免疫细胞治疗.ppt

書式設定,書式設定,第 2,第 3,第 4,第 5,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,免疫细胞治疗,细胞治疗服务,手术,放疗,化 疗,生物治疗,肿瘤治疗手段的发展,暂免疫因子,重组抗体,基因疗法,细胞治疗,科学家重新探索，我们是否可以从肿瘤的发生、发展的根源寻找到治疗肿瘤的新方法？,1,免疫细胞治疗,细胞治疗的技术特点示意图,2,免疫细胞治疗,免疫细胞治疗,3,免疫细胞治疗,免疫细胞治疗主要技术,细胞因子诱导的杀伤细胞,（,cytokine-induced killer cell,CIK,）,1.1991,年发现的，以共同表达,CD3和,CD56,为特征；,2.,增值速度快。经过,2,3,周左右的体外培养，细胞数量可增加,400,倍以上，占总细胞的比例可达,40%,以上。,3.,杀瘤活性高：杀伤单位（,TLU,）为,LAK,细胞的,73,倍以上。,4.,杀瘤谱广：,CIK,细胞虽然以,CD3,、,CD56,细胞为主要效应细胞，却没有,T,淋巴细胞杀伤时的,MHC,限制性。,5.,体外培养依赖,CD3,单抗和,IFN-,。,CD3,单抗可作为丝裂原活性单位与,T,细胞表面的,CD3,交联，诱导其活化，而,IFN-,则诱导,IL-1,等细胞因子的合成。,树突状细胞,(,dendritic,cell,，,DC),是最有效的抗原递呈细胞。,DC,的目标在于诱导肿瘤特异性和长期持久的免疫反应，这种效 应有助于防止微小残留病灶和肿瘤复发。,LAK/TIL/CD3AK/CTL,：自上世纪,80,年代以来先后应用于临床的自体免疫细胞，但由于存在着扩增倍速较低、细胞来源困难、细胞毒力不高等诸多问题，该疗法在临床应用上受到一定限制。,经基因改变的自体,T,细胞：,自体,T,细胞体外经慢病毒转染表达识别,CD19,的嵌合受体，该受体识别表达,CD19,的,CLL,肿瘤细胞后杀伤肿瘤细胞，这一基因改变的细胞在回输后在体内增值,1000,倍以上。,6,免疫细胞治疗,免疫细胞治疗的适用范围,Page,7,Page,7,优势,可以调节和增强全身免疫机能；,可有效的杀伤残余的肿瘤细胞，防止肿瘤复发、转移；,缓解晚期患者的临床症状，延长生存期，创造更多的 治疗机会，甚至实现长期带瘤生存；,减轻放、化疗的毒副反应，提高患者生存质量；,它特异性极强、无免疫排斥反应，相对于其他三种治疗 模式副作用小。,适应症,减少恶性肿瘤传统治疗后的复发与转移；,提高肿瘤综合治疗疗效；,少数肿瘤及患者的主要治疗手段（对放化疗不敏感或者无法耐受的情况以及对免疫原性较强的的肿瘤）。,禁忌症,孕妇；,患者不能进行淋巴细胞分离术或者少量多次抽血者；,器官功能衰竭者；,有器官移植史的患者；,不可控制的感染性疾病，如,HIV,阳性；,有其它免疫缺陷疾病，在,4,周内使用过大量免疫 抑制剂的患者；,对本治疗中所用生物试剂过敏者；,T,淋巴细胞瘤患者。,7,免疫细胞治疗,治疗的基本流程,疗效观察,单个核细胞采集,细胞分离、扩增,细胞鉴定及无菌检测,细胞回输,8,免疫细胞治疗,可以重点开展的免疫细胞治疗项目,1.,NK,：自然杀伤细胞治疗,2.CIK,:,细胞因子诱导的杀伤细胞治疗,3.CIK+DC:CIK,细胞,+,树突细胞治疗,4.TIL,:,肿瘤浸润性淋巴细胞,(,来自于肿瘤组织、胸水、腹水和转移淋巴结）治疗,5.TIL,+DC-,肿瘤组织,6.DC-,肿瘤组织,+T,细胞治疗,4.,7.AAIC:,抗原活化的树突状细胞治疗,8.,EAAL,:,治疗肿瘤和慢性传染性病毒感染,.,9,CIK,细胞免疫治疗,50ml,外周血,单个核细胞,INF-,、,IL-2,、,CD3,诱导,细胞培养达,110,9,以上,质控检测,细胞回输，,6,个疗程或结合放化疗制定方案,免疫细胞治疗,10,免疫细胞治疗,免疫细胞治疗,CIK细胞制备培养,用血分机获得,80ML,浓缩血,2000,g20min,，,20,175cm,2,培养瓶,CIK,培养液（含,IFN-,）,第,2,天加混合细胞因子,PMNC,层,CIK,培养隔,2-3,天补液扩瓶,培养瓶内细胞收集、离心、洗涤回输,第,7,天扩瓶后抽样送检（细菌培养和表型分析）,第,3,天,扩瓶,培养,留血浆,50ML备用,分离出富含白细胞的部分,淋巴细胞分离液,11,免疫细胞治疗,DC-CIK,细胞免疫治疗,80-100ml,外周血,单个核细胞,成熟,DC,与自体,CIK,混合培养，不加抗原,细胞培养达,110,9,以上,质控检测,细胞回输，,6,个疗程或结合放化疗制定方案,NK,细胞,T,细胞,12,免疫细胞治疗,树突状细胞制备流程,第,7-8,天，,DC,细胞收集、离心、洗涤和回输,第,5,天加肿瘤抗原，第,6,天加促熟剂，抽样送检,第,3,天补充含半量细胞因子的培养基,6,孔板,1640,培养液,2000g20min,，,20,留血浆,50ML,备用,分离出富含白细胞的部分,淋巴细胞分离液,PMNC,层,用血分机获得,80ML,浓缩血,细胞贴壁,120min,贴壁细胞进行,DC,细胞培养方案,悬浮细胞,进行,CIK,培养方案,13,免疫细胞治疗,肿瘤浸润性淋巴细胞（,TIL,）治疗,肿瘤组织、肿瘤浸润的淋巴结、癌性胸水,/,腹水,体外获取特异性淋巴细胞,细胞培养达,110,9,以上,质控检测,细胞回输，,6,个疗程或结合放化疗制定方案,14,免疫细胞治疗,经修饰的自体,T,淋巴细胞,(DC+T),免疫治疗,80-100ml,外周血,单个核细胞,肿瘤相关抗原诱导,DC,细胞培养达,110,9,以上,质控检测,细胞回输，,6,个疗程或或结合放化疗制定方案,DC,刺激自体,T,淋巴细胞增殖，CD3,诱导,T cells,15,免疫细胞治疗,免疫细胞治疗,部分仪器设备，实验室照片等,16,生活质量改善,免疫功能检测,客观疗效评估,不良反应,细胞免疫治疗的临床观察指标,免疫细胞治疗,近期疗效：,1.,靶病灶大小的变化：按照,RECIST1.1,版评定肿瘤近期疗效，即以治疗前后影像学检查为依据进行评价，分为完全缓解,(CR),、部分缓解,(PR),、病灶稳定,(SD),和进展,(PD),2.,疾病控制率（,DCR,）：,CR+PR+SD,反应率（,RR,）：,CR+PR,远期疗效：无病生存时间（,DFS,）,无进展生存时间（,PFS,）,总生存（,OS,）,17,免疫细胞治疗,国外临床应用报告（以,CIK,治疗为例）,德国波恩大学权威专家施密特教授于,2011,年,2,月在国际肿瘤专业顶级杂志,J Cancer Res,Clin,Oncol,发布发布了关于,CIK,临床应用的最新总结报告，文章题目和摘要如下：,Hontscha,C,Borck,Y,Zhou H,Messmer,D,Schmidt-Wolf IG,.,Clinical trials on CIK cells:first report of the international registry,on CIK cells(IRCC).,J Cancer Res,Clin,Oncol,.,2011;137(2):305-10.,在,867,例临床比对研究中，,426,例各肿实体瘤的各个,不同阶段的病人接受了,CIK,治疗，各例病人输入的,CIK,细胞数,2.19108 5.21010,范围，在可观察统计的,381,例中结果为：,24,例完全缓解（,CR,）；,27,例部分缓解（,PR,）；,40,例好转（,MR,）；,161,例稳定（,SD,）；,129,例进展（,PD,）。但病人生存质量有显著提高，而且,CIK,治疗副作用轻微。其中还发现肝炎病毒负荷减轻。,18,免疫细胞治疗,国内临床应用报告（以,CIK,治疗为例）,据报道,CIK,治疗,256,例中晚期各种实体瘤，无,CR,，,PR+MR,为,80%207,例），随访,1,年生存期为,96%,，,2,年为,92%,，,3,年为,88%,。生存质量卡氏评分提高率为,88%,（平均,15,分）；并且治疗后检测患 者,CD3+,、,CD4+,、,CD8+,、,CD4+,CD8+,比值显著提高、免疫力明显增强。,19,免疫细胞治疗,20,致谢,期待与大家交流和切磋！,21,