紫贻贝外套膜、鳃、肝胰腺组织学研究.pdf

科研园地栏目编辑魏友海紫贻贝外套膜、鳃、肝胰腺组织学研究韩国威，陈丽梅，郭永军，孙敬锋（天津农学院水产学院，天津市水产生态及养殖重点实验室，天津30 0 38 4)B紫贻贝属软体动物门、双壳纲、贻贝目、贻贝科、贻贝属，资源丰富、肉质细腻、味道鲜美，具有高营养价值，素有“海洋鸡蛋”之称。紫贻贝提取物具有增加机体免疫力、降血脂、抗衰老以及抗菌等诸多功能。目前，紫贻贝已成为我国沿海地区重要的养殖经济贝类。外套膜是贝类的重要器官，主要功能是包裹和保护内部器官，同时还具有辅助呼吸、摄食以及贝壳形成等功能。鳃是双壳贝类的呼吸和摄食器官，通过鳃表面纤毛的摆动，使水流动，进而利用呼吸上皮进行气体交换，同时食物也被带到口处。此外，鳃在贝类的免疫防御过程中也起着重要作用。肝胰腺是软体动物主要的代谢调节中心，参与免疫防御、内部介质的平衡调节、排毒等活动。紫贻贝的研究多聚焦于其提取物和环境污染等方面，对其外套膜、鳃及肝胰腺组织学研究的报道较少。本研究通过制备紫贻贝的外套膜、鳃和肝胰腺的石蜡切片，观察组织形态结构，以期更好地了解紫贻贝的生理生态特征，为紫贻贝的养殖以及病理学研究提供基础资料。一、材料与方法1试验材料试验用紫贻贝购自天津市红旗海产批发市场，运回实验室后暂养于恒温水箱中。选取1 0 只个体健康、活力良好的紫贻贝作为试验对象。2.试验方法将新鲜的紫贻贝除去污泥后，再用自来水冲洗干净。取紫贻贝的外套膜、鳃和肝胰脏，洗净后放入0.9%生理盐水中，将3种组织剪成大小约为5毫米5毫米2 毫米的小块，随后放入Bouin氏液中进行固定。根据组织块的大小，固定1 8 2 4小时，再移至7 0%酒精中保存备用。经流水洗涤组织块后，将其放入脱水剂(叔丁醇)中逐级脱水，透明处理，常规石蜡包埋，切片基金项目：现代农业产业技术体系专项（CARS-49)；天津市现代农业产业技术体系创新团队建设项目（ITTMRS2021007)通信作者：孙敬锋2023.6厚度6 8 微米，苏木精一伊红染色，封片，显微镜下观察。二、结果1.外套膜结构特征紫贻贝的外套膜呈黄色，紧贴壳内表面，根据膜分布部位不同，分为中央膜和边缘膜。中央膜较薄，边缘膜则较厚，含有3个突起，分别为生壳突起、感觉突起和缘膜突起。从组织结构特点来看，外套膜主要结构为内外上皮层、结缔组织和肌纤维（图1 A)。边缘膜外皮层主要由柱状纤毛细胞组成，紧密排列，表面覆盖有较厚的黏液层（图1 B)。在上皮细胞间分布有大量黏液细胞，胞质嗜碱性，染为深蓝色，部分黏液细胞下沉至结缔组织中（图1C)。内皮层主要由矮柱状细胞组成，低于外表皮细胞，且相对松散，表面同样有一层黏液，但较薄。上皮层内部则为泡状结缔组织以及少量的肌纤维分布其中。在结缔组织中有许多血腔以及血淋巴细胞，在生壳突起外皮层一侧的结缔组织中还观察到色素细胞，形状不规则，细胞内含有很多嗜酸性颗粒，染色较深（图1 D）。图1 紫贻贝外套膜显微结构2.鳃结构特征紫贻贝的鳃位于外套腔两侧，中间被内脏团和斧足隔开，其基部连接在外套膜上，每侧鳃由内外两个鳃瓣组成。每个鳃瓣又由上下行鳃小瓣组成，下行鳃小瓣与外套膜连科学养鱼科研园地栏目编辑魏友海接，上行鳃小瓣背侧缘游离，上下行鳃小瓣交界处向内凹陷形成食物沟。上下行鳃小瓣之间通过瓣间连接相连，鳃小瓣与瓣间连接围成的空间，即为鳃腔。每个鳃小瓣由许多排列紧密的鳃丝组成（图2A)，所有鳃丝结构相同，外侧宽，中间以及内侧窄（图2 B)。鳃丝外侧为纤毛柱状细胞，该区域有3种柱状上皮细胞：前纤毛柱状细胞，位于顶端，纤毛较短；前侧纤毛柱状细胞，位于顶端两侧，纤毛较长；侧纤毛柱状细胞，纤毛长。中间部分为单层扁平细胞，无纤毛（图2 C）。内侧也是纤毛柱状细胞，该区域为后纤毛区，纤毛较短。鳃丝中间区域上皮细胞内部为一较长血腔，内含血细胞（图2 D）。鳃丝与鳃丝之间通过纤毛簇交错在一起形成非实质组织的丝间联结。图2 紫贻贝鳃显微结构3.肝胰腺结构特征肝胰腺又称消化腺、消化盲囊，紫贝的肝胰腺为复管状腺，由许多具分支的腺管组成。腺管与腺管之间分布着少量的结缔组织以及血管，腺管无明显隐窝（图3A）。消化细胞和嗜碱性细胞组成腺管上皮，消化细胞体积均比较大，多呈柱状，细胞核位于基部，淡染囊泡或红染颗粒分布于细胞质中。嗜碱性细胞分布于消化细胞之间，体积较小，高度明显小于消化细胞，核多位于细胞中央（图3B)。导管上皮则为单层柱状上皮细胞，几乎没有黏液细胞。图3紫贻贝肝胰腺显微结构三、讨论1.外套膜外套膜的开放和关闭可以调节水流，且外套膜上的褶皱可以拦截大的悬浮颗粒并通过纤毛的摆动将之送出体外，小的颗粒则可被水流带走，再经过鳃的过滤。因此，外套膜是贝类重要的辅助呼吸以及摄食的器官。与很多双壳贝类相同，紫贻贝的外套膜也分为中央膜和边缘膜，边缘膜具有3个突起（生壳突起、感觉突起、缘膜突起）。紫贻贝的边缘膜上皮层为纤毛柱状细胞或矮柱状细胞，上皮层和结缔组织中分布有一定量的黏液细胞，这与已报道的栉孔扇贝（张晓彦，2 0 0 6)、文蛤（任素莲等，2 0 0 3)、紫彩血蛤（孙虎山，1 9 9 9)等相同。2.鳃水流中的颗粒物经由外套膜的初滤后，再通过鳃丝和着生其上的三种纤毛组合运动来过滤食物颗粒，从而进行有效进食。因此，鳃既是双壳贝类的呼吸器官也是滤食器官，而各种双壳贝类生活习性不同，其鳃的形态结构也有很大的差异。合浦珠母贝（陈飞飞等，2 0 1 2)和缢蛏B（崔龙波，2 0 0 6)的鳃属于异丝鳃型，鳃瓣有主鳃丝和普通鳃丝之分，且鳃丝与鳃丝之间形成实质组织来联系。而紫贻贝的鳃虽然也属丝鳃型，但所有鳃丝的结构都一致，鳃丝与鳃丝之间通过纤毛簇交错在一起形成非实质组织的“丝间联结”。CD3.肝胰腺肝胰腺是紫贻贝主要的消化场所，也是主要的代谢中心，在免疫防御以及排毒等方面发挥着关键作用。不同于文蛤（应雪萍，2001)和缢蛏（许星鸿等，2 0 0 1)在腺管上皮中发现4种细胞（胚细胞、纤维细胞、消化细胞、分泌细胞），在紫贻贝腺管上皮中仅观察到消化细胞和嗜碱性细胞。与栉孔扇贝（张晓彦，2 0 0 6)一样，紫贻贝的腺管不形成明显的隐窝，而嗜碱性细胞分布于消化细胞之间。总之，紫贻贝外套膜具双壳贝类典型特征，中央膜较薄，边缘膜较厚，具3个突起；边缘膜外皮层主要由柱状纤毛细胞组成，内皮层则为矮柱状细胞，在上皮与结缔组织中均存在黏液细胞。紫贻贝的鳃为丝鳃型，位于外套腔两侧，上下行鳃小瓣由结构一致的鳃丝组成，柱状细胞和扁平细胞组成鳃丝上皮，鳃丝与鳃丝之间存在“丝间联结”。紫贻贝的肝胰腺为复管状腺，由许多具分支的腺管组成，消化细胞和嗜碱性细胞组成腺管上皮，导管上皮则由柱状上皮细胞组成。80科学养魚2023.6