T淋巴细胞及其亚群检测的临床意义.ppt

T T淋巴细胞及其亚群检测的淋巴细胞及其亚群检测的临床意义临床意义 太原中心 郭学林主要内容主要内容qT T淋巴细胞的概念淋巴细胞的概念qT T淋巴细胞的分化发育淋巴细胞的分化发育qT T淋巴细胞亚群淋巴细胞亚群qT T淋巴细胞亚群检测的临床意义淋巴细胞亚群检测的临床意义一、概念一、概念q来源于骨髓的淋巴样干细胞，在胸腺中成来源于骨髓的淋巴样干细胞，在胸腺中成熟的淋巴熟的淋巴细胞，故称胸腺依赖性淋巴细胞细胞，故称胸腺依赖性淋巴细胞（thymus-dependentlymphocytethymus-dependentlymphocyte），简称），简称T T细胞。细胞。q负责细胞免疫功能，参与抗胞免疫功能，参与抗肿瘤、抗瘤、抗细胞胞内感染微生物、移植排斥、内感染微生物、移植排斥、迟发型超敏反型超敏反应；对部分体液免疫部分体液免疫发挥辅助功能。助功能。q外周血：外周血：约占淋巴占淋巴细胞胞总数的数的60%60%80%80%；Lymphocytes外周血中占总淋巴细胞的外周血中占总淋巴细胞的60-80%二、二、T T淋巴细胞的分化发育淋巴细胞的分化发育lT T细胞在胸腺中的发育细胞在胸腺中的发育lT T细胞在外周淋巴器官中的分化发育细胞在外周淋巴器官中的分化发育uThe development of TCRuPositive selectionuNegative selectionuExtrathymic T-cell development1 1、T T细胞在胸腺中的发育细胞在胸腺中的发育三个重要事件三个重要事件三个重要结果三个重要结果三三 个个 阶阶 段段双阴性阶段双阴性阶段(DN)双阳性阶段双阳性阶段(DP)单阳性阶段单阳性阶段(SP)TCR基因重排基因重排阳性选择阳性选择阴性选择阴性选择获得功能性获得功能性TCR获得获得MHC限制性限制性获得自身耐受获得自身耐受T T细胞受体（细胞受体（TCRTCR）的发育）的发育l、四种肽链基因的重排与表达，形成四种肽链基因的重排与表达，形成TCR 和和TCR，将，将T细胞分为细胞分为 TCR 和和 TCR 两种类型。两种类型。l CD3分子的低度表达分子的低度表达结果：获得功能性结果：获得功能性TCRTCRCD3CD3+CD4CD4+CD8CD8-SPSP SPSP细胞细胞 部位：部位：胸腺皮质。胸腺皮质。过程：过程：DPDP细胞细胞 胸腺上皮细胞胸腺上皮细胞 (TCR(TCR、CD4CD4+CD8CD8+)(抗原肽抗原肽-自身自身MHCMHC分子复合物分子复合物)适当亲和力发生适当亲和力发生结合结合不能发生有效结合不能发生有效结合或结合亲和力过高或结合亲和力过高结合结合MHC-MHC-类分子类分子CD3CD3+CD4CD4-CD8CD8+SPSP 凋亡凋亡结合结合MHC-MHC-类分子类分子结果：单阳性细胞（结果：单阳性细胞（SPSP）、获得自身、获得自身MHCMHC限制性。限制性。T T细胞发育过程中的阳性选择细胞发育过程中的阳性选择(positive selection)部位：部位：胸腺皮髓质交界处及髓质区。胸腺皮髓质交界处及髓质区。过程：过程：SPSP细胞细胞 胸腺树突状细胞、巨噬细胞胸腺树突状细胞、巨噬细胞 （TCRTCR、CD4CD4+/CD8/CD8+）（自身抗原肽（自身抗原肽-MHCMHC分子分子）高亲和力结合高亲和力结合不结合或低亲和力结合不结合或低亲和力结合凋亡删除凋亡删除存活存活结果：成熟的结果：成熟的SPSP、获得自身（中枢）免疫耐受。、获得自身（中枢）免疫耐受。T T细胞发育过程中的阴性选择细胞发育过程中的阴性选择(negative selection)2 2、T T细胞在外周淋巴器官中的分化发育细胞在外周淋巴器官中的分化发育q初始初始T T细胞主要定居于外周淋巴器官的胸腺依赖区细胞主要定居于外周淋巴器官的胸腺依赖区qT T细胞在外周淋巴器官与抗原接触后，最终分化为细胞在外周淋巴器官与抗原接触后，最终分化为具有不同效应功能的具有不同效应功能的T T细胞亚群，效应细胞亚群，效应T T细胞和记细胞和记忆忆T T细胞。细胞。三、三、T T淋巴细胞亚群淋巴细胞亚群l按按T细胞细胞所处的活化阶段所处的活化阶段 初始初始T细胞（细胞（naive T cell）效应效应T细胞（细胞（effector T cell）记忆性记忆性T细胞（细胞（memory T cell）l按按TCR的表型分类的表型分类 TCR+T细胞细胞 TCR+T细胞细胞l按按T细胞的细胞的CD4和和CD8分子表型分子表型 CD4+T细胞细胞 CD8+T细胞细胞 l按按T细胞的功能分类细胞的功能分类 Th（help T cell）Tc/C TL（cytotoxic T cell）Tr（regulatory T cell）1 1、初始初始T T细胞、效应细胞、效应T T细胞和记忆细胞和记忆T T细胞细胞q初始初始T T细胞细胞表型：表型：CD45RA+CD45RA+、CD62L+CD62L+、CD25-CD25-（IL-2RIL-2R）特点：未接触抗原的成熟特点：未接触抗原的成熟T T细胞，有分化潜能细胞，有分化潜能q效应效应T T细胞细胞迁往炎症部位，执行细胞免疫效应迁往炎症部位，执行细胞免疫效应q记忆性记忆性T T细胞细胞表型：表型：CD45RO+CD45RO+、CD25+CD25+（IL-2RIL-2R）特点：存活期长，再次接受抗原刺激后可迅速特点：存活期长，再次接受抗原刺激后可迅速活化活化q1 1、根据根据CD4 CD4 和和CD8 CD8 分子表达，分子表达，可将成熟可将成熟T T 细胞分为细胞分为CD4+CD8-CD4+CD8-或或CD4-CD8+CD4-CD8+细胞；细胞；q2 2、根据根据CD4+CD4+细胞所表达细胞所表达CD45CD45分子异构体，可分为分子异构体，可分为CD45RA+CD45RA+和和CD45RO+TCD45RO+T细胞，两者分别是细胞，两者分别是初始初始T T 细胞细胞(naive T cell,(naive T cell,Tn)Tn)和记忆性和记忆性T T 细胞细胞(memory T(memory T cell,Tm)cell,Tm)的重要表型。的重要表型。T T细胞表面细胞表面CDCD分子表达分子表达不同不同2 2 2 2、TCRTTCRT细胞和细胞和细胞和细胞和TCRTTCRT细胞细胞细胞细胞qqTCRTTCRTTCRTTCRT细胞细胞细胞细胞数量少，占数量少，占数量少，占数量少，占5 5 5 5多为多为多为多为CD4CD8CD4CD8CD4CD8CD4CD8（DNDNDNDN细胞）；少数为细胞）；少数为细胞）；少数为细胞）；少数为CD8+CD8+CD8+CD8+分布于皮肤、粘膜参与固有免疫，是抗感染的第一线分布于皮肤、粘膜参与固有免疫，是抗感染的第一线分布于皮肤、粘膜参与固有免疫，是抗感染的第一线分布于皮肤、粘膜参与固有免疫，是抗感染的第一线细胞细胞细胞细胞qqTCRTTCRTTCRTTCRT细胞细胞细胞细胞数量多，数量多，数量多，数量多，CD4+CD4+CD4+CD4+或或或或CD8+CD8+CD8+CD8+（SPSPSPSP细胞）细胞）细胞）细胞）TCRTCRTCRTCR识别谱广，是参与免疫应答的主要细胞群识别谱广，是参与免疫应答的主要细胞群识别谱广，是参与免疫应答的主要细胞群识别谱广，是参与免疫应答的主要细胞群3 3 3 3、CD4CD4+T T细胞和细胞和细胞和细胞和CD8CD8+T T细胞细胞细胞细胞两者通常是针对两者通常是针对两者通常是针对两者通常是针对TCRTTCRTTCRTTCRT细胞而言细胞而言细胞而言细胞而言qqCD4CD4CD4CD4+T T T T细胞细胞细胞细胞约占约占约占约占6060606065656565受受受受MHCMHCMHCMHC类分子限制类分子限制类分子限制类分子限制主要分化为主要分化为主要分化为主要分化为ThThThThqqCD8CD8CD8CD8+T T T T细胞细胞细胞细胞约占约占约占约占3030303035353535受受受受MHCMHCMHCMHC类分子限制类分子限制类分子限制类分子限制主要分化为主要分化为主要分化为主要分化为CTLCTLCTLCTL4 4、Th、CTL、Ts和和Treg细胞细胞l辅助性辅助性T T细胞（细胞（ThTh）主要表面标记：主要表面标记：主要表面标记：主要表面标记：CD4CD4CD8CD8-主要种类：主要种类：主要种类：主要种类：TH1TH1，TH2TH2功能：具有辅助其他免疫细胞分化和调节免疫应答（促进功能：具有辅助其他免疫细胞分化和调节免疫应答（促进和抑制）的作用。和抑制）的作用。l细胞毒性细胞毒性T T细胞（细胞（CTLCTL）主要表面标记：CD8+CD28+功能：特异性直接杀伤靶细胞 杀伤机制：释放穿孔素，颗粒酶杀伤靶细胞通过Fasl介导靶细胞的凋亡TH1TH2分泌CKsIL-2、IFN-、TNFIL-4、5、6、10CKs作用介导细胞毒和局介导细胞毒和局部炎症有关的免部炎症有关的免疫应答疫应答,辅助抗辅助抗体生成体生成,参与细参与细胞免疫及迟发型胞免疫及迟发型超敏性炎症的发超敏性炎症的发生生促进促进B B细胞增殖、成熟细胞增殖、成熟和促进抗体生成，与体和促进抗体生成，与体液免疫有关液免疫有关生物学功能介导细胞免疫介导细胞免疫引起迟发型超敏引起迟发型超敏反应反应(TDTH)(TDTH)辅助体液免疫辅助体液免疫抗寄生虫感染抗寄生虫感染l抑制性抑制性T T细胞（细胞（TsTs）主要表面标志：主要表面标志：CD8+CD28-CD8+CD28-功能：对免疫应答有重要的负调节功能，抑制性功能：对免疫应答有重要的负调节功能，抑制性T T细胞功能细胞功能的异常，常与的异常，常与T T自身免疫性疾病、第自身免疫性疾病、第I I型超敏反应等疾病发型超敏反应等疾病发生有关。生有关。l调节性调节性T T细胞（细胞（TregTreg）主要表面标记：CD4+CD25+功能：抑制免疫应答可能的机制有：直接接触；分泌抑制性CKs；此外，抑制CKs分泌，抑制APC等。小结小结ThCTLTsTreg 表面标记CD3+CD4CD3+CD4CD8+CD28+CD8+CD28+CD8+CD28-CD4+CD25+CD4+CD25+主要功能介导细胞介导细胞免疫免疫引起迟发引起迟发型超敏反型超敏反应、应、辅助体液辅助体液免疫免疫抗寄生虫抗寄生虫感染感染特异性直接特异性直接杀伤靶细胞杀伤靶细胞对免疫应答有重要的负调节功能抑制免疫应抑制免疫应答答四、四、T T淋巴细胞亚群检测的临床意义淋巴细胞亚群检测的临床意义q通过通过T T淋巴细胞亚群的检测可了解在不同情淋巴细胞亚群的检测可了解在不同情况下体内免疫功能状态，辅助临床疾病的况下体内免疫功能状态，辅助临床疾病的诊断，探索疾病的发病机理、病程、预后，诊断，探索疾病的发病机理、病程、预后，监测、指导临床治疗方案。监测、指导临床治疗方案。目前主要可以做以下项目的检测目前主要可以做以下项目的检测1 1）T T淋巴细胞（淋巴细胞（CD3+CD3+）2 2）CD4+CD4+细胞细胞3 3）CD8+CD8+细胞细胞4 4）CD4+/CD8+CD4+/CD8+的比值的比值 q总总T T淋巴细胞可以结合总淋巴细胞可以结合总B B淋巴细胞来判断某些免淋巴细胞来判断某些免疫缺陷和自身免疫性疾病。疫缺陷和自身免疫性疾病。qCD4+CD4+和和CD8+TCD8+T细胞有助于监测患有细胞有助于监测患有免疫缺陷免疫缺陷疾病疾病（如（如SCIDSCID、AIDSAIDS的病人体内的病人体内CD4+CD4+细胞亚群的百分细胞亚群的百分率相对降低，而率相对降低，而CD8+CD8+群体的百分率相对升高），群体的百分率相对升高），自身免疫性疾病自身免疫性疾病（如在（如在SLESLE病人中，病人中，CD8+CD8+淋巴细胞淋巴细胞的相对百分比往往会降低，但当使用类固醇药物的相对百分比往往会降低，但当使用类固醇药物治疗时，也可能上升。在急性治疗时，也可能上升。在急性GVHDGVHD和移植排斥中，和移植排斥中，CD8+CD8+淋巴细胞所占的比例有可能在正常人的范围淋巴细胞所占的比例有可能在正常人的范围之外）之外）CD4+/CD8+CD4+/CD8+的比值的比值q评价那些自身免疫失调或被怀疑是免疫失调评价那些自身免疫失调或被怀疑是免疫失调或已知患有免疫缺陷的病人的免疫状态，此或已知患有免疫缺陷的病人的免疫状态，此外，这一比值还可用来监测骨髓移植病人以外，这一比值还可用来监测骨髓移植病人以免受到急性免受到急性GVHDGVHD的攻击的攻击 CD4/CD8 CD4/CD8 升高：自身免疫性疾病，如类风升高：自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎、湿性关节炎、SLESLE。CD4/CD8 CD4/CD8 降低：病毒感染、恶性肿瘤、再降低：病毒感染、恶性肿瘤、再生障碍性贫血等。生障碍性贫血等。CD4/CD8CD4/CD8比值与肿瘤比值与肿瘤q恶性肿瘤患者术前恶性肿瘤患者术前CD4/CD8CD4/CD8比值低与术后比比值低与术后比值恢复正常。值恢复正常。q当发生癌转移时当发生癌转移时,CD3,CD3、CD4 CD4 细胞数明显减细胞数明显减少的同时少的同时CD8 CD8 细胞数明显增多细胞数明显增多,CD4/CD8,CD4/CD8 比比值明显降低值明显降低,提示恶性肿瘤患者晚期细胞免提示恶性肿瘤患者晚期细胞免疫功能更低疫功能更低,预后更差。预后更差。q肿瘤终未期患者肿瘤终未期患者CD4/CD8CD4/CD8比值异常，可预测比值异常，可预测患者存活期。患者存活期。常见疾病与常见疾病与T T细胞免疫检测关系细胞免疫检测关系疾病疾病CD3+CD4+CD8+CD4/CD8肿瘤再生障碍性贫血粒细胞减少症过敏性皮炎类风湿（活动期）红斑狼疮（活动期）膜性肾小球肾炎胰岛素依赖性糖尿病乙型肝炎急性/慢性疾病疾病CD3+CD4+CD8+CD4/CD8自身溶血性贫血上呼吸道感染传染性单核细胞增多症（急性期）巨细胞病毒感染乙肝结核病疟疾血吸虫病获得性免疫缺陷综合症T T淋巴细胞亚群的正常参考值淋巴细胞亚群的正常参考值项项 目目百分含量（百分含量（%淋巴淋巴细胞）细胞）Total T lymphocyte(CD3+)50-84%T helper/inducer cell(CD3+/CD4+)27-51%T supressor/cytotoxic cell(CD3+/CD8+)15-44%CD4/CD81.4-2.5请各位批评指正请各位批评指正