1、周测(十三) 选考内容测试 选修1 生物技术实践 1.(15分)(2016·全国乙)空气中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物,以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下: ①配置培养基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O); ②制作无菌平板; ③设置空白对照组和若干实验组,进行相关操作; ④将各组平板置于37 ℃恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。 回答下列问题: (1)该培养基中微生物所需的氮来源于__________。若要完成步骤②,该培养基中的成分X通常是__________。 (2)
2、步骤③中,实验组的操作是________________________________________________________________________。 (3)若在某次调查中,某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板,而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了__________现象。若将30(即36-6)个/平板作为本组菌落数的平均值,该做法__________(填“正确”或“不正确”)。 2.(15分)(2016·全国甲)苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的。回答下列问题: (1)酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产
3、的第一阶段,在酵母菌细胞的________中进行,其产物乙醇与________试剂反应呈现灰绿色,这一反应可用于乙醇的检验;过程③在酵母菌细胞的________中进行。与无氧条件相比,在有氧条件下,酵母菌的增殖速度________。 (2)第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程,根据醋酸杆菌的呼吸作用类型,该过程需要在________条件下才能完成。 (3)在生产过程中,第一阶段和第二阶段的发酵温度不同,第一阶段的温度________(填“低于”或“高于”)第二阶段的。 (4)醋酸杆菌属于________核生物,其细胞结构中________(填“含有”或“不含有
4、)线粒体。 3.(15分)(2016·全国丙)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题: (1)分离纯化乳酸菌时,首先需要用______对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释的理由是________________________________________________________________________。 (2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有__________和__________。分离纯化时应挑选出__________的菌落作为候选菌。 (
5、3)乳酸菌在-20 ℃长期保存时,菌液中常需要加入一定量的__________(填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”)。 4.(15分)(2017·江西赣州一模)某实验小组欲从豆油污染的土壤中筛选出能高效降解脂肪的菌株。请回答下列问题。 (1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于________培养基。 (2)为避免培养皿污染,需将培养皿呈________状态放置。为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行________处理,为了排除____________________________________________
6、 __________________,需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照。 (3)为了筛选出菌株,可将适量的________试剂滴加在平板中的菌落周围,洗去浮色后,如果菌落周围的现象是________________________________,则说明此种菌能够分泌脂肪酶。 (4)纯化菌种时,为了得到单菌落,可采用________法接种于新的培养基平板上。 5.(15分) (2017·河北邯郸一模)随着人们生活水平的日益提高,利用草莓酿制果酒,具有广阔的市场前景。据图回答问题。 (1)根据果酒的生产工艺流程,草
7、莓在压榨前需要除去果柄,此操作是在冲洗之________进行的。选用图示的装置制作果酒时,为适当提高果酒的生产速率,充气口应__________________;排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连,这样做的原因是________________________________________________________________________。 (2)评价草莓果酒制作是否成功,发酵后可用________溶液来鉴定。喝剩的草莓果酒开盖放置一段时间后会变酸,原因是__________________________________________________________
8、 ________。 (3)从微生物培养的角度分析,草莓果汁能够为酵母菌的生长提供水、无机盐、________、________四类营养物质。若是从混杂的微生物中分离酿制草莓果酒的菌种应使用________培养基。对该菌种的数目进行统计时常采用的方法是________________________和显微镜直接计数法。 6.(15分)(2017·广西南宁一模)薄荷叶富含维生素、蛋白质和薄荷油,具有疏散风热、清利咽喉、消炎镇痛的作用。请回答下列问题。 (1)植物芳香油的提取方法有蒸馏法、压榨法和________等。提取薄荷油可以用水蒸气蒸馏法,该方法能利用水蒸
9、气将________的薄荷油携带出来。 (2)在提取薄荷油的过程中,向得到的油水混合物加入NaCl后,薄荷油将分布于液体的__________(填“上层”或“下层”),然后用____________将这两层分开。分离得到的薄荷油油层中含有一定量的水分,可用______________吸水。 (3)可用植物组织培养的方法对薄荷进行扩大培养,在接种前工作台需用______________擦拭一遍。之后所有的接种操作都必须在________旁进行。培养基中的生长素用量与细胞分裂素用量的比值________(填“低”“高”或“相当”)时,有利于芽的分化。 选修3 现代生物科技专题 1.
10、15分) (2016·课标全国Ⅰ)某一质粒载体如图所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamHⅠ酶切后,与用BamHⅠ酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题: (1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有___________________________________
11、答出两点即可),而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。 (2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是________________________;并且__________和________________________________________________________________________ 的细胞也是不能区分的,其原因是______________________________。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组
12、质粒的大肠杆菌单菌落,还需使用含有__________的固体培养基。 (3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自__________。 2.(15分)(2016·课标全国Ⅲ)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三种限制性内切酶的识别序列与切割位点,图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的)。 根据基因工程的有关知识,回答下列问题: (1)经BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被________________酶切后的产物连接,理由是______________
13、 (2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子,如图(c)所示。这三种重组子中,不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有__________,不能表达的原因是________________________________________________________________________。 (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有__________和__________,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是________________。 3.(15分)(2016·课标全国Ⅱ)如图表示通过核移植
14、等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程。 回答下列问题: (1)图中A表示正常细胞核,染色体数为2n,则其性染色体的组成可为________。过程①表示去除细胞核,该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行,去核时常采用________的方法。②代表的过程是________。 (2)经过多次传代后,供体细胞中________的稳定性会降低。因此,选材时必须关注传代次数。 (3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从遗传物质的角度分析其原因是____________________________________。 (4)与克隆羊“多莉(利)”培育成功一样,其他克隆动物的
15、成功获得也证明了________________________。 4.(15分)(2017·河南一模)小鼠是转基因动物研究领域中最主要的模式动物,下图是制备转基因小鼠的两种方法,请回答下列有关问题。 (1)制备转基因小鼠的原理是______________,目的基因能在小鼠体内成功表达的原因是____________________,写出目的基因表达的过程: ________________________________________________________________________。 (2)对转基因动物来说,一般将DNA注入胚胎干细胞的原因是_________
16、 常用的方法是__________________。 (3)将囊胚移入代孕鼠体内属于____________________技术,此技术对代孕受体的要求是________________________________________________________________________。 (4)直接将目的基因注入受精卵,使外源基因整合到小鼠DNA中,是制备转基因小鼠的另一种技术,为得到较多的受精卵,需用______________处理供体雌鼠,为鉴定
17、外源基因是否成功表达,常用________技术进行检测。 5.(15分)(2017·山东淄博一模)利用生物工程技术,可从转基因奶山羊乳汁中分离获得人凝血因子Ⅳ,用于血友病的治疗。请回答下列问题。 (1)根据凝血因子Ⅳ基因上游和下游的碱基序列,可用________技术获取并扩增基因。构建该基因表达载体时,所用到的工具酶是________________________________________________________________________ ________,该基因表达载体中,凝血因子Ⅳ基因的上游和下游分别是______________________________
18、 (2)将目的基因表达载体导入奶山羊受精卵的常用方法是______________。受体细胞选用受精卵的优点是细胞大易操作、营养物质含量高和_________________________________。 (3)在体外胚胎培养时,应选用囊胚的________进行DNA分析,用于选择雌性胚胎。此期的胚胎也适于胚胎分割移植,此技术的优点是________________________________。 (4)人凝血因子Ⅳ是一种胞外酶,该蛋白的加工是在________________等细胞器上进行的。人凝血因子Ⅳ只在乳腺细胞合成的原因是_______________________
19、 6.(15分)(2017·江西赣中南联考)人们对生物工程技术发挥的作用褒贬不一,但生物工程确实已在为人们提供需要的生物新品种或新产品。请回答下列问题。 (1)转入人生长激素基因牛发生的可遗传变异是________,图中过程③用到的生物技术手段有____________________。如欲得到基因型相同的两头牛犊,可在囊胚阶段采用________技术达到此目的。 (2)为检测产下的转基因牛中生长激素基因是否转录出mRNA,首先要从转基因牛中提取mRNA,用____________作为探针,根据是否显示出________来判断。 (3)上图中目的基因的获取可通过逆转
20、录法人工合成,逆转录作用的模板是________,产物是______________;若要获取大量的目的基因,常采用____________技术。 (4)若要把上图过程⑤获得的抗虫棉进行脱毒处理,应选用抗虫棉的________处的组织进行培养,此方法的依据是______________________________________________________________________________。 周测(十三) 选考内容测试 选修1 生物技术实践 1.解析:解答本题的切入点是微生物的培养基的成分和制作及菌落的计数。(1)培养基中的牛肉膏、蛋白胨为微生物的生长既提供了
21、碳源也提供了氮源。微生物培养所采用的培养基是固体培养基,故题中X应是琼脂,在培养基中起凝固剂的作用。(2)本实验是为了了解教室不同高度空气中微生物的分布情况,所以应选择不同的高度放置平板,并使之暴露在空气中一段时间,以利于空气中微生物沉附在平板上。(3)空白对照实验的设计是不暴露在空气中,不应出现菌落。产生了菌落说明在此次实验中平板已被污染。用实验组获取的菌落的平均值减去污染产生的菌落数,作为实验的结果,这种做法不正确,应在防止污染的情况下重新实验,以获得较准确的数据。 答案:(1)牛肉膏、蛋白胨 琼脂 (2)将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上,开盖暴露一段时间 (3)污染 不正确
22、 2.解析:(1)图中过程①是有氧呼吸和无氧呼吸的第一阶段,②是无氧呼吸的第二阶段,过程③是有氧呼吸的第二、三阶段。酵母菌是兼性厌氧型微生物,有氧呼吸第一阶段和无氧呼吸均在细胞质基质内进行。利用乙醇在酸性条件下与重铬酸钾试剂反应呈现灰绿色来检验乙醇。有氧呼吸的第二、三阶段在酵母菌细胞的线粒体中进行。与无氧条件相比,在有氧条件下,酵母菌的增殖速度快。(2)醋酸杆菌是一种好氧细菌,只有当氧气充足时才能进行旺盛的生命活动,因此将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程,需要在有氧条件下才能完成。(3)酵母菌发酵温度一般控制在18~25 ℃,而制作葡萄醋时要将温度控制在30~35 ℃。(4)醋酸杆菌属于原
23、核生物,其细胞中只有核糖体一种细胞器,不含线粒体等其他细胞器。 答案:(1)细胞质基质 (酸性)重铬酸钾 线粒体 快 (2)有氧 (3)低于 (4)原 不含有 3.解析:(1)分离纯化乳酸菌时,首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释,原因是在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的乳酸菌被分散,培养后能在培养基表面形成单个的菌落。(2)在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有鉴别乳酸菌和中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸;乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙,故分离纯化时应挑选出具有透明圈的菌落作为候选菌。(3)乳酸菌在-20 ℃长期保存时,菌液中常需要加入一定量的甘油。 答案:(1)无菌水
24、泡菜滤液中菌的浓度高,直接培养很难分离得到单菌落 (2)鉴别乳酸菌 中和产生的乳酸(或酸) 具有透明圈 (3)甘油 4.解析:(1)欲筛选出能降解豆油的菌株,培养基中应只含有豆油而无其他碳源,不能降解豆油的细菌在此培养基上不能生存。从功能上讲,这类培养基属于选择培养基。(2)为避免培养皿污染,需将培养皿呈倒置状态放置。为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行梯度稀释处理。为了排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照。(3)由于脂肪遇苏丹Ⅳ试剂会出现红色,所以为了筛选出菌株,可将适量的苏丹Ⅳ试剂滴加在平板中的菌落周围,洗去浮色后,如果菌落周围的现象
25、是出现透明圈、不出现红色圈,则说明此种菌能够分泌脂肪酶。(4)分离纯化菌种时,需采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,使聚集在一起的细菌细胞分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落,以便纯化菌种。 答案:(1)豆油 选择 (2)倒置 梯度稀释 实验组中非测试因素对实验结果的影响(培养基被污染) (3)苏丹Ⅳ 出现透明圈、不出现红色圈 (4)平板划线 5.解析:(1)在制作草莓果酒的过程中,在压榨前去果柄的操作应在冲洗之后进行,否则容易造成污染。选用图示的装置制作果酒时,为适当提高果酒的生产速率,应先通入空气以利于酵母菌的大量繁殖,再密封让酵母菌进行无氧呼吸产生酒精,所以充气口
26、应先打开后关闭。排气口通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连,这样做的原因是既可以放气,又可防止污染。(2)橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色,据此评价草莓果酒制作是否成功,发酵后可用(酸性)重铬酸钾溶液来鉴定。喝剩的草莓果酒开盖放置一段时间后,因醋酸菌杆将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸,即醋酸菌发酵产生醋酸,导致果酒变酸。(3)草莓果汁能够为酵母菌的生长提供水、无机盐、碳源和氮源等必需的营养物质。从混杂的微生物中分离酿制草莓果酒的菌种应使用选择培养基。对菌种的数目进行统计,通常采用稀释涂布平板法和显微镜直接计数法。 答案:(1)后 先打开后关闭 可以防止污染 (2)(酸
27、性)重铬酸钾 醋酸菌发酵产生醋酸 (3)碳源 氮源 选择 稀释涂布平板法 6.解析:(1)植物芳香油的提取方法有蒸馏法、压榨法和萃取法等。薄荷油具有挥发性强的特点,可用水蒸气蒸馏法提取。(2)在提取薄荷油的过程中,向得到的油水混合物加入NaCl后薄荷油将分布在上层。可用分液漏斗将两层分开。无水Na2SO4可将油中的水除去。(3)接种前工作台需用体积分数为70%的酒精擦拭一遍,接种过程需要在酒精灯火焰旁操作。细胞分裂素含量高时有利于芽的分化,即生长素用量与细胞分裂素用量的比值低。 答案:(1)萃取法 挥发性较强 (2)上层 分液漏斗 无水Na2SO4 (3)体积分数为70%的酒精 酒精灯火焰
28、 低 选修3 现代生物科技专题 1.解析:(1)质粒作为载体应具备的基本条件有:能自我复制、具有标记基因、含有一至多个限制酶切割位点等。(2)由题意可知,未被转化的和仅含环状目的基因的细胞中均不含有氨苄青霉素抗性基因,所以在含有氨苄青霉素的培养基上均不能生长。质粒载体上含有氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因,插入了目的基因的重组质粒中仅含有氨苄青霉素抗性基因,所以含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞均能在含有氨苄青霉素的培养基上生长,但前者可以在含有四环素的培养基上生长而后者不能,所以可用含有四环素的培养基筛选出含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落。(3)噬菌体属于病毒
29、病毒增殖过程中所需的原料、酶等均来自于受体细胞。 答案:(1)能自我复制、具有标记基因 (2)二者均不含有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均不生长 含有质粒载体 含有插入了目的基因的重组质粒(或答含有重组质粒) 二者均含有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均能生长 四环素 (3)受体细胞 2.解析:(1)分析图(a)可知,限制酶Sau3AⅠ与BamHⅠ切割DNA后形成的黏性末端相同,故经这两种酶切割得到的产物可以用DNA连接酶进行连接。(2)构建基因表达载体时,为保证目的基因能在宿主细胞中成功表达,目的基因应插入在启动子和终止子之间,据此可判断甲、丙均不符合要求,目的基因均不能被转录。(3
30、)常见的DNA连接酶有E·coliDNA连接酶和T4 DNA连接酶,其中T4 DNA连接酶既能连接黏性末端又能连接平末端。 答案:(1)Sau3AⅠ 两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端 (2)甲和丙 甲中目的基因插入在启动子的上游,丙中目的基因插入在终止子的下游,二者的目的基因均不能被转录 (3)E·coliDNA连接酶 T4 DNA连接酶 T4 DNA连接酶 3.解析:(1)因供体的性别不确定,故其细胞核内的性染色体组成为XX或XY;一般将卵母细胞培养到MⅡ中期,用显微操作法将其细胞核去除;②代表的过程是胚胎移植。(2)传代培养10代以内的细胞可以保持正常的二倍体核型,超过10代以
31、后,供体细胞中遗传物质的稳定性会降低。(3)克隆动物细胞质中的遗传物质来自卵母细胞的细胞质,细胞质中的遗传物质对克隆动物的性状会产生影响。(4)克隆动物的成功可以证明动物已分化的体细胞的细胞核具有全能性。 答案:(1)XX或XY 显微操作 胚胎移植 (2)遗传物质 (3)卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响 (4)动物已分化体细胞的细胞核具有全能性 4.解析:(1)制备转基因小鼠属于基因工程,其原理是基因重组,由于所有生物共用一套遗传密码,故目的基因能在小鼠体内成功表达;目的基因表达的过程是经过转录和翻译形成相应的蛋白质。即目的基因RNA蛋白质。(2)由于胚胎干细胞具有发
32、育的全能性,故对转基因动物来说,一般将DNA注入胚胎干细胞,导入动物细胞常用的方法是显微注射法。(3)囊胚移入代孕鼠体内属于胚胎移植技术,对于受体和供体通常要用促性腺激素同时处理,使其同期发情,具有相同生理状态,便于移植成功。(4)为得到较多的受精卵,需用促性腺激素处理供体雌鼠,使其排出更多的卵细胞。为鉴定外源基因是否成功表达,即是否产生了相应的蛋白质,常用抗原—抗体杂交技术进行检测。 答案:(1)基因重组 所有生物共用一套遗传密码 目的基因RNA蛋白质 (2)胚胎干细胞具有发育的全能性 显微注射法 (3)胚胎移植 同种、生理状态相同的其他雌性动物 (4)促性腺激素 抗原—抗体杂交 5.解
33、析:(1)可利用PCR技术扩增目的基因;用同种限制酶将目的基因切割出来,将运载体切开,用DNA连接醇将目的基因与切开的运载体连接起来;凝血因子Ⅳ基因为目的基因,在基因表达载体中,启动子位于目的基因的首端,终止子位于目的基因的尾端。(2)显微注射技术是转基因动物中采用最多,也是最为有效的一种将目的基因导入动物受精卵的方法;受精卵细胞未分化,细胞全能性最高,且细胞大易操作、营养物质含量高。(3)从教材中牛胚胎性别鉴定和分割示意图可知取囊胚的滋养层细胞做DNA分析性别鉴定。胚胎分割有利于提高胚胎的利用率,胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。(4)分泌蛋白是在内质网、高尔基体等细胞器上加工的;
34、基因的选择性表述使人凝血因子Ⅳ只在乳腺细胞合成。 答案:(1)PCR 限制性内切酶和DNA连接酶 启动子和终止子 (2)显微注射法 细胞全能性高 (3)滋养层细胞 充分发挥雌性动物的生殖潜力(快速大量繁殖) (4)内质网、高尔基体 基因的选择性表达 6.解析:(1)将人的生长激素基因转入牛体内利用的是基因工程,原理是基因重组。将受精卵培养成转基因牛用到的技术有细胞培养、胚胎移植,要想得到基因型相同的个体,可在囊胚期采用胚胎分割技术。(2)判断基因是否转录,可根据DNA分子杂交原理,将获得的mRNA与标记的目的基因杂交,如果出现杂交带,则说明转录成功。(3)逆转录时,以mRNA为模板,脱氧核糖核苷酸为原料合成DNA。要想在短时间内产生大量DNA,采用PCR技术。(4)植物根尖或茎尖细胞没有病毒或病毒极少,通过培养可获得脱毒植物。 答案:(1)基因重组 早期胚胎培养(或动物细胞培养)、胚胎移植 胚胎分割 (2)标记的目的基因 杂交带 (3)mRNA(信使RNA) cDNA(或DNA) PCR(聚合酶链式反应) (4)根尖或茎尖(分生组织) 植物细胞的全能性、分生组织不带病毒






