1、
大连依利特P1201高效液相色谱仪操作程序--梯度
仅作参考（不同实验需区别对待）请尽早阅读使用手册
1.仪器组成
大连依利特高效液相色谱仪由P1201泵两台、UV1201检测器(190-650nm)一台、ZWII柱温箱（选配）一台及EC2006色谱数据处理系统组成。
2.开机
2.1 接通稳压电源，依次打开两台P1201泵开关，UV1201检测器开关，ZWII柱温箱开关（实验无温度要求可不开），（第一次使用连续按两下泵“操作菜单”进入菜单2，按“下光标”键进入AB泵的设定选项，分别设定好AB泵。具体参考P1201泵使用手册 3.3 AB泵设定 第28页.）
通入经
2、过滤并超声处理的流动相，打开放空阀，按“冲洗”键排除气泡，按“冲洗”键放空阀出口无液体流出时，需要用20ml注射器抽去管路上的气泡，，待气泡排尽后（一般至少30秒以上），再按一次“冲洗”键，停止冲洗，然后关闭放空阀。（注：更换流动相时需要注意是否互溶。具体参考P1201泵使用手册4-1流动相的更换 第36页.）
2.2打开计算机主机开关，显示器开关，打印机开关。
2.3进入EC2006色谱数据处理系统（具体参考EC2006色谱数据处理系统使用手册（第4章 系统控制 41页.）
2.3.1在计算机桌面上双击EC2006色谱数据处理，或者在开始菜单→程序→ EC2006色谱数据处理→ EC2
3、006色谱数据处理系统，启动EC2006色谱数据，点击左边仪器控制→系统配置，选择UV1201检测器，P1201泵-A, P1201泵-B, 柱温箱（未开启可不选），点击验证系统配置，弹出窗口内当前的设备必须包括前面所有选择的仪器（检测器，泵-A，泵B，柱温箱），否则不能进入下一步操作。
2.3.2分析参数的设置
2.3.2.1若是一个新的分析物质，点击“新建一个新方法”，点击左边仪器控制→仪器控制，在“梯度控制”内设置总流速，两种流动相比例，梯度曲线设置，最大压力等；在“柱温箱”内设置温度；在“检测器”内设置检测波长，点击“发送仪器参数”；点击“启动泵”按钮，选择“立即启动” （普通色
4、谱柱）或者“缓启动”（不能承受压力变化的特殊色谱柱），开始运行泵。
点击左边“分析方法”→“分析方法”，在“数据采集方法”内输入采集时间，缺省路径（自动保存位置）；系统默认实验结束后手动点击“保存”按钮保存手动保存数据，如需设置自动保存数据，在“分析自动化”内，勾选“数据采集并存储”，在“预定文件名内”输入样品名称，勾选“时间”或“序号”作为保存名称的后半部分然后点击“文件”→“另存为”→“存储方法”，选择保存位置，输入名称，将此方法保存为方法，方便以后直接调出使用，
2.3.2.2若是一个以前分析过的物质，则点击“打开”图标，打开之前做好并保存的一个谱图，查看“仪器控制”“分析方法”里面
5、参数是否与要求一致，一致即可点击“发送仪器参数”，启动泵；不一致稍微修改后点击“发送仪器参数”，启动泵。
3.谱图采集
具体参考EC2006色谱数据处理工作站用户使用手册（第五章，数据采集）61页
3.1点击“启动基线监测”，开始查看基线，待基线平直后，点击“停止当前数据采集”。
3.2将手动进样阀的手柄扳到Inject状态，取好样，将进样针扎入进样口（进样针必须扎到底，绝不允许使用气相的尖针进样），点击“启动数据采集”，将手柄扳到Load状态，将样品缓慢注入定量环，马上将手柄从Load状态扳到Inject状态，此时开始在EC2006内采集数据。
3.3在采集过程中可点击“谱
6、图预先设置”，改变X、Y轴坐标，以观察到需要的、清晰的图谱。
3.4若在采集中看到主峰出完，基线走直一段时间后，即可点击“停止当前数据采集”，停止采集，按“保存”按钮，选择保存位置，写上文件名称，点击保存，保存谱图数据；或者设置在合适的时间等自动结束数据采集后，再保存数据。
4.谱图处理
具体参考EC2006色谱数据处理工作站用户使用手册（第六章，谱图处理）71页
点击“打开一个数据或方法文件”，在目标文件夹内双击之前保存的色谱图，即出现样品色谱图。点击色谱图上的“最大化”按钮，在谱图的下方会出现具体的数据，或者点击“查看组分表与积分结果”，出现组分表窗口，与谱图下方出现的数据一致
7、在窗口内单击右键，出现菜单，选择“属性”，弹出“项目选项”窗口，在我们所需要的选项前打钩，在组分表内出现相应的图谱数据。根据需要对色谱图及数据进行分析处理，然后点击“打印预览”，查看是否符合要求，然后再点击“打印”即可打印相应的图谱及数据。
5．关机
5.1测定工作完成后，用甲醇洗泵、柱和检测器。逐级关闭EC2006软件窗口退出，关闭计算机和打印机，或者等柱子冲洗完毕后再一起关闭亦可。
如:反相色谱柱C18保存步骤。
1.普通有机相-水相体系（不含缓冲盐）可以直接用纯有机相体系1ml/min洗30倍柱体积（30min以上），走平基线，保存柱子及仪器。
2.用含缓冲盐（酸，碱，盐
8、等）流动相做实验时，先用甲醇：水=10：90（或乙腈：水=10：90）1ml/min洗30倍柱体积（30min以上），再换上纯甲醇（或纯乙腈）体系1ml/min洗30倍柱体积（30min以上），走平基线，保存柱子及仪器。
其他色谱柱保存严格按照其说明操作。
5.2冲洗完成后，关闭泵，检测器，关闭稳定压电源，再拔出输入电源插头，作好使用登记。
6．注意事项
6.1流动相必须经过过滤和超声处理，样品也必须经过过滤和超声处理。
6.2泵必须在接有流动相的情况下才可以运行。
6.3液路中在接有柱子时，若想使用冲洗功能则必须把放空阀打开。
6.4使用缓冲盐流动相，在洗柱子时必须先用10%甲醇水将缓冲盐洗尽后再用纯甲醇保存。
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