艾滋病检测设备使用与维护.pptx

艾滋病检测常用设备n酶标仪n洗板机n冰箱n温箱n移液器艾滋病检测常用设备n人员经过培训n制定实验室仪器操作程序(SOP)n做好仪器使用记录n定期对仪器进行保养n对仪器进行年检和期间核查酶标仪的使用(奥地利奥地利Anthos2010型酶标仪型酶标仪)n打开电脑,进入WIN98操作系统，双击桌面上“博赛酶标仪测量系统”图标 n单击主菜单测量项目编辑中的子菜单板子布局窗口，按试剂盒说明书的要求设置好空白对照、阴性对照、阳性对照，自动填充样品，选择测量项目名称（试剂盒生产厂家），保存退出。酶标仪的使用(奥地利奥地利Anthos2010型酶标仪型酶标仪)n单击主菜单测量中的单项测量子菜单，进入选择测量程序窗口 n选择保存的测量项目名称，对样品进行编号 n单击自动生成结果项，点击开始键，开始测量n测量完成后，软件会自动返回到主介面，并显示本次测量OD值，选择保存和打印。酶标仪的维护与校准(推荐方法)n每次试验时核对滤光片波长。n定期(每周)清洁仪器表面，保护光学零件不沾灰尘。n每年检查、清洗滤光片，如果滤光片出现破裂或霉点则要更换，根据仪器内具有的校准程序或使用校准板，对滤光片的所用波长光密度的精密度进行校验，测定20次，计算精密度。精密度应该控制在厂家说明书中所规定的范围(建议请厂方代表校验)。校验结果要有记录，保留测定原始结果。酶标仪的期间核查(比对试验):(1)将重铬酸钾用蒸馏水配成100mg/ml的重铬酸钾溶液，取100ul 100mg/ml重铬酸钾溶液10倍稀释至10mg/ml备用。(2)取一空的96孔酶标板，于第一排每孔加入100ul蒸馏水，取100ul 10mg/ml重铬酸钾溶液加入第一孔中，倍比稀释至0.625mg/ml，共有四个稀释度。酶标仪的期间核查(比对试验):(3)在450nm波长下,用本实验室的酶标仪和其他实验室的酶标仪测定不同浓度的重铬酸钾溶液的吸光度值,每台测10次(4)取2.5mg/ml、1.25mg/ml、0.625mg/ml三种浓度下所测得的吸光度值计算平均值x、标准差s和变异系数cv(5)根据测得的吸光度的变异系数判定酶标仪的精密度(cv1%为合格)酶标仪的期间核查(比对试验):(6)根据两台酶标仪在各浓度下测定值的相对偏差来比较两仪器的差异大小.洗板机的使用(DEM-型自动酶标洗板机)开机检验：（1）接上电源线，打开主机开关，洗板机首先进行自检。液晶首先显示：拓普洗板机欢迎您正在初始化系统，请稍候！（2）几秒钟后液晶显示主菜单：洗板？冲洗管路？位置调节请选择！说明仪器正常，处于待命状态。洗板机的使用(DEM-型自动酶标洗板机)n键盘介绍：nDEM-型洗板机采用薄膜键盘，共设有六个功能键。如图：（l）“洗板停止”键在主菜单下按该键一次，可进入洗板参数选择状态，再按一次开始洗板。在洗板过程中按该键终止洗板。在位置调节过程中，按该键返回主菜单。洗板机的使用(DEM-型自动酶标洗板机)n（2）“冲洗管路”键n使用前或洗板工作完成后用该键冲洗整个液体管路。冲洗管路时间0秒300秒连续可调。n（3）“位置调节”键n该键用于调整洗板机的五个位置参数 洗板机的使用(DEM-型自动酶标洗板机)n（4）“选择参数”键n在洗板菜单中，该键用来选择程序代号、清洗方式、洗板次数、洗板条数及浸泡时间等项目，通过“+”或“-”设定。在位置调节过程中，用该键选择需要调节的位置参数。洗板机的使用(DEM-型自动酶标洗板机)n(5)“+”或“-”键n该键用以修改参数。洗板机的使用(DEM-型自动酶标洗板机)n洗板机操作步骤：洗板机操作步骤：n1开机前应检查管路连接是否正确可靠，废液瓶是否排空，洗液瓶有无清洗液，并将酶标板放在载物台上。n2打开电源开关，仪器进行自检，自检结束后，仪器进入主菜单状态。n3按“位置调节”键，校正五个洗板参数是否合适。再按“洗板停止”键返回。洗板机的使用(DEM-型自动酶标洗板机)n4按“洗板停止”键一次，检查洗板参数选择是否正确，参数选择正确时，按“洗板停止”键开始洗板。n5冲洗管路：洗板结束后，将洗液瓶换为蒸馏水瓶冲洗管路，以防清洗头及管路堵塞或结晶。洗板机的使用(DEM-型自动酶标洗板机)n6.冲洗管路先按“冲洗管路”键，这时可用“+或“-”键设定冲洗管路时间，时间范围为0300秒，连续可调。再按“冲洗管路”键即可冲洗管路。n7关机。切断电源，整理工作台，盖好仪器。洗板机的维护(1)每次使用时检查洗板机管道是否通畅，是否有漏液现象。(2)洗涤时检查各孔是否与相应的冲洗头对位良好，负压是否符合规定要求，这是保证各孔洗涤均衡一致的前提。(3)做好仪器设备的清洁工作。洗板机的校准(期间核查方法1)n核查项目:残留量n核查方法:（1）准备一空白96孔反应板，37孵箱过夜。（2）置96孔板于洗板机上，按仪器操作规程调节洗板机吸头位置。洗板机的校准(期间核查方法1)（3）选择两点冲洗和底部冲洗，按常规方式洗涤5次。（4）选板完后，在拍干前后分别称量96孔板重量，前后重量之差除以96得到每孔大约残留量。（5）根据残留量判断洗板机工作是否良好。洗板机的校准(期间核查方法2)n1、机械检查：开机，置96孔酶标板于洗板机上按仪器操作规程（SOP）进行洗板，检查洗板机管道是否畅通，有无漏液现象，检查程序是否运转正常，洗涤时各孔与相应冲洗头对位是否良好，负压是否正常。洗板机的校准(期间核查方法2)2、核查项目：吸光度 核查方法：（1）取一空96孔酶标板，于每孔加入100ul蒸馏水。（2）于第一列每孔加入100ul 100mg/ml浓度的重铬酸钾溶液100ul，混匀后吸100ul置下一列各孔中，如此倍比稀释至1：2048，稀释度依次为1:2、1:4、洗板机的校准(期间核查方法2)1:8、1:16、1:32、1:64、1:128、1:256、1:512、1:1024、1:2048（3）置稀释好的96孔板于酶标仪上，在450nm下测吸光度OD值。（4）将此96孔板置洗板机上常规洗板后，每孔加入100ul蒸馏水，再次置于酶标仪上于450nm波长下测吸光度OD值。洗板机的校准(期间核查方法2)（5）比较洗板前后相应各孔吸光度值变化情况，判断洗板机工作是否良好。移液器的校准 移液器移液器(包括单头和多头移液器)是实验室中重要的基本器具，一年至少应该标定或校准二次，若发现移液器有异常情况，应该立即进行标定。移液器标定方法包括吸取有色溶液进行光谱分析、吸取蒸馏水称量校准、吸取放射性同位素计数校准，以及使用配套校准盒等等。特别要注意校准多头移液器时，必须保证每一个加样头都能够连续和准确的加样。移液器的精密度可根据生产移液器厂家说明书中所规定的范围进行校准。推荐在检测过程中，每个加样工序使用专用的移液器。移液器的校准用蒸馏水称量标定移液器方法(参考芬兰Labsystems移液器标定方案)（1）在一室温为22 的小型工作室(无风)中，在万分之一级别天平上放置一个小三角烧瓶，（2）用待标定的移液器吸取蒸馏水(隔夜存放)加入小三角烧瓶内底部，每次称重后计量，去皮重后再加蒸馏水，连续加蒸馏水10次。加蒸馏水的量根据待标定的移液器不同规格而不同。移液器的校准用蒸馏水称量标定移液器方法(参考芬兰Labsystems移液器标定方案)（3）在移液器标定记录中填写移液器规格、编码、使用蒸馏水量、10次标定称量结果和标定日期，标定人签名。（4）移液器10次标定称量在所要求的重量范围内为合格移液器；移液器标定合格后，在移液器上贴上合格标签，标明日期。不合格移液器要根据移液器生产厂家所推荐的方法进行校准。移液器的校准用蒸馏水称量标定移液器方法(参考芬兰Labsystems移液器标定方案)n 称重法校准移液器方案称重法校准移液器方案移液器规格标定使用蒸馏水量要求重量范围 0.5-10 l 2 l 1.75-2.25 mg 5-40 l 10 l 9.8-10.2 mg 40-200 l 70 l 69.4-70.6 mg 200-1000 l 300 l 298.0-302.0 mg 1-5 ml 2000 l 1990.0-2010.0 mg 2-10 ml 3500 l 3485.0-3515.0 mg谢 谢！