1、一、PBS缓冲液
1.1 母液的配制:
0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水
0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水
1.2不同PH值PBS配制
各种PH值的 0.2M PBS(100ml)配方 :
pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)
5.7 93.5 6.5
5.8 92
2、 8
5.9 90 10
6.0 87.7 12.3
6.1 85 15
6.2 81.5 18.5
6.3 77.5 22.5
6.4
3、 73.5 26.5
6.5 68.5 31.5
6.6 62.5 37.5
6.7 56.5 43.5
6.8 51 49
6.9 45 55
7.0
4、 38 62
7.1 33 67
7.2 28 72
7.3 23 77
7.4 19ml 81ml
7.5 16 84
7.6
5、 13 87
7.7 10.5 0.5
7.8 8.5 91.5
7.9 7 93
8.0 5.3 94.7
以配制100ml 0.2M PBS为例,先配制母液,按照配方表分别取19ml 0.2mol/L的
6、NaH2PO4和81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4,混合即可。
1.3 不同浓度PBS的配制
只需将0.2M PBS按相应比例适当稀释 即可,如:
0.1M PBS(PH=7.4) :取 500ml 0.2M PBS,加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PBS(PH=7.4):取50ml 0.2M PBS,加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PBS(PH=7.4):取100ml 0.2 M PBS,加水稀释至 1000ml 即可。
若需要 NaCl的话,加入 NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。
二、Tris-HCl缓冲液
7、 某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制:将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液与配方表中所示相应体积(单位:ml)的0.1mol/L HCl混合,加水将体积调至100ml 即可。(至于配制0.1M HCl 就是8.58ml浓盐酸用蒸馏水定容到1000ml啦)
各种ph值的tris缓冲液的配制
所需ph值(25℃)
0.1mol/l HCl的体积/ml
7.1
45.7
7.2
44.7
7.3
43.4
7.4
42.0
7.5
40.3
7.6
38.5
7.7
36.6
7.8
34.5
7.9
32.0
8.0
29.2
8.1
26.2
8.2
22.9
8.3
19.9
8.4
17.2
8.5
14.7
8.6
12.4
8.7
10.3
8.8
8.5
8.9
7.0