第十一章-紫外可见分光光度法2.ppt

单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,一、,Lamber-Beer,定律：吸收光谱法基本定律,描述物质对单色光吸收强弱与液层厚度和待测物浓度的关系,假设一束平行单色光通过一个吸光物体,续前,取物体中一极薄层,续前,讨论：,1,Lamber-Beer,定律的适用条件（前提）,入射光为单色光,溶液是稀溶液,2,该定律适用于固体、液体和气体样品,3,在同一波长下，各组分吸光度具有加和性,应用：多组分测定,二、吸光系数和吸收光谱,1,吸光系数的物理意义：,单位浓度、单位厚度的吸光度,讨论：,1,）,E=f,（组分性质，温度，溶剂，,）,当组分性质、温度和溶剂一定，,E=f,（,）,2,）不同物质在同一波长下,E,可能不同（选择性吸收）,同一物质在不同波长下,E,一定不同,3,）,E,，物质对光吸收能力,定量测定灵敏度,定性、定量依据,续前,2,吸光系数两种表示法：,1,）,摩尔吸光系数,：,在一定,下，,C=1mol/L,，,L=1cm,时的吸光度,2,）,百分含量吸光系数,/,比吸光系数,：,在一定,下，,C=1g/100ml,，,L=1cm,时的吸光度,3,）两者关系,3,吸收光谱（吸收曲线）：,A,最大吸收,最小吸收,特征值定性依据,肩峰,末端吸收,续前,4,吸光度测量的条件选择：,1,）测量波长的选择：,2,）吸光度读数范围的选择：3,）参比溶液,(,空白溶液,),的选择：,选,A=0.20.7,注：采用空白对比消除因溶剂和容器的吸收、光的散射和,界面反射等因素对透光率的干扰,三、偏离,Beer,定律的因素,依据,Beer,定律，,A,与,C,关系应为,经过原点的直线,偏离,Beer,定律的主要因素表现为,以下两个方面,（一）光学因素,（二）化学因素,（一）光学因素,1,非单色光的影响：,Beer,定律应用的重要前提,入射光为单色光,照射物质的光经单色器分光后,并非真正单色光,其波长宽度由入射狭缝的宽度,和棱镜或光栅的分辨率决定,为了保证透过光对检测器的响,应，必须保证一定的狭缝宽度,这就使分离出来的光具一定的,谱带宽度,续前,续前,讨论：,入射光的谱带宽度严重影响吸光系数和吸收光谱形状,结论：,选择较纯单色光（,，单色性）,选,max,作为测定波长（,E,，,S,且成线性）,续前,2,杂散光的影响：,杂散光是指从单色器分出的光不在入射光谱带宽度,范围内，与所选波长相距较远,杂散光来源：仪器本身缺陷；光学元件污染造成,杂散光可使吸收光谱变形，吸光度变值,3,反射光和散色光的影响：,反射光和散色光均是入射光谱带宽度内的光,直接对,T,产生影响,散射和反射使,T,，,A,，吸收光谱变形,注：一般可用空白对比校正消除,4,非平行光的影响：,使光程，,A,，吸收光谱变形,（二）化学因素,Beer,定律适用的另一个前提：稀溶液,浓度过高会使,C,与,A,关系偏离定律,四、透光率的测量误差,T,影响测定结果的相对误差两个因素：,T,和,T,T,影响因素：仪器噪音,1,）暗噪音,2,）讯号噪音,续前,1,）暗噪音,与检测器和放大电路不确切性有关,与光讯号无关,续前,2,）讯号噪音,与光讯号有关,表明测量误差较小的范围,一直可延至较高吸光度区，,对测定有利,第四节 紫外分光光度计,1,光源：,2,单色器：,包括狭缝、准直镜、色散元件,棱镜,对不同波长的光折射率不同,色散元件 分出光波长不等距,光栅,衍射和干涉,分出光波长等距,钨灯或卤钨灯,可见光源,3501000nm,氢灯或氘灯,紫外光源,200360nm,续前,3,吸收池：,玻璃,能吸收,UV,光，仅适用于可见光区,石英,不能吸收紫外光，适用于紫外和可见光区,要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致）,4,检测器：,将光信号转变为电信号的装置,5,记录装置：讯号处理和显示系统,光电池,光电管,光电倍增管,二极管阵列检测器,类型：,1,单光束分光光度计：,特点：,使用时来回拉动吸收池,移动误差,对光源要求高,比色池配对,续前,2,双光束分光光度计：,特点：,不用拉动吸收池，可以减小移动误差,对光源要求不高,可以自动扫描吸收光谱,续前,3,双波长分光光度计,特点：,利用吸光度差值定量,消除干扰和吸收池不匹配引起的误差,1,、字体安装与设置,如果您对PPT模板中的字体风格不满意，可进行批量替换，一次性更改各页面字体。,在,“,开始”,选,项卡,中,，点击“,替,换”按,钮右,侧箭,头,，,选,择“,替,换,字,体,”。（如下,图）,在图“替换”下拉列表中选择要更改字体。（如下图）,在“替换为”下拉列表中选择替换字体。,点击“替换”按钮，完成。,21,2,、替换模板中的图片,模板中的图片展示页面，您可以根据需要替换这些图片，下面介绍两种替换方法。,方法一：更改图片,选中模版中的图,片,（,有些图片与其他,对象,进行了组合，,选,择,时,一定要选中图,片 本身，而不是组合）。,单击鼠标右键，选择“更改图片”，选择要替换的图片。（如下图）,注意：,为防止替换图片发生变形，请使用与原图长宽比例相同的图片。,21,赠送精美图标,