1、医院感染病原学医院感染病原学岳阳市二人民医院院感科岳阳市二人民医院院感科 李义红李义红2人体正常微生物群人体正常微生物群正常人体表和与外界相通的开放性部位存正常人体表和与外界相通的开放性部位存在的微生物群。一般不致病,有益无害在的微生物群。一般不致病,有益无害包括细菌、病毒、真菌、衣原体、支原体包括细菌、病毒、真菌、衣原体、支原体等等 以细菌的数量最多,因此通称为正常菌群以细菌的数量最多,因此通称为正常菌群 原籍菌原籍菌:固有菌群固有菌群(常居菌常居菌),长期寄住于皮肤长期寄住于皮肤粘膜粘膜,在一定年龄和一定部位相对固定。在一定年龄和一定部位相对固定。外籍菌外籍菌:暂居菌暂居菌,暂时寄生在皮肤
2、粘膜上的来暂时寄生在皮肤粘膜上的来源源 于外环境的非致病菌和潜在致病菌。于外环境的非致病菌和潜在致病菌。3部位部位主要微生物种类主要微生物种类皮肤皮肤表葡、类白喉杆菌、铜绿、丙酸杆菌非致病性奈瑟菌等表葡、类白喉杆菌、铜绿、丙酸杆菌非致病性奈瑟菌等口腔口腔甲型和乙型链球菌、乳酸杆菌、梭形杆菌、表葡、肺炎甲型和乙型链球菌、乳酸杆菌、梭形杆菌、表葡、肺炎球菌、奈瑟球菌、类白喉杆菌、螺旋体、放线菌、白假球菌、奈瑟球菌、类白喉杆菌、螺旋体、放线菌、白假丝酵母等丝酵母等鼻咽腔鼻咽腔甲型链球菌、奈瑟球菌、肺炎球菌、流感杆菌、乙型链甲型链球菌、奈瑟球菌、肺炎球菌、流感杆菌、乙型链球菌、葡萄球菌、铜绿、大肠埃希
3、菌、变形杆菌等球菌、葡萄球菌、铜绿、大肠埃希菌、变形杆菌等外耳道外耳道葡萄球菌、类白喉棒状杆菌、铜绿、非致病分枝杆菌等葡萄球菌、类白喉棒状杆菌、铜绿、非致病分枝杆菌等眼结膜眼结膜表葡、结膜干燥杆菌、类白喉杆菌等表葡、结膜干燥杆菌、类白喉杆菌等肠道肠道类杆菌、双歧杆菌、大肠埃希、厌氧性链球菌、粪链球类杆菌、双歧杆菌、大肠埃希、厌氧性链球菌、粪链球菌、葡萄球菌、白假丝酵母、乳酸杆菌、变形杆菌、破菌、葡萄球菌、白假丝酵母、乳酸杆菌、变形杆菌、破伤风杆菌、产气荚膜杆菌等伤风杆菌、产气荚膜杆菌等阴道阴道乳酸杆菌、白假丝酵母、类白喉杆菌、大肠埃希菌等乳酸杆菌、白假丝酵母、类白喉杆菌、大肠埃希菌等尿道尿道表
4、葡、类白喉杆菌、耻垢杆菌等表葡、类白喉杆菌、耻垢杆菌等4正常菌群对人体的作用正常菌群对人体的作用正常正常情况下情况下正常正常菌群对宿主有利。菌群对宿主有利。1、菌群之间能相互制约而维持其微生态平衡,、菌群之间能相互制约而维持其微生态平衡,通过争夺营养物质和空间位置,产生代谢通过争夺营养物质和空间位置,产生代谢物物 等来杀伤侵入的有害细菌。等来杀伤侵入的有害细菌。2、细胞成分或代谢产物能激发宿主防御机制、细胞成分或代谢产物能激发宿主防御机制的的 发育。发育。3、有些微生物能在肠道内合成一些维生素。、有些微生物能在肠道内合成一些维生素。4、生物屏障作用。、生物屏障作用。5细菌的定植和抗定植细菌的定
5、植和抗定植细菌定植条件:黏附能力细菌定植条件:黏附能力 满足生活必需的条件满足生活必需的条件 逃避或对抗人体的防御逃避或对抗人体的防御 一定数量一定数量正常菌群的抗定植:正常菌群能相对的保持正常菌群的抗定植:正常菌群能相对的保持稳稳 定,新来的微生物不易定,新来的微生物不易定植定植6细菌的定植和抗定植细菌的定植和抗定植n定植抵抗力:一种已定植的细菌具有抑制定植抵抗力:一种已定植的细菌具有抑制其他其他 细菌定植的能力细菌定植的能力n去污染:减少或消灭患者的一部分正常菌去污染:减少或消灭患者的一部分正常菌群或群或 定植细菌定植细菌 保护性隔离保护性隔离防止外源性感染防止外源性感染 控制定植菌控制定
6、植菌防止内源性感染防止内源性感染 如复方新诺明抑制肠道需氧菌,如复方新诺明抑制肠道需氧菌,可扶可扶 植厌氧菌的定植抵抗力水平。植厌氧菌的定植抵抗力水平。7常见医院感染病原体常见医院感染病原体n按来源分:内源性、外源性按来源分:内源性、外源性n大部分为人体正常菌群的转移菌或条件致大部分为人体正常菌群的转移菌或条件致病菌,对某些环境有特殊适应性(如表葡病菌,对某些环境有特殊适应性(如表葡和不动杆菌,可粘附于塑料表面)和不动杆菌,可粘附于塑料表面)n常为多重耐药菌株常为多重耐药菌株:对抗生素有较强较广耐对抗生素有较强较广耐药药n常侵犯免疫功能低下的宿主:如老年人;常侵犯免疫功能低下的宿主:如老年人;
7、血液病、肝硬化、糖尿病、恶性肿瘤等基血液病、肝硬化、糖尿病、恶性肿瘤等基础疾病的患者;接受各种侵入性操作、器础疾病的患者;接受各种侵入性操作、器官移植等;长期应用广谱抗菌药物、免疫官移植等;长期应用广谱抗菌药物、免疫抑制剂、激素等。抑制剂、激素等。8常见医院感染病原体常见医院感染病原体n葡萄球菌属葡萄球菌属凝固酶阴性:表葡、腐生葡凝固酶阳性:金葡金葡是医院感染的重要病原菌,常见感染部位有下呼吸道、外科伤口、导管相关感染、烧伤部位、泌尿道等。途径:污染的手。从有损伤的皮肤和黏膜进入人体,也可因食入含金葡菌肠毒素或吸入染菌尘埃而致病。可以通过患者之间直接或间接接触引起医院感染暴发。9常见医院感染病
8、原体常见医院感染病原体n肺炎链球菌肺炎链球菌 自然界广泛分布,鼻腔中,多数不致病自然界广泛分布,鼻腔中,多数不致病 能否致病与荚膜关系密切能否致病与荚膜关系密切 主要引起大叶性肺炎及气管炎、中耳炎、主要引起大叶性肺炎及气管炎、中耳炎、脑脑 膜炎、胸膜炎、心内膜炎、败血症等膜炎、胸膜炎、心内膜炎、败血症等 耐青霉素肺炎链球菌(耐青霉素肺炎链球菌(PRSP)10常见医院感染病原体常见医院感染病原体n肠球菌肠球菌 肠道正常菌群的一部分,肠道正常菌群的一部分,G+医院感染最常见的为粪肠球菌,占医院感染最常见的为粪肠球菌,占80-90%,其次是屎肠球菌、鸟肠球菌。,其次是屎肠球菌、鸟肠球菌。可造成泌尿道
9、、血液、心内膜、伤口及下可造成泌尿道、血液、心内膜、伤口及下呼吸道等部位感染。最常见是呼吸道等部位感染。最常见是尿路感染尿路感染。条件致病菌。部分肺部感染为混合感染。条件致病菌。部分肺部感染为混合感染。11常见医院感染病原体常见医院感染病原体n埃希菌属埃希菌属 大肠埃希菌是最常见的临床大肠埃希菌是最常见的临床分离菌,也是肠道分离菌,也是肠道G-杆菌群的主要成员。杆菌群的主要成员。大肠埃希菌居医院感染泌尿道感染病原菌大肠埃希菌居医院感染泌尿道感染病原菌首位,也是首位,也是G-菌败血症最常见的病原菌。菌败血症最常见的病原菌。在肠道内一般不致病,在免疫力低下的患在肠道内一般不致病,在免疫力低下的患者
10、可发生易位引起内源性感染;可通过患者可发生易位引起内源性感染;可通过患者之间及工作人员与患者之间的接触、呼者之间及工作人员与患者之间的接触、呼吸道气溶胶的吸入或各种侵入性操作引起吸道气溶胶的吸入或各种侵入性操作引起外源性感染。外源性感染。可引起泌尿道、腹腔、胆道、血液、可引起泌尿道、腹腔、胆道、血液、下呼吸道等部位的感染。下呼吸道等部位的感染。考点12常见医院感染病原体常见医院感染病原体n克雷伯菌属克雷伯菌属 G-杆菌,内毒素是主要致杆菌,内毒素是主要致病物质。是肠道及上呼吸正常菌群的组成病物质。是肠道及上呼吸正常菌群的组成部分。部分。在住院患者中易发生定植,尤上呼吸道极在住院患者中易发生定植
11、,尤上呼吸道极常见常见 可通过接触患者或呼吸机等医疗器械传播。可通过接触患者或呼吸机等医疗器械传播。不注意洗手,手可成传播感染的重要方式不注意洗手,手可成传播感染的重要方式 可引起呼吸道、泌尿道、伤口及血液等部可引起呼吸道、泌尿道、伤口及血液等部位感染,克雷伯菌肺炎易形成脓肿和位感染,克雷伯菌肺炎易形成脓肿和 坏死。肺克还可引起肠炎和婴儿坏死。肺克还可引起肠炎和婴儿 脑膜炎及败血症。脑膜炎及败血症。13常见医院感染病原体常见医院感染病原体n肠杆菌属肠杆菌属 阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、聚团肠杆菌等,是肠杆菌科中最常见的环聚团肠杆菌等,是肠杆菌科中最常见的环境菌群,但不是肠道
12、的常居菌群。境菌群,但不是肠道的常居菌群。阴沟是呼吸道及消化道正常菌群的组成部阴沟是呼吸道及消化道正常菌群的组成部分分 产气肠杆菌是产生产气肠杆菌是产生AmpC型酶的重要菌之型酶的重要菌之一一2009天津蓟县妇幼保健院新生儿感染天津蓟县妇幼保健院新生儿感染14常见医院感染病原体常见医院感染病原体n假单胞菌属假单胞菌属 非发酵、非发酵、G-需氧杆菌需氧杆菌铜绿假单胞菌:俗称绿脓,产多种水溶性色铜绿假单胞菌:俗称绿脓,产多种水溶性色素,易造成机会性感染,可单一素,易造成机会性感染,可单一/混合感染,混合感染,可发生在人体任何部位和组织,常见于烧可发生在人体任何部位和组织,常见于烧伤或创伤部位、中耳
13、、角膜、尿道和呼吸伤或创伤部位、中耳、角膜、尿道和呼吸道道嗜麦芽窄食单胞菌:常呈多重耐药,对包括嗜麦芽窄食单胞菌:常呈多重耐药,对包括碳青霉烯类在内的碳青霉烯类在内的-内酰胺类、氟喹诺酮内酰胺类、氟喹诺酮类、氨基糖苷类等都可表现为耐药,对泰类、氨基糖苷类等都可表现为耐药,对泰能天然耐药能天然耐药15常见医院感染病原体常见医院感染病原体n不动杆菌属不动杆菌属 需氧需氧G-菌,基本为腐生菌,菌,基本为腐生菌,广泛存在于自然界,新鲜水标本中广泛存在于自然界,新鲜水标本中100%有不动杆菌生长。有不动杆菌生长。常见鲍曼不动杆菌,易在潮湿环境中生存,常见鲍曼不动杆菌,易在潮湿环境中生存,可引起泌尿道、呼
14、吸道、伤口及血液等感可引起泌尿道、呼吸道、伤口及血液等感染,主要通过各种污染器械及手传播。染,主要通过各种污染器械及手传播。ICU是不动杆菌引起感染的多发区,病死率较是不动杆菌引起感染的多发区,病死率较高,与高,与ICU患者年龄大、病情重、机体免疫患者年龄大、病情重、机体免疫力较低、住院时间长、多有侵袭性操作以力较低、住院时间长、多有侵袭性操作以及广泛使用皮质激素和抗生素有关。及广泛使用皮质激素和抗生素有关。16常见医院感染病原体常见医院感染病原体n变形杆菌属变形杆菌属 自然界分布广泛自然界分布广泛(土壤、污土壤、污水、垃圾水、垃圾),普通、奇异变形杆菌引起人的,普通、奇异变形杆菌引起人的原发
15、性和继发性感染,是泌尿道感染主要原发性和继发性感染,是泌尿道感染主要病原菌之一,仅次于大肠埃希菌,可由此病原菌之一,仅次于大肠埃希菌,可由此产生菌血症,还常引起伤口、呼吸道等多产生菌血症,还常引起伤口、呼吸道等多种感染。种感染。17常见医院感染病原体常见医院感染病原体n嗜肺军团菌嗜肺军团菌 广泛存在于自然水体与自来广泛存在于自然水体与自来水等环境中水等环境中 常见医院感染类型:肺炎常见医院感染类型:肺炎 感染途径:吸入带菌气溶胶感染途径:吸入带菌气溶胶 易感因素:吸烟、慢阻肺、饮酒过度、使易感因素:吸烟、慢阻肺、饮酒过度、使用空调设施、使用肾上腺皮质激素或其他用空调设施、使用肾上腺皮质激素或其
16、他免疫抑制剂、年老等。免疫抑制剂、年老等。18常见医院感染病原体常见医院感染病原体n分枝杆菌分枝杆菌 人型和牛型结核分枝杆菌是熟知的致病菌人型和牛型结核分枝杆菌是熟知的致病菌 非结核分枝杆菌非结核分枝杆菌(NTM)广泛分布于自然界,广泛分布于自然界,医院环境表面、医疗器械及其清洗用水中医院环境表面、医疗器械及其清洗用水中存在多种非结核分枝杆菌存在多种非结核分枝杆菌n真菌真菌 白假丝酵母菌、新型隐球菌、曲霉菌白假丝酵母菌、新型隐球菌、曲霉菌 免疫力低下或长期使用广谱抗菌药物时易免疫力低下或长期使用广谱抗菌药物时易发生感染发生感染19常见医院感染病原体常见医院感染病原体n病毒病毒 常见:常见:HB
17、V、HCV、HIV、CMV SARS相关病毒相关病毒 其他:流感病毒、麻疹病毒、柯萨奇病毒、其他:流感病毒、麻疹病毒、柯萨奇病毒、水痘水痘-带状疱疹病毒等带状疱疹病毒等 可经血液可经血液-体液传播,也可经飞沫传播,还体液传播,也可经飞沫传播,还可经器官移植传播。可经器官移植传播。20医院感染病原体变迁医院感染病原体变迁n2020世纪世纪4040年代前年代前 G+G+球菌球菌n2020世纪世纪6060年代年代 G-G-杆菌取代杆菌取代G+G+球菌球菌n近年来近年来 头孢菌素大量应用以及侵入性操头孢菌素大量应用以及侵入性操作增多,在作增多,在G-G-杆菌得到有效控制的同时,杆菌得到有效控制的同时,
18、G+G+球菌呈上升趋势,同时真菌比例增加,球菌呈上升趋势,同时真菌比例增加,病毒、衣原体也成为医院感染的重要病原病毒、衣原体也成为医院感染的重要病原体。体。21病原体的耐药性病原体的耐药性n细菌耐药性:致病微生物对抗菌药物作用细菌耐药性:致病微生物对抗菌药物作用的耐受性或对抗性,是抗菌药物、细菌本的耐受性或对抗性,是抗菌药物、细菌本身及环境共同作用的结果。身及环境共同作用的结果。天然耐药天然耐药 因染色体因染色体DNA突变所致突变所致 获得性耐药获得性耐药 大多由质粒、噬菌体及其他大多由质粒、噬菌体及其他遗传遗传 物质携带外来的物质携带外来的DNA片段所片段所致致n交叉耐药:细菌对同一作用机制
19、药物中不交叉耐药:细菌对同一作用机制药物中不同种同种 类的药物同时耐药类的药物同时耐药n多重耐药:细菌对不同作用机制药物同时多重耐药:细菌对不同作用机制药物同时耐药耐药考点22细菌耐药的机制产生钝化酶,使抗生素灭活或结构改变靶位发生突变,抗生素的亲和力下降细胞膜通透性降低,抗生素进入减少或进入细菌的抗生素被主动排除体外(外排泵)细菌菌膜形成23耐药菌耐药菌 MRSAnMRSAMRSAn定义:凡对甲氧西林、苯唑西林、头孢西定义:凡对甲氧西林、苯唑西林、头孢西丁耐药,或青霉素结合蛋白丁耐药,或青霉素结合蛋白2a2a(PBP2aPBP2a)阳)阳性、性、mecAmecA基因阳性的金黄色葡萄球菌定义基
20、因阳性的金黄色葡萄球菌定义为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSAMRSA)nMRSAMRSA应视为对所有应视为对所有内酰胺类抗生素耐药内酰胺类抗生素耐药n19611961年英国首次报道年英国首次报道MRSAMRSA考点24耐药菌耐药菌 VREnVRE-VRE-耐万古霉素肠球菌耐万古霉素肠球菌n19881988年首次分离于英国伦敦年首次分离于英国伦敦nVREVRE的出现与近年临床大量使用广谱抗生素的出现与近年临床大量使用广谱抗生素和糖肽类抗生素有关和糖肽类抗生素有关n体外证明,体外证明,VREVRE耐药基因可轻易整合到金葡耐药基因可轻易整合到金葡菌,产生一种难治的耐万古
21、霉素金葡菌菌,产生一种难治的耐万古霉素金葡菌25耐药菌耐药菌ESBLsESBLsnESBLsESBLs产超广谱产超广谱-内酰胺酶内酰胺酶n是由质粒介导的、能水解氧亚氨基是由质粒介导的、能水解氧亚氨基-内酰内酰胺类抗生素的一类胺类抗生素的一类-内酰胺酶,对内酰胺酶,对-内内酰胺类抗生素具有广泛水解活性,包括青酰胺类抗生素具有广泛水解活性,包括青霉素类、氧亚氨基头孢菌素和单酰胺类,霉素类、氧亚氨基头孢菌素和单酰胺类,通常不水解通常不水解7-7-甲氧基头孢菌素和碳青霉甲氧基头孢菌素和碳青霉烯类,其活性可被烯类,其活性可被-内酰胺酶抑制剂抑制。内酰胺酶抑制剂抑制。n19831983年德国首次报道年德国
22、首次报道n肺炎克雷伯、产酸克雷伯、大肠埃希菌最肺炎克雷伯、产酸克雷伯、大肠埃希菌最常见常见26耐药菌耐药菌产产KPCKPC酶细菌酶细菌nKPCKPC碳青霉烯酶碳青霉烯酶nKPCKPC可水解包括碳青霉烯类抗菌药物在内的可水解包括碳青霉烯类抗菌药物在内的所有所有-内酰胺类抗菌药物,但对头孢他啶内酰胺类抗菌药物,但对头孢他啶和头孢西丁相对较弱。和头孢西丁相对较弱。n20012001年美国北卡罗来纳州首次报道,我国年美国北卡罗来纳州首次报道,我国20072007年报道了首株产年报道了首株产KPCKPC的肺克的肺克n产产KPCKPC酶的细菌包括肺克、其他肠杆菌酶的细菌包括肺克、其他肠杆菌(如如大肠埃希菌
23、、产酸克雷伯、沙门菌、肠杆大肠埃希菌、产酸克雷伯、沙门菌、肠杆菌属、奇异变形杆菌等菌属、奇异变形杆菌等)、铜绿等。、铜绿等。27耐药菌耐药菌 MDR-AB MDR-ABn多重耐药鲍曼不动杆菌多重耐药鲍曼不动杆菌-同时耐同时耐3种以上不种以上不同类型的抗菌药物的鲍曼。同类型的抗菌药物的鲍曼。n1991年美国首次报道对碳青霉烯类抗菌药年美国首次报道对碳青霉烯类抗菌药物耐药的鲍曼(物耐药的鲍曼(CRAB)28耐药菌耐药菌n多重耐药铜绿假单胞菌多重耐药铜绿假单胞菌 耐药机制复杂,主要与以下因素有关:耐药机制复杂,主要与以下因素有关:细菌产生抗菌活性酶,细菌产生抗菌活性酶,如如-内酰胺酶、氨内酰胺酶、氨
24、基糖苷钝化酶等;基糖苷钝化酶等;细菌改变抗菌药物作细菌改变抗菌药物作用的靶位,如用的靶位,如PBPsPBPs、DNADNA旋转酶等结构发生旋转酶等结构发生改变;改变;外膜通透性降低;外膜通透性降低;生物膜形成;生物膜形成;主动泵出系统等。主动泵出系统等。nMRCNSMRCNS:耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌:耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌nPRSPPRSP:耐青霉素肺炎链球菌:耐青霉素肺炎链球菌nMDR-TBMDR-TB:多重耐药结核分枝杆菌:多重耐药结核分枝杆菌29标本采集有关的生物安全措施标本采集有关的生物安全措施n戴手套、穿工作服,必要时戴面罩或护目戴手套、穿工作服,必要时戴面罩或护目镜镜n
25、容器必须防漏。标本运送时应密封、防渗容器必须防漏。标本运送时应密封、防渗n严禁将出现渗漏的标本送检,应尽量重新严禁将出现渗漏的标本送检,应尽量重新采集标本,将渗漏容器按感染性医疗废物采集标本,将渗漏容器按感染性医疗废物处置。处置。n严禁将针头暴露的注射器送到实验室,应严禁将针头暴露的注射器送到实验室,应将注射器中的标本注入无菌密封的容器中将注射器中的标本注入无菌密封的容器中送检。送检。30标本采集的基本原则标本采集的基本原则n应在疾病急性期或早期,如有可能尽量在应在疾病急性期或早期,如有可能尽量在用抗菌药物前采集标本用抗菌药物前采集标本n收集真正病灶处的标本,避免临近正常菌收集真正病灶处的标本
26、,避免临近正常菌群的污染。群的污染。n标本采集要足量,以满足检验的要求。标本采集要足量,以满足检验的要求。n选择合适的取样容器。选择合适的取样容器。n检验申请单上应提供患者的相关资料,包检验申请单上应提供患者的相关资料,包括病人姓名、病房、住院或门诊号、标本括病人姓名、病房、住院或门诊号、标本来源、采集部位和采集时间等。来源、采集部位和采集时间等。31标本的运送与保存标本的运送与保存n所有标本采集后立即送检,最好在所有标本采集后立即送检,最好在2h2h内。内。如不能及时送检应放在相应条件保存。运如不能及时送检应放在相应条件保存。运送时间较长者可使用运送培养基。送时间较长者可使用运送培养基。n保
27、存的方式主要依赖于运送培养基的种类保存的方式主要依赖于运送培养基的种类及要检测的病原体。需检测志贺菌、淋病及要检测的病原体。需检测志贺菌、淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌和流感嗜血杆菌等奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌和流感嗜血杆菌等病原菌的标本,如脑脊液、生殖道、眼部、病原菌的标本,如脑脊液、生殖道、眼部、内耳道的标本,禁止冷藏。用于检测病毒内耳道的标本,禁止冷藏。用于检测病毒的标本应储存于的标本应储存于44。尿液、痰液、拭子及。尿液、痰液、拭子及插管等标本做普通细菌培养而无法及时送插管等标本做普通细菌培养而无法及时送检时,可冷藏保存。检时,可冷藏保存。32血培养标本的采集血培养标本的采集n采血指征采血指征 一
28、般患者出现可疑菌血症应采集血液培养:一般患者出现可疑菌血症应采集血液培养:发热(发热(3838)或低温()或低温(3636),寒战,),寒战,白细胞增多(计数大于白细胞增多(计数大于10.010.010109 9/L/L,特别,特别有有“核左移核左移”时),皮肤黏膜出血、昏迷、时),皮肤黏膜出血、昏迷、多器官衰竭、血压降低,多器官衰竭、血压降低,C C反应蛋白升高及反应蛋白升高及呼吸加快,粒细胞减少、血小板减少等。呼吸加快,粒细胞减少、血小板减少等。新生儿可疑菌血症,应该同时做尿液和脑新生儿可疑菌血症,应该同时做尿液和脑脊液培养。脊液培养。考点33血标本的采集血标本的采集n采血时间采血时间 尽
29、量在使用抗菌药物之前进行。对间歇性尽量在使用抗菌药物之前进行。对间歇性寒战或发热患者应在寒战或体温高峰到来寒战或发热患者应在寒战或体温高峰到来之前之前0.5-1h0.5-1h采集血液,或于寒战或发热后采集血液,或于寒战或发热后1h1h进行。进行。当怀疑为急性感染性心内膜炎时,应立即当怀疑为急性感染性心内膜炎时,应立即进行血培养,在进行血培养,在30min30min内采集内采集1-21-2套血标本,套血标本,然后立即进行抗菌药物的经验治疗。对于然后立即进行抗菌药物的经验治疗。对于亚急性感染性心内膜炎,则推荐在亚急性感染性心内膜炎,则推荐在30-30-60min60min内采集两次各内采集两次各2
30、 2套血标本,然后才开套血标本,然后才开始抗菌药物的经验治疗。始抗菌药物的经验治疗。考点34血标本的采集血标本的采集n采血套数及采血量采血套数及采血量对于成人患者,要求每次采集对于成人患者,要求每次采集2-32-3套标本,套标本,每套应包括一个需氧培养瓶和厌氧培养瓶。每套应包括一个需氧培养瓶和厌氧培养瓶。对于目前普遍采用的自动化血培养系统,对于目前普遍采用的自动化血培养系统,成人采血成人采血20ml20ml,分装在两个瓶内,各分配,分装在两个瓶内,各分配10ml10ml。当采血量不足。当采血量不足20ml20ml时,应先注入需时,应先注入需氧瓶。氧瓶。对于婴幼儿患者,采血量不超过患者总血对于婴
31、幼儿患者,采血量不超过患者总血量的量的1%1%。通常儿童采血。通常儿童采血1-5ml1-5ml。考点35血标本的采集血标本的采集n皮肤消毒程序皮肤消毒程序(1 1)使用安尔碘溶液直接消毒皮肤,达到该)使用安尔碘溶液直接消毒皮肤,达到该消毒剂规定要求的时间即可。消毒剂规定要求的时间即可。(2 2)严格执行三步法:)严格执行三步法:75%75%酒精擦拭静脉酒精擦拭静脉穿刺部位待穿刺部位待3030秒以上。秒以上。1%-2%1%-2%碘酊作用碘酊作用30s30s或或10%10%碘伏碘伏1-2min1-2min,从穿刺点向外画圈,从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达消毒,至消毒区域直径达3cm3cm以
32、上。以上。75%75%酒精脱碘:对碘过敏的患者,用酒精脱碘:对碘过敏的患者,用75%75%酒精消酒精消毒毒1min1min,待酒精挥发干燥后采血。,待酒精挥发干燥后采血。36血标本的采集血标本的采集n静脉穿刺和培养瓶接种程序静脉穿刺和培养瓶接种程序 在穿刺前或穿刺期间,为防止静脉滑动,在穿刺前或穿刺期间,为防止静脉滑动,可戴乳胶手套固定静脉,不可接触穿刺点。可戴乳胶手套固定静脉,不可接触穿刺点。用注射器无菌穿刺取血后直接注入血培用注射器无菌穿刺取血后直接注入血培养瓶,勿换针头,或严格按厂商推荐的方养瓶,勿换针头,或严格按厂商推荐的方法采血。法采血。血标本接种到培养瓶后,轻轻颠倒混匀血标本接种到
33、培养瓶后,轻轻颠倒混匀以防血液凝固。血培养使用以防血液凝固。血培养使用SPSSPS抗凝剂,不抗凝剂,不得用肝素、得用肝素、EDTAEDTA、枸橼酸钠抗凝。、枸橼酸钠抗凝。37血标本的采集血标本的采集n注意事项注意事项1 1、最好从静脉采血,不建议从动脉采血。、最好从静脉采血,不建议从动脉采血。2 2、一个静脉穿刺点只能采集、一个静脉穿刺点只能采集1 1套血标本,采集第套血标本,采集第2 2套套血标本应该选择第血标本应该选择第2 2个静脉穿刺点。一次静脉采血注个静脉穿刺点。一次静脉采血注入多个培养瓶中应视为单份血培养。入多个培养瓶中应视为单份血培养。3 3、常规血培养不宜从静脉导管或静脉留置装置
34、取血,、常规血培养不宜从静脉导管或静脉留置装置取血,除非怀疑导管相关血流感染除非怀疑导管相关血流感染4 4、送检的标本所标注的内容应包括病人基本信息、送检的标本所标注的内容应包括病人基本信息、采血时间和采血位置,不要把标签贴在血培养瓶的条采血时间和采血位置,不要把标签贴在血培养瓶的条形码上,否则仪器无法识别。形码上,否则仪器无法识别。5 5、采血后应该立即送检,如不能立即送检,需室温、采血后应该立即送检,如不能立即送检,需室温保存,切勿冷藏。保存,切勿冷藏。38静脉导管标本的采集静脉导管标本的采集n采集原则采集原则保留导管:至少保留导管:至少2套血培养,经外周静脉采套血培养,经外周静脉采血血1
35、套,从导管中心或输液港隔膜无菌采血套,从导管中心或输液港隔膜无菌采血1套套 拔除导管:采拔除导管:采2套外周血培养,无菌方法拔套外周血培养,无菌方法拔出导管取导管尖端进行培养出导管取导管尖端进行培养39静脉导管标本的采集静脉导管标本的采集n采集方法采集方法导管尖端:消毒导管周围皮肤,拔出导管,导管尖端:消毒导管周围皮肤,拔出导管,无菌剪刀取约无菌剪刀取约5cm长,置无菌容器中送检长,置无菌容器中送检经留置导管采血:消毒,拔去导管盖,消经留置导管采血:消毒,拔去导管盖,消毒针芯。先接无菌注射器抽吸至少毒针芯。先接无菌注射器抽吸至少0.51ml血弃去,另取一直无菌注射器抽血进行血血弃去,另取一直无
36、菌注射器抽血进行血培养,然后封管。培养,然后封管。40静脉导管标本的采集静脉导管标本的采集n注意事项注意事项 送检的导管长度保持约送检的导管长度保持约5cm,不要,不要差差 距太大距太大 样本要标注采集时间和部位,及时样本要标注采集时间和部位,及时送送 检,同时送检外周血和导管血时要检,同时送检外周血和导管血时要分分 别标注,同时送检别标注,同时送检41上呼吸道标本的采集上呼吸道标本的采集n鼻拭子鼻拭子无菌拭子入鼻腔内至少无菌拭子入鼻腔内至少1cm后后采集标本采集标本取样时用力旋转拭子并停留取样时用力旋转拭子并停留10s,退出拭子,放入运送培,退出拭子,放入运送培养基或无菌试管养基或无菌试管标
37、记病人信息,须注明鼻内标记病人信息,须注明鼻内有无病灶,及时送检有无病灶,及时送检42上呼吸道标本的采集上呼吸道标本的采集n咽拭子咽拭子在扁桃体部位、咽喉壁及口腔内炎在扁桃体部位、咽喉壁及口腔内炎症、溃疡或渗出部位采样时,应先症、溃疡或渗出部位采样时,应先清水漱口清水漱口观察病人咽喉壁和扁桃体,定位炎观察病人咽喉壁和扁桃体,定位炎症和渗出物区域症和渗出物区域压舌板轻压舌面,无菌拭子在定位压舌板轻压舌面,无菌拭子在定位区域反复刷刮,拭子不要触及颊腔区域反复刷刮,拭子不要触及颊腔侧壁或牙齿,置无菌试管或运送培侧壁或牙齿,置无菌试管或运送培养基养基43下呼吸道标本的采集下呼吸道标本的采集n咳痰咳痰清
38、晨第一口痰为宜清晨第一口痰为宜抗菌药物应用前,先清水漱口,有假牙应取下抗菌药物应用前,先清水漱口,有假牙应取下无痰可用无痰可用3 35 5NaCl 5mlNaCl 5ml雾吸约雾吸约5min5min导痰导痰易受口咽部定植菌污染易受口咽部定植菌污染44下呼吸道标本的采集下呼吸道标本的采集n气管内抽吸物气管内抽吸物n支气管镜采集支气管镜采集 支气管冲洗液支气管冲洗液 肺泡灌洗液肺泡灌洗液 防污染毛刷采样防污染毛刷采样n经气管穿刺吸引物经气管穿刺吸引物n经胸壁针刺吸引物经胸壁针刺吸引物n开胸肺活检开胸肺活检45下呼吸道标本的采集下呼吸道标本的采集n注意事项注意事项尽快(尽快(2h2h)送至实验室。)
39、送至实验室。如不能及时送达,应将标本暂存于如不能及时送达,应将标本暂存于44,但放,但放置时间不可超过置时间不可超过24h24h。由于上呼吸道定植菌的干扰,在选择痰培养检由于上呼吸道定植菌的干扰,在选择痰培养检查时应该同时痰涂片检查,每低倍视野下白细查时应该同时痰涂片检查,每低倍视野下白细胞胞1010个且上皮细胞个且上皮细胞2525个,应重留标本。个,应重留标本。对于普通细菌性肺炎,对于普通细菌性肺炎,痰标本送检每天痰标本送检每天1 1次,次,连续连续2 23 3天。天。不建议不建议24h24h内多次采集,除非痰内多次采集,除非痰液外观性状出现改变。液外观性状出现改变。46大便标本的采集大便标
40、本的采集n自然排便:成型粪便需要豌豆大小,液体自然排便:成型粪便需要豌豆大小,液体粪便的量至少约粪便的量至少约5ML5ML,取粪便中含脓血或粘,取粪便中含脓血或粘液的部分置清洁容器中送检。容器要带密液的部分置清洁容器中送检。容器要带密封盖。封盖。n直肠拭子:无菌拭子插入肛门直肠拭子:无菌拭子插入肛门2 24cm4cm,在,在肛门括约肌处柔和转动拭子,可见拭子上肛门括约肌处柔和转动拭子,可见拭子上有明显的粪便标本,置运送培养基中送检。有明显的粪便标本,置运送培养基中送检。(不太适合成人,不适于检查寄生虫、毒素不太适合成人,不适于检查寄生虫、毒素和病毒抗原和病毒抗原)47尿液标本的采集尿液标本的采
41、集n症状明显的病人(如尿急、尿频、尿痛),一症状明显的病人(如尿急、尿频、尿痛),一份标本就已足够,治疗份标本就已足够,治疗48-7248-72小时后再采集第二小时后再采集第二份标本。对于症状不明显的病人,需采集份标本。对于症状不明显的病人,需采集2-32-3份份标本。怀疑肾结核时,应连续标本。怀疑肾结核时,应连续3 3天采集晨尿。天采集晨尿。n普通培养普通培养101020ml20ml,找抗酸杆菌需,找抗酸杆菌需303050ml50ml。n多次收集或多次收集或2424小时尿不能用作培养。小时尿不能用作培养。n申请单上必须注明病人症状是否明显,这对于申请单上必须注明病人症状是否明显,这对于定量培
42、养分析非常重要,尤其只有少量尿液标定量培养分析非常重要,尤其只有少量尿液标本。本。n室温保存时间不超过室温保存时间不超过2h2h,44冷藏不得超过冷藏不得超过8h8h。48尿液标本的采集尿液标本的采集n清洁中段尿清洁中段尿尽量取早晨第一次尿液,置无菌容器加盖送检尽量取早晨第一次尿液,置无菌容器加盖送检弃去开始流出的尿液,以冲刷尿道口的细菌,取弃去开始流出的尿液,以冲刷尿道口的细菌,取能代表膀胱部位病原菌的中段尿能代表膀胱部位病原菌的中段尿女性病人:收集标本前用清洗液冲洗干净,从前女性病人:收集标本前用清洗液冲洗干净,从前向后仔细擦洗向后仔细擦洗尿道区域尿道区域男性病人:翻开包皮并清洗尿道口男性
43、病人:翻开包皮并清洗尿道口49尿液标本的采集尿液标本的采集n耻骨上膀胱穿刺尿耻骨上膀胱穿刺尿n一次性导尿尿液一次性导尿尿液n留置导尿管尿液留置导尿管尿液用用75%酒精消毒导尿管外部酒精消毒导尿管外部,无菌注射器插无菌注射器插入导尿管吸取尿液送检。不要从尿袋中采集入导尿管吸取尿液送检。不要从尿袋中采集尿液,也不要把导尿管与尿袋拔开后收集尿尿液,也不要把导尿管与尿袋拔开后收集尿液进行培养液进行培养50伤口分泌物的采集伤口分泌物的采集n开放性感染和已破溃的化脓灶开放性感染和已破溃的化脓灶采集前先用无菌生理盐水冲洗表面污染菌,用灭采集前先用无菌生理盐水冲洗表面污染菌,用灭菌拭子采脓液及病灶深部分泌物;
44、如污染严重,菌拭子采脓液及病灶深部分泌物;如污染严重,可取感染部位下的组织送检可取感染部位下的组织送检切口:取分泌物,有时可取沾有分泌物的最内层敷料置灭切口:取分泌物,有时可取沾有分泌物的最内层敷料置灭菌容器内送检。菌容器内送检。瘘管:灭菌棉拭子挤压瘘管,弃去前端脓液后用灭菌容器瘘管:灭菌棉拭子挤压瘘管,弃去前端脓液后用灭菌容器收集脓液。收集脓液。烧伤:清创,以无菌棉拭子直接采取多部位创面脓性分泌烧伤:清创,以无菌棉拭子直接采取多部位创面脓性分泌物置无菌试管中送检。物置无菌试管中送检。51伤口分泌物的采集伤口分泌物的采集n闭合性脓肿闭合性脓肿皮肤消毒后,用无菌注射穿刺抽取脓液或分泌物皮肤消毒后
45、,用无菌注射穿刺抽取脓液或分泌物送检,有时也可将沾有脓液的最内层敷料放入无送检,有时也可将沾有脓液的最内层敷料放入无菌平皿内送检。菌平皿内送检。疑为厌氧菌感染时,取材后立即将注射器内空气疑为厌氧菌感染时,取材后立即将注射器内空气排空,将针头插入橡皮塞内,及时送检。排空,将针头插入橡皮塞内,及时送检。52伤口分泌物的采集伤口分泌物的采集n敷用药物敷用药物2h2h内和烧伤内和烧伤12h12h内不应采集标本内不应采集标本n皮肤消毒对培养结果至关重要,采集标本时应注皮肤消毒对培养结果至关重要,采集标本时应注意分泌物的性状、色泽和气味意分泌物的性状、色泽和气味n深部或粘膜附近的感染应同时做需氧和厌氧培养
46、深部或粘膜附近的感染应同时做需氧和厌氧培养n采集标本后及时送检,如采集标本后及时送检,如1h1h内不能送检应冷藏内不能送检应冷藏n厌氧培养要注意:避免正常菌群污染;由采集至厌氧培养要注意:避免正常菌群污染;由采集至接种尽量避免接触空气,最好以针筒直接由病灶接种尽量避免接触空气,最好以针筒直接由病灶处抽取标本,采取完毕立即送检处抽取标本,采取完毕立即送检53脑脊液的采集脑脊液的采集n腰椎穿刺后,采集脑脊液腰椎穿刺后,采集脑脊液3 35ml5ml于于3 3个无菌小瓶或试管中,个无菌小瓶或试管中,每管每管1 12ml2ml,分别进行微生物,分别进行微生物学、生化及细胞学检测。学、生化及细胞学检测。n及时送检,室温保存,病毒检及时送检,室温保存,病毒检测标本可冷藏测标本可冷藏54其他与感染相关的检测项目其他与感染相关的检测项目n常规检测:血、尿、大便常规常规检测:血、尿、大便常规nCRPnPCTnESRnX-线检查线检查
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