1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第级,连续刺激对心肌和骨骼肌,收缩影响的特点,张常娥,厚德修身,博学致远,病理生理学教研室,张常娥,10栋-505,实验目的,学习在体蛙心收缩曲线的记录方法，通过对期前收缩和代偿间歇的观察，了解心肌兴奋性的变化特点。,掌握蛙类坐骨神经腓肠肌标本的制备方法，观察刺激强度和刺激频率对骨骼肌收缩的影响。,比较心肌和骨骼肌收缩和兴奋性的异同点。,一、心肌收缩实验,心肌兴奋性周期性变化：有效不应期，相对不应期，超常期,心肌,有效不应期特别长，一直延续到舒张早期。在收缩期给予心肌有效刺激，由于心肌处于有效不应期，故不会产生期前收缩
2、90,-80,-60,心室肌动作电位期间兴奋性的变化与机械收缩,有效不应期：,相对不应期：,超常期：,给予任何刺激，不产生动作电位,给予阈上刺激，产生动作电位,给予阈下刺激，即可产生动作电位,收缩舒张（早）,舒张（中、晚）,期前收缩和代偿间歇,期前收缩,代偿间歇,心肌收缩的实验步骤：,破坏脑和脊髓，暴露心脏。,蛙心夹夹住心尖，蛙心夹上的丝线系于换能器，连,接BL420实验系统。,1.蛙心正常收缩曲线,2.舒张的早、中、晚期刺激心室。,3.心室收缩期刺激心室，观察心跳曲线。,4.在期前收缩的收缩期和舒张期刺激心室。观察心跳曲线。,(一)刺激强度对骨骼肌收缩的影响,弱刺激去极化紧张电位,较强
3、刺激局部电位,达到阈强度的刺激动作电位肌肉收缩,(二)刺激频率对骨骼肌收缩的影响,低频刺激单收缩：,单次阈上刺激引起单收缩。,刺激频率增加不完全强直收缩：,后一收缩发生在前一收缩的舒张期时，称为不完全强直收缩。,刺激频率进一步增加完全强直收缩：,后一收缩发生在前一收缩的收缩期时，各自的收缩完全融合，肌肉处于持续的收缩状态，称为完全强直收缩。,骨骼肌收缩特点,当同等强度的连续阈上刺激作用于标本时，出现多个收缩反应的融合，称为强直收缩。,实验原理,（一）刺激强度对骨骼肌收缩的影响,阈下刺激：,阈刺激：,即活体细胞能产生兴奋或动作电位所需的最小刺激强度，作为衡量组织兴奋性高低的指标。,阈上刺激：,随
4、着刺激强度的增加，肌肉收缩幅度也相应增大，这种刺激强度超过阈值的刺激称为阈上刺激。,最大刺激：,能使肌肉发生最大收缩反应的最小刺激,。,（二）刺激频率对骨骼肌收缩的影响,低频刺激单收缩,刺激频率增加不完全强直收缩,刺激频率进一步增加完全强直收缩,实验原理,单收缩,不完全强直收缩,完全强直收缩,制备坐骨神经腓肠肌标本,腓肠肌连张力换能器记录收缩曲线,坐骨神经置于电极上给予刺激,观察不同,刺激强度,对腓肠肌收缩的影响,单刺激逐渐增大刺激强度观察收缩，,找出,阈强度,观察不同,刺激频率,对腓肠肌收缩的影响,刺激强度固定在,阈强度,，选用连续刺激逐渐增加刺激,频率观察,单收缩，完全强直收缩，完全强直收
5、缩,刺激对骨骼肌收缩影响的,实验步骤：,坐骨神经-腓肠肌标本的制作：,(1)破坏脑、脊髓：,(,2)去除躯干上部和内脏：,(3)剥皮：,(4)分离两腿：,(5)制作坐骨神经-腓神经标本,（方法如下）：,取一腿,腹侧向上,用蛙钉固定于蛙板。用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经，于,近脊柱端,用线结扎。,再将标本,背面朝上,，循坐骨神经沟找出坐骨神经大腿段，用玻璃分针小心剥离。,从脊柱端将坐骨神经剪断，手持结扎线游离神经至腘窝处。,将游离干净的坐骨神经搭在腓肠肌上，在膝关节周围剪掉全部大腿肌肉，并用粗剪刀将股骨刮干净，然后在股骨中部剪去上段股骨，剩余的部分就是坐骨神经小腿标本。,用镊子将,腓肠肌跟腱,分
6、离并穿线结扎，于结扎线,远端剪断跟腱,。,游离腓肠肌至膝关节处，然后从,膝关节囊处剪掉小腿其余部分,，即可得一个具有附着在股骨上的,腓肠肌,并带有支配腓肠肌的,坐骨神经,的标本。,用浸有任氏液的,锌铜弓,轻触坐骨神经，如果腓肠肌发生迅速收缩表明标本兴奋性良好，说明实验操作成功。,将制备好的标本浸泡在盛有任氏液的培养皿中，510min后开始实验。,（6）连线,坐骨神经置于刺激电极上，保持神经与刺激电极接触良好。,股,骨断端固定,在肌动器上，然后将,腓肠肌,跟腱上的结扎线缚于机械电换能器悬臂的着力点上，并使,肌肉处于自然拉长的长度,（此线不宜太紧或太松，并应,与桌面垂直,），换能器输出连于计算机。,打开计算机，启动BL-420E生物机能实验系统，记录实验结果。,实验注意：,玻璃分针去除神经周围组织。,操作中滴加任氏液。,每次刺激后必须让标本有一定休息时间。,标本连线松紧合适，不能过分牵拉，要垂直。,思考：,1.,肌肉收缩强度与刺激强度和刺激频率关系？,2.不完全强直收缩、完全强直收缩的产生机制是什么？,3.心肌能否发生强直收缩？为什么？,
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