12):2961轧2967.咱10暂曹春.慢性心力衰竭患者血浆外泌体 miR-214-3p 和 miR-184 的表达及意义咱J暂.河北医药,2021,43(2):246轧249.收稿日期院2023轧04轧212144窑窑Mod Diagn Treat现代诊断与治疗2023 Jul 34渊14冤表 1观察组和对照组 EBV-DNA 载量尧TLR7mRNA尧ADA尧HLA-G 比较渊x依s冤组别nEBV-DNA 载量(伊103copy/mL)TLR7mRNAADA(U/L)HLA-G(U/mL)对照组观察组tP1201000.68依0.167.42依1.8938.9160.011.21依0.242.62依0.6322.6340.0114.34依2.6548.23依8.4641.5220.016.28依1.8423.22依6.3527.9200.01传染性单核细胞增多症在儿童时期较为常见袁是 EB 病毒引起的一种急性传染病袁临床表现具有不典型性及多样化袁临床诊断存在一定难度咱1暂遥EBV-DNA 载量检测可以反映 EBV 的复制水平袁有助于明确患儿发热原因袁其载量越高意味着患儿病情越严重袁对传染性单核细胞增多症诊断有一定指导意义遥TLR7mRNA 参与机体免疫应答反应袁诱导炎症反应袁加重病情曰腺苷脱氨酶渊Adenosine deaminase袁ADA冤是细胞免疫非特异性免疫标志物袁由 T 淋巴细胞介导袁而传染性单核细胞增多症患儿 EBV 感染与其免疫功能关系密切遥 白细胞抗原-G渊Human leucocyteantigen-G袁HLA-G冤是免疫抑制分子袁参与病毒复制尧繁殖过程袁传染性单核细胞增多症诊患儿 HLA-G 水平异常升高遥 本研究旨在分析 EBV-DNA 载量尧TLR7mRNA尧ADA 及 HLA-G 对儿童传染性单核细胞增多症的诊断效能遥 报道如下遥1资料与方法1.1一般资料选取 2018 年 10 月至 2022 年 10 月本院收治的 100 例传染性单核细胞增多症患儿作为观察组袁其中 EBV-DNA 高载量患儿 53 例袁低载量患儿 47 例袁其中男 52 例尧女 48 例曰年龄 2耀11渊7.85依1.23冤岁遥 另选取同期在医院体检的 120 例健康儿童作为对照组袁男 61 例尧女 59 例曰年龄 1耀11渊7.88依1.25冤岁遥 两组性别尧年龄等一般资料比较袁无显著差异渊P跃0.05冤袁具有可比性遥 本研究经我院医学伦理委员会审核批准遥1.2纳入与排除标准纳入标准院渊1冤符合叶EB 病毒感染实验室诊断及临床应用专家共识曳咱2暂中关于传染性单核细胞增多症的诊断标准者遥 渊2冤临床资料齐全尧依从性较好者遥 渊3冤近三个月无病毒感染史者等遥排除标准院渊1冤心脏尧肾脏尧肝脏等器官功能不全者遥渊2冤合并其他多种恶性疾病者遥 渊3冤血液系统尧免疫系统严重病变者等遥1.3方法1.3.1EBV-DNA 载量检测方法在所有研究对象空腹状态下采其肘部静脉血 3 mL袁使用实时荧光定量 PCR 仪渊厂家院上海聚慕医疗器械有限公司袁型号院FQ-8A冤测定 EBV-DNA 载量遥1.3.2TLR7mRNA 检测方法在所有研究对象空腹状态下采其肘部静脉血 3mL袁分离单个细胞核袁使用实时荧光定量 PCR 仪检测 TLR7mRNA遥腺苷脱氨酶渊ADA冤检测方法院在所有研究对象空腹状态下采其肘部静脉血 3 mL袁离心机参数 3100 r/min尧10 min获得血清袁使用双食试剂过氧化氢物酶法测定血清ADA 水平遥1.3.3白细胞抗原-G渊HLA-G冤检测方法在所有研究对象空腹状态下采其肘部静脉血 3 mL袁离心机参数 3100 r/min尧10 min 获得血浆袁使用酶联免疫吸附法测定血浆 HLA-G 水平遥1.4临床观察指标渊1冤EBV-DNA 载量尧TLR7mR鄄NA尧ADA尧HLA-G 比较遥 渊2冤高载量组尧低载量组TLR7mRNA尧ADA尧HLA-G 比较遥 渊3冤诊断效能比较遥1.5统计学处理数据采用 SPSS 20.0 统计学软件进行处理遥 计量资料采用渊x依s冤表示袁行 t 检验曰计数资料采用咱n渊%冤暂表示袁行 字2检验遥 P约0.05 示差异有统计学意义遥2结果2.1观察组和对照组 EBV-DNA 载量尧TLR7mR鄄NA尧ADA尧HLA-G 比较观察组 EBV-DNA 载量尧TLR7mRNA尧ADA尧HLA-G 水平高于对照组袁差异有统计学意义渊P约0.05冤遥 见表 1遥2.2高载量组和低载量组 TLR7mRNA尧ADA尧HLA-特异度尧灵敏度尧准确度尧阴性预测值尧阳性预测值高于任一项单独检测袁差异有统计学意义渊P约0.05冤遥 结论EBV-DNA 载量尧TLR7mRNA尧ADA 及 HLA-G 联合检测可以有效提高儿童传染性单核细胞增多症的准确度尧特异度尧灵敏度尧阳性预测值尧阴性预测值袁具有较高的诊断价值遥关键词院传染性单核细胞增多症曰白细胞抗原-G曰腺苷脱氨酶曰诊断效能中图分类号院R725.1文献标志码院B文章编号院1001轧8174渊2023冤14轧2144轧03G 比较高载量组 TLR7mRNA尧ADA尧HLA-G 水平高于低载量组袁差异有统计学意义渊P约0.05冤遥 见表2遥2.3诊断效能分析EBV-DNA 载量尧TLR7mRNA尧ADA尧HLA-G 联合检测诊断特异度尧灵敏度尧准确度尧阴性预测值尧阳性预测值高于任一项单独检测袁差异有统计学意义渊P约0.05冤遥EBV-DNA 载量尧TLR7mRNA尧ADA尧HLA-G 两两比较袁均无显著差异渊P跃0.05冤遥 见表 3遥2145窑窑Mod Diagn Treat现代诊断与治疗2023 Jul 34渊14冤表 2高载量组和低载量组 TLR7mRNA尧ADA尧HLA-G 比较渊x依s冤组别nTLR7mRNAADA(U/L)HLA-G(U/mL)高载量组低载量组tP53473.23依0.652.16依0.588.6400.0144.52依9.5632.45依6.377.3300.0124.35依6.8117.42依4.535.9110.01表 3诊断效能比较检查项目特异度灵敏度准确度阳性预测值阴性预测值EBV-DNA 载量TLR7mRNAADAHLA-G四种联合字2P71.67(86/120)73.33(88/120)75.00(90/120)74.17(89/120)87.50(105/120)10.7570.02981.00(81/100)82.00(82/100)80.00(80/100)78.00(78/100)97.00(97/100)17.0090.00275.91(167/220)77.27(170/220)77.27(170/220)75.91(167/220)91.82(202/220)25.4170.00170.43(81/115)71.93(82/114)72.73(80/110)71.56(78/109)86.61(97/112)10.7500.03081.90(86/105)83.02(88/106)81.82(90/110)80.18(89/111)97.22(105/108)16.4830.0023讨论EBV 感染会造成全身性免疫异常袁对多个器官造成不良影响袁现阶段袁对于传染性单核细胞增多症的诊断多以实验室检查为主袁其中 EBV-DNA 载量尧TLR7mRNA尧ADA尧HLA-G 均为常用指标袁每种检查均有一定诊断价值袁但又存在一定局限性咱3暂遥EBV-DNA 载量检测是 EBV 感染重要检测手段袁可以有效扩增袁能够实时监测每个循环中的 PCR产物袁准确检测出病毒拷贝数袁反映 EBV 感染袁具有较好的准确性袁同时操作简便尧重复性好遥对传染性单核细胞增多症患儿进行 EBV-DNA 载量检测可以对其发热原因进行诊断袁避免滥用抗菌药袁减少并发症产生遥EBV-DNA 载量和传染性单核细胞增多症患儿病情严重程度密切相关袁EBV-DNA 载量可以反映患儿免疫清除能力及病毒复制能力袁EBV-DNA 载量水平越高表示患儿免疫功能越差袁病情越严重咱4-5暂曰EBV 感染会促使 TLR7mRNA 水平异常表达袁传染性单核细胞增多症患儿 TLR7mRNA 水平异常升高曰ADA 在人体组织中分布广泛袁由嘌呤核苷代谢产生袁受到 EBV 感染后袁机体会启动细胞免疫应答袁单核巨噬细胞尧淋巴细胞被激活袁促使淋巴细胞中 ADA水平上升袁进入到血液中遥 此外袁受感染的 B 淋巴细胞被细胞毒性 T 淋巴细胞靶向攻击袁B 淋巴细胞被破坏袁促使 ADA 被释放进入血液中袁因此袁传染性单核细胞增多症患儿 ADA 水平异常升高咱6-7暂曰HLA-G作为免疫抑制分子袁可以帮助病毒感染细胞在机体受到病毒感染时脱离免疫系统监测袁 潜伏在机体袁并且 HLA-G 在病毒的复制尧繁殖过程中发挥重要作用袁传染性单核细胞增多症患儿 HLA-G 水平异常升高遥对上述相关指标进行联合监测有助于降低误诊尧漏诊袁提高儿童传染性单核细胞增多症诊断效能遥本研究结果显示袁观察组尧对照组 EBV-DNA载量尧TLR7mRNA尧ADA尧HLA-G 比较袁差异有统计学意义渊P约0.05冤曰高载量组和低载量组 TLR7mR鄄NA尧ADA尧HLA-G 进行比较袁差异有统计学意义渊P约0.05冤曰EBV-DNA 载 量 尧TLR7mRNA尧ADA尧HLA-G联合检测诊断特异度尧灵敏度尧准确度尧阴性预测值尧阳性预测值高于任一项单独检测渊P约0.05冤袁表明与正常儿童相比袁传染性单核细胞增多症患儿 EBV-DNA载量尧TLR7mRNA尧ADA尧HLA-G 更高袁且 EBV-DNA载量与 TLR7mRNA尧ADA尧HLA-G 水平存在一定关系遥EBV-DNA 载量尧TLR7mRNA尧ADA 及 HLA-G 联合检测具有较高的诊断价值遥综上所述袁与正常儿童相比袁传染性单核细胞增多症患儿 EBV-DNA 载量尧TLR7mRNA尧ADA尧HLA-G更高袁且 EBV-DNA 载量与 TLR7mRNA尧ADA尧HLA-G 水平存在一定关系遥EBV-DNA 载量尧TLR7mRNA尧ADA 及 HLA-G 联合检测可以有效提高儿童传染性单核细胞增多症的准确度尧特异度尧灵敏度尧阳性预测值尧阴性预测值袁具有较高的诊断价值遥参考文献咱1暂孙昌瑞,冯林.尿 NGAL 对传染性单核细胞增多症儿童患者早期肾损伤的诊断价值咱J暂.成都医学院学报,2019,14(1):93-96.咱2暂全国儿童 EB 病毒感染协作组,中华实验和临床病毒学杂志编辑委员会.EB 病毒感染实验室诊断及临床应用专家共识咱J暂.中华实验和临床病毒学杂志,2018,32(1):2-8.咱3暂张善虎.3 项指标联合检测对儿童原发传染性单核细胞增多症的诊断价值咱J暂.检验医学与临床,2020,17(1):66-68.咱4暂吴菲,刘淼.EBV-CAIgM尧EBVDNA 和异型淋巴细胞在儿童传染性单核细胞增多症中的诊断价值咱J暂.中华全科医学,2020,18(8):1341-1343+1383.咱5暂林珊,郭三平,江心怡,等.异型淋巴细胞尧EB 病毒及 TLR7 联合检测在儿童传染性单核细胞增多症中的诊断价值咱J暂.检验医学与临床,2023,20(1):32-35+40.咱6暂谢付静,孙红娟,杨亚培,等.血浆白细胞抗原 G尧白细胞介素 10 水平在传染性单核细胞增多症诊断中的价值咱J暂.山东医药,2017,57(40):95-96.咱7暂邓士勇,陈明,王旭东,等.联合检测 HLA-G尧IL-6 在传染性单核细胞增多症患儿中的诊断价值咱J暂.中国实验血液学杂志,2018,26(4):1210-1214.收稿日期院2023-04-122146窑窑