自体富血小板血浆治疗雄激素性脱发的临床疗效：基于7例随机双盲、自身半头配对、安慰剂对照试验.pdf

D0I:10.39698468.2023.03.006临床研究论著2192023年6 月第30 卷第3期皮肤性病诊疗学杂志自体富血小板血浆治疗雄激素性脱发的临床疗效：基于7 例随机双盲、自身半头配对、安慰剂对照试验张杰，赖维，陈海燕，月周峰，郑跃中山大学附属第三医院，广东广州510630摘要目的评估自体富血小板血浆(PRP)治疗雄激素性脱发（AGA)的有效性和安全性,测定PRP中生长因子浓度并初步探究其与疗效的相关性。方法纳人中山大学附属第三医院就诊的AGA受试者7 例。抽取外周静脉血，使用regenlab自动化套装单次离心法制备PRP,随机分配受试者一侧秃发区域注射PRP,对侧注射生理盐水，共治疗3次，每次间隔1周，在治疗后1、2、3个月随访，进行大体照片及毛发皮肤镜图像采集并软件分析毛发变化，受试者自评以及医师临床评估。采用ELISA测定PRP与外周血中血小板衍生生长因子、转化生长因子-和血管内皮生长因子的浓度，计算3种生长因子的富集系数,统计分析PRP中血小板与生长因子浓度的相关性，并比较治疗后有效和无效患者中生长因子浓度是否存在差异。结果治疗结束后,PRP侧毛发密度较治疗前和对照侧增加（P0.05），毛发/毛囊比值较对照侧增加（P0.05），毛发生长期/休止期比例较治疗前升高（P0.05）；医师评估与患者自评PRP侧治疗有效率均为42.8 6%。活化后PRP中PDCF、T CF-和VEGF平均浓度分别为36.73、11.30 和2.9 7 ng/mL，与外周血中3种生长因子比较，富集系数分别为2.14、1.9 0 和2.30 倍。PRP中血小板计数与VEGF、T G F-浓度无明显相关性,PRP中血小板富集系数和PDGF、VECF富集系数存在线性正相关（P0.05）。治疗有效组PRP中的TCF-和VEGF浓度高于治疗无效组（均P0.05）。结论PRP可促进毛发增多，提高生长期毛发比例,安全性较高；治疗效果与PRP中含的TGF-和VEGF浓度、个体单位血小板释放生长因子能力相关。关键词雄激素性脱发；富富血小板血浆；生长因子Efficiency of autologous platelet-rich plasma for androgenic alopecia:a preliminary studyZHANG Jie,LAI Wei,CHEN Haiyan,ZHOU Feng,ZHENG YueThird Affiliated Hospital,Sun Yat-sen University,Guangzhou 510630,ChinaCorresponding author:ZHENG Yue,E-mail:benbenzhu-11 AbstractObjectivee To evaluate the efficacy and safety of autologous platelet-rich plasma(PRP)in the treatment of androgenetic alopecia and to investigate the correlation between concen-trations of growth factors and efficacy.Methods Seven male patients with AGA were included inthis prospective study.In each subject,one side of the alopecia area was randomly injected withPRP while the opposite side was injected with saline once every other week for 3 times,followedby follow-up at 1,2,and 3 months.Clinical pictures and dermoscopy images were taken for as-sessment of efficacy by patients and doctors.ELISA was used to measure the levels of PDGF,TGF-and VEGF in PRP and peripheral blood.Relationship between efficacy and concentrationof growth factors was also determined.ResultsAfter the treatment,both hair density hair/follicle通信作者：郑跃，主任医师，博士生导师，E-mail：b e n b e n z h u-11 16 3.c o m基金项目：广东省自然科学基金（2 0 2 2 A1515012253）；广州市科技基础研究计划（SL2023A04J01600,SL2022A04J01597）220JDiagnTherDermato-enereol,Jun.2023.Vol.30,No.3ratio were increased on the PRP side compared with the placebo side(P0.05).Anagen/telogenratio on the PRP side was higher than that at baseline(P0.05).The effective rate was 42.86%on the PRP side as assessed by the physician and the patients.The mean concentrations of PDGF,TGF-and VECF in PRP after activation were 36.73 ng/mL,11.30 ng/mL and 2.97 ng/mL,respectively,which enrichment coefficients were 2.14,1.9 and 2.3 times of that in peripheralblood,respectively.Platelet count in PRP was not significantly correlated with VEGF and TGF-concentrations.But platelet enrichment coefficient was positively and linearly correlated withPDGF and VEGF enrichment coefficients in PRP(P O.05).Concentrations of TGF-andVEGF in PRP were higher in the effective than in the ineffective group(P 0.05).ConclusionsPRP can promote hair growth and increase the proportion of hair in the anagen phase.The effi-cacy of PRP is correlated with the concentrations of growth factors(TGF-,VECF)and the abili-ty of platelets to release growth factors.Keywordsandrogenetic alopecia;platelet-rich plasma;growth factor雄激素性脱发（androgenetic alopecia，A G A）作为最常见的脱发类型，发病率逐渐上升并呈年轻化趋势，现有的治疗方法不能满足不同性别、不同年龄层和不同严重程度患者的治疗需求，因此探索有效、安全、简便的新方法十分必要研究表明，生长因子对促进组织修复、血管新生，改善毛囊微环境及调控毛囊发育及生长周期有巨大作用2 ,多种生长因子联合具有协调促进作用3。富血小板血浆（platelet rich plasma，PRP)是自体血通过离心获得的富含高浓度血小板的血液成分，活化后的PRP含有多种较高浓度的生长因子，主要包括血小板衍生生长因子（p l a t e l e t-d e r i v e d g r o w t h f a c t o r,PD G F）、转化生长因子-（t r a n s f o r mi n g g r o w t h f a c t o r-,TGF-）、表皮生长因子（epidermalgrowth factor,EGF）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和成纤维细胞生长因子（fibroblastgrowthfactor,FGF）等，具有促进组织修复和再生的作用4-6 ,已逐渐成为脱发治疗的新热点。虽然目前已有一些临床研究报道PRP用于治疗AGA7-9,但普遍证据等级不高，部分缺乏严谨的实验设计，评估疗效基于主观判断，疗效存在争议；并且大部分资料缺少治疗及PRP相关参数，极少研究测定PRP中生长因素浓度并分析疗效和生长因子浓度的相关性。PRP作为AGA的潜在治疗手段，仍需要更多高质量的临床研究证实。因此，本研究采用随机双盲、自身配对、安慰剂对照试验验证PRP治疗AGA的有效性和安全性，测定PRP中血小板以及PDGF、T G F-和VEGF的浓度和富集系数,分析PRP中血小板与生长因子之间是否存在线性相关，并初步探究PRP中生长因子水平与疗效的相关性。1对象与方法1.1研究对象纳人2 0 16 年1一5月在中山大学附属第三医院诊断为AGA的受试者8 例,纳人标准：符合AGA诊断标准10-11;脱发严重程度符合 Ham-ilton-Norwood分级IVI级12 ;年龄18 55岁；血小板计数超过150 10/L。排除标准：有弥漫性脱发、斑秃、头皮肿瘤和累及头皮的皮肤病（如脂溢性皮炎、银屑病、梅毒、系统性红斑狼疮等)；存在药物因素、理化因素、外伤及其他系统性疾病（如化疗、激素治疗等)影响头发生长;有血液系统疾病;有其他系统性疾病如内分泌疾病、肝肾功能不全等；近6 个月内使用脱发治疗药物；需长期服用抗凝、抗血小板聚集药物以及非留体抗炎药者；瘢痕体质。所有受试者均签署知情同意书。本研究经中山大学附属第三医院医学伦理学委员会批准（中大附三医伦20162-100号试验共纳人8 例受试者，1例因不能完成治疗退出，最终纳人7 例，均为男性，年龄2 554岁，平均（38.7 110.8 1）岁；病程4 14年，平均（9.143.51）年；发病年龄19 40 岁，平均(29.578.54）岁；脱发分级为Ia-VI 级。2212023年6 月皮肤性病诊疗学杂志第30 卷第3期1.2方法1.2.1PRP制备及活化治疗前制备PRP：采用RengenACR-CClassic无菌制备套装（瑞士Regen-lab），消毒后用套装内采血管自动收集8 mL肘前静脉血，轻柔颠倒以使血液与抗凝剂混匀。将PRP真空采血管放人离心机，150 0 g离心10min。离心后,PRP采血管内血液以分离凝胶为界分成3层，下层为分离凝胶下方的红细胞层，分离凝胶表面为细胞沉积层，主要含血小板和白细胞，上层为含有极少量血小板的血浆,即贫血小板血浆。保持PRP采血管垂直放置，收集上层约1/2上清血浆并弃去，将剩余的血浆与细胞沉积层混匀，即得到PRP,约1.9 mL/管。活化：将PRP与10%氯化钙溶液按9：1（体积比）混匀。1.2.2治疗方案研究采取随机双盲、自身半头配对、安慰剂对照试验。患者根据随机数字表法选择治疗侧，使用相同注射设备，注射在头顶进行,因此，患者无法看到注射过程。以过鼻梁的矢状面将受试者脱发区域分成左右对称两侧，随机选择一侧作为PRP侧，用2 7 G微针将制备好的PRP均匀皮下注射16 次，共计2 mL，间隔1cm，深度4mm,范围覆盖约4cm4cm正方形,前额秃发区域适当调整范围；对照侧多点注射生理盐水。为保持治疗及评估区域的一致性，使用染料定位标记（试验结束后激光去除标记），每次治疗前用利多卡因软膏进行麻醉并用型安尔碘消毒。受试者共治疗3次，间隔1周,并在治疗结束后第1、2、3个月进行随访。1.2.3，血小板计数和生长因子浓度测定治疗前从受试者PRP和外周静脉血样本中分别抽取100L样本，用全自动血液分析仪XS-800i（日本Sysmex)进行血小板计数,并计算血小板回收率及富集系数。血小板回收率=富血小板血浆中血小板总数/外周血中血小板总数10 0%；富集系数=富血小板血浆中血小板浓度/外周血中血小板浓度。采用ELISA法检测受试者的活化2 4h后外周静脉血和PRP中3种生长因子PDCF、T CF-和VEGF的浓度，并计算生长因子富集系数。富集系数=富血小板血浆中生长因子浓度/外周血中生长因子浓度。1.2.4临床疗效和安全性评估治疗后 1、2、3个月进行随访，进行疗效评估：使用创弘皮肤毛发镜系统30 倍率采集毛发图像，采用Image-ProPlus7.0图像分析软件（美国MediaCybernetics）和人工校正，测量毛发密度（根/cm）；治疗前和治疗后3个月，进行毛发显微镜检，即在两侧治疗区域内，分别随机拔取约15根毛发，在毛发显微镜下观察毛发所处生长周期，记录并计算生长期/休止期比例；每次随访使用VISIA皮肤检测仪（美国Canfield）采集毛发大体照片，2 位皮肤科医师评估毛发改善情况。评估人员不参与试验设计和实施，患者信息及治疗信息对评估人员实施盲法；受试者自我评估。临床疗效评估采用7级评分法：-3=明显减少，-2=中度减少，-1=轻度减少,0=无变化，+1=轻度改善，+2=中度改善，+3=明显改善；有效为疗效评分1分，有效率（%）=有效例数/总例数10 0%。安全性评估：在治疗及随访期间，监测不良反应。1.3统计学处理采用SPSS22.0进行统计分析。使用Shapiro检验评估正态性，毛发密度采用均数土标准差、毛发/毛囊比值和生长期/休止期比值采用中位数（四分位数间距）进行统计学描述。毛发密度的组内前后比较和组间差异性比较、外周血与PRP中血小板浓度差异性比较采用t检验；毛发/毛囊比值和生长期/休止期比值的组间差异性比较采用Wilcoxon秩和检验；生长因子浓度、外周血与PRP中血小板以及生长因子富集系数、生长因子浓度的组间差异性比较采用非参数检验。血小板与生长因子浓度相关性采用pearson相关性分析，两者富集系数相关性采用spearman相关性分析。有效率比较采用Fisher精确概率法。采用多因素重复测量方差分析比较时间因素主效应及时间因素与干预因素交互效应对毛发生长的作用。P0.05为差异具有统计学意义。2结果2.1临床疗效2.1.1毛发密度对照侧治疗后较治疗前毛发密度稍减少，治疗后随时间推移密度无明显变化。PRP侧治疗后较治疗前毛发密度增加,且治疗后ZPRP侧对照侧区域222J DiagnTher Dermato-VVenereol,Jun.2023.Vol.30,No.3随时间推移继续增加，时间与治疗区域之间存在交互效应（F=10.78,P0.001,图1)。140.00-对照组-PRP组135.00130.00125.00-120.00115.000123治疗前后各时间点（月）图1毛发密度时间、治疗效应交互图Figure 1Interaction diagram of time andefficacy for hair density.比较PRP侧与对照侧在治疗前后各时间点的毛发密度：治疗前，两侧初始毛发密度差异无统计学意义（P=0.838）；治疗后1、2、3个月,PRP侧毛发密度较同时期对照侧均明显增加，差异均有统计学意义（均P0.05)。2.1.22毛发/毛囊比值治疗前、治疗后1个月，PRP侧与对照侧毛发/毛囊比值差异均无统计学意义（均P0.05）。治疗2、3个月后,PRP侧毛发/毛囊比值均较同时期对照侧增加，差异有统计学意义(均P0.05,表2)。表1治疗前后各时间点PRP侧与对照侧毛发密度(mean SD)Table 1Hair density on PRP-treated side vs.control side before and after the treatment(mean SD)区域治疗前治疗1个月后治疗2 个月后治疗3个月后对照侧（根/cm)122.11 13.54117.14 12.03116.73 12.01116.90 11.23PRP侧(根/cm)122.03 13.80126.90 18.51132.73 18.82135.92 18.42P0.8380.0320.0010.002表2治疗前后毛发/毛囊比值Pso(IQR)Table2Hair/follicle ratio before and after the treatmentPso(IQR)治疗前治疗1个月后治疗2 个月后治疗3个月后1.26(0.22)1.20(0.21)1.22(0.11)1.24(0.19)1.27(0.23)1.26(0.32)1.32(0.28)1.30(0.32)-0.45-1.15-2.21-2.200.6550.2490.0270.0282.1.3生长期/休止期比值治疗后3个月，PRP侧毛发生长期/休止期为2.50（7.33），生长期毛发比例较治疗前1.33（5.0）增加（P=0.046,Z=1.9 9）；对照侧毛发生长期/休止期2.0（2.50），与治疗前1.2 5（5.6 0）比较，无明显差异(P=0.60,Z=-0.52)。2.1.4医师评估和患者自评医师评估：3例受试者治疗后PRP侧毛发情况改善（图3），2 位患者脱发分级为I a,1例为V；所有受试者对照侧无明显变化;PRP侧和对照侧治疗有效率分别为42.86%和0，但差异无统计学意义（P=0.051）。患者自评和医师评估结果一致（表3）。2.2安安全性评估观察到的主要不良反应包括：出血（10 0%）、局部灼热刺激感（7 1.43%）、注射后疼痛（57.14%）、暂时性红斑（14.2 8%）。局部灼热刺激感约8 12 h缓解；注射后疼痛12 h内缓解，最长不超过36 h；暂时性红斑48 h内消退。均未予特殊处理。所有患者均未发生瘙痒、血肿、2232023年6 月第30 卷第3期皮肤性病诊疗学杂志感染等其他不良反应。表3临床疗效评估(例）Table3Assessmentoftheefficacy(case)项目+3分+2分+1分0分-1分-2分-3分有效率(%)医师评估对照侧(例)00070000PRP侧(例)012400042.86患者自评对照侧（例）00070000PRP 侧(例)003400042.86治疗前治疗后毛发大体皮肤镜图图3PRP侧治疗前后毛发大体及皮肤镜图片（红框为PRP注射区域，黑框为生理盐水注射区域）Figure3Comparison of hair growth before and after the treatment(Black box indicates the vehicle-treated area while thered box is the PRP-treated area).2.3PRP相关检测及分析2.3.1PRP中血小板计数、回收率和富集系数外周血和PRP中平均血小板浓度分别为(2 6 8.30 21.30）10%/mL 和(9 58.6 0 10 6.9 0）10%/mL,PRP中血小板回收率为8 4%，血小板富集系数为3.510.43,差异有统计学意义（P0.05）。2.3.2PRP中PDGF、T G F-和VEGF浓度和富集系数外周血和PRP中PDCF、T CF-和VEGF浓度和富集系数见表4。与外周血相比,PRP中PDGF、T G F-和VEGF的浓度均明显升高，差异均有统计学意义(P0.05。各受试者PRP中每百万血小板中PDGF、TCF-和VECF平均含量分别为39.0 0 8.10、12.201.50、3.10 0.9 0 p g，但存在明显个体差异,PDCF、T CF-和VEGF的含量范围分别为30.93 52.96 pg、10.6 4 12.6 8 p g 和 1.6 9 4.2 9 pg。JDiagnTherDermatoJun.2023.Vol.30,No.3lereol224表4外周血与PRP中生长因子浓度和富集系数(mean SD)Table 4 Concentration and enrichment coefficient of growthfactors in PRP and the peripheral blood(mean SD)外周血PRP富集系数生长因子P(ng/mL)(ng/mL)(ng/mL)PDCF17.00 4.7736.73 11.592.14 0.120.018TCF-6.00 1.1311.30 1.731.90 0.230.018VECF1.26 0.372.97 1.132.30 0.290.0162.3.3PRP中生长因子与血小板相关性分析PRP中PDGF浓度与血小板数量有明显线性相关性(r=0.93,P=0.003),而 TGF-(r=0.75,P=0.052)和VECF(r=0.71,P=0.071)的浓度与血小板数量无明显相关性。PDCF（r=0.7 8,P=0.041)和VECF（r=0.9 3,P=0.0 0 3）富集系数与血小板富集系数有明显线性相关性,而TGF-与血小板富集系数无明显相关性（r=0.57,P=0.180)2.4临床疗效与PRP相关性分析PRP治疗后,经医师评估有3例受试者有效，其余4例无明显变化，患者自评与医师评估结果一致。比较治疗有效组与无效组患者的PRP,其中血小板浓度（P=0.500）、PD G F浓度（P=0.077）差异无统计学意义；有效组TGF-和VEGF浓度高于无效组，差异有统计学意义(PrCF-=0.034,PvECF=0.034)。比较有效组与无效组受试者PRP中血小板及PDGF富集系数，差异均无统计学意义（P血小板0.124,PvecF=0.325,PrCF-=0.085,PvecF=0.064)。3讨论AGA是临床最常见的一种脱发疾病,其特征是雄激素相关的渐进性毛囊微型化。目前AGA的药物治疗主要包括口服非那雄胺和外用米诺地尔，选择较少且存在疗效欠佳、起效慢、需长期使用以及不良反应等限制，毛发移植术过程痛苦、有创，费用高昂，也限制了受试者的选择1,13早期PRP治疗脱发的相关文献集中在病例报告，近期一些人体对照试验已有报道，大部分结论倾向有效14-17 ,但尚有争议(18-2 1。本研究采L14-17用随机、自身半头配对、安慰剂对照试验，并通过定位标记确保脱发区域的参数重复测定的位置一致性。随访结束时，数据显示PRP治疗区域的毛发密度增加、生长期毛发比例提高，皮肤镜观察到毛发数量增多、直径增加的改变，但这些积极的改变并没有达到头发视觉效果的理想改善。有学者质疑PRP治疗脱发，认为其改善虽然是有希望的，但差异的大小表明其潜在益处可能没有临床意义2 。这也许提示现有的PRP治疗暂时无法作为单一治疗手段，更适合联合治疗。另外回顾已有的研究,虽然报道的治疗方案治疗间隔、注射次数差异较大，但最长的注射治疗周期不超过12周，考虑毛发生长规律，延长PRP治疗的持续时间是否可强化头发宏观改善的效果值得探究。在安全性方面，多次的PRP注射治疗未观察到明显的副作用，部分患者出现的疼痛不适感及头皮反应程度轻微且具有短期自限性，与多数研究一致。本研究根据疗效评分将受试者分为有效组与无效组,进一步分析发现,相较于无效组,有效组中TGF-和VECF浓度更高，差异有统计学意义，提示更高浓度的生长因子可能对毛发生长益处更大。但在临床治疗中测定生长因子浓度难以实现,PRP的常见评价指标主要是血小板计数和富集系数。目前PRP中生长因子浓度与血小板数量的相关性尚不明确，相关报道争议较大，许多因素可能影响PRP中血小板与生长因子浓度之间的关系23-241。有研究报道生长因子PDCF、EGF、T G F-和VECF浓度与血小板数量存在线性相关2 5-2 7 ,亦有研究表明生长因子PDCF、ECF、T G F-和VECF与血小板数量均无相关性 2 3,2 8-30 。本研究结果显示,PRP中仅PDGF浓度与血小板数量有线性相关性，而TCF-和VEGF的浓度与血小板数量无明显相关性。另外,本研究观察到不同受试者PRP中三种生长因子浓度存在差异，而生长因子的浓度变化更能反映受试者PRP质量的实际差异。不同患者相同制备方法获得的PRP的生长因子浓度不一定有可比性，也许能解释个体之间明显的疗效差异。PRP治疗AGA的可能机制目前尚未完全清楚。多项研究证实,PRP中含有的PDGF、EG F、VECF和FCF对毛发生长有促进作用31-3;siah等34 研究发现PRP中的VECF和胶质细胞源性神经营养因子（GDNF)浓度与毛发生长有正相关2252023年6 月第30 卷第3期皮肤性病诊疗学杂志性;Rodrigues 等35 研究发现,PDGF、EG F、VEG F浓度与PRP改善脱发的疗效之间缺乏相关性；Lieberman等36 研究发现，低浓度的PRP对骨细胞增殖有刺激作用,PRP中生长因子浓度过高则有抑制作用。TGF-被认为是毛发生长的抑制因子,双氢睾酮可刺激毛乳头细胞合成TCF-,抑制角质形成细胞增殖，诱导细胞调亡和毛发提早进人退行期37-38 ,推测可能存在生长因子的最佳效果窗口浓度，疗效可能基于生长因子促进毛发生长的正负调节作用的净效应。本研究样本量小、治疗疗程较短，有明显的局限性，尽管如此，本项安慰剂对照临床试验表明，PRP治疗AGA具有潜在益处,疗效可能与PRP中含的TGF-和VEGF浓度、个体单位血小板释放生长因子能力相关。通过更大规模队列研究，探索确定最重要的生长因子及其最佳疗效浓度，治疗间隔时间及疗程的方案优化是下一步研究的重要方向。参考文献1YORKK,MEAHN,BHOYRULB,et al.A reviewofthe treatment of male pattern hair loss J.Expert OpinPharmacother,2020,21(5):603-612.2GENTILE P,GARCOVICH S.Advances in regenerativestem cell therapy in androgenic alopecia and hair loss:wntpathway,growth-factor,and mesenchymal stem cell sig-naling impact analysis on cell growth and hair follicle de-velopmentJ.Cells,2019,8(5):466.3KISO M,HAMAZAKI T S,ITOH M,et al.Synergisticeffect of PDGF and FGF2 for cell proliferation and hairinductive activity in murine vibrissal dermal papilla invitroJ.J Dermatol Sci,2015,79(2):110-118.4KUSHIDA S,KAKUDO N,MORIMOTO N,et al.Plate-let and growth factor concentrations in activated platelet-rich plasma:a comparison of seven commercial separationsystemsJ.J Artif Organs,2014,17(2):186-192.5TEY R V,HALDANKAR P,JOSHI V R,et al.Varia-bility in platelet-rich plasma preparations used in regener-ative medicine:a comparative analysis J.Stem CellsInt,2022:3852898.6EMER J.Platelet-rich plasma(PRP):current applica-tions in dermatologyJ.Skin Therapy Lett,2019,24(5):1-6.7EVANSAG,MWANGIJM,POPERW,etal.Plate-let-rich plasma as a therapy for androgenic alopecia:asystematic review and Meta-analysis J.J DermatologTreat,2022,33(1):498-511.8DERVISHI G,LIU H,PETERNEL S,et al.Autologousplatelet-rich plasma therapy for pattern hair loss:a sys-tematic reviewJ.J Cosmet Dermatol,2020,19(4):827 835.9BADRAN K W,SAND J P.Platelet-rich plasma for hairloss:review of methods and results J.Facial Plast SurgClin North Am,2018,26(4):469-485.10 张学军，陆洪光，高兴华皮肤性病学M8 版.北京：人民卫生出版社，2 0 13：18 2.11赵辨中国临床皮肤病学M南京：江苏科学技术出版社，2 0 10:118 6.12 NORWOOD O T.Male pattern baldness:classificationand incidenceJ.South Med J,1975,68(11):1359-1365.13 ZHOU Y,CHEN C,QU Q,et al.The effectiveness ofcombination therapies for androgenetic alopecia:a system-atic review and Meta-analysis J.Dermatol Ther,2020,33(4):e13741.doi:10.1111/deh.13741.14 ZHOU Y H,LIU Q M,BAI Y S,et al.Autologous acti-vated platelet-rich plasma in hair growth:a pilot study inmale androgenetic alopecia with in vitro bioactivity inves-tigationJ.J Cosmet Dermatol,2021,20(4):1221-1230.15PAPAKONSTANTINOU M,SIOTOS C,GASTERATOSK C,et al.Autologous platelet-rich plasma treatment forandrogenic alopecia:a systematic review and Meta-analy-sis of clinical trialsJ.Plast Reconstr Surg,2022,151(5):739e-747e.16 GEORGESCU S R,AMUZESCU A,MITRAN C I,et al.Effectiveness of platelet-rich plasma therapy in androgenicalopecia-a Meta-analysisJ.J Pers Med,2022,12(3):342.17 EVANSAG,MWANCIJM,POPERW,et al.Plate-let-rich plasma as a therapy for androgenic alopecia:asystematic review and Meta-analysis J.J DermatologTreat,2022,33(1):498-511.18 G RA F G C,M U L INA RI-BRENNERF,W ERNER B,e tal.Platelet-rich plasma associated with hair transplantsfor the treatment of androgenetic alopecia showed no ben-efitsJ.J Eur Acad Dermatol Venereol,2020,34(7):e340-e342.19 O K IT A A L,ST EINER D,FERREIRA S B,e t a l.Treatment of Male-pattern alopecia with platelet-rich plas-（编辑：黄瑛）微信公众号全文下载226J Diagn Ther Dermato-Venereol,Jun.2023.Vol.30,No.3maJ.Skin Appendage Disord,2020,6(2):97-101.20 PUIG C J,REESE R,PETERS M.Double-blind,place-bo-controlled pilot study on the use of platelet-rich plasmain women with female androgenetic alopecia J.Derma-tol Surg,2016,42(11):1243-1247.21 AYATOLLAHI A,HOSSEINI H,SHAHDI M,et al.Platelet-rich plasma by single spin process in male patternandrogenetic alopecia:is it an effective treatment?J.Indian Dermatol Online J,2017,8(6):460-464.22 BIGBY M,GRIMALT R.Platelet-rich plasma lacks evi-dence of clinically significant improvement in androgenet-ic alopeciaJ.J Am Acad Dermatol,2021,84(4):1183-1185.23 ZIMMERMANNR,ARNOLDD,STRASSERE,et al.Sample preparation technique and white cell content influ-ence the detectable levels of growth factors in plateletconcentratesJ.Vox Sang,2003,85(4):283-289.24 BORZINI P,MAZZUCCO L.Tissue regeneration and inloco administration of platelet derivatives:clinical out-come,heterogeneous products,and heterogeneity of theeffector mechanismsJ.Transfusion,2005,45(11):1759 1767.25】ST