网织红检测方法学及在现代医疗诊断中的应用-推广会ppt课件.pptx

汪静涛汪静涛迈瑞瑞临床床应用部用部网网织红细胞的胞的检测方法及在方法及在现代代医医疗诊断中的断中的应用用2024/3/9 周六目录网网织红检测方法学方法学现代医代医疗诊断中的断中的应用用网网织红通道的其他通道的其他实际意意义2.l网网织红细胞胞 Reticulocyte,Ret Reticulocyte,Ret介于晚幼介于晚幼红细胞和成熟胞和成熟红细胞之胞之间的的过渡渡阶段段细胞胞其胞其胞质中残存少量核酸物中残存少量核酸物质RNARNARNARNA经碱性染料活体染色后形成碱性染料活体染色后形成蓝色或紫色的点粒状或色或紫色的点粒状或丝网状网状结构构 沉淀物沉淀物网织红细胞定义3.2024/3/9 周六血细胞发育红细胞的胞的发育育骨骨 髓髓外外周周血血4.红细胞的发育原始原始红细胞胞早幼早幼红细胞胞中幼中幼红细胞胞晚幼晚幼红细胞胞网网织红细胞胞成熟成熟红细胞胞大大 小小细胞胞体体积有有 无无细胞胞核核核酸核酸物物质多多少少 无无有核有核红细胞（胞（3d3d）成熟成熟红细胞（胞（120d120d）网网织红细胞胞（2d2d）5.人工人工镜检流式分流式分析析仪网网织红检测仪血液分血液分析析仪检测技术发展简介第四第四级第三第三级第二第二级第一第一级项 目目手工手工镜检流式流式细胞胞仪RETRET测定定仪血液分析血液分析仪检测细胞数胞数1000个（少）10万个（多）32,000个（多）10万个（多）单个个检测时间3060分钟30分钟孵育后检测1分钟 1510RET#15109 9/L/L，常表示无移植并，常表示无移植并发症症,而感染和而感染和输血都不会影响血都不会影响网网织红细胞胞计数。但若数。但若 1510 15109 9/L/L 并伴有中性粒并伴有中性粒细胞和血小板的上胞和血小板的上升，可升，可能提示骨髓移植失能提示骨髓移植失败。骨髓移植后造血功能恢复的监测30.2024/3/9 周六Between January 2008 and July 2009,studied 46 adult patients with hematologic malignancies who underwent allogeneic PBPC transplant:37 related and 9 unrelated grafts未成熟网未成熟网织红细胞和网胞和网织血小板在同种异体移植病人造血恢复的血小板在同种异体移植病人造血恢复的预测价价值20082008年年1 1月至月至20092009年年7 7月月,研究研究恶性血液病患者性血液病患者4646成人接受同种异体成人接受同种异体干干细胞移植胞移植:其中其中37 37 人具有相关性人具有相关性骨髓移植后造血功能恢复的监测31.2024/3/9 周六Fig.Evaluation of leukocytes(WBC),platelets(PLT),immature reticulocyte fraction(IRF),and immature platelet fraction(IPF)in the pre-and posttransplant period.骨髓移植后造血功能恢复的监测32.自体移植后不同自体移植后不同时期期细胞胞变化化 0 5 10 15 20 25 301009080704030206050100（DAY）IRFIRFRetRetPLTPLTWBCWBC自体移植后不同时期细胞变化33.2024/3/9 周六目录网网织红检测方法学方法学现代医代医疗诊断中的断中的应用用网网织红通道的其他通道的其他实际意意义34.PLT-O（光学血小板）2024/3/9 周六PLT是一个常用参数在很多疾病的诊疗过程中有着重要意义功能：止血、血栓、损伤修复。新发现功能：抗感染。（禽流感）临床应用：了解造血功能、感染、化疗；伴随发热的血小板减少：糖尿病、肝硬化等。35.所有的血液分析仪均采用：传统电阻抗法测量PLT，速度快，成本低。但是经常存在电子噪声、大血小板、小红细胞、血小板凝集、破碎红细胞、白血病性白细胞碎片等的干扰。PLT-O（光学血小板）（光学血小板）如此重要的参数，为什么有时报告单上的结果与临床症状不符呢？36.大血小板大血小板PLT-Histogramm(x 1000)PLT-O（光学血小板）（光学血小板）把血小板算成了红细胞结果PLT假性减少37.1.冷凝集（37水浴预温20min）2.EDTA依赖型血小板聚集（更换抗凝剂冲抽或加入1%丁胺卡那）血小板聚集血小板聚集(x 400)PLT-O（光学血小板）（光学血小板）把血小板算成了白细胞结果PLT假性减少38.细胞碎片干胞碎片干扰PLT-O（光学血小板）（光学血小板）细胞碎片算作血小板结果PLT假性增加39.不是检验科的工作没有做好，这是因为以前的技术水平还不能实现：以低廉的价格，很少的分析时间，得到正确的结果。2024/3/9 周六对于于这些干些干扰，以前的做法：，以前的做法：相差显微镜流式分析仪是检验科不想做好吗？还是另有隐情？那怎么解决那怎么解决这个漏洞呢？个漏洞呢？40.临床案例1：溶血性贫血某医院血液科，儿科住院部绑定网织红。患者，男，41岁，血液内科门诊患者，2013年5月16日抽取抗凝静脉血进行血常规测试，后诊断为溶血性贫血。背景信息人工镜检信息镜下观察可见：1 淋巴细胞2 盔形红细胞3 泪滴状红细胞4、5红细胞碎片6 血小板1234561.BC-6800结果界面临床案例1：溶血性贫血42.简要定义：由于各种原因使红细胞生存时间缩短，破坏增多或加速，而骨髓的代偿造血功能不足以补偿其损耗所发生的一类贫血;（正常样本）（溶血性贫血样本）43.正常样本模板红细胞碎片临床案例1：溶血性贫血44.BC-6800研究界面报告单结果界面光学血小板（PLT-O）反映了正确的血液学特征报告了正确的结果！临床案例1：溶血性贫血45.上海交通大学医学院附属瑞金医院，是一所三级甲等大型综合性教学医院名列：全国前列。46医院背景临床案例2：血小板聚集n农村患者，男，41岁，咳嗽，发热；到当地卫生所就诊按普通感冒处理，查血常规发现PLT严重偏低；感冒症状消失，患者多次复查血常规，PLT结果一直严重偏低，当地医院查不出PLT严重偏低的原因。n患者非常担心自己得了什么绝症（患者实际已经恢复正常），到上海市第一人民医院查找PLT偏低的原因。nLH-750仪器提示PLT聚集，科室手工镜检后备注：血小板成簇可见（蓝盖枸橼酸纳抗凝管），RBC无明显异常。患者初次就诊患者二次就诊46.47l患者不放心，又到交大瑞金医院检查，医院开始把患者样本放在LH755上检测PLT结果严重偏低，同时提示“血小板聚集”；再把样本在XE-5000上检测PLT还是偏低，同时也提示“血小板聚集”；医生在BC-6800上检测一次，PLT检测结果正常，同时也提示“血小板聚集”。老老师很震惊很震惊，最后，最后医生按医生按BC-BC-68680000的的结果果报告告。l患者看到PLT结果正常，那种心情无法形容，一块石头终于落地。患者三次就诊终于得到满意结果临床案例2：血小板聚集47.48PLTPLT结果果报：135135报“PLTPLT聚集，聚集，PLTPLT直方直方图异常异常报警警”BC-6800数据PLT-O 135PLT-O 135 PLT-I 2 PLT-I 2PLT聚集样本彰显PLT-O强大分析能力48.数据比对医院检测仪器提示提示报告结果社区卫生院某三分类PLT严重偏低镜检血小板聚集危急值（50）上海第一人民医院LH-750PLT严重偏低血小板聚集19上海瑞金医院LH-755PLT严重偏低血小板聚集20BC-6800BC-6800PLT-IPLT-I严重偏低重偏低自自动切切换到到PLT-OPLT-O血小板聚集血小板聚集135135PLT聚集样本彰显PLT-O强大分析能力49.这不是一个孤立的事件2013年1-4月，解放军总医院，检验科乐家新主任在科室内部做了相关调查：假性血小板减低：2200例(其中EDTA依赖 21例)；脂质干扰1700余例RBC冷凝集：30例；纠正血液系统疾病：46例(其中白血病21例)50.对于PLT聚集样本：为什么RET通道的PLT-O更可靠？1、检测前通过反应池的搅拌杆混匀，打散了部分聚集血小板；2、使用DR稀释液对血细胞进行了球形化处理，部分聚集的PLT被球形化后自动散开。3、荧光染色后，通过收集前向散射信号（细胞体积）、荧光信号（细胞核酸含量）在散点图上可以非常清楚的将PLT与RBC分开，即使通过前面两个步骤仍然聚集的PLT也会被划分到PLT一边（在阻抗通道中往往被划分到RBC一边）。51.苏州大学第一附属医院采集PLT聚集样本，对比分析发现：PLT_O值更加接近于真值说明：PLT在受到聚集干扰时，PLT-o值与真值较接近，且有很好的相关性。PLT聚集模拟实验1.网织红相关参数（RET%、IRF）的应用：各种贫血的诊断、分型贫血的疗效观察监测白血病和肿瘤放、化疗对骨髓造血功能影响的监测骨髓移植后造血功能恢复的监测光学血小板（PLT-O）的应用核酸荧光染色，由荧光强度提供RNA信息进行内部结果的确认和计数，不受贫血、细胞碎片、幼稚血小板等干扰结果更准确小结53.谢 谢！54.