血液细胞染色体检验.ppt

骨髓骨髓细胞染色体胞染色体检验临床血液床血液检验教研室教研室邵邵泽伟 副教授副教授基基础知知识简介介 1960年年Nowell和和Hungerford发现了慢性了慢性粒粒细胞白血病特异性染色体异常，即胞白血病特异性染色体异常，即Ph染色染色体，从此推体，从此推动了了细胞胞遗传学在学在肿瘤瘤细胞学上胞学上的广泛的广泛应用，促用，促进了血液了血液肿瘤分子生物学的瘤分子生物学的发展。展。血血细胞染色体胞染色体检验技技术 主要包括主要包括染色体非染色体非显带技技术、染色体、染色体显带技技术、染色体高分辨技染色体高分辨技术、姐妹染色、姐妹染色单体互体互换技技术、染色体、染色体脆性部位脆性部位显示技示技术和早熟凝集染色体技和早熟凝集染色体技术等。等。80年代又年代又发展了展了染色体原位染色体原位杂交技交技术(FISH)，这一技一技术将分子探将分子探针与染色体与染色体杂交，拓展了交，拓展了检测范范围，提高了提高了检测的灵敏度。的灵敏度。自自动化染色体分析技化染色体分析技术提供了菜提供了菜单式操作，式操作，简单易行，在易行，在资料存料存储、染色体、染色体图像像处理和核型分析方面理和核型分析方面显示了独特示了独特优势。一、染色体非一、染色体非显带技技术F(一一)原理原理 染色体制染色体制备的关的关键是是获得足得足够的分裂中期的分裂中期细胞。胞。如骨髓可直接得到分裂中期如骨髓可直接得到分裂中期细胞，而外周血淋巴胞，而外周血淋巴细胞胞需需经体外培养，植物凝集素（体外培养，植物凝集素（PHA）刺激）刺激细胞分裂胞分裂以以获得分裂中期得分裂中期细胞。骨髓胞。骨髓细胞常胞常规染色体制染色体制备方法方法包括直接法和培养法两种。包括直接法和培养法两种。直接法直接法F1直接法：直接法：F 抗凝骨髓抗凝骨髓标本不本不经培养，以培养，以PBS稀稀释后加人秋后加人秋水仙素水仙素“阻留阻留”中期中期细胞，胞，经低渗液低渗液处理后，再理后，再经预固定、固定后即可染色作固定、固定后即可染色作镜检。（。（秋水仙素能干秋水仙素能干扰有有丝分裂分裂纺锤体形成，使体形成，使细胞胞“阻留阻留”在分裂中期，增加中期在分裂中期，增加中期细胞数目。低胞数目。低渗渗处理理则使染色体彼此使染色体彼此铺展开，便于分析。）展开，便于分析。）短期培养法短期培养法F抗凝骨髓抗凝骨髓标本在含小牛血清的培养液中于本在含小牛血清的培养液中于37培养培养24或或48h，加入秋水仙素，加入秋水仙素“阻留阻留”中期中期细胞，其他同直接法。胞，其他同直接法。二、染色体常二、染色体常规显带技技术F 显带染色体染色体(banding chromosome)：染色体：染色体经过某种特殊的某种特殊的处理或特异的染色后，染色体上可理或特异的染色后，染色体上可显示出一系列示出一系列连续的明暗条的明暗条纹，称，称为显带染色体。染色体。F 1971年巴黎会年巴黎会议确定的四种确定的四种显带技技术是奎丫染是奎丫染色法、色法、Giemsa法、逆相法、逆相Giemsa法和着法和着丝粒区异染色粒区异染色质法，即法，即Q带、G带、R带和和C带。F (一一)原理原理 F 1G显带（Giemsa法）：法）：F DNA上富含上富含A-T碱基碱基对的的DNA和和组蛋白蛋白结合合紧密，和染料密，和染料亲和力和力较强，呈深，呈深带；而富含；而富含G-C碱基碱基对的区段的区段结合的蛋白合的蛋白质与染料与染料亲和力和力降低，呈浅降低，呈浅带。这样染色体上可染色体上可显示出一系列示出一系列连续的明暗条的明暗条纹。F2R显带(逆相逆相Giemsa法法)：F 带纹与与Q带、G带正好相反，即前者的阳正好相反，即前者的阳性性带相当于后者的阴性相当于后者的阴性带，而前者的阴性，而前者的阴性带则相当于后者的阳性相当于后者的阳性带。R带按制按制备方法不同可方法不同可分分为荧光光R带和和姬姆姆萨R带两种两种类型。型。(二二)显带染色体的命名染色体的命名 F 显带染色体上的明暗条染色体上的明暗条纹称作称作带(band)。染色体上。染色体上有明有明显而恒定的形而恒定的形态特征，如着特征，如着丝粒和某些特粒和某些特别显著的著的带，称作，称作界界标(1andmark)。两个界。两个界标之之间的区域称的区域称为染染色体区色体区(region)。F 区的划分是以着区的划分是以着丝粒开始向短臂粒开始向短臂(phocomelic arm，p)或或长臂臂(q)的臂端延伸，依次的臂端延伸，依次编为l区、区、2区、区、3区等。区等。用作界用作界标的的带就是就是该区的区的l号号带，例如，例如6p23，即表示第，即表示第6号染色体短臂，号染色体短臂，2区，区，3带。F 在表示一个指定的在表示一个指定的带时需要四需要四项内容，内容，即染色体号、臂号、区号和即染色体号、臂号、区号和带号。如果一个号。如果一个带需要再分，就称需要再分，就称为亚带(subband)，亚带的的描述就是在描述就是在带的后面加一小数点，再写出指的后面加一小数点，再写出指定的定的亚带数。如数。如6p23.1，即指即指6号染色体短臂，号染色体短臂，2区区3带的第的第l亚带。如果。如果亚带又被再划分，又被再划分，则只在只在亚带后加数字，不再加后加数字，不再加标点。点。三、三、临床床评价价F (一一)染色体异常染色体异常(chromosome aberration)是指染色体数量异常和是指染色体数量异常和结构异常，又称染色体构异常，又称染色体畸畸变。1染色体数目异常染色体数目异常 多倍体多倍体(polyploid)：人人类生殖生殖细胞染色体胞染色体为23条，体条，体细胞染色体胞染色体为46条，称二倍体条，称二倍体(diploid)(2n)。在某些病理情况下，。在某些病理情况下，细胞染色体数目成倍增加，胞染色体数目成倍增加称称为多倍体，如三倍体多倍体，如三倍体(triploid)(3n)，四倍体，四倍体(tetraploid)(4n)等。在等。在恶性血液病中常性血液病中常见有多倍体有多倍体细胞。胞。F 非整倍体非整倍体(aneuploid)：染色体数目增加或减少不是染色体数目增加或减少不是成倍的，称成倍的，称为非整倍体非整倍体。F 少于少于46条者称条者称亚二倍体二倍体(hypodiploid)，少于，少于69条者条者为亚三倍体三倍体(hypotriploid)；多于；多于46条者称条者称为超二倍体超二倍体(hyperdiploid)，多于，多于69条者称条者称超三倍体超三倍体(hypertriploid)。F 如果染色体数是如果染色体数是2n，但不是正常的，但不是正常的23对，而是个，而是个别染色染色体增加，其他染色体相体增加，其他染色体相应减少，称减少，称为假二倍体假二倍体(pseudodiploid)。在急白血病和。在急白血病和恶性淋巴瘤等疾病常可性淋巴瘤等疾病常可见到到多种非整倍体异常。多种非整倍体异常。F 嵌合体嵌合体(mosaic)：同一个体具有两种或两种同一个体具有两种或两种以上不同核型的以上不同核型的细胞，称胞，称为嵌合体。嵌合体。F 分分为性染色体嵌合体和常染色体嵌合体，常性染色体嵌合体和常染色体嵌合体，常见于先天性疾病。人体于先天性疾病。人体恶性性肿瘤瘤细胞核型的改胞核型的改变不能算嵌合体。不能算嵌合体。F 2染色体染色体结构的异常构的异常F 导致染色体致染色体结构改构改变的机制是断裂及断裂后的重的机制是断裂及断裂后的重排。染色体的断裂可以是自排。染色体的断裂可以是自发的，也可是致畸的，也可是致畸变因因素引起的。素引起的。F 常常见的染色体的染色体结构异常有如下几种：构异常有如下几种：缺失缺失(deletion，Del)：是指染色体是指染色体长臂或短臂臂或短臂部分部分节段的段的丢失，包括末端缺失和中失，包括末端缺失和中间缺失；如急缺失；如急性性单核核细胞白血病的胞白血病的del(11)(q23)，即是在，即是在l 1号染色号染色体体长臂臂2区区3带断裂，末端缺失。断裂，末端缺失。2染色体染色体结构的异常构的异常F倒位倒位(inversion，inv)：一条染色体两一条染色体两处断裂后，形成三个断片，中断裂后，形成三个断片，中间断片作断片作180倒倒转后又重新接合，即倒位。臂内倒后又重新接合，即倒位。臂内倒位是指染色体的位是指染色体的长臂或短臂内臂或短臂内发生的倒位；臂生的倒位；臂间倒倒位是指两位是指两处断裂分断裂分别发生于生于长臂和短臂，中臂和短臂，中间含着含着丝粒的断片倒粒的断片倒转而再接合。如而再接合。如inv(3)(q2lq26)就是就是3号染色体号染色体长臂内的倒位。臂内的倒位。2染色体染色体结构的异常构的异常F 易位易位(translocation，t)：指染色体断裂的指染色体断裂的断片离开原来位置而接到同一条染色体的另一断片离开原来位置而接到同一条染色体的另一处或或另一条染色体上，从而造成染色体的重排。另一条染色体上，从而造成染色体的重排。F 无着无着丝粒的断片易位到同一染色体的另一部位粒的断片易位到同一染色体的另一部位又称又称移位移位；无着；无着丝粒的断片易位到另一染色体上又粒的断片易位到另一染色体上又称称转位位；两个染色体；两个染色体发生断裂后相互交生断裂后相互交换片段称片段称相相互易位互易位(reciprocal translocation)。F 易位是白血病、淋巴瘤中常易位是白血病、淋巴瘤中常见的染色体的染色体结构异构异常常。2染色体染色体结构的异常构的异常F 环状染色体状染色体(ring chromosome)：当染色体的当染色体的长臂和短臂两末端臂和短臂两末端处断裂，两端断面相互断裂，两端断面相互连接，即形接，即形成成环状染色体，状染色体，环状染色体在状染色体在辐射射损伤时常常见。2染色体染色体结构的异常构的异常F 等臂染色体等臂染色体(isochromosome，i)：由于染由于染色体的分裂不是色体的分裂不是纵裂，而是横裂，裂，而是横裂，结果果产生的两条新生的两条新染色体，一条有原来染色体的两条染色体，一条有原来染色体的两条长臂而没有短臂，臂而没有短臂，而另一条而另一条则只有原来染色体的两条短臂而没有只有原来染色体的两条短臂而没有长臂，臂，这种染色体称种染色体称为等臂染色体等臂染色体。2染色体染色体结构的异常构的异常F 脆性位点脆性位点(fragile site)：指在接触某种特指在接触某种特殊的化学物殊的化学物质或体外培养条件所出或体外培养条件所出现的非随机的非随机的染色体裂隙、断裂。的染色体裂隙、断裂。3.异常核型的描述异常核型的描述F 异常核型的描述：异常核型的描述：临床多使用床多使用简式描述。式描述。对肿瘤瘤细胞异常核型的描述，胞异常核型的描述，按照按照ISCH对肿瘤瘤细胞命名的原胞命名的原则进行行 染色体数目异常的描述：在染色体号或性染色体前写染色体数目异常的描述：在染色体号或性染色体前写上上“+”或或“一一”号，表示号，表示该染色体增加或染色体增加或丢失；如在染失；如在染色体后写色体后写“+”或或“一一”号，表示号，表示该染色体部分染色体部分获得或部得或部分分丢失，如失，如46，XY，-5，即表示少一条，即表示少一条5号染色体，号染色体，46，XY，5一，即表示一，即表示5号染色体部分缺失。号染色体部分缺失。3.异常核型的描述异常核型的描述 描写描写结构异常，如构异常，如46，XY，t(5；17)(q32；q12)，即表示第，即表示第5号和第号和第17号染色体出号染色体出现相互易位，相互易位，断点在第断点在第5号染色体号染色体长臂第臂第3区第区第2带以及第以及第17号染号染色体色体长臂第臂第l区第区第2带。2.常用常用缩写符号写符号Thank you后面内容直接删除就行资料可以编辑修改使用资料可以编辑修改使用资料仅供参考，实际情况实际分析主要经营：课件设计，文档制作，网络软件设计、图文设计制作、发布广告等秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求感感谢您的您的观看和下看和下载The user can demonstrate on a projector or computer,or print the presentation and make it into a film to be used in a wider field