临床病原体检查专家讲座.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,临床病原体检验,临床病原体检查,第1页,临床病原体检验目标,明确感染是否发生以及病原体类型。,提供体外抗微生物药品敏感试验结果。,亲密监视烈性传染病与新传染病发生，及时向行政主管部门汇报。,配合相关机构进行流行病学调查。,临床病原体检查,第2页,临床病原体检验基本程序,医生、护士、病人、检验师：正确采集运输标本。,检验科：直接镜检、免疫学和分子生物检测、病原体分离培养判定、药敏试验,汇报结果。,医生：明确诊疗、合理用药。,临床病原体检查,第3页,一、标本采集和运输,临床病原体检查,第4页,标本采集基本标准,无菌、及时、按照要求、标注清楚,依据病史与临床表现确定标本采集类型与部位，尽可能采集病变显著部位标本。,在发病早期或急性期采集标本，最好在抗生素使用前（如使用过抗生素应在申请单上注明）。,采集标本预防污染，并置于无菌容器，加盖密封、马上送检。,标本必须贴上标签，与检验申请单同时送检。,临床病原体检查,第5页,拒收标本,1.样本上无病患标签或病患标签与检验申请单不符合。,2.样本以不适当温度、运输培养基及容器运输。,3.样本量不足、已被防腐剂固定和运输时间过长。,4.样本外漏、容器破损及显著受污染样本。,5.样本检验项目申请不适合进行。,6.当日重复送样本（除血液培养外）。,7.已接触空气厌养菌检测标本。,8.被正常厌养菌污染标本,要求检测。,临床病原体检查,第6页,血液标本采集,适应症：疑似菌血症、败血症或脓毒血症病人。,普通在抗生素使用前，于发烧早期或高峰期采血。,24,小时内采血,23,次可提升阳性率。,血液与培养基百分比为,1,：,10,，普通成人血量,1020ml,，婴儿,15ml,。,临床病原体检查,第7页,呼吸道标本采集,类型：鼻咽拭子、痰和经气管采集标本。,上呼吸道存在正常菌群，在采集标本与结果分析时应予考虑,。,临床病原体检查,第8页,痰标本采集,采集时间：晨痰，且在取痰前用清水重复漱口。,方法：,（,1,）自然咳痰法,（,2,）气管镜下采集法,（,3,）气管穿刺法临床病原体检查,第9页,尿标本采集,无菌采集中段尿,如考虑厌氧菌感染，采取膀胱穿刺法采集标本。,排尿困难者考虑导尿采集标本,。,临床病原体检查,第10页,粪便标本采集,自然排便，挑取脓、血或粘液部分于清洁容器中送检。,排便困难者，采取直肠拭子采集。,怀疑霍乱弧菌感染引发腹泻，马上接种或将标本置于碱性蛋白胨或卡,-,布运输培养液送检。,传染性腹泻应连续送检,3,次。,临床病原体检查,第11页,生殖道标本,男性：无菌采集尿道口分泌物或前列腺液,。,女性：用无菌棉纤采集阴道或宫颈分泌物。怀疑厌氧菌感染，应采取阴道后穹隆穿刺法，并马上接种于厌氧平板。,疑似梅毒螺旋体感染，直接从外生殖器硬下疳蘸取渗出液，置于盖玻片上，马上送检。,临床病原体检查,第12页,脑脊液,由临床医生采取腰椎穿刺，抽取,2-3ml,，置于无菌容器中马上送检，不能暂时保留于冰箱中。,临床病原体检查,第13页,胸腹水等穿刺液标本,标本采集应在用药前或停顿用药后,12,天进行。,用无菌注射器抽取可疑标本，分别置于抗凝与不抗凝无菌容器中马上送检。,怀疑厌氧菌感染，采取床边接种为宜。,临床病原体检查,第14页,脓液及创伤感染分泌物标本,开放性脓肿及脓性分泌物：用无菌棉纤采取脓液或病灶,深部,分泌物，置于无菌试管中送检。,封闭性脓肿：局部消毒后，用注射器抽取，怀疑厌氧菌感染，应隔绝空气采集。,大面积烧伤创面分泌物：用无菌棉纤,多点,采取脓液或分泌物，置于无菌试管中送检,。,临床病原体检查,第15页,检验方法,直接显微镜检验,病原体抗原与抗体检测,病原体核酸检测,病原体分离培养与判定,临床病原体检查,第16页,显微镜直接涂片检测,不染色标本：,染色标本：革兰氏染色,抗酸染色,墨汁染色,临床病原体检查,第17页,临床病原体检查,第18页,临床病原体检查,第19页,临床病原体检查,第20页,临床病原体检查,第21页,病原体分离培养与判定,目标：,明确感染病原体。,为临床提供体外抗微生物药品敏感试验结果。,临床病原体检查,第22页,结果评价：,正常人群无菌体液中检测到细菌，应考虑细菌为感染病原体。,存在正常菌群标本检测到细菌应结合细菌量考虑是否为致病菌。,如临床表现支持感染，但培养阴性，应考虑为标本不合格、培养不恰当等原因。,直接镜检找到病原体，而培养阴性，应考虑有,L,细菌、厌氧菌或苛氧菌感染,临床病原体检查,第23页,三、临床常见病原体检验,临床常见病原体为：细菌、病毒、支原体、衣原体、立克次体,以及寄生虫等,临床病原体检查,第24页,不一样部位感染细菌学,血液,中枢神经系统,呼吸系统,泌尿生殖道,胃肠道,脓肿、创伤分泌物及穿刺液,眼、耳部,临床病原体检查,第25页,血液标本常见病原菌,种类,病 原 菌,G,+,球菌,金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、化脓链球菌、草绿色链球菌、肠球菌,G,+,杆菌,结核分枝杆菌、产单核李斯特菌、阴道加特纳菌,G,-,球菌,脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌，卡他布兰汉菌,G,-,杆菌,大肠埃希菌、铜绿假单胞苗、克雷伯杆菌、肠杆菌、变形杆菌、沙雷菌、沙门菌、不动杆菌、嗜肺军团菌、嗜血杆菌,真菌,念珠菌、曲霉菌、隐球菌、球孢子菌,厌氧菌,拟杆菌、产气荚膜梭菌,临床病原体检查,第26页,中枢神经系统常见病原菌,脑膜炎奈瑟菌多见，其次为流感嗜血杆菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌、B群溶血性链球菌、脑膜败血黄杆菌,临床病原体检查,第27页,呼吸系统,肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌、肺炎支原体、肺炎衣原体,临床病原体检查,第28页,泌尿生殖道,淋病奈瑟菌、大肠埃希菌变形杆菌、肺炎克雷伯菌、产气肠杆菌、沙门菌、铜绿假单胞菌和沙雷菌、肠球菌,临床病原体检查,第29页,胃肠道,幽门螺杆菌、霍乱弧菌、沙门菌属细菌、志贺菌属细菌,临床病原体检查,第30页,脓肿、创伤分泌物及穿刺液,化脓性感染中最常见病原菌是金黄色葡萄球菌和化脓性链球菌，创伤感染病中多由厌氧菌引发。,临床病原体检查,第31页,眼、耳部,球菌、杆菌均可,临床病原体检查,第32页,四、医院感染,概念：,医院感染,（,nosocomial infection,）又称医院取得性感染（,hospital acquired infection,），指患者在入院时不存在，也不处于潜伏期，而在医院内发生感染，包含医院内取得而在出院后发病感染。广义医院感染对象不但指住院患者，还包含门诊病人、医院职员、探视人员与陪护人员等。,临床病原体检查,第33页,医院感染高危人群,慢性疾病:如肿瘤、糖尿病以及肝硬化等,免疫抑制剂及激素使用着,化疗及放疗患者,手术及麻醉患者,使用介入性诊疗与治疗患者,广谱抗生素使用者,临床病原体检查,第34页,医院感染感染源,病人、医院职员、探视人员、陪护人员。,医院环境、未彻底消毒医疗器械、血液制品等。,临床病原体检查,第35页,医院感染常见病原体,细菌为主要病原体。,细菌种类因时、地和人而异。,不一样临床类型其感染细菌组成比不一样。,临床病原体检查,第36页,医院感染常见临床类型,下呼吸道感染：最常见,尿路感染：,具备一项即可诊疗：,手术切口感染：,大部分为外源性感染培养可（-）,胃肠道感染：,使用抗生素,血液感染：,静脉输液、血液透析,皮肤和软组织感染：,金葡、溶血性链球菌蜂窝组织炎,静脉插管,：化脓,无症状菌尿入院时有尿路感染，入院后又培养出新细菌有发烧及尿道综合征，培养（-），但离心尿液白细胞10/HP,临床病原体检查,第37页,细菌污染监测,各类环境中空气、物体表面、医务人员手细菌总数卫生学标准,环境类别,空气,（cfu/m,3,）,物体表面,（cfu/cm,3,）,手,（cfu/cm,3,）,类,10,5,5,类,200,5,5,类,500,10,10,类,15,15,临床病原体检查,第38页,细菌耐药性检验,体外抗菌药品敏感试验方法,纸片扩散法（,Kirby-Bauer test,）,稀释法（,dilution test,）,E,试验法（,E test,）,临床病原体检查,第39页,药敏试验结果解释,敏感（,susceptible,）：表示测试菌能被测定药品常规剂量给药后在体内到达血药浓度所抑制或杀灭。,耐药（,resistant,）：表示测试菌不能被测定药品常规剂量给药后在体内到达血药浓度所抑制或杀灭，治疗无效。,中介,(intermediate):,该范围作为敏感与耐药之间缓冲区，防止因为微小技术误差影响试验结果。,最低抑菌浓度（,MIC,）能够抑制检测菌肉眼可见生长最低药品浓度称为测定药品对检测菌最低抑菌浓度。,临床病原体检查,第40页,耐药菌监测特殊试验,-,内酰胺酶：,能裂解青霉素类和头孢菌素类,-,内酰胺环，从而使其失去活性,临床意义,：（,1,）流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌以及卡拉莫拉汉菌等阳性，表示对青霉素、氨苄西林以及阿莫西林耐药。（,2,）葡萄球菌属以及肠球菌属等，阳性表示对青霉素、氨基组青霉素（氨苄西林）、羧基组青霉素（替卡西林）以及脲基组青霉素（美洛西林）耐药。,临床病原体检查,第41页,产超广谱,-,内酰胺酶,(extend spectum,-lactamase,ESBL)检测：,由质粒介导,-,内酰胺酶，可水解青霉素类、头孢菌素和氨曲南，主要在大肠埃希菌和克雷伯菌属等肠杆菌科细菌中产生。,临床意义：,产,ESBL,细菌,不论体外药品敏感试验结果怎样,对青霉素类、头孢菌素类和氨曲南治疗均无效。,临床病原体检查,第42页,耐甲氧西林葡萄球菌（,methecillin resistance staphylococcus,，,MRS,）,1,g,苯唑西林纸片抑菌圈直径,10mm,，或,MIC,4,g/ml,金黄色葡萄球菌,1,g,苯唑西林纸片抑菌圈直径,17mm,，或,MIC,0.5,g/ml,凝固酶阴性葡萄球菌称耐甲氧西林葡萄球菌。,临床病原体检查,第43页,临床意义,对全部,-,内酰胺类药品均无效,并对氨基糖甙类、大环内脂类、克林霉素和四环素等抗生素多重耐药。治疗首选药品为万古霉素。,临床病原体检查,第44页,耐青霉素肺炎链球菌,（,penicillin resistant strepttococcus paeumoni,，,PRSP,）,定义：,1,g,苯唑西林纸片抑菌圈直径,2,g/ml,应视为耐青霉素肺炎链球菌,PRSP,对氨苄西林、,氨苄西林,/,舒巴坦、,头孢克肟、,头孢唑啉临床治疗疗效很差，治疗时参考药敏结果选择药品，经验治疗重症感染时，可用头孢曲松或头孢噻肟联合万古霉素用药。,临床病原体检查,第45页,耐万古霉素肠球菌,（,vancomycin resistant enteroccoccus,，,VRE,）,定义,:,对,30,g,万古霉素纸片抑菌圈直径,19mm,，,或,MIC,32,g/ml,应视为耐万古霉素肠球菌。,耐万古霉素肠球菌当前尚无有效治疗方法，不过对青霉素敏感,VRE,可用青霉素和庆大霉素联合治疗，若对青霉素耐药而不是高水平耐氨基糖苷类可用壁霉素和庆大霉素。另外氯霉素、红霉素、四环素（或多西环素、或米诺环素）及利福平可用于,VRE,株。,临床病原体检查,第46页,超级细菌,临床病原体检查,第47页,谢谢,临床病原体检查,第48页,