NPCa-02氮磷钾测定仪使用说明.doc

氮磷钙测定仪的详细介绍
SHF3-NPCa02型氮磷钙测定仪是继KDN-04型蛋白质测定仪的基础上，消化吸收国外先进技术，改进设计研制而成。它具备了KDN-04型蛋白质测定仪所有的性能及特点，并能使消化装置的温度在150-450范围内任意调节，由于将催化剂硫酸铜和硫酸钾换成双氧水，使样品中粗蛋白、磷、钙实现了一次性消化，进一步加快测试速度，提高检测效果。其测定结果与国家标准相符，由于测定速度快工作效率提高，深受饲料、粮食质检等行业的欢迎，是日常检测的理想设备。
SHF3-NPCa02型氮磷钙测定仪工作原理：
H2SO4是H2O2都是强氧化剂，在高温下放出新生态氧O，使饲料中有机物分解，放出CO2、SO2、NH3及各种元素，其中CO2、SO2释放到空气中NH3●5H3SO4结合成（NH4）2SO4、P、Ca等各种无机离子均能固定在消化液中。
粗蛋白质测定是硫酸铵在强碱条件下蒸馏，使氨逸出硼酸吸收后用标准酸滴定氮的含量乘以6.25为粗蛋白质含量；
磷的测定是磷在酸性的条件下，与钒钼铝氨作用，形成黄色钒酸铵，（NH4）3PO4NH4VO316MoO1络化物，在420nm波长下比色其含磷量与吸光度成正比；
　　钙的测定是EDTA返滴定法，在待测液中先加入已知量的EDTA标准液，然后调节PH值为12-14，以铬兰黑R（钙试剂）为指示剂，并用标准钙溶液返滴定过量的EDTA，终点由兰色变为灰红色，由此计算钙的含量。
SHF3-NPCa02型氮磷钙测定仪技术参数：
1、测定品种：粮食、食品、乳制品、饮料、饲料、及其他农副新产品
2、工作电压：交流会220V.50HZ；
3、功率：四孔消化器 1500W
八孔消化器 3000W
蒸馏器 800W
4、重量：25kg
5、体积：四孔消化器 650×220×150mm
八孔消化器 730×300×150mm
蒸馏器 380×330×820mm
操作说明
1. 仪器和用具
1.1 NPCa-02氮磷钙快速连续测定仪消化装置
1.2 KDN-04型蛋白质测定仪蒸馏装置
1.3 分析天平：感量0.0001g
1.4 实验室粉碎机或研钵
1.5 分样筛：孔径0.45mm
1.6 酸式滴定管：25ml和10ml
1.7 锥形瓶：200ml
1.8 容量瓶：100ml、10000ml、50ml
1.9 刻度移液管：10ml
1.10 分光光度计：有10mm比色池、可在420nm下测吸光度。
2. 试剂
2.1 双氧水：分析纯30%
2.2 氢氧化钠：分析纯40%水溶液
2.3 硼酸：分析纯2%水溶液
2.4 混合指示剂：甲基红0.1%，溴甲酚绿0.5%，乙醇溶液混合
2.5 盐酸：分析纯；0.5N盐酸标准溶液
2.6 钒钼酸铵显色剂：GB6437-86
2.7 标准磷溶液：GB6437-86
2.8 氢氧化钠NaOH（GB629-81分析纯）21%水溶液
2.9 三乙醇胺：分析纯12.1水溶液
2.10 乙二胺四乙酸二钠（EDTA二钠，GB1401-78分析纯）：GB6436-86
2.11 钙指示剂：1g铬兰黑R与100gK2SO4研细，混匀，贮于棕色瓶内
2.12 钙标准溶液：碳酸钙（分析纯）在105℃干燥4-6h，干燥器冷却后精确称取0.5g，溶于25ml0.5NHC中煮沸溶解，除去CO2定容至500ml。
3 样品制备
取具有代表性的样品，粉碎至40目通过，用四四分法缩至200g，装于密封容器中备用。
4 操作步骤
4.1 消化
4.1.1 消化前准备：将抽气泵的外螺纹，同水嘴的内螺纹旋紧，在排气管（消化器结构图）的尾端装上胶管，胶管的另一端装在抽气泵的横入口处，再在抽气泵的下端装上胶管，接通下水道，开足水嘴，使抽气泵有足够的吸力。
4.1.2 消化操作
A 称取0.2-18试样（含氮量5-80mg以含量定）准确至0.0001，无损失地转入清洗干净的100ml定量消化管中，加浓硫酸8-10ml摇匀。
B 将装有试样的定量消化管移在消化架上，套上装有密封圈的排气管，再装上弹簧夹。
C 手握排气管（连同装有试样的消化管），移至消化炉上，接通水源和电源（将电压调至220V），消煮10min左右，见H2SO4大量冒烟消化液呈酱油色，将排气管（连同消化管）提出，稍加冷却，打开排气管上部瓶塞，逐个向消化管内加入H2O2-3ml，将电压调至150-180V，重新转入消化炉煮2-3min，仍用上法，向消化管滴入H2O2直至消化液呈无色后，再移入消化炉，继续消煮5min-15min（此时电压仍为150-180V）取出，待消化液冷却至室温（冷却时排气管继续保持吸气状态，切忌放在冷水中冷却），再在消化管内加入蒸馏水至刻度（100ml）摇匀，待测。
4.2 粗蛋白测定（半微量蒸馏法）
4.2.1 蒸馏前准备
A 接通进水口水源胶管，在排水口及排水开关尾部接上胶管，与下水道接通，注意胶管出水口不得高于仪器座平面，同时关闭排水开关。
B 在NaOH、H2O注入接口处，用橡胶管套入后分别置于NaOH、H2O盛器桶内，加液时按面板上相应开关，液体经电磁泵自动流入消化管内，注入毫升数视标尺所注位置而定。
C 接通电源，检查电源与仪器是否相符。
4.2.2 蒸馏操作
A 先开电源开关，后开给水开关。
B 待蒸气发生器内释放蒸气时，关闭蒸汽阀，按下蒸气开关，蒸发炉内水由冷却水接口通过冷凝管，经平稳器慢慢流入，由于蒸发炉水位不断上升，使电极板之间电流逐步增加，水温经过电板加热而上升，但由于初态时水温较低，水迅速上升，蒸气尚未能马上产生，电流急剧增加，造成熔丝管断裂，待电流表指向5A时即释放蒸气开关，待指针回落到零时，再按蒸气开关，反复几次，等整齐正常喷出，电流表固定在4-5A时，即可开始正常蒸馏。
C 在托架上（正视图13），放上已经加入接受液（2%硼酸溶液15圆1和混合指示剂2、3滴）的锥形瓶。蒸馏导出管的末端必须浸入液内。
D 在定量接待测的消化液中用移液管移出定量的消化液于洗净的消化管内。
E 左侧上拉弹簧平台，将移入消化液的消化管套在整流管（正视图12）下端的密封圈上，稍加旋转，使其保持接口密封，抬上弹簧平台，关上保护罩。
F 开碱伐（正视图9），加40%NaOH溶液（量是硫酸的5倍）后关闭。
G 开蒸汽阀开始蒸馏，待接收液约150ml后，将接收瓶取下（在取下接受瓶时，用少量蒸馏水洗导出管尖端，洗液与吸收液合并），再关闭蒸汽阀。取下消化管，接着进行第二个样品蒸馏器加水。全量蒸馏只要将消化液管直接套上蒸馏器加水、碱后进行蒸馏。
4.3 滴定：吸收氮后的吸收液，用标定后的盐酸溶液进行滴定，溶液有兰绿色变为紫色为终点。
4.4 空白测定：用0.1g糖代替样品或不加样品作空白测定。
4.5.1测定计算公式
粗蛋白质（%）=（[(V2-V1)×N×0.14×K]×(W×V×V)）×100
式中：V2-滴定试样时所需标准溶液的体积ml；
V1-滴定空白时所需标准溶液的体积ml；
N盐酸标准溶液当量浓度；
W-样品重量g；
V-样品消化液总体积团1，
V-样品消化液蒸馏用体积皿1；
0.0140-1mg当量氮的克数；
K-氮换算成蛋白质的系数。
4.5.2 平行测定下的结果用算术平均值表示，保留小数后二位。
5 磷的测定
5.1 标准曲线绘制：准确吸取磷来准溶液（50μg/ml）0、1.0、2.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0、15.0于50ml容量瓶中各加入钒钼铵显示剂10ml，用蒸馏水稀释至刻度搞匀，放置10min以上，以0ml溶液为参比，用10mm比色皿，在420波长下测定各溶液的吸光度，用磷含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
5.2 试样测定：准确吸取待测消化液2-10ml（视样品含磷量定，使光密度值不超过标准曲线范围）置于50ml容量瓶中，以空白消化液作参比按绘制曲线同样步骤显色、比色。测得样品吸光度。由标准曲线查的样品含磷量。
5.3 测定结果计算
P(%)=X×(W×V×100)×100×103=X×(W×V×100)
式中：W-试样重量g；
V-比色测定时所移取试样分解液的体积ml；
X-由标准曲线查得式样分解含磷量tlg。
5.4重复性：每个试样称取两平行测定值，以算术平均值为结果。
6 钙的测定（EDTA）反滴定法
61 准确吸取待测消化液10ml余150ml锥形瓶，加蒸馏水40ml，三乙醇胺2ml，20%NaOH7.2ml，边加编摇中和试样分解液的酸度，再加20% NaOH2ml，使溶液的PH值达12-14加钙指示剂0.1g左右，加入0.01MEDTA液10ml，此时溶液应呈兰色绿色（如是红色，说明分解中钙的含量高，要少吸取样品）然后用0.01M标准滴定过剩的EDTA终点由兰色绿色变为紫红，同时进行空白试样的测定。
6.2 结果计算
Ca（%）=[(V0-V)×M×0.04508]×(W×V1×100)×100
式中：V0-空白分解被标准钙滴定数ml；
V-试样分解标准钙滴定ml；
M-标准钙克分子浓度；
0.04008-1ml当量钙的克数；
V1-滴定时吸取试样分解液体积ml；
W-样品重量g。
操作注意事项：
1 观察蒸发炉内水位，不能超过不锈钢电极。（如果超过，请先把水排完）。
2 关掉排水阀，打开主电源，打开冷却水，打开绿色蒸汽开关，然后观察电流表，等电流表指针升到4A左右，关掉蒸汽开关。待其回到0A后再打开蒸汽开关。电流升到4A后再关掉，这样反复开关（0-20）左右直到蒸汽从塑料管内喷出，让其喷半分钟左右，关掉蒸汽开关，仪器进入正常的待机状态。
3 做样品前，先把硼酸接受液放上，然后把消化好的样品放到蒸馏器上。加NaOH（是硫酸的5倍）和20mlH2O左右，打开蒸汽开关进行蒸馏。
注意事项：
1 如果开机电源指示灯不亮,请更换15A保险丝。
2 如果开机后电流上升中，突然指示灯不亮，请关闭电源开关、冷却水、打开排水阀、打开蒸汽开关、进行排水。（更换保险丝）重新开机操作。
3 做完样品，先拿下硼酸接受液，再关掉蒸汽开关，然后拿下消化管。
4 盛H2O，NaOH的容器应低于仪器高度。防止水泵，碱泵停止工作后大气压把液体压入消化管内。
5 如果打开蒸汽开关很长时间（10min）以上电流表没有指示，电流且其它都正常。必须用手指挤压稳压器下端出口橡胶管3次左右，使蒸发炉内空气排出，使水流入蒸发炉内。
6 整流结束：清洗碱泵，关自来水。打开蒸汽开关，打开排水阀取下消化管，使蒸发炉内水全部排完。
7 水泵，碱泵如果打开有工作声音，但不出液体，必须检查玻璃单向阀，是否有粘连，如果粘住必须拔掉一头橡胶管用吹气球打通，使中间兰色椎体活动。