医疗机构消毒监测技术.ppt

1医疗机构消毒监测技术问 题 1、目前是否开展医疗机构消毒监测工作？2、主要开展哪些检测项目？3、检测技术方面存在哪方面的困难？汇总问题1、一部分CDC开展监测工作；一部分CDC不开展；个别CDC采样后送市CDC检测；个别CDC以前做过，目前不做；还有些CDC是时做时不做，工作断断续续；还有的CDC说刚接手工作，不太清楚状况。2、开展空气、医护人员手、物表等监测项目的较多。医院消毒是预防医院内感染的重要措施之一，消毒效果的监测是评价其消毒设备运转是否正常、消毒药剂是否有效、消毒方法是否合理、消毒效果是否达标的唯一手段，因而在医院消毒、灭菌工作中必不可少。5内内 容容一、检测依据是什么？一、检测依据是什么？二、应具备什么条件？二、应具备什么条件？三、检测项目如何做？三、检测项目如何做？六、六、6法律、条例传染病防治法传染病防治法突发公共卫生事件管理条例突发公共卫生事件管理条例医疗废物管理条例医疗废物管理条例病原微生物实验室生物安全条例病原微生物实验室生物安全条例公共场所卫生管理条例公共场所卫生管理条例7部门规章、规范消毒管理办法消毒管理办法医院感染管理规范医院感染管理规范医院消毒技术规范医院消毒技术规范公共场所集中空调卫生管理办法公共场所集中空调卫生管理办法消毒技术规范（消毒技术规范（2002年版）年版）内镜清洗消毒技术操作规范内镜清洗消毒技术操作规范医疗机构口腔诊疗器械消毒技术操作规范医疗机构口腔诊疗器械消毒技术操作规范血液透析器复用操作规范血液透析器复用操作规范医务人员艾滋病病毒职业暴露防护工作指医务人员艾滋病病毒职业暴露防护工作指导原则导原则医疗机构传染病预检分诊管理办法医疗机构传染病预检分诊管理办法医疗卫生机构医疗废物管理办法医疗卫生机构医疗废物管理办法8医院消毒效果监测的评价标准医院消毒效果监测的评价标准医院消毒卫生标准医院消毒卫生标准GB15982-1995消毒与灭菌效果的评价方法与标准消毒与灭菌效果的评价方法与标准 GB15981-1995一次性使用医疗用品卫生标准一次性使用医疗用品卫生标准GB15980-1995消毒技术规范（消毒技术规范（2002年版年版）内镜清洗消毒技术操作规范（内镜清洗消毒技术操作规范（2004年版年版）医疗机构污水排放要求医疗机构污水排放要求GB18466-2005 医院洁净手术部建筑技术规范医院洁净手术部建筑技术规范GB50333-20029医院监测应具备的条件1.实验室要求：相对正压洁净的条件进实验室要求：相对正压洁净的条件进行试验。行试验。环境：环境：100级空气洁净实验室；级空气洁净实验室；100级空气洁净操作台级空气洁净操作台设备：设备：P2生物安全柜生物安全柜 生化培养箱生化培养箱霉霉菌培养箱菌培养箱 等其他设备等其他设备2.建立质量控制体系：样品建立质量控制体系：样品结果报告结果报告全过程控制。（明确样品采集重要性，如全过程控制。（明确样品采集重要性，如果采样时造成污染，整个检测过程都是白果采样时造成污染，整个检测过程都是白费，不准确的结果报告会给实验室增加不费，不准确的结果报告会给实验室增加不必要的麻烦必要的麻烦被检单位的不信任、甚至会被检单位的不信任、甚至会导致法律诉讼）导致法律诉讼）10医院监测应具备的条件3.仪器、设备、定期计量认证仪器、设备、定期计量认证4.人员人员:监测人员需经过专业培训，掌握一定的消监测人员需经过专业培训，掌握一定的消毒知识，熟悉消毒设备和药剂性能，具备毒知识，熟悉消毒设备和药剂性能，具备熟悉的检验技能；选择合理的采样时间熟悉的检验技能；选择合理的采样时间（消毒后、使用前）（消毒后、使用前）;遵循严格的无菌操作。遵循严格的无菌操作。11医院各类环境分类医院各类环境分类对不同的区域和环境，要求也不同。国家标准GB15982-1995将医院环境分为四类，II，III，IV。I类，层流洁净手术室，层流洁净病房II类，普通手术室，产房，婴儿室，早产儿室，普通隔离室，供应室无菌区，烧伤病房，重症监护病房III类，儿科病房，妇产检查室，注射室，换药室，治疗室，供应室，清洁区。急诊抢救室，化验室，各类普通病房IV类，传染科及病房4、我国医院各类环境空气细菌菌落总数卫生标准表3 我国医院各类环境空气细菌菌落总数卫生标准环境类别 范 围 标准（cfu/cm2）I类 层流洁净手术室、层流洁净病房 10 II类 普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、烧伤病房、重症监护病房、供应室无菌区、普通保护性隔离区200 III类 儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房500 13监测的主要项目监测的主要项目1.空气消毒效果的监测2.物品和环境表面消毒效果的监测2、物体表面的消毒效果监测3.手和皮肤黏膜消毒效果监测4.使用中消毒液的监测：常用消毒液有效成分测定、使用中消毒液染菌量测定5.压力蒸汽灭菌效果监测方法：压力蒸汽灭菌、干热灭菌的效果监测、过氧化氢低温等离子灭菌和低温甲醛蒸汽灭菌的效果监测、环氧乙烷气体灭菌效果的监测6.医疗机构污水消毒效果的监测；清洁与清洗效果监测7.医疗器械灭菌效果的监测；紫外线消毒的效果监测（紫外线灯辐照度值的测定、生物监测法）8.内镜消毒灭菌效果的监测；清洁用品的消毒效果监测9、致病菌的检测181.1 采采样样时时间间：在消毒处理后、操作前进行采样。采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；未采用洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样；或怀疑与医院感染暴发有关时采样。1、空气消毒效果的监测、空气消毒效果的监测1、空气消毒效果的监测、空气消毒效果的监测1.2 采样方法：平板暴露法采样方法：平板暴露法 布布点点：室内面积30m2,设内、中、外对角线3点，内外点布点部位距墙壁1M处；室内面积30m2，设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1M处。将普通营养琼脂平板（直径为9）放在室内各采样点处，将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5min,盖好立即送检。同时做阴性对照，不揭盖。201.1 采采样样时时间间：在消毒处理后、操作前进行采样。1.2 采样方法：平板暴露法采样方法：平板暴露法 布布点点：室内面积30m2,设内、中、外对角线3点，内外点布点部位距墙壁1M处；室内面积30m2，设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1M处。将普通营养琼脂平板（直径为9）放在室内各采样点处，将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5min,盖好立即送检。同时做阴性对照，不揭盖。1、空气消毒效果的监测、空气消毒效果的监测21空气采样布点方法图空气采样布点方法图 1 2 3 1 2 3 4 5 室内面积室内面积30m2室内面积室内面积30m2221.3 检测方法：检测方法：将平板放置于37培养箱培养48h后计数。1.4 计算公式：计算公式：空气细菌菌落总数（空气细菌菌落总数（cfu/m）=50000N/（A T）A为平板面积（为平板面积（cm2)，T为暴露时间（为暴露时间（min)，N为平均菌落数。为平均菌落数。致病菌的检测：致病菌的检测：金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌1.5 注意事项：注意事项：采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止10min进行采样。采样高度选择与地面垂直高度150cm。1.6检测依据：检测依据：消毒技术规范2002版3.17.823空气监测数值对照表空气监测数值对照表注：菌落数单位为cfu；/3表示某3个平皿的采样点，除以3得空气细菌总数单位为cfu/m3。241.6 结果判定结果判定：类区域：细菌总数10cfu/m3(或0.2cfu/平板)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格；类区域：细菌总数200cfu/m3(或4cfu/平板)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格；类区域：细菌总数500cfu/m3(或10cfu/平板)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格。252.1 采样时间：在消毒处理后采样时间：在消毒处理后4h内进行采样。内进行采样。在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采样。样。2.2 采采样样方方法法：用55的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积1002，连续采样4个，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。2.物品和环境表面消毒效果的监测物品和环境表面消毒效果的监测262.3 检测方法：检测方法：2.3.1 细菌总数检测：倾注法细菌总数检测：倾注法倾注法是指倾注法是指将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80次，用无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，内加入已融化的4548的营养琼脂营养琼脂15ml18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置361 温箱培养48h，计数菌落数。采样结果计算方法：采样结果计算方法：细菌总数细菌总数(cfu/cm2)平板上菌落数平板上菌落数 稀释倍数稀释倍数 采样面积采样面积(cm2)2.3.2 致病菌检测：致病菌的检测依据污染情况进行相应指标致病菌检测：致病菌的检测依据污染情况进行相应指标的检测。如：金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、沙门氏菌。的检测。如：金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、沙门氏菌。2.4 检测依据：检测依据：消毒技术规范消毒技术规范2002版版3.17.7 27某医院3手术室托盘，两平板上分别生长菌落数为2cfu和2cfu，平均菌落数为多少？细菌总数为多少？28某医院3手术室托盘，两平板上分别生长菌落数为2cfu和2cfu，平均菌落数为2cfu。细菌总数为多少？不知道采样面积，不能计算。告诉你采样面积为100cm2,则细菌总数为多少？若物品面积未达到100cm2,仅75cm2,怎么办？29某医院3手术室托盘，两平板上分别生长菌落数为2cfu和2cfu，平均菌落数为2cfu。细菌总数为多少？不知道采样面积，不能计算。告诉你采样面积为100cm2,则细菌总数为多少？2*10/100=0.2 cfu/cm2若物品面积未达到100cm2,仅75cm2,怎么办？302.4 结果判定结果判定、类区域：细菌总数5cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。类区域细菌：细菌总数10cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。类区域细菌：细菌总数15cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门氏菌。312.5 注意事项注意事项采样面积采样面积：被采表面100/cm，取全部表面；被采表面100 cm，取100 cm。门把手等不规则物体表面用面拭子直接涂擦采样，用cfu/件表示。32检检测测依依据据：消消毒毒技技术术规规范范2002版版3.17.6 3.1 采采样样时时间间：在接触病人和从事医疗活动前进行采样或消毒后立即采样。3.2 采样方法：采样方法：被检人五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双双手手指指屈屈面面从指根到指端往返涂擦2次（一一只只手手涂涂擦擦面面积积约约302），并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。3.手和皮肤黏膜消毒效果监测手和皮肤黏膜消毒效果监测333.3 检测方法：倾注法，按检测方法：倾注法，按2.3的原则执行。的原则执行。3.4 结果判定结果判定：、类区域工作人员：细菌总数5cfu/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单孢菌为消毒合格。类区域工作人员：细菌总数10cfu/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。类区域工作人员：细菌总数15cfu/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的工作人员手上，不得检出沙门氏菌、大肠杆菌、溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌为消毒合格。皮肤黏膜:参照手的卫生学标准执行。3.4 注意事项：采样面积约为注意事项：采样面积约为30cm22。34被检测人员张三，检测后两个平板分别生长菌落数为6和7cfu，平均菌落数为6.5cfu。细菌菌落总数为多少？35被检测人员张三，检测后两个平板分别生长菌落数为6和7cfu，平均菌落数为6.5cfu。细菌菌落总数为多少？6.5cfu*10/30cm2=这么计算是否正确？36被检测人员张三，检测后两个平板分别生长菌落数为6和7cfu，平均菌落数为6.5cfu。细菌菌落总数为多少？采样必须双手都采，因而6.5cfu*10/60cm2=37医院各类环境空气、物表、医护人员手细医院各类环境空气、物表、医护人员手细菌菌落总数卫生标准菌菌落总数卫生标准对不同的区域和环境，要求也不同。国家标准GB15982-1995将医院环境分为四类，II，III，IV。I类，层流洁净手术室，层流洁净病房，空气要求10cfu/m3，物表5cfu/cm2，医护人员手5cfu/cm2II类，普通手术室，产房，婴儿室，早产儿室，普通隔离室，供应室无菌区，烧伤病房，重症监护病房，空气200cfu/m3，物表5cfu/cm2，医护人员手5cfu/cm238III类，儿科病房，妇产检查室，注射室，换药室，治疗室，供应室，清洁区。急诊抢救室，化验室，各类普通病房，空气要求500cfu/m3，物表10cfu/cm2，医护人员手10cfu/cm2IV类，传染科及病房，物表15 cfu/cm2，医护人员手15 cfu/cm2以上14类都不得检出致病性微生物，如：乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面和医务人员不得检出沙门氏菌。394.1 采采样样时时间间:采取更换前使用中消毒液与无菌器械保存液。4.2 采样方法：采样方法：测定使用中消毒液染菌量用无菌吸管吸取消毒液1.0ml，加入到9.0ml含相应中和剂的无菌肉汤采样管中混匀。4.3 检检测测方方法法：倾倾注注法法，将一平板置20培养7d,观察霉菌生长情况；另一平板置361 培养72h，计数菌落数，同时检测致病菌（金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、铜绿假单胞菌）。消消毒毒液液染染菌菌量量（cfu/ml）=每每个个平平板板上上的的菌菌落数落数稀释倍数稀释倍数4.使用中消毒液的监测使用中消毒液的监测404.4 结果判断结果判断：消毒液染菌量100cfu/ml，并未检出致病菌为合格。致病菌如：溶血性链球菌GB4789.11,沙门氏菌GB4789.4，绿脓杆菌GB7918.4，金黄色葡萄球菌GB7918.5。4.5 注意事项注意事项:4.5.1 不同消毒剂使用与之相对应的中和剂中和，以中和被检液的残效作用。4.5.2 采集消毒液样品时应在消毒液内没有物品或放入物品消毒作用到规定时间之后进行采样。4.5.3 采样后1h内检测。4.6 检测依据：检测依据：消毒技术规范消毒技术规范2002版版3.17.9.241消消毒毒液液类类别别醇类与酚类含氯、含碘、过氧化物氯己定（洗必泰）季胺盐类醛类含有表面活性剂的各种复方消毒液相相应应的的中中和和剂剂普通营养肉汤在肉汤中加入中和剂0.1%硫代硫酸钠在肉汤中加入3%（w/v）吐温80和0.3%卵磷脂在肉汤中加入0.3%甘氨酸在肉汤中加入3%（w/v）吐温80消毒液与相对应的中和剂消毒液与相对应的中和剂参照表参照表425.压力蒸汽灭菌效果监测方法压力蒸汽灭菌效果监测方法化学监测法化学监测法1）化学指示卡(管)监测方法2）化学指示胶带监测法3）B-D试验生物监测法生物监测法指示菌株：指示菌株：指示菌株为耐热的嗜热脂肪杆菌芽孢（ATCC7953或SSIK31株），菌片含菌量为5.0105cfu/片至5.0106cfu/片。43培养基：培养基：试验用培养基为溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基。采样方法：采样方法：将压力蒸汽灭菌生物培养指示剂放于标准测试包中，按照国家规范，分别将测试包放于锅内不同位置，灭菌完毕，送检。检测方法：检测方法：在无菌条件下，取出标准试验包或通气贮物盒中的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，经561 培养7d(自含式生物指示物按说明书执行)，观察培养基颜色变化。检测时设阴性对照和阳性对照。44 结结果果判判定定：每个指示菌片接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基都不变色，判定为灭菌合格；指示菌片之一接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基，由紫色变为黄色时，则灭菌过程不合格。注意事项注意事项监测所用化学指示卡及菌片须经卫生部认可，并在有效期内使用。生物指示物监测应1月1次。检测依据：检测依据：消毒技术规范消毒技术规范2002版版3.17.2 456.6.医疗器械灭菌效果的监测医疗器械灭菌效果的监测 采样时间采样时间：在灭菌处理后，存放有效期内采样。检测方法检测方法：倾注法和无菌检验对可用破坏性方法取样的医疗用品，如：输液器，注射器和注射针等均作无菌检验。对不能用破坏性方法取样的特殊医疗用品，检测细菌菌落总数 检测依据：检测依据：消毒技术规范消毒技术规范2002版版2.1.9.2 46对不能用破坏性方法取样的特殊医疗用品，检测细菌菌落总数。缝合针、针头、手术刀片缝合针、针头、手术刀片等件医疗器械各5件，分别投入5ml的无菌洗脱液中。注射器注射器则取5副在5ml无菌肉汤中分别抽吸5次。手术钳、镊子手术钳、镊子等大的医疗器械取2件，用棉拭子反复涂擦采样，将棉拭子投入5ml无菌洗脱液中。检测方法：检测方法：振打80次,吸取1ml 接种平皿做活菌计数，37培养48h，计算细菌菌落总数。结果判定结果判定：平板上无菌生长为灭菌合格。注意事项注意事项：若消毒因子为化学消毒剂时,采样液中应加入相应的中和剂。47无菌检验注意事项：1、在洁净度100级区域中进行，严格无菌操作。2、采样后送检时间不得超过6h，样品保存于4，则不超过24h。3、如消毒因子为消毒剂，采样液中应加入中和剂。4、采样面积，100cm2。487.7.内镜消毒灭菌效果的监测内镜消毒灭菌效果的监测化学监测：含氯消毒剂、2%戊二醛等应每日监测。生物监测：采样部位为内镜的内腔面检测依据：内镜清洗消毒技术操作规范（2004年版）采样方法：采样方法：用无菌注射器抽取10毫升含相应中和剂的缓冲液，从待检内镜活检口注入，用15毫升无菌试管从活检口收集，及时送检，2小时内检测，同时做致病菌监测。49菌落计数：菌落计数：将送检液用旋涡器充分震荡，取0.5ml，加入2只直径90mm无菌平皿，每个平皿分别加入已经熔化的45-48营养琼脂15ml-18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，于35培养48小时后计数。结果判断：结果判断：菌落数/件=2个平皿菌落数平均值稀释倍数。致病菌检测：致病菌检测：将送检液用旋涡器充分震荡，取0.2ml分别接种90mm血平皿、中国兰平皿和SS平皿，均匀涂布，35培养48小时，观察有无致病菌生长。50 评价标准评价标准:消毒后的内镜合格标准为：细菌总数20cfu/件，不能检出致病菌；灭菌后内镜合格标准为：无菌检测合格。内镜消毒监测注意事项：内镜消毒监测注意事项：消毒剂浓度监测每日定时监测并做好记录，保证消毒效果。消毒剂使用时间不得超过产品说明书规定的使用期限。消毒后内镜（如胃镜、肠镜、喉镜、气管镜、鼻窦镜等）应每季度进行生物学监测并做好监测记录，其合格标准为细菌总数20cfu/件，不得检出致病菌。灭菌后内镜（如腹腔镜、关节镜、胆道镜、膀胱镜、胸腔镜、脑室镜等）应每月进行生物学监测并做好记录，合格标准为无菌生长。518.8.医疗机构污水监测医疗机构污水监测（目前由环保部门承担）（目前由环保部门承担）检测依据：GB18466-2005.附录A4、B4、C4。污水监测项目：总余氯、粪大肠菌群、肠道致病菌；结核病医疗机构增测结核杆菌。总余氯：采用含氯消毒剂消毒时，接触池出口总余氯每日监测不得少于2次次（采用间歇式消毒处理的，每次排放前监测）。粪大肠菌群：每月检测不得少于1 次。致病菌：每年检测不得少于4次。主要检测沙门菌和志贺菌，结核病医疗机构检测结核杆菌。52总余氯的检测日常监测一般采用比色计（邻联甲苯胺比色法）：在含5ml样品的比色管内滴加邻联甲苯胺溶液2滴3滴，混匀，置暗处15 min，与永久性余氯标准比色溶液比色测定。检测温度应控制在1520；余氯过高会产生桔黄色，碱度过高或余氯很低时可能会产生淡蓝绿色或淡蓝色，应多加1ml 1:2的盐酸或1ml 邻联甲苯胺溶液，即可产生正常的淡黄色进行比色测定。53样品准备:污水样品应至少取200mL，使用前应充分混匀。若样品为经过氯消毒的污水，应在采样后立即用5硫代硫酸钠溶液充分中和余氯。粪大肠菌群的检测粪大肠菌群的检测54552.发酵试验将样品接种于装有乳糖胆盐培养液的试管（内有小倒管）中，44培养培养24h。样品接种体积以及管内乳糖胆盐培养液的浓度与体积根据以下条件确定：样品为污水时，取三个接种量、每个接种量的样品分别接种于5个试管内，共需15个试管。接种量为10mL-5mL三倍浓度乳糖胆盐培养液接种量为1mL-10mL普通浓度乳糖胆盐培养液接种量少于1mL-吸取1mL稀释样品接种于装有10mL普通浓度乳糖胆盐培养液563.平板分离大肠杆菌分解乳糖产酸时培养液变色、产气时小倒管内出现气泡。经24h培养后，将产酸的试管内培养液分别划线接种于EMB培养基上。置于37培养箱中，培养1824h。4.鉴定挑选可疑粪大肠菌群菌落，进行革兰氏染色和镜检。可疑菌落有：1）深紫黑色，具有金属光泽的菌落；2）紫黑色，不带或略带金屑光泽的菌落；3）淡紫红色，中心色较深的菌落。57 上述涂片镜检的菌落如为革兰氏阴性无芽孢杆菌，则挑取上述典型菌落13个接种于盛有5mL乳糖蛋白胨培养液倒管和倒管的试管内，置于44培养箱中培养24h。产酸产气试管为粪大肠菌群阳性管。5.计数根据证实有粪大肠菌群存在的阳性管数，查表可得100mL污水中粪大肠菌群MPN值。58谢谢 谢谢 ！