血液实验医学知识培训专家讲座.pptx

单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,血液系统,试验一 影响血液凝固原因,试验二 出血时间和凝血时间测定,试验三 ABO血型判定,血液实验医学知识培训,第1页,背景知识,见生理学教材第三章P58-74页,血小板生理,生理性止血基本过程,血液凝固,血型与红细胞凝集,红细胞血型,输血标准,血液实验医学知识培训,第2页,目标,原理,动物,药品,器材,方法与步骤,注意事项,结果与分析,目标,原理,动物,药品,血液实验医学知识培训,第3页,目标,了解血液凝固基本过程及影响血液凝固理化原因,血液实验医学知识培训,第4页,一、血液凝固（blood coagulation）,血液由流体状态变为不能流动胶冻状凝块过,程称为血液凝固，简称血凝。,可溶性,纤维蛋白原,不可溶性,纤维蛋白多聚体,本质：,相关知识,血液实验医学知识培训,第5页,2、凝血酶形成,二、血液凝固过程,1、凝血酶原酶复合物形成,3、纤维蛋白形成,血液实验医学知识培训,第6页,纤维蛋,白形成,纤维蛋白原 纤维蛋白单体,纤维蛋白多聚体,a,Ca,2+,Ca,2+,凝血酶形成,a ,外源性凝血,组织损伤释放,Ca,2+,a,凝血酶原酶复合物形成,a a,a,a,内源性凝血,激肽释放酶,前激肽释放酶,a,PL,a,Ca,2+,PL,Ca,2+,接触异物,接触异物,Ca,2+,血液实验医学知识培训,第7页,Ca,2+,经过与FII、FVII、FIX、FX结合并使其发生变构，暴露出与磷脂结合部位来参加凝血。所以Ca,2+,在血凝过程中含有很主要作用。,三、Ca,2+,在血液凝固中作用,血液实验医学知识培训,第8页,(1)激活血小板为凝血因子提供磷脂表面，参加内外源性凝血路径因子X和凝血酶原激活；,(2)血小板质膜表面结合有许多凝血因子（FI、FV、FXI、FXIII），并使这些因子相继激活；,(3)血小板激活后，释放颗粒内容物（纤维蛋白原），可增加纤维蛋白形成，加固凝块。,四、血小板在凝血过程中作用,血液实验医学知识培训,第9页,肝素在体内和体外都有抗凝作用，主要经过增加抗凝血酶活性而发挥间接抗凝作用，使血液不凝。,五、肝素在凝血过程中作用,血液实验医学知识培训,第10页,六、温度对血液凝固影响,七、接触面光滑程度对血液凝固影响,适宜酶发挥效能温度（,37,左右）环境中，血凝速度加紧。,接触面越粗糙血液凝固速度越快,血液实验医学知识培训,第11页,动物,家兔，23kg，雌雄均可,药品,肝素、草酸钾、2%氯化钙溶液、肺组织浸液、富血小板血浆、少血小板血浆、生理盐水、石蜡油,器材,小烧杯、带橡皮刷玻璃棒或竹签、清洁小试管10支、水浴装置一套、冰块、棉花、移液器（1ml、0.2ml）,血液实验医学知识培训,第12页,方法与步骤,1.观察内源性与外源性凝血过程,取洁净小试管3支，编号后按,表7-2,加入各种成份摇匀后静置，在加入,2%,CaCl,2,溶液同时开始计时，每15倾斜一次，观察是否开始凝血，并分别统计3支试管血凝时间，比较3个管血液凝固时间。,血液实验医学知识培训,第13页,表7-2 内源性凝血与外源性凝血观察,1号试管,2号试管,3号,试管,富血小板血浆(ml),0.2,-,-,-,少血小板血浆(ml),-,0.2,0.2,生理盐水(ml),0.2,0.2,-,-,肺组织浸液(ml),-,-,-,-,0.2,CaCl,2,(ml),0.2,0.2,0.2,血液凝固时间(s),*比较血液凝固时间(1与2比，2与3比)，分析产生差异原因,血液实验医学知识培训,第14页,取小试管7支，编号并按,表7-4,准备后，取家兔颈动脉血，每管1ml,在加3滴,2%,CaCl2溶液时,马上计时，每15倾斜试管一次，以观察血液是否凝固，至血液呈凝胶状不再流动时统计血凝时间。,2.观察影响血液凝固理化原因,血液实验医学知识培训,第15页,试验条件,加抗凝血,加CaCl,2,凝血时间,粗糙面,试管内加棉花,1ml,3滴,试管内涂石蜡油,1ml,3滴,温度,试管置37水浴,1ml,3滴,试管置冰浴,1ml,3滴,加肝素0.2ml,1ml,3滴,加草酸钾0.2ml,1ml,3滴,对照管,1ml,3滴,表7-4 影响血凝理化原因,血液实验医学知识培训,第16页,3.示教：观察纤维蛋白原在凝血过程中作用,取血10ml，注入两个小烧杯中，一杯静置，另一杯用试管刷轻轻搅拌，几分钟后,试管刷,上结成红色血团，用水冲洗，观察纤维蛋白形状，比较两杯血凝情况。,血液实验医学知识培训,第17页,1每试管口径大小及取血量应基本一致，判断试管,倾斜角度（45）、间隔时间（15s/次）、标准,（血液不见流动）都应一致。,2采血有先有后，计时不应统一要求，各组和个人,应分别单独计时。,3棉花不要压试管太紧，要松软。,4用石蜡油将试管表面全部润滑后，将石蜡油倒入,水池中。,5取血前先准备好冰块，取完血后马上把第3号试,管放入水浴锅，4号试管放入装有冰块烧杯中。,注意事项,血液实验医学知识培训,第18页,试验二 出血时间和凝血时间测定,目标,了解出血时间和凝血时间测定方法。,原理,出血时间测定在于了解毛细血管及血小板功效正常是否,凝血时间测定可了解血液中凝血因子功效正常是否。,血液实验医学知识培训,第19页,出血时间,是指从针刺使毛细血管破损，血液自行流出到自行停顿时间。,纸片法正常值：13分钟,生理性止血过程,包含血管收缩、血小板血栓形成和纤维蛋白凝块形成和纤维组织增生，长入血凝块到达永久止血。,血液实验医学知识培训,第20页,血液实验医学知识培训,第21页,凝血时间,是指血液流出体外至凝固所需要时间。,它反应是血液本身凝血过程是否正常。,玻片法正常值：28分钟,凝血时间延长常见于一些凝血因子缺乏或异常疾病。比如：甲、乙、丙型血友病。,血液实验医学知识培训,第22页,对象,人,药品,75%酒精棉球,器材,采血针、载玻片、滤纸条、秒表,血液实验医学知识培训,第23页,1出血时间测定,(1)以75%酒精棉球消毒耳垂或中指指端腹侧，待酒精,自然挥发后，用消毒采血针刺入上述部位23mm,深，让血液自然流出，切勿挤压，从血流流出算,起计算时间。,(2)每隔半分钟用滤纸吸干流出血流一次，直到吸,不到血液为止。,(3)统计开始出血到止血时间，或以滤纸上血点,数0.5分钟来计算，其结果即为出血时间（分）。,方法与步骤,血液实验医学知识培训,第24页,2凝血时间测定：,(1)以75%酒精棉球消毒，待酒精自然挥发后用消毒,采血针刺入上述部位23mm深，让血液自然流,出，用棉球轻轻拭去第一滴血液，待血液重新自,然流出即开始计时。,(2)将第二滴血置于玻片上，每隔半分钟用大头针挑,血一次，直到挑起细纤维状血丝，即表示开始,凝血.从开始流出到挑起细纤维状血丝所需要,时间即为凝血时间。,方法与步骤,血液实验医学知识培训,第25页,1.出血时间测定,2.凝血时间测定,结果,受试者姓名,出血时间,解释,受试者姓名,凝血时间,解释,血液实验医学知识培训,第26页,注意事项,1各种用具严格消毒。,2针刺手指或耳垂不宜过浅，深度23mm使血可自,然流出为宜。如针刺部位深度不够，流血量太少,不能用力挤压局部，应重新针刺。,3用滤纸吸血时，注意不要用滤纸触及皮肤伤口，,以免影响结果准确性。,4测定凝血时，应严格每隔半分钟用大头针挑血一,次，不可太频繁，同时每次挑动血液要按一定方,向和次序进行，以免破坏纤维蛋白网状结构而,造成不凝假象。,血液实验医学知识培训,第27页,试验三,ABO,血型判定,目标,学习ABO血型判定试验方法，加深对ABO血型划分了解。,原理,用已知血清凝集素(抗A凝集素、抗B凝集素)来确定未知红细胞膜上凝集原（A凝集原和B凝集原）种类，从而判定ABO血型。,血液实验医学知识培训,第28页,依据红细胞膜上是否有A或B抗原可分为四种血型：,A型、B型、AB型和O型。,ABO血型,血型（blood group）：,通常是指红细胞膜上特异性抗原类型。,血液实验医学知识培训,第29页,血型,红细胞膜上抗原,血清中抗体,A型血,A抗原,抗B,B型血,B抗原,抗A,AB型血,AB抗原,O型血,抗A和抗B,各种血型抗原和抗体分布情况,血液实验医学知识培训,第30页,血液实验医学知识培训,第31页,血型判定原理,含B抗原红细胞,+,抗B抗体,红细胞,凝集反应,抗B,血液实验医学知识培训,第32页,Rh血型临床意义,输血溶血,新生儿溶血,血液实验医学知识培训,第33页,输血标准,1、血型判定是安全输血前提.,2、输血前必须进行交叉配血试验,(cross-match test）,血液实验医学知识培训第34页,凝集,凝集,不凝集,不凝集,交叉配血试验,交叉配血主侧:供血者红细胞+受血者血清,交叉配血次侧:供血者血清+受血者红细胞,配血不合,不能输血,配血相合,能够输血,紧急情况少许迟缓输血,亲密,观察,如有输血反应,马上停,止,不凝集,血液实验医学知识培训,第35页,对象,人,药品,抗A抗体和抗B抗体，生理盐水,器材,采血针、凹玻片、75%酒精棉球,显微镜,血液实验医学知识培训,第36页,1取双凹片一块，用蜡笔在两端分别写上A、B字,样，在两侧凹内分别滴一滴抗A抗体和抗B抗体。,2用镊子夹取75%酒精棉球，消毒指端或耳垂及采,血针，用采血针采一滴血，用玻片一角刮取少,许血液在抗A抗体中摇匀，在再用玻片另一角刮,取少许在抗B抗体中摇匀。,3将玻片轻轻转动数次，使血液血清充分混合，,放置1015min后肉眼观察有没有凝集现象，若肉,眼不能判断是否凝集，应放在显微镜下观察，,判定结果。,方法与步骤,血液实验医学知识培训,第37页,血液实验医学知识培训,第38页,血液试验结果分析,血液实验医学知识培训,第39页,表7-2 内源性凝血与外源性凝血观察,1号试管,2号试管,3号,试管,富血小板血浆(ml),0.2,-,-,-,少血小板血浆(ml),-,0.2,0.2,生理盐水(ml),0.2,0.2,-,-,肺组织浸液(ml),-,-,-,-,0.2,CaCl,2,(ml),0.2,0.2,0.2,血液凝固时间(s),*比较血液凝固时间(1与2比，2与3比)，分析产生差异原因,血液实验医学知识培训,第40页,1号试管与2号试管凝血时间对比,现象：,（）,号试管快于,（）,号试管,原因：,结论：血小板（）血液凝固,血液实验医学知识培训,第41页,2号试管与3号试管凝血时间对比,现象：,（）,号试管快于,（）,号试管,原因：,结论：外源性凝血,（）,内源性凝血,血液实验医学知识培训,第42页,试验条件,加抗凝血,加CaCl,2,凝血时间,粗糙面,试管内加棉花,1ml,3滴,试管内涂石蜡油,1ml,3滴,温度,试管置37水浴,1ml,3滴,试管置冰浴,1ml,3滴,加肝素0.2ml1ml,3滴,加草酸钾0.2ml,1ml,3滴,对照管,1ml,3滴,表7-4 影响血凝理化原因,血液实验医学知识培训,第43页,1号试管与2号试管凝血时间对比,现象：,（）,号试管快于,（）,号试管,原因：,结论：接触面越（）血液凝固越（）,血液实验医学知识培训,第44页,3号试管与4号试管凝血时间对比,现象：,（）,号试管快于,（）,号试管,原因：,结论：,酶,（）温度，能（）血液凝固,血液实验医学知识培训,第45页,5号试管凝血时间,现象：,原因：,结论：肝素含有（）作用,血液实验医学知识培训,第46页,6号试管凝血时间,现象：,原因：,结论：草酸钾含有（）作用,示教,静止烧杯,：,搅拌烧杯,：,分析,血液实验医学知识培训,第47页,1.出血时间测定,2.凝血时间测定,结果,受试者姓名,出血时间,解释,XX,正常值 及意义,受试者姓名,凝血时间,解释,XX,正常值及意义,血液实验医学知识培训,第48页,ABO血型判定,结果,受试者姓名,血型,解释,XX,A,抗A抗体中发生凝集反应，说明受试者红细胞表面含有A抗原；,抗B抗体中未发生凝集反应，说明受试者红细胞表面没有B抗原；,故受试者为A型血,血液实验医学知识培训,第49页,