MTHFR C677T、A1298C与不明原因习惯性流产的相关性研究.pdf

*通信作者谢小芳袁电话院0512-67783142袁E-mail:南 通 大 学 学 报 渊 医 学 版 冤Journal of Nantong University(Medical Sciences)2023 颐 43渊4冤DOI:10.16424/32-1807/r.2023.04.019引文格式院 赵丹,祁琳,刘锐,等.MTHFR C677T尧A1298C 与不明原因习惯性流产的相关性研究J.南通大学学报(医学版),2023,43(4)颐375-378.习惯性流产(habitual abortion,HA)是指在妊娠前20 周内连续发生了 3 次或 3 次以上的自然流产1。全球 1%耀3%的育龄女性患有此疾病，属于产科高发疾病。HA 发病涉及因素较多，包括子宫异常、胚胎核型异常、免疫功能紊乱、感染性疾病、内分泌系统疾病、父母遗传疾病(核型异常、隐性疾病携带者、显性疾病和易栓症)等2-3。与上述因素无关，且通过宫腔镜，子宫输卵管造影和抗磷脂抗体检测仍无法判断原因的通常称为不明原因习惯性流产(unexplainedhabitual abortion,UHA)。目前，亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)基因与 UHA 之间是否存在相关性受到了诸多学者的关注。MTHFR 突变易使机体叶酸代谢受阻，降低同型半胱氨酸向蛋氨酸转化从而引起高同型半胱氨酸血症，最终诱发胚胎细胞凋亡导致流产；其遗传多态性已被证实是高同型半胱氨酸的常见遗传因子4-5。MTHFR 基因易发生突变，突变概率与突变位点均具有区域性和种族性6。目前，暂未发现苏州地区有关育龄女性 MTHFR 基因多态性分布与 UHA 关系的报道，本研究通过检测患者体内 MTHFR 基因 C677T以及 A1298C 多态性分布，探讨其与 UHA 发生的相关性。1材料和方法1.1研究对象与分组将 2021 年 1 月2022 年12 月在苏州大学附属第二医院生殖中心就诊的 104例 UHA 患者纳入病例组，年龄 2040 岁，平均(29.20依3.40)岁；同期 589 名妊娠正常无自然流产史者纳入对照组，年龄 2039 岁，平均(28.58依3.31)岁。两组年龄差异无统计学意义(P0.05)。所选受试者的临床资料完整，排除意识障碍、自身免疫性疾病、恶性肿瘤、生殖系统感染、夫妻双方染色体异常者。1.2MTHFR 基因多态性检测方法选用 EDTA 负压抗凝管，采集受试者静脉血 2 mL。按照柱式提取试剂盒(苏州康吉诊断有限公司)说明书提取血液样本 DNA。使用叶酸代谢能力测定试剂盒(荧光法)(江西诺德医疗器械有限公司)检测 C677T、A1298C 基因多态性，ABI7900 PCR 分析仪进行扩增分析，PCR反应体系总体积 20 滋L，扩增程序：95 益 10 min 激活荧光基团；95 益 15 s 变性，60 益 40 s，40 个循环；室温冷却 1 min。60 益收集 FAM 和 HEX(或 VIC)通道信号。1.3统计学方法采用 SPSS 19.0 软件分析基因分布频率。Pearson 字2检验比较两组间基因分布频率，MTHFR C677T尧A1298C 与不明原因习惯性流产的相关性研究赵丹袁祁琳袁刘锐袁易甜甜袁汪红秋袁潘振袁谢小芳*(苏州大学附属第二医院精准医学诊断中心袁苏州 215004)摘要目的院探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)C677T尧A1298C 基因分布频率与不明原因习惯性流产(unexplained habitual abortion,UHA)之间的相关性遥 方法院将 2021 年 1 月要2022 年 12 月于苏州大学附属第二医院就诊的 104 例 UHA 患者纳入病例组袁589 名健康妊娠女性作为对照组遥 分别采集两组静脉血并提取 DNA袁 实时荧光基因扩增技术检测 MTHFR 基因 C677T 位点和 A1298C 位点的多态性袁 分析各基因分布频率与UHA 的关系遥 结果院MTHFR C677T 基因型频率在病例组分布为野生型(CC)17.31%尧杂合突变型(CT)50.96%和纯合突变型(TT)31.73%袁对照组为 CC 29.03%尧CT 48.73%和 TT 22.24%袁两组分布差异存在统计学意义(字2=7.909,P0.05)曰病例组 MTHFR 677 的 T 等位基因频率明显高于对照组(OR=1.532,95%CI:1.1382.063,P=0.005)曰Pearson 相关性分析显示袁基因型 TT尧等位基因 T 是不明原因习惯性流产的危险因素(OR1,P0.05)遥 结论院苏州地区育龄女性携带 MTHFR 677T 等位基因和携带 TT 基因型可增加 UHA 风险袁而单独携带 MTHFR 1298C 等位基因则不增加风险发生遥关键词不明原因习惯性流产曰亚甲基四氢叶酸还原酶曰C677T曰A1298C中图分类号R714.21文献标志码B文章编号1674-7887渊2023冤04-0375-04375窑窑南 通 大 学 学 报(医 学 版)2023 颐 43渊4冤计算 OR 值及 95%CI；以x 軃 依s 表示计量资料，组间比较采用 t 检验，P0.05 表示基因型分布符合 H-W 定律。2结果2.1H-W 平衡检验H-W 平衡校验结果显示，本研究中 MTHFR C677T、A1298C 位点的基因多态性符合该定律(P0.05)，见表 1，表明所选样本具有群体代表性。2.2MTHFR C677T 基因型及等位基因分布频率差异病例组与对照组 MTHFR C677T 的 3 种基因型分布频率(CC、CT 和 TT)差异有统计学意义(P0.05)，病例组 TT 基因型频率及突变 T 等位基因频率均高于对照组(均 P0.05)，见表 3。2.4MTHFR C677T 基因多态性与 UHA 的关系MTHFR C677T 的 3 种基因型分布频率(CC、CT、TT)组间两两对比，结果显示，基因型 CT 与 CC 组间差异有统计学意义(P0.05)；基因型 TT 与 CC 组间差异有统计学意义(P0.05)。通过 Pearson 相关性分析，TT基因型分布频率与 UHA 的发生存在显著关联，基因型TT、等位基因 T 是 UHA 发生的风险因素(OR1,PT 多态性可作为北印度人群流产的早期遗传筛查指标。但在埃及女性17和日本女性18的研究结果中，与对照组相比，病例组的 TT 基因型分布频率较表 2MTHFR C677T 基因型及等位基因分布频率(n,%)组别nC677T 基因型分布频率等位基因分布频率CCCTTTCT对照组 589 171(29.03)287(48.73)131(22.24)629(53.40)549(46.60)病例组 10418(17.31)53(50.96)33(31.73)89(42.79)119(57.21)字2值7.9097.966P值0.0190.005基因型对照组病例组字2值P值OR95%CICC171(37.3)18(25.4)3.845 0.049 9 1.754 0.9953.094CT287(62.7)53(74.6)CC171(56.6)18(35.3)7.979 0.0052.393 1.2904.439TT131(43.4)33(64.7)CT287(68.7)53(61.6)1.607 0.2051.364 0.8432.207TT131(31.3)33(38.4)C629(53.4)89(42.8)7.966 0.0051.532 1.1382.063T549(46.6)119(57.2)表 1H-W 平衡检验组别C677TA1298C字2值P值字2值P值对照组0.2590.6110.4520.501病例组0.1740.6770.1780.673组别nA1298C 基因型分布频率等位基因分布频率AAACCCAC对照组 589 405(68.76)164(27.84)20(3.40)974(82.68)204(17.32)病例组 10468(65.38)33(31.73)3(2.88)169(81.25)39(18.75)字2值0.6870.251P值0.7090.616表 3MTHFR A1298C 基因型及等位基因分布频率(n,%)表 4MTHFR C677T 基因型与 UHA 相关性分析(n,%)376窑窑高，但差异并无统计学意义。因此，MTHFR 基因多态性与 UHA 的相关性仍存在一定的争议。在本研究中，MTHFR C677T 多态性对照组 CC(野生型)基因型分布频率和等位基因 C 分布频率均高于病例组，而病例组 TT(纯合突变)基因型分布频率明显高于对照组。经 Pearson 相关性分析发现MTHFR C677T 位点的等位基因 T 与 UHA 发病有关，等位基因 T(P=0.005,OR=1.532,95%CI:1.1382.063)与基因型 TT(P=0.005,OR=2.393,95%CI:1.2904.439)可增加UHA的发病风险。以上结果表明MTHFRC677T 的突变 T 基因可能是 UHA 的遗传危险因素之一。这与 Y.L.CAO 等4,19的研究结果相符。此外，对两组 MTHFR A1298C 多态性的分布以及突变的基因频率进行了分析，结果显示病例组 AC、CC、等位基因 C 与对照组之间差异无统计学意义(P0.05)，表明携带 MTHFR 1298C 基因与 UHA 发生没有显著关联。中国人群 MTHFR 基因多态性分布差异大，需根据不同区域，不同基因分布给予个体精准化的治疗。同时，甲硫氨酸还原酶(5-methyltetrahydrofolate-homocysteine methyltransferase reductase,MTRR)基因多态性也是造成叶酸代谢异常，引起自然流产的关键酶之一，今后的研究将结合 MTHFR 与 MTRR 基因多态性综合分析。综上所述，MTHFR 677 位点的 T 突变可增加UHA 发生的风险，1 298 位点的 C 突变与 UHA 无明显关联。建议对苏州地区孕龄女性开展常规 MTHFR基因多态位点的遗传筛查，在孕早期发现携带 MTH原FR 677T 基因型，及早干预并制定精准的治疗方案对预防 UHA 的发生具有十分重要的临床意义。参考文献1SAK S,INCEBIYIK A,HILALI N G,et al.Cytogeneticscreening in couples with Habitual AbortionsJ.J GynecolObstet Hum Reprod,2019,48(3):155-158.2LIU Y K,LIU Y L,ZHANG S N,et al.Etiology of sponta鄄neous abortion before and after the demonstration of embry鄄onic cardiac activity in women with recurrent spontaneousabortionJ.Int J Gynaecol Obstet,2015,129(2):128-132.3KACPRZAK M,CHRZANOWSKA M,SKOCZYLAS B,etal.Genetic causes of recurrent miscarriagesJ.Ginekol Pol,2016,87(10):722-726.4CAO Y L,XU J H,ZHANG Z F,et al.Association studybetweenmethylenetetrahydrofolatereductasepolymor鄄phisms and unexplained recurrent pregnancy loss:a meta-analysisJ.Gene,2013,514(2):105-111.5陈冬琳,徐键.同型半胱氨酸与妊娠相关疾病研究进展J.预防医学,2020,32(2):147-151.6YANG B Y,LIU Y Y,LI Y F,et al.Geographical distribu鄄tion of MTHFR C677T,A1298C and MTRR A66G genepolymorphisms in China:findings from 15357 adults ofHan nationalityJ.PLoS One,2013,8(3):e57917.7OBICAN S G,FINNELL R H,MILLS J L,et al.Folic acidin early pregnancy:a public health success storyJ.FASEBJ,2010,24(11):4167-4174.8RAI V,KUMAR P.Relation between methylenetetrahydro鄄folate reductase polymorphisms(C677T and A1298C)andmigraine susceptibilityJ.Indian J Clin Biochem,2022,37(1):3-17.9RAI V,KUMAR P.Methylenetetrahydrofolate reductase(MTHFR)gene C677T(rs1801133)polymorphism and riskof alcohol dependence:a meta-analysisJ.AIMS Neurosci,2021,8(2):212-225.10WEISBERG I,TRAN P,CHRISTENSEN B,et al.A sec鄄ond genetic polymorphism in methylenetetrahydrofolatereductase(MTHFR)associated with decreased enzyme activ鄄ityJ.Mol Genet Metab,1998,64(3):169-172.11LI Y,QIU S,SHI J K,et al.Association between MTHFRC677T/A1298C and susceptibility to autism spectrum dis鄄orders:a meta-analysisJ.BMC Pediatr,2020,20(1):449.12NELEN W L,BULTEN J,STEEGERS E A,et al.Mater鄄nal homocysteine and chorionic vascularization in recur鄄rent early pregnancy lossJ.Hum Reprod,2000,15(4):954-960.13CIRILLO M,COCCIA M E,ATTANASIO M,et al.Homo鄄cysteine,vitamin B status and MTHFR polymorphisms inItalian infertile womenJ.Eur J Obstet Gynecol ReprodBiol,2021,263:72-78.14ZHANG Y,HE X,XIONG X,et al.The associationbetweenmaternalmethylenetetrahydrofolatereductaseC677T and A1298C polymorphism and birth defects andadverse pregnancy outcomesJ.Prenat Diagn,2019,39(1):3-9.15ZUIN M,CERVELLATI C,TRENTINIA,et al.Methylenete鄄trahydrofolate reductase C667T polymorphism and suscep鄄tibility to late-onset Alzheimer忆s disease in the ItalianpopulationJ.Minerva Med,2021,112(3):365-371.16NAIR R R,KHANNA A,SINGH K.MTHFR C677Tpolymorphism and recurrent early pregnancy loss risk inNorth Indian populationJ.Reprod Sci,2012,19(2):210-215.17SETTIN A,ELSHAZLI R,SALAMA A,et al.Methylenete鄄trahydrofolate reductase gene polymorphisms in Egyptianwomen with unexplained recurrent pregnancy lossJ.GenetTest Mol Biomark,2011,15(12):887-892.18KOBASHI G,KATO E H,MORIKAWA M,et al.MTHFR赵丹，等.MTHFR C677T、A1298C 与不明原因习惯性流产的相关性研究377窑窑C677T Polymorphism and factor V Leiden mutation arenot associated with recurrent spontaneous abortion ofunexplained etiology in Japanese womenJ.Semin ThrombHemost,2005,31(3):266-271.19DU B R,SHI X J,YIN C H,et al.Polymorphisms ofmethalenetetrahydrofolate reductase in recurrent pregnancyloss:an overview of systematic reviews and meta-analy鄄sesJ.J Assist Reprod Genet,2019,36(7):1315-1328.收稿日期 2023-03-01南 通 大 学 学 报 渊 医 学 版 冤Journal of Nantong University(Medical Sciences)2023 颐 43渊4冤DOI:10.16424/32-1807/r.2023.04.020引文格式院 陆威,徐昱,张慎忠,等.右心室/左心室直径比对急性肺动脉栓塞患者的评估价值J.南通大学学报(医学版),2023,43(4)颐378-380.急性肺动脉栓塞(acute pulmonary embolism,APE)是临床常见的疾病，据统计，APE 患者 7 d 全因死亡率为 1.9%耀2.9%，30 d 全因死亡率为 4.9%耀6.6%1。APE 的早期危险分层是预后评估和指导治疗决策的重要步骤2。CT 肺动脉造影(computed tomographypulmonary angiography,CTPA)在临床诊断 APE 应用广泛且技术成熟，然而在 APE 患者的早期危险分层仍存在一定困难。研究3表明，高敏肌钙蛋白(high-sensitivity cardiac troponin T,hs-cTnT)、N 末端 B 型钠尿肽前体(B-type natriuretic peptide precursor,NT-proBNP)等心脏生物标志物对右心室收缩功能障碍(right ventricular systolic dysfunction,RVD)的诊断具有重要意义。APE 的诊断基于临床概率评估、实验室检查、超声心动图和 CTPA，其中 CTPA 在 APE 的诊断中起着中心作用4。据报道5，超过 50%的 APE 患者可能发生继发性右心室衰竭，合并右心室衰竭患者的死亡率比右心室功能正常患者高 2耀3 倍。因此，右心室衰竭是 APE 严重程度和预后的有力预测因素，基于 CTPA 的右心室功能参数对 APE 患者的早期危险分层及预后具有重要探讨价值。本研究探讨CTPA 测量的右心室/左心室(right ventricle/left ventri原cle,RV/LV)直径比对 APE 患者早期危险分层(预测ICU 入区率和住院死亡率)的有效性，并与 NT-proB原NP、hs-cTnT、超声心动图诊断的 RVD 进行比较。1资料和方法1.1一般资料回顾性分析 2014 年 1 月2020 年12 月在南通市通州区人民医院行 CTPA 检查患者的病历资料。APE 的诊断均符合肺血栓栓塞症诊治与预防指南(2018)6。排除标准：活动性出血、近期脑血管病史、慢性期肺动脉栓塞者。最终，229 例患者纳入研究。根据 CTPA 测定的 RV/LV 将患者分为两组，RV/LV约1 为 A 组，共 112 例；RV/LV跃1 为 B 组，共117 例。1.2实验室检测NT-proBNP 采用罗氏公司生产的试剂盒罗氏 602，应用电化学发光法进行测定。hs-cTnT 采用罗氏 Elecsys2010 全自动电化学免疫右心室/左心室直径比对急性肺动脉栓塞患者的评估价值陆威袁徐昱袁张慎忠袁赵建春袁张春浩(江苏省南通市通州区人民医院影像科袁南通 226300)摘要目的院探讨应用 CT 肺动脉造影(computed tomography pulmonary angiography,CTPA)测量右心室/左心室(right ventricle/left ventricle,RV/LV)直径比袁以早期识别急性肺动脉栓塞(acute pulmonary embolism,APE)危重患者遥 方法院回顾性分析 2014 年 1 月要2020 年 12 月南通市通州区人民医院诊治的 APE 患者 229 例的病历资料遥 通过 CTPA 在垂直于心脏长轴的断层图像上测量 RV/LV 直径比袁并根据 RV/LV 将患者分为 RV/LV约1(A 组)和 RV/LV跃1(B 组)遥 分析RV/LV 与临床预后的关系袁并与简化肺栓塞严重指数评分尧B 型钠尿肽前体尧高敏肌钙蛋白和超声心动图诊断的右心室收缩功能障碍(right ventricular systolic dysfunction,RVD)进行比较遥 结果院B 组年龄显著大于 A 组(67.81依2.70)岁 vs(60.68依3.20)岁袁B 组高血压患者较多(44.4%vs 33.3%)袁平均动脉压较低袁ICU 入区率较高(28.05%vs 11.61%)袁死亡 5 例遥 超声心动图诊断 RVD 预测 ICU 入区率的敏感度(94.3%)尧特异度(81.1%)最高袁CTPA 显示 RV/LV跃1 与心脏生物标志物等效遥B 组心肌酶指标更高袁RVD 患者较多遥 结论院测量 RV/LV 有助于识别 APE 患者中的危重者遥关键词急性肺动脉栓塞曰血管造影术曰右心室功能曰右心室/左心室直径比中图分类号R543.2文献标志码B文章编号1674-7887渊2023冤04-0378-03378窑窑