LC-2010A HT型高效液相色谱仪标准操作规程.doc

标 题LC-2010A HT型高效液相色谱仪标准操作规程文件编码SOP/QAS054 -2012版 次第1版起 草 人起草日期 执行日期 审 核 人审核日期 颁发部门质量保障管理中心批 准 人批准日期 复制份数共1份分发部门质量保障管理中心目的：为检验人员提供LC-2010A HT型高效液相色谱仪标准的检验操作规程，保证工作质量。范围：适用于LC-2010A HT型高效液相色谱仪的使用。责任：质量保障管理中心检验员。内容：1.设备组成和工作条件该仪器为集中一体化设计，主要由在线脱气机、自动进样器、柱温箱、紫外检测器及四元低压泵组成。2.准备工作2.1将色谱甲醇及流动相用0.45um滤膜过滤并脱气。2.2对所进样品用0.45um滤膜过滤。2.3检查色谱柱安装是否正确良好。2.4检查泵、检测器、数据处理机的各个连接头连接是否正确良好。3.开机3.1启动稳压器电源3.2电压稳定后，依次打开仪器电源及计算机。4.泵、自动进样器和色谱柱的清洗4.1打开“LCsolution”操作系统，点击“操作”项下“分析”标志，将仪器与计算机控制器连接。4.2连接完成后，分析程序进入控制界面，同时，仪器显示进入系统控制面板。4.3点击“F5”进入常规系统操作显示界面。在确认计算机控制器未启动仪器的情况下，打开泵头脱气阀，点击“purge”按钮，进入脱气清洗泵及自动进样器界面。依次点击“F1-F5”，对你所使用的泵及自动进样器进行脱气。脱气完成后，各个泵及进样器则会显示“fin”，否则则是“exe”状态。泵脱气完成后，会自动进入常规操作显示界面，此时表示脱气完成，可以将泵阀关闭，进行用前平衡色谱柱或是用前清洗。4.4使用色谱柱前，用低流速纯有机相进行30min左右的清洗，清洗时，在分析界面的“简单设置”版面“模式”下拉菜单中，选择合适模式，如“低压梯度”或是“等浓度洗脱”。然后在“流速”一栏输入流速“0.3ml/min”，在“泵浓度”一栏输入“100”，表示所用有机相比例为100%，完成后点击“下载”方可使仪器正常运行。然后用流动相比例的有机相-水进行再次清洗30min（操作如上），然后可以更换流动相进行平衡色谱柱（更换流动相时，应注意流路中是否有气泡，若有，则需重复3.3的操作，待气泡完全排除后，方可继续）。5.实验条件的设定5.1用流动相平衡色谱柱时，可根据实际情况，将流速逐渐升至所需流速，通常所使用的流速为1.0ml/min、1.2ml/min、0.8ml/min。5.2检测器波长及检测时间选择。在“简单设置”操作版面中，“检测器A”项下“波长通道1”一栏输入你所需的检测波长“X”，“结束时间”一栏输入你所需检测时间“X”，点击“下载”即可。5.3柱温的选择。在“简单设置”操作版面中，“柱温”项下“温度”一栏输入你所需检测温度“X”，点击下载即可。6.基线检查待仪器运行参数设定完成后，平衡约30min左右后，查看基线是否为直线且稳定，若是，则可进样，否则，继续平衡。7.试验方法确定7.1将处理后的样品放入样品盘，记录相应的盘号及位置。7.2点击“数据采集”项下“单次运行”按钮，在此介面输入相关信息，如“文件保存路径”，“样品信息”，“样品位置”等。输入完毕后，点击“确定”，进行方法确认。7.3待此次运行结束时，点击“LCsolution”项下“再解析”按钮，打开在解析界面，找到前次运行记录的色谱图，进行数据处理。点击数据分析界面下“向导”按钮，进行积分参数设定，设定完成后，点击“下一步”进行数据峰的选择，再点击“下一步”，直至完成“向导”。然后双击此文件，保存当前设置后，点击“文件”项下“方法另存为”，进行方法保存。8.样品批处理8.1点击“实时分析”界面下“批处理”按钮，进入批处理界面。8.2点击“向导”按钮，进入向导界面，根据提示进行向导操作。完成后，点击“批处理开始”按钮，进行批处理。9.报告制作及图谱打印9.1打开在解析版面，点击“报告”界面，进入报告编辑界面。点击“文件”项下“打开报告文件”选择已有模板进行报告编辑。9.2报告编辑完成后，点击快捷栏中“打印”即可打印报告。10.清洗及关机10.1实验完成后，用相应的有机相-水组成清洗流动相，将色谱柱及仪器管路进行清洗。一般使用10%甲醇水（或10%乙腈水）冲洗30min后，换比例至100%甲醇（或乙腈）继续清洗30min后，降低流速至0ml/min后，退出“LC-solution”“实时分析”系统，断开仪器连接。10.2关闭电脑，关闭仪器开关，关闭插板电源。10.3对使用情况进行登记。11.维护保养11.1液相色谱使用的流动相，应使用分析纯或色谱纯，且用前需进行过滤脱气处理。11.2样品进样前，需进行过滤，否则会使柱头堵塞，柱压升高，污染流通池。11.3每次分析完成后，将所使用的泵通道充分清洗，有机相使用的泵通道应固定，避免管路中有机相与缓冲盐接触后堵塞泵通道。不使用的泵应置与清洗瓶中，使管路中充满清洗液，防止不使用的泵通道因外置而影响检测。11.4仪器运行中，如出现压力持续性波动，使保留时间发生变化，则说明管路中存在气泡，需对溶剂或泵进行脱气处理，防止气泡过柱影响分析结果或对色谱柱造成损伤。11.5长时间不使用仪器时，应将所有管路冲洗干净，管路中充满有机溶剂，色谱柱使用相应的有机溶剂进行保存，以免因长时间保存对柱子产生永久性损耗。11. 6 对使用情况进行登记。12. 保养12.1 仪器室应保持干燥和空气流通。12.2 严禁测试腐蚀性较强的样品。12.3 避免强烈震动或撞击。12.4 不用时应将仪器罩住。13.注意事项13.1打开冲洗泵头的10%异丙醇溶液的开关(需用针捅抽)控制流量大小以能流出的最小流量为准13.2注意各流动相所剩溶液的容积设定，若设定的容积低于最低限会自动停泵，注意洗泵溶液的体积及时加液。13.3使用手动进样器进样时，在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒，洗针液一般选择与样品液一致的溶剂，进样前必须用样品液清洗进样针筒3遍以上，并排除针筒中的气泡。13.4溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎，在更换流动相时注意保护，当发现过滤头变脏或长菌时，不可用超声洗涤，可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗涤。13.5实验结束后，一般先用水或低浓度甲醇水溶液冲洗整个管路30分钟以上，再用甲醇冲洗。冲洗过程中关闭D灯、W灯。 4/6SOP/QAS002-2012附件 仪器使用记录仪器维护保养记录培训要求培训部门：质量保障管理中心培训岗位：质量保障管理中心化验员变更历史文件编码版本变更描述生效日期SOP/QAS054-2012第2版增加：1.设备的组成和工作条件2.13.注意事项2012年11月1日仪器维护保养记录2012年维护事项维护人备注月日4/5 新疆华世丹药业有限公司 SOP/QAS054-2012仪器使用记录年运行时间药品名称规格批号用途仪器状态操作人备注月 日6/6 新疆华世丹药业有限公司