第十五章-杂环类药物的分析课件.ppt

第八章第八章 杂环类药杂环类药物的分析物的分析 杂环杂环化合物：指化合物：指环环状有机状有机化合物的碳化合物的碳环环中中夹杂夹杂有非碳元素有非碳元素原子（如原子（如O O、S S、N N等）的化合物。等）的化合物。内容很多。重点介内容很多。重点介绍绍其中五其中五类类。1.第一第一节节 吡吡啶类药啶类药物的分析物的分析一、一、结结构与性构与性质质 2.异烟异烟肼肼（isoniazidisoniazid）吡吡啶啶（pyridinepyridine）（一）典型（一）典型药药物的物的结结构构3.尼可刹米尼可刹米（nikethamidenikethamide）酰酰胺胺类类中枢中枢兴奋药兴奋药4.异烟异烟腙腙（ftivazideftivazide）5.丙硫异烟胺丙硫异烟胺（protionamideprotionamide）6.（二）主要化学性（二）主要化学性质质1.1.弱碱性弱碱性 吡吡啶啶环环p pK Kb b=8.88.8，尼尼可可刹刹米米 位位上上酰酰胺胺基基易易水水解解，遇遇碱碱水水解解后后，释释放放出出具具有有碱碱性性的的二二乙乙胺胺，能能使使湿湿润润的的红红色色石石蕊蕊试纸变蓝试纸变蓝色，故可以此色，故可以此进进行行鉴别鉴别。7.2.2.还还原性原性 异烟异烟肼肼 位上位上酰肼酰肼基具有很基具有很强强的的还还原性。可被不同的氧化原性。可被不同的氧化剂剂氧化，可与某些氧化，可与某些羰羰基基试剂发试剂发生生缩缩合反合反应应。8.3 3 吡吡啶环啶环的特性的特性 吡吡啶啶环环可可发发生生开开环环反反应应，特特别别是被取代以后。是被取代以后。9.二、二、鉴别试验鉴别试验（一一）吡吡啶啶的的开开环环的的反反应应，本本反反应应适适用用于于吡吡啶啶 、未未取取代代，以以及及 、为为烷烷基基或或羧羧基基的的衍衍生生物（物（异烟异烟肼肼和尼可刹米）。和尼可刹米）。10.1 1 戊戊烯烯二二醛醛反反应应（K Knignig反反应应）溴化溴化氰氰与芳伯胺作用于吡与芳伯胺作用于吡啶环啶环，使氮使氮转为转为五价。五价。环环水解成戊二水解成戊二醛醛，与芳伯胺作用成有色的戊与芳伯胺作用成有色的戊烯烯二二醛醛衍生物。衍生物。颜颜色因芳胺而异。苯胺色因芳胺而异。苯胺与与联联苯胺。苯胺。11.12.13.14.尼可刹米尼可刹米 ChP ChP（20002000）【鉴鉴别别】（2 2）取取本本品品 1 1 滴滴，加加水水 50 50 mlml，摇摇匀匀，分分取取 2 2 mlml，加加溴溴化化氰氰试试液液 2 2 mlml与与 2.5%2.5%苯苯胺胺溶溶液液 3 3 mlml，摇摇匀匀，溶液溶液渐显渐显黄色。黄色。15.异烟异烟肼肼：需先氧化成异烟酸：需先氧化成异烟酸 然后在与芳胺然后在与芳胺缩缩合成有色合成有色戊戊烯烯二二醛醛衍生物。衍生物。16.2 2二硝基二硝基氯氯苯反苯反应应3 3在无水条件下将吡在无水条件下将吡啶啶与与2,42,4二硝基二硝基氯氯苯混合共苯混合共热热至熔融。至熔融。加加氢氢氧化氧化钠钠溶解，溶液成紫溶解，溶液成紫红红。4 4要将要将药药物氧化，或水解成物氧化，或水解成羧羧酸。酸。17.异烟异烟腙腙 ChP ChP（20002000）【鉴鉴别别】取取异异烟烟腙腙约约50 50 mgmg，加加2,42,4二二硝硝基基氯氯苯苯50 50 mgmg与与乙乙醇醇3 3 m1m1，置置水水浴浴中中煮煮沸沸2 23 3 minmin，加加1010氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液2 2滴滴，静静置置后后，即即显显鲜鲜明明的的红红色。色。18.19.20.异烟异烟肼肼不不经处经处理的反理的反应应：不不处处理理时时生成生成2,42,4二硝基苯二硝基苯肼肼21.（二）（二）酰肼酰肼基基团团的反的反应应1.1.还还原反原反应应2.2.异烟异烟肼肼与硝酸与硝酸银银反反应应，生成，生成可溶于稀硝酸的白色异烟酸可溶于稀硝酸的白色异烟酸银银沉淀，生成氮气和金属沉淀，生成氮气和金属银银，在管壁上在管壁上产产生生银镜银镜。22.23.异烟异烟肼肼 ChP ChP（20002000）【鉴别鉴别】（2 2）取异烟）取异烟肼约肼约10 mg10 mg，置置试试管中，加水管中，加水2 ml2 ml溶解后，加氨溶解后，加氨制硝酸制硝酸银试银试液液1 m11 m1，即，即发发生气泡与生气泡与黑色黑色浑浊浑浊，并在，并在试试管壁上生成管壁上生成银镜银镜。另外：另外：24.2.2.缩缩合反合反应应酰肼酰肼基与芳基与芳醛缩醛缩合成棕，有固合成棕，有固定熔点，可定熔点，可鉴别鉴别。25.26.异烟异烟肼肼 ChP ChP（20002000）【鉴别鉴别】（1 1）取本品）取本品约约0.1 g0.1 g，加，加水水5 ml5 ml溶解后，加溶解后，加1010香草香草醛醛的乙醇的乙醇溶液溶液1 m11 m1，摇摇匀，微匀，微热热，放冷，即析，放冷，即析出黄色出黄色结结晶，晶，滤过滤过，用稀乙醇重，用稀乙醇重结结晶，晶，在在105105干燥后，干燥后，测测定熔点，其熔点定熔点，其熔点为为228228231231，熔融，熔融时时同同时时分解。分解。27.三、形成沉淀的反三、形成沉淀的反应应本品具有吡本品具有吡啶环啶环的的结结构，与重金构，与重金属属盐盐或苦味酸作用生成或苦味酸作用生成绿绿色配位色配位化合物沉淀。化合物沉淀。28.（1 1）与）与铜盐铜盐的反的反应应尼可刹米尼可刹米 ChP ChP（20002000）【鉴鉴别别】（3 3）取取本本品品 2 2 滴滴，加加水水 1 1 ml ml，摇摇匀匀，加加硫硫酸酸铜铜试试液液 2 2 滴滴与与硫硫氰氰酸酸胺胺试试液液 3 3 滴滴，即即生生成成草草绿绿色沉淀。色沉淀。29.（2 2）与）与氯氯化汞的反化汞的反应应 30.（四）分解（四）分解产产物的反物的反应应尼可刹米是烟尼可刹米是烟酰酰胺的胺的N N位双乙基位双乙基取代物。取代物。与与氢氢氧化氧化钠钠加加热热有二有二乙胺逸出。能使湿乙胺逸出。能使湿润润的的红红色石色石蕊蕊试纸变蓝试纸变蓝色。色。31.1.1.尼可刹米尼可刹米 ChP ChP（20002000）【鉴鉴别别】（1 1）取取本本品品 10 10 滴滴，加加氢氢氧氧化化钠钠试试液液 3 3 ml ml，加加热热，即即发发生生二二乙乙胺胺的的臭臭气气，能能使使湿湿润润的的红红色色石蕊石蕊试纸变蓝试纸变蓝色。色。32.（五）紫外吸收光（五）紫外吸收光谱谱特征（特征（P171P171）参考参考 丙硫异烟胺丙硫异烟胺 ChP ChP（20002000）【鉴鉴别别】（1 1）取取本本品品，加加乙乙醇醇制制成成每每1 1 ml ml 中中含含 20 20 g g 的的溶溶液液，照照分分光光光光度度法法（附附录录AA）测测定定，在在 291 291 nm nm 的的波波长长处处有有最最大大吸吸收收，吸吸收收度度约为约为0.780.78。33.三、有关物三、有关物质检查质检查（一）异烟（一）异烟肼肼中游离中游离肼肼的的检查检查异烟异烟肼肼不甚不甚稳稳定，游离定，游离肼肼是是诱变诱变剂剂与致癌物，由原料引入或与致癌物，由原料引入或贮贮藏藏过过程的降解。程的降解。34.薄薄层层色色谱谱法（法（TLCTLC）（）（1 1）ChPChP（20002000）杂质对杂质对照品法照品法 取本品，取本品，加水制成每加水制成每 1ml 1ml 中含中含 50mg 50mg的溶液，作的溶液，作为为供供试试品溶液。另取硫酸品溶液。另取硫酸肼肼加水制成加水制成每每 1ml 1ml中含中含 0.20mg 0.20mg（相当于游离（相当于游离肼肼5050g g 的溶液，作的溶液，作为对为对照溶液。吸取供照溶液。吸取供试试品品溶液溶液 10 10l l 与与对对照溶液照溶液 2 2l l 分分别别点于点于同一硅胶薄同一硅胶薄层层板（用板（用羧羧甲基甲基纤维纤维素素钠钠溶液制溶液制备备）上。）上。35.以异丙醇丙以异丙醇丙酮酮（3232）为为展开展开剂剂，展开后，晾干，展开后，晾干，喷喷以乙醇制以乙醇制对对二甲氨基苯甲二甲氨基苯甲醛试醛试液，液，15min15min后后检检视视，在供在供试试品主斑点前方与硫酸品主斑点前方与硫酸肼肼斑点相斑点相应应的位置上，不得的位置上，不得显显黄色斑黄色斑点。点。36.37.2.2.比比浊浊法法 JP JP（1414）反反应应原理原理 游离游离肼肼+水水杨醛杨醛乙醇液乙醇液水水杨杨醛腙醛腙浑浊浑浊。优优点：不用点：不用对对照品，价廉、照品，价廉、简单简单易行易行 缺点：准确度差，缺点：准确度差，时间过长时间过长，异烟，异烟肼肼反反应产应产物也物也浑浊浑浊。38.检查检查方法方法 取异烟取异烟肼肼0.1g,0.1g,加水加水5ml5ml使溶使溶解，加水解，加水杨杨酸乙醇液酸乙醇液0.1ml0.1ml迅速迅速振振摇摇混合，放置混合，放置5min5min内溶液不内溶液不浑浑浊浊。39.3.3.差示分光光度法差示分光光度法 游游离离肼肼+对对二二甲甲氨氨基基苯苯甲甲醛醛黄黄色色缩缩合物于合物于456nm456nm波波长处长处有最大吸收；有最大吸收；异异烟烟肼肼+对对二二甲甲氨氨基基苯苯甲甲醛醛缩缩合合物于物于456nm456nm波波长处长处无吸收。无吸收。游游离离肼肼+3%+3%丙丙酮酮无无色色的的二二甲甲基基甲甲酮连酮连氮（自然无吸收）。氮（自然无吸收）。40.参参比比：异异烟烟肼肼+游游离离肼肼+对对二二甲氨基苯甲甲氨基苯甲醛醛+3%+3%丙丙酮酮 样样品品：异异烟烟肼肼+游游离离肼肼+对对二二甲氨基苯甲甲氨基苯甲醛醛 测测定，定，对对照法定量照法定量 41.45642.43.测测定方法：定方法：对对照品溶液制照品溶液制备备与与测测定定 精密称精密称取硫酸取硫酸肼肼0。2031g，相当于游离，相当于游离肼肼50mg，制成，制成1ug/ml的的肼标肼标准液。准液。取取50ml量瓶量瓶2个，各加个，各加肼标肼标准液准液5ml。其中一个加。其中一个加对对-二甲氨基苯二甲氨基苯甲甲醛试醛试液液20ml，44.对对-二甲氨基苯甲二甲氨基苯甲醛试醛试液的制液的制备备：取取20g，加相，加相对对密度密度为为1。18的的盐盐酸酸172。5ml，用水稀，用水稀释释至至1000ml，即得。，即得。45.以以对对-二甲氨基苯甲二甲氨基苯甲醛试醛试液的水液的水溶液溶液为为参比，在参比，在456nm处测处测吸吸光度。光度。另一瓶加丙另一瓶加丙酮酮，以含有，以含有3%丙丙酮酮的的对对-二甲氨基苯甲二甲氨基苯甲醛试醛试液液为为参参比在比在456nm处测处测吸光度。吸光度。计计算算差差值值。46.供供试试品溶液制品溶液制备备与与测测定定 用用水制成水制成2mg/ml的异烟的异烟肼肼的水溶的水溶液，片液，片剂剂要用要用盐盐酸溶解酸溶解过滤过滤。分。分成两份，按上述成两份，按上述测测定，求差定，求差值值，根据两差根据两差值值，求，求肼肼的含量。的含量。47.何何为为差示法？差示法？以供以供试试品作品作为为参比，供参比，供试试品和参品和参比液比液经经不同的不同的处处理，理，这这种种处处理，理，使干使干扰组扰组分的吸光度没有分的吸光度没有变变化，化，使待使待测组测组分的吸光度有分的吸光度有变变化。化。变变化的差化的差值值与与浓浓度成正比。度成正比。48.（二）尼可刹米中有关物（二）尼可刹米中有关物质质的的检检查查 ChPChP（20002000）TLC TLC 高低高低浓浓度度对对比法比法 配制两种不同配制两种不同浓浓度的度的对对照溶液照溶液49.检查检查方法：取本品，加甲醇，方法：取本品，加甲醇，配成配成40mg/ml40mg/ml溶液，溶液，为为供供试试品，再品，再稀稀释释成成0.40.4和和0.04 mg/ml0.04 mg/ml溶液，作溶液，作为对为对照液，取个照液，取个10 ul10 ul，点板，紫，点板，紫外灯外灯试检试检。杂质杂质斑点不得更深。斑点不得更深。50.（三）硝苯地平中有关物（三）硝苯地平中有关物质质的的检查检查遇光不遇光不稳稳定，内部定，内部发发生岐化，降解生岐化，降解为为硝苯吡硝苯吡啶啶衍生物和衍生物和亚亚硝基吡硝基吡啶啶衍生物。衍生物。51.52.用用HPLCHPLC要求在避光条件下操作。要求在避光条件下操作。各各杂质总杂质总量不得大于量不得大于0.5%0.5%。配供配供试试品品1mg/ml 1mg/ml 和和0.1mg/ml0.1mg/ml乙乙醇液。醇液。53.第二第二节节 喹喹啉啉类药类药物物 喹喹琳琳类药类药物分子物分子结结构中含有吡构中含有吡啶啶与苯稠合而成的与苯稠合而成的喹喹啉啉杂环杂环，环环上上杂杂原原子的反子的反应应性能基本与吡性能基本与吡啶啶相同。相同。现现以以本本类类最常用的典型最常用的典型药药物硫酸奎宁、硫物硫酸奎宁、硫酸奎尼丁和酸奎尼丁和盐盐酸酸环环丙沙星丙沙星为为例，就其例，就其鉴别鉴别和和杂质检查杂质检查的有关的有关问题进问题进行行讨论讨论。54.一一 基本基本结结构与化学性构与化学性质质 （一）典型（一）典型药药物的物的结结构构硫酸奎宁硫酸奎宁硫酸奎尼丁硫酸奎尼丁55.盐盐酸酸环环丙沙星丙沙星56.（二）主要化学性（二）主要化学性质质1.1.碱性碱性 喹喹啉啉环环上的氮原子具有碱性，与上的氮原子具有碱性，与强强酸酸形成形成稳稳定的定的盐盐。其中。其中环环丙沙星与丙沙星与盐盐酸成酸成盐盐，而奎宁和奎尼丁均与二元酸成而奎宁和奎尼丁均与二元酸成盐盐，结结构中构中喹喹核碱含脂核碱含脂环环氮，碱性氮，碱性强强，可与硫酸成，可与硫酸成盐盐。而。而喹喹啉啉环环系芳系芳环环氮，碱性氮，碱性较较弱，不能与硫酸成弱，不能与硫酸成盐盐。57.奎宁和奎尼丁的分子式完全奎宁和奎尼丁的分子式完全相同，但相同，但喹喹核碱部分立体核碱部分立体结结构不构不同，因此其旋光性、碱性和溶解同，因此其旋光性、碱性和溶解性能也不同。奎宁性能也不同。奎宁为为左旋体，碱左旋体，碱性大于奎尼丁。性大于奎尼丁。58.2.2.旋旋光光性性 硫硫酸酸奎奎宁宁为为左左旋旋体体，其其比比旋旋度度为为-237-237至至-244-244；硫硫酸酸奎奎尼尼丁丁为为右右旋旋体体，其其比比旋旋度度为为275275至至290290；而；而盐盐酸酸环环丙沙星无旋光性。丙沙星无旋光性。59.3.3.荧荧光特性光特性 硫酸奎宁和硫酸奎尼硫酸奎宁和硫酸奎尼丁在稀硫酸溶液中均丁在稀硫酸溶液中均显蓝显蓝色色荧荧光，光，而而盐盐酸酸环环丙沙星丙沙星则则无无荧荧光。光。60.二二 鉴别试验鉴别试验（一）（一）绿绿奎宁反奎宁反应应 奎奎宁宁和和奎奎尼尼丁丁为为6 6位位含含氧氧喹喹啉啉衍衍生生物物，可可 以以 发发 生生 绿绿 奎奎 宁宁 反反 应应（Thalleioquin Thalleioquin)。以以6-6-羟羟基基喹喹啉啉为为例例，经经氯氯化化反反应应，再再以以氨氨水水处处理理，生生成成绿绿色色的的二二醌醌基基吲吲胺胺的的铵铵盐盐，即即为为绿绿奎宁反奎宁反应应的基本机制。的基本机制。61.62.硫硫酸酸奎奎宁宁和和硫硫酸酸奎奎尼尼丁丁的的绿绿奎奎宁宁反反应应机机制制同同上上，取取其其水水溶溶液液，加加溴溴试试液液2 2一一3 3滴滴和和氨氨试试液液lmllml，即即显显翠翠绿绿色色；加加酸酸成成中中性性变变成成蓝蓝色色；酸酸性性则则呈呈紫紫红红色色。翠翠绿绿色色可可转转溶溶于于醇醇、氯氯仿仿中中而而不不溶溶于于醚醚。因因此此中中国国药药典典采采用用此此反反应应鉴鉴别别硫酸奎宁和奎尼丁。硫酸奎宁和奎尼丁。63.鉴鉴别别方方法法：取取本本品品约约20mg20mg，加加水水20m120m1溶溶解解后后，分分取取溶溶液液5m15m1，加加溴溴试试液液3 3滴滴与氨与氨试试液液1 ml1 ml，即，即显显翠翠绿绿色。色。64.（二）光（二）光谱谱特征特征 1.1.紫紫外外吸吸收收光光谱谱特特征征 中中国国药药典典采用本法采用本法鉴别盐鉴别盐酸酸环环丙沙星。丙沙星。鉴鉴别别方方法法：取取本本品品，加加0.0.1 1 mol/Lmol/L盐盐酸酸溶溶液液制制成成每每1 1 mlml中中含含8ug8ug的的溶溶液液，照照分分光光光光度度法法测测定定，在在277nm277nm与与315mn315mn的波的波长处长处有最大吸收。有最大吸收。65.2.2.荧荧光光光光谱谱特特征征利利用用硫硫酸酸奎奎宁宁和和硫硫酸酸奎奎尼尼丁丁，在在稀稀硫硫酸酸溶溶液液中中均均显显蓝蓝色色荧荧光光，而而盐盐酸酸环环丙丙沙沙星星则则无无荧荧光光的的特特性性，可用于本可用于本类药类药物的物的鉴别鉴别或区或区别别。66.3.3.红红外外吸吸收收光光谱谱特特征征 硫硫酸酸奎奎宁宁和和盐盐酸酸环环丙丙沙沙星星在在中中国国药药典典均均采采用用红红外外光光谱谱的的方方法法进进行行鉴鉴别别，而而硫硫酸酸奎奎尼尼丁丁未采用此法。未采用此法。67.（三）无机酸（三）无机酸盐盐 利利用用硫硫酸酸奎奎宁宁和和硫硫酸酸奎奎尼尼丁丁中中的的硫硫酸酸根根，在在酸酸性性条条件件下下与与氯氯化化钡钡反反应应生生成成白白色色的的沉沉淀淀，即即显显硫硫酸酸盐盐的的鉴鉴别别反反应应进进行行鉴鉴别别；盐盐酸酸环环丙丙沙沙星星中中具具有有盐盐酸酸根根，在在酸酸性性条条件件下下与与硝硝酸酸银银反反应应生生成成白白色色的的沉沉淀淀（即即显显氯氯化化物物的的鉴鉴别别反反应应）进进行行鉴别鉴别。68.三三特殊特殊杂质检查杂质检查四四（一一）硫硫酸酸奎奎宁宁中中特特殊殊杂杂质质 根根据据硫硫酸酸奎奎宁宁的的合合成成工工艺艺，产产品品中中特特殊殊杂杂质质主主要要是是合合成成中中产产生生的的中中间间体体以以及及副副反反应应产产物物，通通过过检检查查酸酸度度、氯氯仿仿-乙乙醇醇中中不不溶溶物物和和其其他他金金鸡纳鸡纳碱等加以控制。碱等加以控制。69.1.1.酸度酸度 本本项检查项检查主要控制主要控制药药物中物中的酸性的酸性杂质杂质。检查检查方法：取本品方法：取本品约约20mg20mg，加，加水水20m120m1溶解后，用酸度溶解后，用酸度计进计进行行测测定，定，pHpH值应为值应为5 57 7一一6.66.6。70.2.2.氯氯仿一乙醇中不溶物仿一乙醇中不溶物 本本项项检检查查主主要要控控制制药药物物在在制制备备过过程程中引人的醇中不溶性中引人的醇中不溶性杂质杂质或无机或无机盐类盐类等。等。检检查查方方法法：取取本本品品，加加氯氯仿仿-无无水水乙乙醇醇(2:1)(2:1)的的混混合合液液15m115m1，在在5050度度加加热热l0minl0min后后，用用已已称称定定重重量量的的垂垂熔熔坩坩锅锅（垂垂熔熔玻玻璃璃滤滤器器）滤滤过过，滤滤渣渣用用上上述述混混合合液液分分5 5次次洗洗涤涤，每每次次10 10 mlml，在在105105度度干燥至恒重，干燥至恒重，遗遗留残渣不得超留残渣不得超过过2mg2mg。71.垂熔玻璃垂熔玻璃滤滤器：系以硬器：系以硬质质玻璃玻璃烧结烧结成具有一定孔成具有一定孔经经的的滤滤板，再粘板，再粘连连不不规规格格的漏斗、的漏斗、滤滤球而成。按球而成。按滤滤板孔径大小分板孔径大小分为为1 16 6（C1C1C6C6）六种）六种规规格。一般格。一般1 12 2号号滤滤除大除大颗颗粒的沉淀，粒的沉淀，3 34 4号号滤滤除除细细沉沉淀物，淀物，5 56 6号可号可滤滤除除细细菌。菌。应应用用时时在在板上面盖板上面盖1 12 2层纸层纸，以减，以减压压抽即可。抽即可。72.3.3.其他金其他金鸡纳鸡纳碱碱 本本项项检检查查主主要要控控制制硫硫酸酸奎奎宁宁中中其其他他生物碱，因其化学生物碱，因其化学结结构不十分明确、构不十分明确、没没有有合合适适的的对对照照品品，因因此此采采用用薄薄层层色色谱谱中的高低中的高低浓浓度度对对比法比法进进行行检查检查。检检查查方方法法：取取本本品品，加加稀稀乙乙醇醇制制成成每每1ml1ml中中含含l0mgl0mg的的溶溶液液，作作为为供供试试品品溶溶液液；精精密密称称取取适适量量，加加稀稀乙乙醇醇稀稀释释制制成成每每1 1 mlml中含中含50 ug50 ug的溶液，作的溶液，作为对为对照溶液。照溶液。73.照照薄薄层层色色谱谱法法试试验验，吸吸取取上上述述两两种种溶溶液液各各5ul5ul，分分别别点点于于同同一一硅硅胶胶G G薄薄层层板板上上，以以氯氯仿仿-丙丙酮酮-二二乙乙胺胺（5 5：4:1.254:1.25）为为展展开开剂剂，展展开开后后，微微热热使使展展开开剂剂挥挥散散，喷喷以以碘碘铂铂酸酸钾钾试试液液使使显显色色。供供试试品品溶溶液液如如显显杂杂质质斑斑点点，与与对对照照溶溶液液的的主主斑斑点点比比较较，不得更深。，不得更深。74.（二）（二）盐盐酸酸环环丙沙星中特殊丙沙星中特殊杂质杂质的的检查检查 盐盐酸酸环环丙丙沙沙星星在在生生产产和和贮贮藏藏过过程程中中引引入入的的特特殊殊杂杂质质，通通过过酸酸度度、溶溶液液的的澄澄清清度度与与颜颜色色、有有关关物物质质等等项项目目的的检检查查进进行控制。行控制。75.1.1.酸度酸度 本本项检查项检查主要控制主要控制盐盐酸酸环环丙丙沙星在生沙星在生产产和和贮贮藏藏过过程中可能引入的程中可能引入的酸性酸性杂质杂质。检查检查方法：取本品，加水制成每方法：取本品，加水制成每lmllml中含中含25mg25mg的溶液，用酸度的溶液，用酸度计进计进行行测测定，定，pHpH值应为值应为3.03.0一一4.54.5。76.2.2.溶液的澄清度与溶液的澄清度与颜颜色色本本项项检检查查主主要要控控制制盐盐酸酸环环丙丙沙沙星星在在生生产产和和贮贮藏藏过过程程中中可可能能引引入入的的水水中中不不溶溶性物性物质质和有色和有色杂质杂质。检检查查方方法法：取取本本品品0.0.1 1 g g，加加水水l0mll0ml溶溶解解后后，溶溶液液应应澄澄清清；如如显显色色，与与黄黄色色或或黄黄绿绿色色4 4号号标标准准比比色色液液比比较较；不得更深。不得更深。77.3.3.有关物有关物质质 本本项项检检查查主主要要控控制制盐盐酸酸环环丙丙沙沙星星在在生生产产和和贮贮藏藏过过程程中中可可能能引引人人结结构构不不清清的的有有关关杂杂质质，采采用用HPLCHPLC法中法中归归一化法一化法进进行行检查检查。78.色色谱谱条条件件与与系系统统适适用用性性试试验验：用用十十八八烷烷基基硅硅烷烷键键合合硅硅胶胶为为填填充充剂剂；以以0.0.05mol/L05mol/L枸枸橼橼酸酸溶溶液液-乙乙睛睛（82:1882:18）用用三三乙乙胺胺调调节节pHpH值值3.53.5为为流流动动相相；检检测测波波长长为为277nm277nm理理论论板板数数按按盐盐酸酸环环丙丙沙沙星星峰峰计计算算应应不不低低于于20002000，盐盐酸酸环环丙丙沙沙星星峰峰与与相相邻杂质邻杂质峰的分离度峰的分离度应应符合符合规规定。定。79.测测定定方方法法：取取本本品品适适量量，加加水水制制成成每每1 1 mlml中中含含0.0.4mg4mg的的溶溶液液，取取20ul20ul注注入入液液相相色色谱谱仪仪，调调节节检检测测灵灵敏敏度度和和记记录录仪仪衰衰减减，使使主主成成分分的的峰峰高高为为记记录录仪仪满满量量程程的的2 2一一4 4倍倍，记记录录时时间间应应为为主主成成分分峰峰保保留留时时间间的的2 2倍倍。按按面面积积归归一一化化法法计计算算，杂杂质质总总量量不不得超得超过过1.51.5。80.第三第三节节 托托烷类药烷类药物物 托托烷类药烷类药物大多数是由莨菪物大多数是由莨菪烷烷衍生衍生的氨基醇与不同的有机酸的氨基醇与不同的有机酸缩缩合成合成酯酯的生的生物碱，常物碱，常见见的有的有颠颠茄生物碱和古柯生物茄生物碱和古柯生物碱，根据其碱，根据其结结构特征均属于构特征均属于杂环类药杂环类药物。物。现仅现仅以典型以典型药药物硫酸阿托品和物硫酸阿托品和氢氢溴酸溴酸东东莨菪碱莨菪碱为为例例进进行行讨论讨论。81.一一 基本基本结结构与化学性构与化学性质质（一）典型（一）典型药药物的物的结结构构82.（二）主要化学性（二）主要化学性质质1.1.水解性水解性 阿托品和阿托品和东东莨菪碱分子莨菪碱分子结结构中，具有构中，具有酯酯的的结结构，易水解。以阿托品构，易水解。以阿托品为为例，水解生成例，水解生成莨菪醇（莨菪醇（I I）和莨菪酸（）和莨菪酸（IIII）83.2.2.碱碱性性 阿阿托托品品和和东东莨莨菪菪碱碱的的分分子子结结构构中中，五五元元脂脂环环上上含含有有叔叔胺胺氮氮原原子子，因因此此，具具有有较较强强的的碱碱性性，易易与与酸酸成成盐盐。如如阿阿托托品品的的pKb1pKb1为为4.35.4.35.84.3.3.旋旋光光性性 氢氢溴溴酸酸东东莨莨菪菪碱碱分分子子结结构构中中含含有有不不对对称称碳碳原原子子，呈呈左左旋旋体体。比比旋旋度度为为-240-240至至-270-270，而而阿阿托托品品结结构构中中虽虽然然也也含含有有不不对对称称碳碳原原子子，但但因因外外消消旋旋化化而而为为消消旋旋体体，无无旋旋光光性性。利利用用此此性性质质可可区区别别阿阿托托品品与与东东莨莨菪菪碱。碱。85.二二 鉴别试验鉴别试验（一）托（一）托烷烷生物碱一般生物碱一般鉴别试验鉴别试验 本本类类药药物物为为酯酯类类生生物物碱碱，水水解解后后生生成成的的莨莨菪菪酸酸，经经发发烟烟硝硝酸酸加加热热处处理，理，转变为转变为三硝基衍生物，三硝基衍生物，再再与与氢氢氧氧化化钾钾醇醇溶溶液液和和固固体体氢氢氧氧化化钾钾作作用用，则则转转成成有有色色的的醌醌型型产产物物，开开始始呈呈深深紫紫色色。以以阿阿托托品品为为例例，其其反反应应式式为为：86.鉴鉴别别方方法法：取取供供试试品品约约10mg,10mg,加加发发烟烟硝硝酸酸5 5滴滴，置置水水浴浴上上蒸蒸干干，得得黄黄色色的的残残渣渣，放放冷冷，加加乙乙醇醇2 2一一3 3滴滴湿湿润润，加固体，加固体氢氢氧化氧化钾钾一小粒，即一小粒，即显显深紫色。深紫色。87.（二）氧化反（二）氧化反应应 本本类类药药物物水水解解后后，生生成成的的莨莨菪菪酸酸，可可与与硫硫酸酸和和重重铬铬酸酸钾钾在在加加热热的的条条件件下下，发发生生氧氧化化反反应应，生生成成苯苯甲甲醛醛，而逸出，而逸出类类似苦杏仁的臭味。似苦杏仁的臭味。88.（三）沉淀反（三）沉淀反应应 本本类类药药物物具具有有碱碱性性，可可与与生生物物碱碱沉沉淀淀剂剂生生成成沉沉淀淀。如如阿阿托托品品与与氯氯化化汞汞醇醇试试液液反反应应，则则生生成成黄黄色色沉沉淀淀，而而东东莨莨菪菪碱碱与与氯氯化化汞汞醇醇试试液液反反应应，则则生生成白色复成白色复盐盐沉淀。沉淀。89.（四）硫酸（四）硫酸盐盐与溴化物反与溴化物反应应 硫硫酸酸阿阿托托品品的的水水溶溶液液，加加氯氯化化钡钡试试液液，即即生生成成白白色色沉沉淀淀，沉沉淀淀在在盐盐酸酸或或硝硝酸酸中中均均不不溶溶解解；加加醋醋酸酸铅铅试试液液，也也生生成成白白色色沉沉淀淀，但但沉沉淀淀在在醋醋酸酸胺胺或或氢氢氧氧化化钠钠试试液液中中溶溶解解。氢氢溴溴酸酸东东莨莨菪菪碱碱的的水水溶溶液液，加加硝硝酸酸银银试试液液，即即生生成成淡淡黄黄色色凝凝乳乳沉沉淀淀，沉沉淀淀能能在在氨氨试试液液中中微微溶溶，但但在在硝硝酸酸中中几几乎乎不不溶溶；滴滴加加氯氯试试液液，溴溴即即游游离离，加加氯氯仿仿振振摇摇，氯氯仿仿层层显显黄黄色或色或红红棕色。棕色。90.三三 氢氢溴酸溴酸东东莨菪中特殊莨菪中特殊杂质检查杂质检查 氢氢溴溴酸酸东东莨莨菪菪碱碱是是从从茄茄科科植植物物颠颠茄茄、白白曼曼陀陀罗罗、莨莨菪菪等等中中提提取取得得到到的的莨莨菪菪碱碱的的氢氢溴溴酸酸盐盐。我我国国是是从从茄茄科科植植物物白白曼曼陀陀罗罗的的干干燥燥品品（洋洋金金花花）中中提取提取东东莨菪碱，然后制成莨菪碱，然后制成氢氢溴酸溴酸盐盐。91.根根据据其其制制备备工工艺艺，本本品品在在生生产产和和贮贮藏藏过过程程中中可可能能引引人人的的特特殊殊杂杂质质，通通过过酸酸度度、其其他他生生物物碱碱和和易易氧氧化化物物检检查查进进行控制。行控制。1.1.酸酸度度 东东莨莨菪菪碱碱碱碱性性很很弱弱，对对石石蕊蕊试试纸纸几几乎乎不不显显碱碱性性反反应应。氢氢溴溴酸酸东东莨莨菪菪碱碱为为强强酸酸弱弱碱碱形形成成的的盐盐，通通过过其其5%5%水水溶溶液液的的pHpH值值为为4.0-5.54.0-5.5，来来控控制本品中的酸性制本品中的酸性杂质杂质。92.检检查查方方法法：取取本本品品0.0.l0gl0g，加加水水2m12m1溶溶解解后后，分分成成两两等等份份：一一份份中中加加氨氨试试液液2 2一一3 3滴滴，不不得得发发生生浑浑浊浊；另另一一份份中中加加氢氢氧氧化化钾钾试试液液数数滴滴，只只许发许发生瞬即消失的生瞬即消失的类类白色白色浑浊浑浊。93.2.2.其其他他生生物物碱碱 本本品品的的水水溶溶液液加加入入氨氨试试液液不不得得发发生生混混浊浊。当当有有其其他他生生物物碱碱，如如阿阿扑扑阿阿托托品品、颠颠茄茄碱碱存存在在时时，则则产产生生混混浊浊；本本品品水水溶溶液液加加入入氢氢氧氧化化钾钾试试液液，则则有有东东莨莨菪菪碱碱析析出出显显浑浑浊浊。因因东东莨莨菪菪碱碱在在碱碱性性条条件件下下水水解解，生生成成异异东东莨莨菪菪碱碱醇醇和和莨莨菪菪酸酸，前前者者在在水水中中易易溶溶；后后者者生生成成碱碱式式盐盐在在水水中中也也能能溶溶解解，故故可可使使瞬瞬即即发发生的生的浑浊浑浊消失。消失。94.3.3.易易氧氧化化物物 主主要要是是检检查查本本品品在在生生产产过过程程中中可可能能引引入入的的杂杂质质阿阿扑扑阿阿托托品品及及其其它它含含有有不不饱饱和和双双键键的的有有机机物物质质，可可使使高高锰锰酸酸钾钾溶液褪色。溶液褪色。检检查查方方法法：取取本本品品0.0.15g15g，加加水水5m15m1溶溶解解后后，在在1515一一20 20 加加高高锰锰酸酸钾钾滴滴定定液液（0.0.02mo1/L 02mo1/L)0.)0.05 05 mlml，l0minl0min内内红红色不得完全消失。色不得完全消失。95.第四第四节节 吩吩噻嗪类药噻嗪类药物的分析物的分析 一一 吩吩噻嗪类药噻嗪类药物的基本物的基本结结构构（一）（一）结结构特点与典型构特点与典型药药物物 96.97.98.奋奋乃静乃静99.癸氟癸氟奋奋乃静乃静100.盐盐酸氟酸氟奋奋乃静乃静101.盐盐酸三氟拉酸三氟拉嗪嗪102.盐盐酸二氧丙酸二氧丙嗪嗪103.硫氮硫氮杂杂蒽母核蒽母核 （1 1）含）含S S、N N的三的三环环共共轭轭的大的大 体系，体系，S S、N N与苯与苯环环形成形成p-p-共共轭轭具有紫外具有紫外吸收光吸收光谱谱特征。特征。104.（2 2）硫硫氮氮杂杂蒽蒽环环上上硫硫原原子子为为-2-2价，具有价，具有还还原性，易氧化呈色。原性，易氧化呈色。（3 3）硫氮）硫氮杂杂蒽蒽环环上硫原子有两上硫原子有两对对孤孤对电对电子，易与金属离子子，易与金属离子络络合呈合呈色。色。105.2.2.取代基取代基 R R：脂：脂烃烃胺基、胺基、哌嗪哌嗪基，具碱性基，具碱性 R R：卤卤素素 106.（二）性（二）性质质 1.1.紫紫外外与与红红外外吸吸收收光光谱谱 本本类类药药物物的的紫紫外外特特征征吸吸收收，主主要要由由母母核核三三环环的的系系统统所所产产生生，一一般般具具有有三三个个峰峰值值。即即在在 204204209nm209nm（205nm205nm附附近近）、250250 265nm265nm（254nm254nm附附 近近）和和 300300325nm325nm（300nm300nm附附近近）。最最强强峰峰多多在在250250265nm265nm。107.2 2位位上上的的取取代代基基（RR）不不同同，会引起吸收峰会引起吸收峰发发生位移。生位移。其其结结构构中中-2-2价价的的硫硫，易易氧氧化化，氧化氧化产产物物砜砜及及亚砜亚砜有四个吸收峰。有四个吸收峰。吩吩噻噻嗪嗪类类药药物物随随取取代代基基 R R 和和RR的的不不同同，产产生生不不同同的的红红外外吸吸收收光光谱谱。108.2 2易被氧化呈色易被氧化呈色3 3 硫氮硫氮杂杂蒽蒽环环上二价硫原子易上二价硫原子易氧化，遇不同氧化氧化，遇不同氧化剂剂，硫酸，硝酸，硫酸，硝酸，三三氯氯化化铁铁，过过氧化氧化氢氢等，母核易被等，母核易被氧化成氧化成亚砜亚砜和和砜砜。随取代基不同，。随取代基不同，有不同的有不同的颜颜色。色。109.3 3 易与金属离子易与金属离子络络合呈色合呈色未未被被氧氧化化的的硫硫可可与与金金属属钯钯形形成成配配合合物物，氧氧化化产产物物无无此此反反应应。可可进进行行含含量量测测定定，有有专专属属性性，可消除氧化可消除氧化产产物的干物的干扰扰。110.二、二、鉴别试验鉴别试验 （一）（一）UVUV和和IRIR最最大大吸吸收收波波长长，最最小小吸吸收收波波长长，吸吸光度，吸收系数等光度，吸收系数等进进行行鉴别鉴别。111.奋奋乃静乃静 ChP ChP（20002000）鉴别鉴别 取本品，加无水乙醇制成取本品，加无水乙醇制成每每1ml 1ml 中含中含 7 7 g g 的的溶液，照分光溶液，照分光光度法（附光度法（附录录AA）测测定，在定，在 258nm 258nm 的波的波长处长处有最大吸收，吸收度有最大吸收，吸收度约为约为0.650.65。112.本品的本品的红红外吸收外吸收图谱应图谱应与与对对照的照的图谱图谱（光（光谱谱集集 243 243 图图）一致。一致。113.（二）（二）显显色反色反应应 1.1.氧化氧化剂剂氧化氧化显显色色氧化氧化剂剂 硫酸、硝酸、硫酸、硝酸、过过氧化氧化氢氢，过过程及其复程及其复杂杂，很，很难难用反用反应应式表达式表达（P182P182）。）。114.奋奋乃静乃静 ChP ChP（20002000）鉴别鉴别 （1 1）取本品）取本品 5mg 5mg，加，加盐盐酸酸与水各与水各 1ml 1ml，加，加热热至至 80 80，加入，加入过过氧化氧化氢氢溶液数滴，即溶液数滴，即显显深深红红色；放色；放置后，置后，红红色色渐渐褪去。褪去。115.盐盐酸异丙酸异丙嗪嗪 ChP ChP（20002000）鉴别鉴别 （1 1）取本品）取本品约约 5mg 5mg，加硫酸，加硫酸5ml 5ml 溶解后，溶液溶解后，溶液显樱显樱桃桃红红色；放置后，色色；放置后，色渐变渐变深。深。（2 2）取本品）取本品约约 0.1g 0.1g，加水，加水 3ml 3ml 溶解后，溶解后，加硝酸加硝酸 1ml 1ml，即生成，即生成红红色沉淀；加色沉淀；加热热，沉，沉淀即溶解，溶液由淀即溶解，溶液由红红色色转变为转变为橙黄色。橙黄色。116.癸氟癸氟奋奋乃静乃静 ChP ChP（20002000）鉴别鉴别 （2 2）取本品）取本品约约 5mg 5mg，加甲，加甲醇醇2ml 2ml 溶解后，加溶解后，加 0.1%0.1%氯氯化化钯钯溶溶液液 3ml 3ml，即有沉淀生成，并，即有沉淀生成，并显红显红色，色，再加再加过过量的量的氯氯化化钯钯溶液，溶液，颜颜色色变变深。深。2.2.与与钯钯离子离子络络合合显显色色117.（三）分解（三）分解产产物的反物的反应应癸氟癸氟奋奋乃静乃静 ChP ChP（20002000）鉴别鉴别 （1 1）取本品）取本品 15 15 20mg20mg，加碳，加碳酸酸钠钠与碳酸与碳酸钾钾各各约约0.1g0.1g，混匀，在，混匀，在 600 600 炽炽灼灼 15 152020分分钟钟，放冷，加水，放冷，加水2ml 2ml 使溶解，加使溶解，加盐盐酸溶液（酸溶液（1212）酸）酸化，化，滤过滤过，滤滤液加茜素液加茜素锆试锆试液液 0.5ml 0.5ml，应显应显黄色。黄色。118.119.三、特殊三、特殊杂质检查杂质检查 癸氟癸氟奋奋乃静及其注射液乃静及其注射液TLC TLC 参比参比杂质对杂质对照品法以照品法以盐盐酸氟酸氟奋奋乃乃静静为对为对照品。其他照品。其他药药物物TLC TLC 高高低低浓浓度度对对比法。比法。120.(一）一）盐盐酸异丙酸异丙嗪杂质嗪杂质的来源与的来源与检查检查 1.1.合成工合成工艺艺 中中间产间产物