《农产品质量安全检测技术培训系列之.ppt

农残检测常用方法技术要点农残检测常用方法技术要点卞红正卞红正安徽省农产品质量安全检测中心安徽省农产品质量安全检测中心农业部农产品质量安全监督检验测试中心（合肥）农业部农产品质量安全监督检验测试中心（合肥）农产品质量安全检测技术系列之农产品质量安全检测技术系列之主要内容速测方法3准确定性定量检测法4当前常用检测方法2前言1以前农残检测方法的颁布：国家标准化管理委员会颁布国家标准国家标准化管理委员会颁布国家标准（GBGB）;农业部颁布行业标准农业部颁布行业标准（NYNY）;国国家家进进出出口口商商品品检检验验检检疫疫总总局局颁颁布布行行业业标标准准，编编号号为为SNSN。已颁布标准截截至至目目前前已已颁颁布布的的农农产产品品和和食食品品农农药药残残留留检检测测方方法法标标准准共共有有39390 0多多个个。其其中中：国国家家标标准准9292个个，农农业业行行业业标标准准3535个个，商检行业商检行业标准约标准约270270个。个。前 言根根据据20092009年年6 6月月1 1日日实实施施的的中中华华人人民民共共和和国国食食品品安安全全法法第第二二十十一一条条和和第第二二十十二二条条的的规规定定，今今后后凡凡涉涉及及食食品品安安全全的的标标准准（八八个个方方面面），统统一一由由国国务务院院卫卫生生行行政政部部门门部部制制定定和和颁颁布布，国国务务院院标标准准化化行行政政部部门门提供国家标准编号提供国家标准编号 。对对现现行行的的食食用用农农产产品品质质量量安安全全标标准准、食食品品卫卫生生标标准准、食食品品质质量量标标准准和和有有关关食食品品的的行行业业标标准准中中强强制制执执行行的的标准予以整合，统一公布为食品安全国家标准。标准予以整合，统一公布为食品安全国家标准。农残检测方法标准全部统一为农残检测方法标准全部统一为食品安全食品安全国家标准。国家标准。前 言1.速测方法GB/T 5009.199-2003蔬蔬菜菜中中有有机机磷磷和和氨氨基基甲甲酸酸酯酯类类农农药药残残留留量量的的快快速速检检测测NY/T 448-2001蔬蔬菜菜上上有有机机磷磷和和氨氨基基甲甲酸酸酯酯类类农农药药残残毒毒快快速速检测方法检测方法一、当前常用检测方法NY/T 761-2008蔬蔬菜菜和和水水果果中中有有机机磷磷、有有机机氯氯、拟拟除除虫虫菊菊酯酯和和氨氨基基甲甲酸酸酯酯类类农农药多残留的测定药多残留的测定QuEChERS Method（美美国国农农业业部部农农业业研究服务中心）修订方法研究服务中心）修订方法NY/T 761-2008、GB/T 19648-2006水水果果和和蔬蔬菜菜中中500种种农农药药及及相相关关化化学学品品残残留留的的测测定定 气气相相色色谱谱-质质谱谱法法、GB/T 20769-2008水水果果和和蔬蔬菜菜中中450种种农农药药及及相相关关化化学学品品残残留留量量的的测测定定 液液相相色色谱谱-串串联联质谱法质谱法等方法糅合在一起的实施细则等方法糅合在一起的实施细则2.准确定性定量检测法一、当前常用检测方法二、速测方法1快速检测程序试样试样检测检测 阴性阴性阳性阳性复测（两次以上）复测（两次以上）阴性阴性阳性阳性根据市场根据市场规定处理规定处理 准确定量准确定量定性定性分析分析二、速测方法GB/T5009.199-2003NY/T448-2001适用适用范围范围蔬蔬菜菜（葱葱蒜蒜、萝萝卜卜、韭韭菜菜、芹芹菜菜、香香菜菜、茭茭白白、蘑蘑菇菇和和番番茄茄含含有有抑抑制制酶酶的的植植物物次次生生物物质质，易易导导致致假假阳阳性性；叶绿素高的也会干扰，这两类可整株取样）叶绿素高的也会干扰，这两类可整株取样）适适用用叶叶菜菜(除除韭韭菜菜)、果果菜菜、豆豆菜菜、瓜瓜菜菜、根根菜菜(除除萝萝卜、茭白等卜、茭白等)方法方法速测卡法速测卡法(纸片法纸片法)和酶抑制率法和酶抑制率法(分光光度法分光光度法)酶抑制率法酶抑制率法(分光光度法分光光度法)波长波长412nm4103nm酶酶乙酰胆碱酯酶（用乙酰胆碱酯酶（用pH8磷酸缓冲液溶解）磷酸缓冲液溶解）（3min吸光度变化值吸光度变化值0.3，4冰箱保存不超过冰箱保存不超过4天）天）丁酰胆碱酯酶（用丁酰胆碱酯酶（用pH8磷酸缓冲液溶解）磷酸缓冲液溶解）3min吸光度变化值吸光度变化值0.40.8之间之间底物底物硫代乙酰胆碱硫代乙酰胆碱（蒸馏水溶解，（蒸馏水溶解，4冰箱保存不超过冰箱保存不超过2周）周）碘化硫代丁酰胆碱（碘化硫代丁酰胆碱（BTCI）（用（用pH8磷酸缓冲液溶解）磷酸缓冲液溶解）显色剂显色剂二硫代二硝基苯甲酸（二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）+碳酸氢钠碳酸氢钠缓冲液溶液，缓冲液溶液，4冰箱保存冰箱保存二硫代二硝基苯甲酸（二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）缓冲液溶解缓冲液溶解步骤步骤取取表表面面干干净净的的蔬蔬菜菜或或瓜瓜果果，叶叶菜菜类类取取叶叶片片部部分分，瓜瓜果取表皮带肉，剪成果取表皮带肉，剪成1cm左右见方碎片。左右见方碎片。取取样样1g置置于于小小烧烧杯杯内内，加加入入5mL缓缓冲冲溶溶液液，振振荡荡1-2min，倒出并静置，倒出并静置3-5分钟；分钟；于于小小试试管管内内分分别别加加入入2.5mL样样本本提提取取液液、100uL酶酶液液、100uL显显色色剂剂，摇摇匀匀后后于于37放放置置15min以以上上，加加入入100uL底底物物，应应立立即即倒倒入入仪仪器器比比色色皿皿中中，记记录录3min吸吸光光度变化值。度变化值。取取2g切切碎碎的的样样本本（非非叶叶菜菜类类取取4g）放放入入提提取取瓶瓶内内，加加入入20mL缓缓冲冲液液，振振荡荡1-2min，倒倒出出并并静静置置3-5分分钟钟；于于小小试试管管内内分分别别加加入入50uL酶酶液液、3mL样样本本提提取取液液、50uL显显色色剂剂，于于37-38下下放放置置30min后后分分别别加加入入50uL底物，倒入比色皿中，用仪器测定。底物，倒入比色皿中，用仪器测定。结果结果抑制率抑制率50%：阳性：阳性（阳性样品需要重复检测（阳性样品需要重复检测2次次以上以上，若，若不合格不合格,用用色谱、色谱、质谱等质谱等进一步定性定量分析进一步定性定量分析）抑制率抑制率70%：阳性：阳性（阳性样品应有（阳性样品应有2次以上的重复检测次以上的重复检测，若若不合格不合格,用用色谱、色谱、质谱等质谱等进一步定性定量分析进一步定性定量分析）备注备注1、当当温温度度低低于于37时时，酶酶反反应应速速度度放放慢慢，加加入入酶酶液液和和显显色色剂剂后后反反应应时时间间应应该该延延长长，延延长长时时间间的的确确定定，应应以以空空白白对照测试对照测试3min吸光度变化值吸光度变化值0.3方可进行方可进行下一步下一步操作。操作。2、3min吸吸光光度度变变化化值值0.3原原因因：酶酶的的活活性性不不够够；酶的活性太低。酶的活性太低。3、样品检测放置时间与空白的时间应该一致。、样品检测放置时间与空白的时间应该一致。1、样品检测放置时间与空白的时间应该一致。、样品检测放置时间与空白的时间应该一致。2、丁丁酰酰胆胆碱碱酯酯酶酶对对乐乐果果、甲甲基基对对硫硫磷磷、毒毒死死蜱蜱、二二嗪嗪磷等农药不太灵敏，检出浓度均在磷等农药不太灵敏，检出浓度均在10mg/kg以上。以上。二、速测方法2结果计算抑制率（抑制率（%）=抑制率：酶被抑制的程度抑制率：酶被抑制的程度AAc c 对照组对照组3min 3min 后与后与3min 3min 前吸光值之差前吸光值之差;AAs s s s 样本样本3min 3min 后与后与3min 3min 前吸光值之差。前吸光值之差。二、速测方法3注意事项20112011年年首首届届全全省省农农产产品品质质量量安安全全检检测测技技术术人人员员大大比比武武现现场场操操作作评评分分细细则则（农农残残速速测测类类）(2011(2011年年)中中对对取取样样部部位位、处处理理方方法法等等内内容容进进行行详详细细的分项打分，这些打分项都是平时检测中需要注意的地方。的分项打分，这些打分项都是平时检测中需要注意的地方。适适用用范范围围：蔬蔬菜菜（葱葱蒜蒜、萝萝卜卜、韭韭菜菜、芹芹菜菜、香香菜菜、茭茭白白、蘑蘑菇菇和和番番茄茄含含有有抑抑制制酶酶的的植植物物次次生生物物质质，易易导导致致假假阳阳性性；叶叶绿绿素素高高的的也也会会干干扰扰，这两类可整株取样）这两类可整株取样）；农药：有机磷和氨基甲酸酯类。；农药：有机磷和氨基甲酸酯类。所有操作步骤顺序、加液量、处理时间一定要严格按标准执行。所有操作步骤顺序、加液量、处理时间一定要严格按标准执行。建建议议使使用用同同一一批批比比色色皿皿，不不同同批批次次的的比比色色皿皿对对结结果果可可能能存存在在影影响响。一一批上机样品同时检测，共用一个对照。批上机样品同时检测，共用一个对照。检检测测前前一一定定要要检检查查酶酶液液活活性性（3min3min吸吸光光度度变变化化值值0.30.3）；酶酶液液反反复复解冻最多不超过两次解冻最多不超过两次,否则会影响酶活性。否则会影响酶活性。二、速测方法4如何看待农残快速测定方法n 何为快速检测方法？指检测速度相对较快、便于现场筛查的检测方法。其主要适合于定性和半定量测定，检测准确度相对要差一些。n 法律地位 中华人民共和国农产品质量安全法第三十六条规定“采用国务院农业行政主管部门会同有关部门认定的快速检测方法进行农产品质量安全监督抽查检测，被抽查人对检测结果有异议的，可以自收到检测结果时起四小时内申请复检。复检不得采用快速检测方法。”二、速测方法5农残速测与色谱、质谱等方法的结果比较n 时间时间：从：从20052005年至年至20072007年。年。n 项目项目：农业部开展的省份间农产品质量安全例行监测互查。：农业部开展的省份间农产品质量安全例行监测互查。n 要要求求：承承担担任任务务的的3737个个部部级级中中心心分分别别用用农农残残速速测测进进行行初初步步筛筛查查，并并把把所所有有样样品用品用NY/T 761NY/T 761等方法进行色谱、质谱定量检测。等方法进行色谱、质谱定量检测。n 目目的的：想想验验证证速速测测与与色色谱谱检检测测的的相相关关性性，如如果果有有相相关关性性，就就可可以以先先用用速速测测初初步步筛筛查查，然然后后把把阳阳性性（超超标标的的）样样品品再再用用色色谱谱等等方方法法准准确确定定量量，那那样样可可以以大大大大减少工作量。减少工作量。n 结结论论：速速测测结结果果和和色色谱谱等等定定量量检检测测结结果果几几乎乎没没有有任任何何相相关关性性。说说白白了了就就是是速速测测超超标标的的，色色谱谱检检测测不不出出来来，速速测测不不超超标标的的，色色谱谱可可能能会会超超标标。因因为为没没有有什什么么相关性，农业部在省部级检测中心这个层级最终导致放弃速测方法。相关性，农业部在省部级检测中心这个层级最终导致放弃速测方法。所以，速测仅仅是法律认可的一项工作，不要较真，如被检方有异议，更所以，速测仅仅是法律认可的一项工作，不要较真，如被检方有异议，更不能拿速测阳性结果进行处罚和仲裁。不能拿速测阳性结果进行处罚和仲裁。二、速测方法6为什么采用农残快速检测法 （非官方解释最实在的理解）鲜活农产品不宜长时间保存，快速检测方法克服了当前所有准确定量方法（色谱、质谱方法等）检测周期过长的问题。【时限性考虑时限性考虑】我国研究院所和各地市针对特殊样品，采用酶抑制法取得了与准确定量方法（色谱、质谱方法等）一致性结果。【所谓的科学依据所谓的科学依据】快速检测方法是经过农业部会同有关部门认定发布的，经法律认可的方法，具有权威性和统一性（不过可靠性谈不上不过可靠性谈不上）。【法律依据法律依据】快速检测方法所需设备简单，易掌握，平时运营成本相对较低，选用该法主要是从我国从业人员素质、经济状况的国情出发来考虑的（不可能要求大家都去买质谱、色谱等设备）。【方法经济性、操控性方法经济性、操控性】明知快速检测方法准确度不高，选用该法，主要是在县级、乡镇等一级进行普及，让经营户、老百姓发现有人在抓农产品质量安全，更主要的是起到震慑作用。【震慑作用震慑作用】【案例】河南省郑州市农残快速检测网络【案例】河南省郑州市农残快速检测网络三、准确定性定量检测法1基本步骤：u检测前工作准备检测前工作准备u提取提取u净化净化、浓缩定容、浓缩定容u标准溶液配制和测定标准溶液配制和测定u结果计算结果计算三、准确定性定量检测法2提取条件的优化：uQuEChERSQuEChERS方法选择方法选择单一单一乙腈为提取溶剂乙腈为提取溶剂。u含含水水量量低低或或含含糖糖量量高高的的样样品品应应加加入入一一定定量量的的水水后后再再进行提取，以提高提取效率。进行提取，以提高提取效率。u乙乙腈腈对对N N-三三卤卤甲甲硫硫基基杀杀菌菌剂剂类类农农药药，具具有有降降解解作作用用，如如克克菌菌丹丹、抑抑菌菌灵灵等等；通通过过加加入入1%1%的的醋醋酸酸，调调节节pHpH值值，能够抑制上述农药的分解。能够抑制上述农药的分解。三、准确定性定量检测法3盐析：u盐析盐析剂种类：氯化钠、醋酸钠和硫酸铵等；剂种类：氯化钠、醋酸钠和硫酸铵等；u盐盐析析剂剂能能与与水水结结合合使使游游离离水水分分子子减减少少，减减少少了了农农药药在水相中的溶解度；在水相中的溶解度；u盐析剂能减少有机溶剂在水中的溶解度；盐析剂能减少有机溶剂在水中的溶解度；u盐析剂能使水相的比重增大，有助于分离。盐析剂能使水相的比重增大，有助于分离。三、准确定性定量检测法4脱水剂的选择：u无无水硫酸镁吸水能力比无水硫酸钠高水硫酸镁吸水能力比无水硫酸钠高3 3倍倍。u无无水硫酸镁吸水的同时也放热，促进农药的萃取。水硫酸镁吸水的同时也放热，促进农药的萃取无机盐无机盐加入量（加入量（g）乙腈中的水分乙腈中的水分（加入前，（加入前，%）乙腈中的水分乙腈中的水分（加入后，（加入后，%）NaCl2g/27mL276.0Na2SO40.8g/4mL63.9MgSO40.8g/4mL60.6三、准确定性定量检测法5净化剂的选择：uPSAPSA提提供供伯伯氨氨基基和和仲仲氨氨基基，相相比比氨氨基基更更能能去去除除基基质质干干扰扰；主主要要用用来来消消除除各各种种有有机机酸酸、色色素素以以及及一一些些糖糖和和脂脂肪肪酸酸。为为了了减减少少仪仪器的维护，往往在器的维护，往往在PSAPSA的基础上加的基础上加C18C18净化。净化。uPSAPSA可去除可去除9090以上的脂肪酸和以上的脂肪酸和5050左右的左右的色素。色素。uGCBGCB可可去去除除9090以以上上的的色色素素，但但对对脂脂肪肪酸酸的的净净化化能能力力仅仅有有1010左左右右。对对于于一一些些含含色色素素高高的的样样品品，将将两两者者联联合合使使用用。但但用用量量要要适适当当，否否则则会会吸吸附附一一些些平平面面结结构构的的农农药药，影影响响回回收收率率，如如六六氯氯苯、百菌清等。苯、百菌清等。净化剂净化剂去杂种类去杂种类PSAPSA糖、有机酸、色素等糖、有机酸、色素等C18C18油脂、非极性干扰物等油脂、非极性干扰物等GCBGCB色素、甾醇、非极性干扰物等色素、甾醇、非极性干扰物等方法1：NY/T 761-2008方法名称及来源：方法名称及来源：蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留检测方法氨基甲酸酯类农药多残留检测方法NY/T 761-NY/T 761-20082008。农药种类和个数：农药种类和个数：有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药药等共等共104种。种。使用仪器：使用仪器：GC、LC。检测步骤：检测步骤：加入加入加入加入2 2 2 2 mLmLmLmL丙酮丙酮丙酮丙酮丙酮定丙酮定丙酮定丙酮定容至容至容至容至5.0 5.0 5.0 5.0 mLmLmLmLGCGCGCGC检测检测检测检测（FPDFPDFPDFPD）加入加入加入加入2 2 2 2 mLmLmLmL正己正己正己正己烷烷烷烷5 mL5 mL5 mL5 mL丙酮丙酮丙酮丙酮正己烷正己烷正己烷正己烷(10(10(10(1090)90)90)90)淋洗，淋洗，淋洗，淋洗，重复一次重复一次重复一次重复一次依次依次5mL丙酮丙酮+正己烷正己烷(10+90),5mL正己烷预淋正己烷预淋弗罗弗罗弗罗弗罗里矽里矽里矽里矽柱柱柱柱50 50 50 50 水浴水浴水浴水浴氮吹近干氮吹近干氮吹近干氮吹近干正己烷定容正己烷定容正己烷定容正己烷定容5.0 mL5.0 mL5.0 mL5.0 mLGCGCGCGC检测检测检测检测（ECDECDECDECD）加入加入加入加入2 mL2 mL2 mL2 mL甲醇甲醇甲醇甲醇二氯甲烷二氯甲烷二氯甲烷二氯甲烷(1+99)(1+99)(1+99)(1+99)2 mL2 mL2 mL2 mL甲醇甲醇甲醇甲醇二氯甲烷二氯甲烷二氯甲烷二氯甲烷(1+99)(1+99)(1+99)(1+99)淋洗，淋洗，淋洗，淋洗，重复一次重复一次重复一次重复一次4 mL甲醇甲醇二氯甲烷二氯甲烷(1+99)预淋预淋氨氨氨氨基基基基柱柱柱柱50 50 50 50 水浴水浴水浴水浴氮吹近干氮吹近干氮吹近干氮吹近干甲醇定容甲醇定容甲醇定容甲醇定容2.50 mL2.50 mL2.50 mL2.50 mLHPLCHPLCHPLCHPLC检测检测检测检测（柱后（柱后（柱后（柱后+荧荧荧荧光）光）光）光）过过过过2 2 2 2 m m m m滤膜滤膜滤膜滤膜25 g25 g25 g25 g样品样品样品样品 ，加入，加入，加入，加入50 mL50 mL50 mL50 mL乙腈高速匀浆乙腈高速匀浆乙腈高速匀浆乙腈高速匀浆2 min2 min2 min2 min过滤到添加过滤到添加过滤到添加过滤到添加57 g57 g57 g57 g氯化氯化氯化氯化钠的钠的钠的钠的100 mL100 mL100 mL100 mL具塞量筒具塞量筒具塞量筒具塞量筒剧烈震荡剧烈震荡剧烈震荡剧烈震荡1 min1 min1 min1 min后静置后静置后静置后静置30 min30 min30 min30 min（实践中（实践中（实践中（实践中10min10min10min10min即可）即可）即可）即可）分取分取分取分取10mL10mL10mL10mL有机相，旋蒸近干，有机相，旋蒸近干，有机相，旋蒸近干，有机相，旋蒸近干，洗耳球吹干或洗耳球吹干或洗耳球吹干或洗耳球吹干或80 80 80 80 水浴氮水浴氮水浴氮水浴氮气挥干气挥干气挥干气挥干方法1：NY/T 761-2008方法方法2：NY/T 761、GB/T 19648和和GB/T 20769等综合法方法名称及来源：方法名称及来源：NY/T NY/T 761-2008761-2008、GB/T GB/T 19648-200619648-2006和和GB/T GB/T 20769-20769-20082008等，其中以等，其中以GB/T 19648-2006GB/T 19648-2006为主。为主。农药种类和个数：农药种类和个数：有有机机磷磷、有有机机氯氯、拟拟除除虫虫菊菊酯酯、氨氨基基甲甲酸酸酯酯类类和苯并咪唑类农药等和苯并咪唑类农药等800800多种。多种。使用仪器：使用仪器：GCGC、LCLC、GC-MS/MSGC-MS/MS和和LC-MS/MSLC-MS/MS。检测步骤：检测步骤：所有洗脱液氮吹仪吹所有洗脱液氮吹仪吹所有洗脱液氮吹仪吹所有洗脱液氮吹仪吹干；或旋蒸近干，洗干；或旋蒸近干，洗干；或旋蒸近干，洗干；或旋蒸近干，洗耳球吹干耳球吹干耳球吹干耳球吹干5mL乙腈乙腈+甲苯预淋甲苯预淋石墨化炭黑氨基柱石墨化炭黑氨基柱石墨化炭黑氨基柱石墨化炭黑氨基柱（色素少，可用氨基（色素少，可用氨基（色素少，可用氨基（色素少，可用氨基柱代替）柱代替）柱代替）柱代替）丙酮定丙酮定丙酮定丙酮定容容容容5.0 5.0 5.0 5.0 mLmLmLmL移取移取移取移取2.5 mL2.5 mL2.5 mL2.5 mL氮吹仪吹干，氮吹仪吹干，氮吹仪吹干，氮吹仪吹干，正己烷定容正己烷定容正己烷定容正己烷定容2.5 mL2.5 mL2.5 mL2.5 mLGC-MS/MSGC-MS/MSGC-MS/MSGC-MS/MS和和和和GCGCGCGC检测检测检测检测用用用用2 mL2 mL2 mL2 mL乙腈甲苯乙腈甲苯乙腈甲苯乙腈甲苯(3+1)(3+1)(3+1)(3+1)涮涮涮涮洗浓缩瓶并倒入洗浓缩瓶并倒入洗浓缩瓶并倒入洗浓缩瓶并倒入SPESPESPESPE小柱，小柱，小柱，小柱，重复重复重复重复2 2 2 2次次次次剩剩 余余 约约 20mL乙乙腈腈+甲甲苯苯分分次次或或1次次倒倒入入，淋洗小柱淋洗小柱移取移取移取移取2.5 mL2.5 mL2.5 mL2.5 mL氮吹仪吹干，氮吹仪吹干，氮吹仪吹干，氮吹仪吹干，用甲醇用甲醇用甲醇用甲醇+水水水水（1+11+11+11+1）定容）定容）定容）定容2.5 mL2.5 mL2.5 mL2.5 mLLC-MS/MSLC-MS/MSLC-MS/MSLC-MS/MS和和和和HPLCHPLCHPLCHPLC检测检测检测检测过过过过0.22 0.22 0.22 0.22 m m m m滤膜滤膜滤膜滤膜25 g25 g25 g25 g样品样品样品样品 ，加入，加入，加入，加入50 mL50 mL50 mL50 mL乙腈高速匀浆乙腈高速匀浆乙腈高速匀浆乙腈高速匀浆2 min2 min2 min2 min过滤到添加过滤到添加过滤到添加过滤到添加57 g57 g57 g57 g氯化氯化氯化氯化钠的钠的钠的钠的100 mL100 mL100 mL100 mL具塞量筒中具塞量筒中具塞量筒中具塞量筒中剧烈震荡剧烈震荡剧烈震荡剧烈震荡1 min1 min1 min1 min后静置后静置后静置后静置30 min30 min30 min30 min（实践中（实践中（实践中（实践中10min10min10min10min即可）即可）即可）即可）分取分取分取分取10mL10mL10mL10mL有机相，旋蒸或有机相，旋蒸或有机相，旋蒸或有机相，旋蒸或50 50 50 50 水浴水浴水浴水浴氮气氮气氮气氮气至近干，加入至近干，加入至近干，加入至近干，加入2 mL2 mL2 mL2 mL乙乙乙乙腈腈甲甲甲甲苯苯苯苯(3+1)(3+1)(3+1)(3+1)洗洗脱脱液液用用量量约为约为25mL25mL方法方法2：NY/T 761、GB/T 19648和和GB/T 20769等综合法方法方法2：NY/T 761、GB/T 19648和和GB/T 20769等综合法方法方法2：NY/T 761、GB/T 19648和和GB/T 20769等综合法方法方法2：NY/T 761、GB/T 19648和和GB/T 20769等综合法方法方法3：优化后的：优化后的QUECHERS METHOD方法名称及来源：方法名称及来源：在美国农业部的在美国农业部的QuEChERS MethodQuEChERS Method基础上做了优基础上做了优化和调整。化和调整。农药种类：农药种类：有机磷，有机氯，氨基甲酸酯和拟除虫菊酯类有机磷，有机氯，氨基甲酸酯和拟除虫菊酯类农药等多残留检测。农药等多残留检测。使用仪器：使用仪器：GC-MS/MS GC-MS/MS、LC/MS/MSLC/MS/MS。方法方法3：优化后的：优化后的QUECHERS METHOD原理原理：与与固固相相萃萃取取(SPE)(SPE)相相似似，都都是是利利用用吸吸附附剂剂填填料料与与基基质质中中的的杂杂质质相相互互作作用用，吸吸附附杂杂质质从从而而达达到到除除杂杂净净化的目的。化的目的。优点优点：回回收收率率高高，对对大大量量极极性性及及挥挥发发性性的的农农药药品品种种的的回回收收率率大大于于85%85%；精精确确度度和和准准确确度度高高；可可分分析析的的农农药药范范围围广广；速速度度快快；溶溶剂剂使使用用量量少少，污污染染小小，价价格格低低廉廉且且不不使使用用含含氯氯化化物物溶溶剂剂；操操作作简简便便；使使用很少的玻璃器皿，装置简单。用很少的玻璃器皿，装置简单。方法方法3：优化后的：优化后的QUECHERS METHOD检测步骤：检测步骤：(1)(1)样品粉碎；样品粉碎；(2)(2)单一溶剂乙腈提取分离；单一溶剂乙腈提取分离；(3)(3)加入加入MgSOMgSO4 4等盐类除水；等盐类除水；(4)(4)加入乙二胺加入乙二胺-N-N-丙基硅烷丙基硅烷(PSA)(PSA)等吸附剂除杂；等吸附剂除杂；(5)(5)上清液进行上清液进行GC-MS/MSGC-MS/MS、LC-MS/MS LC-MS/MS 检测。检测。检测步骤：检测步骤：称取10g样品于50mL离心管中，加20mL乙腈,高速均质2 min吸取0.5mL上层提取液于15mL离心管中，加入0.5 mL50%甲醇水溶液，涡旋混匀振摇后,5000 r/min 离心35 min将8g氯化钠与无水硫酸镁混合粉末（重量比为1:1）倒入上述50mL离心管中吸取1.0mL上层提取液于10mL离心管中（离心管中含有40mg的PSA、40mg的C18、20mg的GCB、1mL甲苯），剧烈振摇后，静置5min。过0.22m微孔滤膜LC-MS/MS检测剧烈振摇剧烈振摇1min1min过0.22m微孔滤膜GC-MS/MS检测方法方法3：优化后的：优化后的QUECHERS METHOD方法方法3：优化后的：优化后的QUECHERS METHOD方法方法3：优化后的：优化后的QUECHERS METHOD方法方法3：优化后的：优化后的QUECHERS METHOD方法方法3：优化后的：优化后的QUECHERS METHOD