WATERS_2695操作流程.doc

WATERS 2695仪器操作简明流程
2695分离单元使用操作：
1)开机自检
打开电源开关，仪器开始自检（4-5min），待屏幕上方出现“Idle”字样表示自检成功。
2)脱气（Degas）
按面板右下方“Menu/Status”键进入“Status（1）”界面，移动光标
至“Degasser Mode”，按Enter选择“On”，打开在线脱气。
3)设定柱温（可选项）
在“Status（1）”界面，移动光标至“Col Htr Set”，输入目标温按Enter即可。（可在工作站方法中设置）
4)Prime Seal Wash（清洗柱塞杆）
按“Menu/Status”键回到“Menu”界面，按下排功能键“Diag”，然后再按下排功能键“Prime Seal Wsh”，“Start”，冲洗1~2min后，“HALT”，“CLOSE”。
5)Wet Prime
在“Status（1）”界面中“Composition”下，选择将用到的溶剂通道为“100%”，按液晶屏幕右下角“Direct Function”键，移动光标选择“2 Wet Prime”，“OK”，流速及时间可使用默认值，也可自行设定（如：5ml/min，3min），“OK”即可。
将每一个会用到的溶剂通道按照上述操作一次。
6)Purge Injector（注射器排气泡及清洗）
进入Direct Function”界面后，选择“3 Purge Injector”，“OK”，默认数值为6，“OK”。
7)Prime Needle Wash（清洗注射针）
进入“Diagnostics”界面，按下排功能键之“Prime Ndl Wsh”，“Start”，默认30秒钟，“Close”，即可返回“Diagnostics”界面。
注：以上4）-7）为溶剂系统前处理过程，建议每天开机后依次进行。若发现注射器中有气泡，则可重复6）直至排除。如果流动相中含有盐类，则实验结束后必须用水清洗柱塞杆（即操作4））。
8)平衡柱子
在“Status（1）”界面上，按流动相比例设定各通道溶剂比例后，再Wet Prime操作一次，然后设置流速，平衡色谱柱30-60min。
9)放置样品
拉开样品转盘舱门，将盛有待测样品溶液的样品瓶放入转盘中，记下样品瓶号，关上舱门。
10)检测样品
打开工作站，设置仪器方法、方法组、自动进样序列等，监视基线、检测样品。
11)分析处理数据、打印报告
12)清洗注射器、针、柱塞杆
参见上述4)、7)。
13)清洗色谱柱
用水冲洗柱子40-60min（视柱子规格不同，流速通常1ml/min）；然后用甲醇或乙腈冲洗柱子40min（流速1ml/min）。
14)关机
关掉电源开关。
1、检测器波长范围：190-700nm
2、可以进行紫外扫描（scan），参考媒体播放
3、清洗柱塞杆的溶剂可以用水，或5%-10%甲醇（抑菌）
4、清洗针的溶剂可以根据样品溶解性选择，如甲醇，或异丙醇-水（1：1）
5、清洗柱塞杆操作“prime seal wash”“start”后，看有溶液流出，持续一段时间后，按下“HALT”，“CLOSE” 冲洗1-2min即可，1次。可以每天开机后进行，或结束实验时进行。流动相中有盐，结束实验时一定要清洗。仪器不自动进行。
6、每次仪器打开后，会自动进行的操作有：①start up diagnostics; ②waters alliance seperations module, rev2.03,initializing;③initializing needle ＆ syringe; ④initializing carousels; ⑤initializing solvent system; ⑥idle  （在屏幕上有显示）
7、实验结束后要purge injector”，1次即可，包括了“purge sample loop”。
8、在线脱气机打开后，开始时运行加速，使压力很快降到1.0psi以下，然后维持在0.5psi左右。
9、怀疑管路堵塞可卸下单向阀、在线过滤器进行清洗。单向阀安装注意方向。
10、
本仪器配置注射器体积250ul，样品环100ul。可在“CONFIG”中查看。
11、样品环体积可换；但同时注射器体积也应匹配。注射器体积有25、100、250、2500等。
12、在检测器中“DIAG”中可以查看“sample energy”、“reference energy”等参数，了解紫外灯的使用情况。
13、检测器要经常用“SHIFT m滤膜过滤过的甲醇冲洗15min-30min即可达到清洗目的。m+3”来校正波长，保证其准确性。每1-2周检查1次。先清洗检测池。清洗检测池可以在线进行，不用卸下；具体操作是，用双向接头替代色谱柱，流速设置为1ml/min，用0.45
14、2台仪器可以共用一个工作站（工作站升级为多系统）；但2台仪器不能同时用一个项目采集样品。
15、基线平衡后纵坐标可达到小数点后第4位（很平稳）。
16、可单针自动进样，也可以成组进样；成组进样需要编辑样品组方法（包括瓶号、样品名、进样体积、进样次数、功能、方法组/报告方法、下一针延迟等）。样品组方法可保存、调用。（ctrl +D可以用于列复制是“下同”之意。）
17、样品组方法里的“功能”一项，有“平衡”及“平衡色谱柱”两个选项，其功能不同；若仪器方法选用梯度，用“平衡色谱柱”可以在进样前运行梯度来平衡柱子；而如果选用“平衡”则只是按照初始梯度条件等度平衡柱子。（当然，如果是用等度的流动相条件，则两者没有区别）
18、编辑仪器方法时注意：
1)2695“通用”标签下，“单次输送体积”数值根据流动相流速不同有别：流速＜0.3时，选25；流速在0.3-1.0时，选50；流速＞1.0时，选100。“针头深度”除样品瓶选用内插管时设为2，其余均用默认值0。
2)“脱气”标签下，“脱气模式”选择“开”即可。
19、注射器中的气泡快速有效排除方法：可以小心的卸下注射器抽吸甲醇排除气泡后，注射器中保留少量溶剂，做“purge injector”小心安装上，再做几次“purge injector”观察没有气泡即可。
其他方法，如WATERS 工程师讲可以在“purge injector”开始后、注射器杆向上时，拧掉下边螺丝，上下抽推排除气泡。溶剂用甲醇较好；不用同时拧掉上方注射器。
20、检测器开机自检结束时有时会提示“calibration differs.521nm”,这是仪器自检后提示与上一次自检结果有出入，原因很多，可能是检测池中有小气泡，检测池污染，也可能是流路中溶剂有变动。分析原因，清洗检测池，排气泡，或者请工程师帮助。
21、要注意样品瓶中死体积大小，防止供试液体积不足，针头吸不到。